RU2301679C2 - Ciclosporin-containing pharmaceutical preparation and its using - Google Patents
Ciclosporin-containing pharmaceutical preparation and its using Download PDFInfo
- Publication number
- RU2301679C2 RU2301679C2 RU2004121028/15A RU2004121028A RU2301679C2 RU 2301679 C2 RU2301679 C2 RU 2301679C2 RU 2004121028/15 A RU2004121028/15 A RU 2004121028/15A RU 2004121028 A RU2004121028 A RU 2004121028A RU 2301679 C2 RU2301679 C2 RU 2301679C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- pharmaceutical preparation
- preparation according
- surfactant
- treatment
- prevention
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Description
Данное изобретение относится к коллоидным системам-носителям для фармацевтического средства, содержащим циклоспорин, для местного применения на кожу и слизистую оболочку, включающим в себя смесь поверхностно-активное вещество/вспомогательное поверхностно-активное вещество (моноолеат полиоксиэтиленглицерина/полоксамеры), гидрофильную фазу, например смеси пропиленгликоль/вода, липофильную фазу (изопропилпальмитат или олеиновую кислоту) и агенты, усиливающие проникновение.This invention relates to colloidal carrier systems for a pharmaceutical agent containing cyclosporine for topical application to the skin and mucous membrane, comprising a surfactant / auxiliary surfactant mixture (polyoxyethylene glycerol monooleate / poloxamers), a hydrophilic phase, for example mixtures propylene glycol / water, lipophilic phase (isopropyl palmitate or oleic acid) and penetration enhancing agents.
Данное изобретение относится, в частности, к фармацевтическим препаратам, содержащим циклоспорин А (ЦсА), для местного применения при лечении патологических изменений кожи, придатков кожи или слизистых оболочек, в особенности, атопического дерматита и псориаза, к применению этих препаратов и способу их приготовления.This invention relates, in particular, to pharmaceutical preparations containing cyclosporin A (CsA), for topical use in the treatment of pathological changes in the skin, skin appendages or mucous membranes, in particular atopic dermatitis and psoriasis, to the use of these preparations and the method for their preparation.
Известно, что ЦсА представляет собой циклический пептид из 11 аминокислот, с молярной массой 1202 г/моль, который продуцируется почвенным грибом Tolypocladium inflatum. ЦсА очень трудно растворим в воде (<0,04 мг/мл при 25°С), в то же время он легко растворим в маслах и спиртах. Его иммуномодулирующее действие основано на ингибировании высвобождения интерлейкина-1 из макрофагов и интерлейкина-2 из Т-хелперных клеток, которые, в свою очередь, активируют цитотоксические предшественники Т-клеток, от которых происходят цитотоксические Т-клетки. Таким образом, ингибируется транскрипция генов, кодирующих упомянутые цитокины. При этом ЦсА влияет только в небольшой степени на естественно возникающую защиту организма. С точки зрения галеновых средств, фармацевтическое средство представляет собой вещество, которое, в частности, не подходит для местного лечения, поскольку высокая липофильность делает проникновение через эпидермальный липидный барьер практически невозможным. В качестве причины неудачи предыдущих попыток получения и применения различных липофильных, гидрофильных и липосомных препаратов для местного применения, как правило, указывается неадекватное проникновение фармацевтического средства.CsA is known to be a cyclic peptide of 11 amino acids, with a molar mass of 1202 g / mol, which is produced by the soil fungus Tolypocladium inflatum. CSA is very difficult to dissolve in water (<0.04 mg / ml at 25 ° C), at the same time it is easily soluble in oils and alcohols. Its immunomodulatory effect is based on inhibiting the release of interleukin-1 from macrophages and interleukin-2 from T helper cells, which, in turn, activate the cytotoxic precursors of T cells from which cytotoxic T cells originate. Thus, the transcription of genes encoding said cytokines is inhibited. In this case, CSA affects only to a small extent the naturally occurring defense of the body. From the point of view of galenic agents, a pharmaceutical agent is a substance which, in particular, is not suitable for topical treatment, since high lipophilicity makes penetration through the epidermal lipid barrier almost impossible. As a reason for the failure of previous attempts to obtain and use various lipophilic, hydrophilic and liposome preparations for local application, as a rule, inadequate penetration of the pharmaceutical agent is indicated.
В дерматологии ЦсА, как оказалось, особенно пригоден при системном применении для лечения тяжелой формы псориаза и атопического дерматита. В дополнение, имеются сообщения и исследования в отношении эффективности после системного применения в случае множества других воспалительных дерматозов (например, язвенный дерматит, красный лишай, актинический ретикулоид, диссеминированная кольцевая гранулема).In dermatology, CSA, as it turned out, is especially suitable for systemic use for the treatment of severe psoriasis and atopic dermatitis. In addition, there are reports and studies of efficacy after systemic use in the case of many other inflammatory dermatoses (for example, ulcerative dermatitis, lichen planus, actinic reticuloid, disseminated annular granuloma).
В WO 9302664 описаны W/O микроэмульсии, которые содержат липофильную фазу (среднецепочечные триглицериды и поверхностно-активное вещество с низким значением гидрофильно-липофильного баланса (ГЛБ) в соотношении от 5:1 до 1,5:1), водную гидрофильную фазу, поверхностно-активное вещество с высоким значением ГЛБ и растворимый в воде терапевтический агент.WO 9302664 describes W / O microemulsions that contain a lipophilic phase (medium chain triglycerides and a surfactant with a low hydrophilic lipophilic balance (HLB) ratio of 5: 1 to 1.5: 1), an aqueous hydrophilic phase, surface - an active substance with a high HLB value and a water-soluble therapeutic agent.
GB 2222770 включает в себя микроэмульсионные предконцентраты, включающие в себя ЦсА, гидрофильную фазу (пропиленгликоль или частичный эфир низкомолекулярных моно- или полиоксиалкандиолов) (транскутол/гликофурол), липофильную фазу (среднецепочечные триглицериды) и поверхностно-активное вещество (Cremophor RH 40). Эти системы пригодны для перорального применения и улучшают биодоступность по сравнению с существующими системами.GB 2222770 includes microemulsion preconcentrates including CSA, hydrophilic phase (propylene glycol or partial ester of low molecular weight mono- or polyoxyalkanediols) (transcutol / glycofurol), lipophilic phase (medium chain triglycerides) and surfactant R 40 (Cre). These systems are suitable for oral use and improve bioavailability compared to existing systems.
В ЕР 760237 описаны O/W микроэмульсии для нерастворимых в воде фармацевтически активных веществ, таких как ЦсА, которые полностью растворяются в диспергированных масляных каплях. Эти системы включают в себя С8-С20 замещенные растительные триглицериды, лецитин, а также другое поверхностно-активное вещество и липофильную фазу, содержащую пропиленгликоль.EP 760237 describes O / W microemulsions for water-insoluble pharmaceutically active substances, such as CsA, which are completely soluble in dispersed oil droplets. These systems include C 8 -C 20 substituted plant triglycerides, lecithin, as well as another surfactant and a lipophilic phase containing propylene glycol.
WO 97/22358 включает в себя микроэмульсионные предконцентраты с ЦсА, причем фармацевтическое средство растворено в системе, включающей в себя гидрофобные (токоферолы или производные токоферола) и гидрофильные компоненты (пропиленкарбонат и полиэтиленгликоль с молекулярной массой <1000), а также поверхностно-активное вещество.WO 97/22358 includes microemulsion pre-concentrates with CSA, the pharmaceutical agent being dissolved in a system comprising hydrophobic (tocopherols or tocopherol derivatives) and hydrophilic components (propylene carbonate and polyethylene glycol with a molecular weight <1000), as well as a surfactant.
В WO 94/08603, WO 94/08605 и WO 99/39700 описаны фармацевтические препараты, в которых циклоспорин и его производные приведены в качестве возможного активного ингредиента в коллоидной системе.WO 94/08603, WO 94/08605 and WO 99/39700 describe pharmaceutical preparations in which cyclosporin and its derivatives are listed as a possible active ingredient in the colloidal system.
В документе Tran HS et al, Site-specific immunosuppression using a new formulation of topical cyclosporine A with polyethylene glycol-8 glyceryl caprylate/caprate // J Surg Res. 1999, 83 (2), p.136-40, являющемся ближайшим аналогом заявленного изобретения, раскрыт препарат для местного применения, содержащий циклоспорин А и усилитель проникновения полиэтиленгликоль-8-глицерилкаприлат/капрат.In Tran HS et al, Site-specific immunosuppression using a new formulation of topical cyclosporine A with polyethylene glycol-8 glyceryl caprylate / caprate // J Surg Res. 1999, 83 (2), p.136-40, which is the closest analogue of the claimed invention, a topical preparation is disclosed containing cyclosporin A and a penetration enhancer of polyethylene glycol-8-glyceryl caprylate / caprate.
Однако ранее описанные системы обладают некоторыми существенными недостатками. Для растворения используют частичные органические растворители, которые затем нужно снова удалять из препарата без какого-либо остатка. Часто комбинации поверхностно-активное вещество/вспомогательное поверхностно-активное вещество для улучшения растворимости фармацевтического препарата используют в слишком высоких концентрациях (более чем 20% мас./мас.). В некоторых публикациях упоминаются системы, которые не состоят исключительно из ингредиентов, совместимых с кожей. Описаны некоторые микроэмульсионные предконцентраты, действительная структура которых, как полагают, образуется in situ только после применения. Кроме того, существующие системы обладают значительно большими диаметрами частиц.However, the previously described systems have some significant drawbacks. Partial organic solvents are used for dissolution, which must then be removed again from the preparation without any residue. Often, surfactant / adjuvant surfactant combinations are used in too high concentrations (more than 20% w / w) to improve the solubility of the pharmaceutical preparation. Some publications mention systems that are not exclusively composed of skin compatible ingredients. Some microemulsion preconcentrates are described, the actual structure of which is believed to be formed in situ only after application. In addition, existing systems have significantly larger particle diameters.
Таким образом, задача настоящего изобретения заключается в том, чтобы предложить новую коллоидную систему-носитель для фармацевтического средства, которая по существу включает в себя дерматологически приемлемые ингредиенты, причем эта система-носитель для фармацевтического средства в то же время должна иметь относительно низкое содержание поверхностно-активного вещества/вспомогательного поверхностно-активного вещества.Thus, it is an object of the present invention to provide a new colloidal carrier system for a pharmaceutical agent, which essentially includes dermatologically acceptable ingredients, which carrier system for a pharmaceutical agent should at the same time have a relatively low surface- active substance / auxiliary surfactant.
Эта задача решена посредством отличительных признаков согласно п.1 формулы изобретения. Относительно применения, данное изобретение определено признаками по пунктам 14-20 формулы изобретения.This problem is solved by the distinguishing features according to
В соответствии с данным изобретением, таким образом, предложено, что фармацевтический препарат в коллоидной форме включает в себя четыре существенных компонента. Фармацевтический препарат по данному изобретению, следовательно, включает в себя липофильную фазу, смесь поверхностно-активного вещества и вспомогательного поверхностно-активного вещества, гидрофильную фазу и циклоспорин в качестве активного ингредиента в концентрациях, указанных в п.1.In accordance with this invention, therefore, it is proposed that the pharmaceutical preparation in colloidal form includes four essential components. The pharmaceutical preparation of this invention therefore includes a lipophilic phase, a mixture of a surfactant and an auxiliary surfactant, a hydrophilic phase and cyclosporin as the active ingredient at the concentrations indicated in
Преимущество коллоидных систем-носителей для фармацевтического средства, в соответствии с данным изобретением, можно увидеть, в частности, в составе исключительно дерматологически приемлемых ингредиентов при сравнительно низком содержании поверхностно-активного вещества/вспомогательного поверхностно-активного вещества, а также малом размере диспергированных частиц.The advantage of colloidal carrier systems for a pharmaceutical agent according to this invention can be seen, in particular, in the composition of exclusively dermatologically acceptable ingredients with a relatively low content of surfactant / auxiliary surfactant, as well as a small particle size dispersion.
С точки зрения материалов, в частности, масла, воски или жиры особенно пригодны для липофильной фазы для фармацевтического препарата по данному изобретению. В отношении липофильной фазы, можно применять все липофильные фазы, которые известны сами по себе на сегодняшний день из уровня техники. Особенно предпочтительны триглицериды, изопропилмиристат, 2-октилдодеканол, изопропилпальмитат или олеиновая кислота. Липофильная фаза содержится в препарате в количестве 1-10% по массе.From the point of view of materials, in particular, oils, waxes or fats are particularly suitable for the lipophilic phase for the pharmaceutical preparation of this invention. With respect to the lipophilic phase, all lipophilic phases that are known per se today from the prior art can be used. Especially preferred are triglycerides, isopropyl myristate, 2-octyldodecanol, isopropyl palmitate or oleic acid. The lipophilic phase is contained in the preparation in an amount of 1-10% by weight.
Существенной составной частью фармацевтического препарата по данному изобретению является смесь поверхностно-активного вещества и вспомогательного поверхностно-активного вещества, которую используют в количестве 1-50% по массе, предпочтительно 20-30% по массе. С точки зрения материалов, предпочтительными являются поверхностно-активные вещества, выбранные из эфиров полиоксиэтиленглицерина и жирных кислот, и эфиров полиоксиэтиленсорбитана и жирных кислот.Примеры вспомогательных поверхностно-активных веществ представляют собой полоксамеры, блок-сополимеры полиоксиэтилена и полиоксипропилена.An essential component of the pharmaceutical preparation of this invention is a mixture of a surfactant and an auxiliary surfactant, which is used in an amount of 1-50% by weight, preferably 20-30% by weight. From the point of view of materials, surfactants selected from polyoxyethylene glycerol fatty acid esters and polyoxyethylene sorbitan fatty acid esters are preferred. Examples of auxiliary surfactants are poloxamers, block copolymers of polyoxyethylene and polyoxypropylene.
Особенно предпочтительное соотношение в смеси представляет собой массовое соотношение от 1,5 до 2,5 для поверхностно-активного вещества и от 2,5 до 3,5 для вспомогательного поверхностно-активного вещества. Авторы данного изобретения смогли доказать, что, в особенности, поддержание этого соотношения в смеси поверхностно-активного вещества/вспомогательного поверхностно-активного вещества является важным для стабильности и пригодности фармацевтического препарата (фиг.9-11).A particularly preferred mixture ratio is a mass ratio of from 1.5 to 2.5 for a surfactant and from 2.5 to 3.5 for an auxiliary surfactant. The authors of this invention were able to prove that, in particular, maintaining this ratio in a mixture of surfactant / auxiliary surfactant is important for the stability and suitability of the pharmaceutical preparation (Fig.9-11).
Если смесь поверхностно-активное вещество/вспомогательное поверхностно-активное вещество включает в себя эфиры полиоксиэтиленглицерина и жирных кислот и полоксамеры в массовом соотношении 2:3, могут быть достигнуты особенно хорошие результаты.If the surfactant / auxiliary surfactant mixture comprises polyoxyethylene glycerol fatty acid esters and poloxamers in a 2: 3 weight ratio, particularly good results can be achieved.
Препарат по данному изобретению содержит, в дополнение, гидрофильную фазу, которая, как это известно само по себе из уровня техники, может включать в себя полиолы, воду или полиол, либо полиол-буферную смесь, либо только буфер. Концентрация этого компонента составляет 40-80% по массе, предпочтительно 60-75% по массе.The preparation according to this invention contains, in addition, a hydrophilic phase, which, as is known per se from the prior art, may include polyols, water or a polyol, or a polyol-buffer mixture, or only a buffer. The concentration of this component is 40-80% by weight, preferably 60-75% by weight.
В еще одном предпочтительном воплощении данного изобретения предложено, в случае гидрофильной фазы, что смесь пропиленгликоля и воды используют в соотношении от 1:10 до 10:1. Наиболее предпочтительное соотношение смеси составляет 2:1.In another preferred embodiment of the present invention, it is proposed, in the case of a hydrophilic phase, that a mixture of propylene glycol and water is used in a ratio of from 1:10 to 10: 1. The most preferred ratio of the mixture is 2: 1.
В соответствии с данным изобретением, фармацевтический препарат содержит в качестве активного ингредиента циклоспорин и/или его производное в концентрации 0,1-20% по массе. Особенно предпочтительно, чтобы фармацевтический препарат содержал циклоспорин А и/или его производные. Предпочтительная концентрация при этом находится в пределах 0,01-10% по массе, наиболее предпочтительно 0,5-5% по массе.In accordance with this invention, the pharmaceutical preparation contains as an active ingredient cyclosporine and / or its derivative in a concentration of 0.1-20% by weight. It is particularly preferred that the pharmaceutical preparation contains cyclosporin A and / or its derivatives. The preferred concentration is in the range of 0.01-10% by weight, most preferably 0.5-5% by weight.
Конечно, также возможно, чтобы в фармацевтическом препарате содержался наряду с циклоспорином А и/или его производным дополнительный активный ингредиент. Примеры активных ингредиентов этого типа представляют собой кортикостероиды, антибиотики, противогрибковые агенты и/или виростатические средства.Of course, it is also possible that, in addition to cyclosporin A and / or its derivative, an additional active ingredient is contained in the pharmaceutical preparation. Examples of active ingredients of this type are corticosteroids, antibiotics, antifungal agents and / or virostatic agents.
Как это известно само по себе из уровня техники, в фармацевтический препарат по данному изобретению могут быть добавлены также обычные добавки, такие как агенты, усиливающие проникновение. Если добавлены агенты, усиливающие проникновение, то предпочтительными являются диметилсульфоксид или короткоцепочечные спирты в концентрации 5-10% по массе.As is known per se from the prior art, conventional additives such as penetration enhancing agents can also be added to the pharmaceutical preparation of this invention. If penetration enhancing agents are added, dimethyl sulfoxide or short chain alcohols in a concentration of 5-10% by weight are preferred.
Фармацевтический препарат по данному изобретению существует в коллоидной форме. При этом предпочтительно, чтобы дисперсная фаза имела диаметр частиц, находящийся в пределах от 5 до 200 нм. Особенно предпочтительно, чтобы диаметр частиц находился в диапазоне от 5 до 100 нм.The pharmaceutical preparation of this invention exists in colloidal form. It is preferable that the dispersed phase has a particle diameter in the range from 5 to 200 nm. Particularly preferably, the particle diameter is in the range from 5 to 100 nm.
Фармацевтический препарат по данному изобретению особенно подходит для профилактики воспалительных заболеваний кожи и слизистой оболочки, для лечения и профилактики атопического дерматита, для лечения и профилактики псориаза.The pharmaceutical preparation according to this invention is particularly suitable for the prevention of inflammatory diseases of the skin and mucous membrane, for the treatment and prevention of atopic dermatitis, for the treatment and prevention of psoriasis.
Другие подходящие применения представляют собой лечение и профилактику коллагенозов, хронических ран, ожогов и/или хронических воспалительных заболеваний кожи и слизистой оболочки, а также лечение и профилактику хронических воспалительных заболеваний кишечника и лечение и профилактику воспалительных заболеваний глаз, а также после трансплантации.Other suitable uses are the treatment and prevention of collagenoses, chronic wounds, burns and / or chronic inflammatory diseases of the skin and mucous membrane, as well as the treatment and prevention of chronic inflammatory bowel diseases and the treatment and prevention of inflammatory eye diseases, as well as after transplantation.
Данное изобретение описано далее более подробно при помощи различных композиций и результатов тестов.The invention is described below in more detail using various compositions and test results.
Состав и приготовление систем растворителейComposition and preparation of solvent systems
Были разработаны три коллоидные системы-носители для фармацевтического средства, состав которых следует из Таблицы 1.Three colloidal carrier systems for a pharmaceutical agent have been developed, the composition of which follows from Table 1.
Приготовление систем осуществляли согласно конкретной последовательности следующих стадий:The preparation of systems was carried out according to a specific sequence of the following stages:
- взвешивание фармацевтического средства,- weighing the pharmaceutical product,
- добавление смеси поверхностно-активное вещество/вспомогательное поверхностно-активное вещество,- adding a mixture of surfactant / auxiliary surfactant,
- тщательное измельчение,- thorough grinding,
- добавление требуемого количества ИПП,- adding the required number of IPPs,
- тщательное перемешивание,- thorough mixing
- добавление приготовленной смеси пропиленгликоля и воды,- adding the prepared mixture of propylene glycol and water,
- перемешивание до тех пор, пока не станет прозрачной, возможно, кратковременная обработка коллоидной системы ультразвуком.- mixing until then, until it becomes transparent, possibly a short-term treatment of the colloidal system with ultrasound.
В качестве эмульгаторов были выбраны полиоксиэтиленглицерина моноолеат (Tagat® O2) и полоксамеры (Synperonic® PE/L 101 или 121). Показано, что для приготовления системы-носителя особенно подходящей является комбинация обоих компонентов в массовом соотношении 2:3.Polyoxyethylene glycerol monooleate (Tagat® O2) and poloxamers (Synperonic® PE / L 101 or 121) were selected as emulsifiers. It is shown that for the preparation of a carrier system, a combination of both components in a mass ratio of 2: 3 is particularly suitable.
Смеси двух поверхностно-активных веществ и пропиленгликоля/воды готовили заранее. Сначала измельченное в порошок фармацевтическое средство осторожно растирали со смесью поверхностно-активного вещества, а затем добавляли липофильную фазу (изопропилпальмитат или олеиновую кислоту). Вслед за этим осуществляли добавление гидрофильной фазы (смесь пропиленгликоль/вода) и перемешивание до тех пор, пока смесь не станет прозрачной. В конце добавляли ДМСО. Если требовалось, систему оставляли на несколько минут в ультразвуковой ванне.Mixtures of two surfactants and propylene glycol / water were prepared in advance. First, the powdered pharmaceutical was carefully triturated with a surfactant mixture, and then the lipophilic phase (isopropyl palmitate or oleic acid) was added. Subsequently, a hydrophilic phase (propylene glycol / water mixture) was added and stirring until the mixture became clear. At the end, DMSO was added. If required, the system was left for several minutes in an ultrasonic bath.
В качестве липофильных компонентов использовали изопропилпальмитат или олеиновую кислоту, которые обе действуют в качестве растворителей ЦсА. В дополнение, олеиновая кислота осуществляет функцию агента, усиливающего проникновение, для того чтобы облегчить проникновение ЦсА через роговой слой. Диметилсульфоксид добавляли для улучшения растворимости ЦсА в носителе и ввиду его свойств, усиливающих проникновение. В качестве смеси поверхностно-активного вещества/вспомогательного поверхностно-активного вещества были выбраны полиоксиэтиленглицерина моноолеат, который переносится кожей человека без какой-либо реакции при 100%-ной концентрации и хорошо переносится слизистой оболочкой, а также полоксамеры, которые разрешены для внутривенного введения.Isopropyl palmitate or oleic acid, both of which act as solvents of CSA, was used as lipophilic components. In addition, oleic acid functions as a penetration enhancing agent in order to facilitate the penetration of CsA through the stratum corneum. Dimethyl sulfoxide was added to improve the solubility of CSA in the carrier and in view of its penetration enhancing properties. As a mixture of a surfactant / auxiliary surfactant, polyoxyethylene glycerol monooleate was selected, which is transferred by human skin without any reaction at a 100% concentration and is well tolerated by the mucous membrane, as well as poloxamers that are allowed for intravenous administration.
Характеристика систем-носителейCharacteristics of carrier systems
Системы-носители для фармацевтического средства характеризовали, среди прочего, посредством динамического рассеяния лазерного света. Этот способ пригоден для определения размера коллоидных частиц в жидкой среде. Диаметры частиц, составляющие приблизительно 20 нм, смогли определить для препаратов, свободных от фармацевтического средства.Carrier systems for a pharmaceutical are characterized, inter alia, by dynamic scattering of laser light. This method is suitable for determining the size of colloidal particles in a liquid medium. Particle diameters of approximately 20 nm were determined for pharmaceutical-free preparations.
АнализAnalysis
Определение ЦсА осуществляли методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) (модифицированного согласно Merck KgA - Darmstadt). Технические данные представлены в Таблице 2.The determination of CsA was carried out by high performance liquid chromatography (HPLC) (modified according to Merck KgA - Darmstadt). Technical data is presented in Table 2.
Тесты на высвобождениеRelease tests
Высвобождение фармацевтического средства in vitro из вышеупомянутых препаратов в зависимости от времени тестировали с помощью модельной системы многослойной мембраны.The in vitro release of a pharmaceutical agent from the aforementioned preparations was tested with time using a multilayer membrane model system.
Индивидуальные ячейки этой модели включают в себя, соответственно, основание и покровный диск, между которыми расположены слои мембраны. Сквозь отверстие в покровном диске (4 см2) на мембрану наносили определенное количество препарата (10-20 мг). В качестве акцептора служили додеканоловые коллоидные мембраны с содержанием додеканола 2%, которые готовили, используя аппарат для нанесения пленки. Емкость абсорбции акцептора определяли путем определения насыщающей растворимости ЦсА в додеканоле. Это важно для обеспечения того, чтобы достижение насыщающей растворимости фармацевтического средства в мембранах не являлось ограничивающим фактором для высвобождения. Путем использования трех мембран, расположенных одна над другой, были достигнуты условия поглощения в акцепторе.The individual cells of this model include, respectively, the base and the covering disk, between which the membrane layers are located. Through a hole in the integumentary disc (4 cm 2 ) a certain amount of the preparation (10-20 mg) was applied to the membrane. Dodecanol colloidal membranes with a dodecanol content of 2%, which were prepared using an apparatus for applying a film, served as an acceptor. The acceptor absorption capacity was determined by determining the saturating solubility of CsA in dodecanol. This is important to ensure that achieving saturating solubility of the pharmaceutical in membranes is not a limiting factor for release. By using three membranes located one above the other, absorption conditions in the acceptor were achieved.
Во время теста (30, 100, 300 и 1000 минут) модель находилась при температуре 32±1°С. После окончания времени тестирования избыток препарата осторожно удаляли, мембраны разделяли, экстрагировали смесью этанол-вода (80/20; об./об.) и подвергали определению содержания посредством ВЭЖХ. Определение проводили пять раз в течение времени тестирования.During the test (30, 100, 300 and 1000 minutes), the model was at a temperature of 32 ± 1 ° C. After the test time, the excess drug was carefully removed, the membranes were separated, extracted with ethanol-water (80/20; v / v) and subjected to determination of the content by HPLC. The determination was carried out five times during the testing time.
Из Фиг.1 можно определить, что все три препарата уже через 30 минут высвобождают приблизительно 25% содержащегося ЦсА. Высвобожденное количество фармацевтического средства возрастает в случае более длительного времени тестирования. На Фиг.2, для лучшего сравнения носителей с различной концентрацией, высвобожденные количества фармацевтического средства приведены на 10 мг примененного препарата.From FIG. 1, it can be determined that all three drugs release approximately 25% of the contained CSA after 30 minutes. The released amount of the pharmaceutical agent increases with longer testing times. In figure 2, for better comparison of carriers with different concentrations, the released amount of the pharmaceutical product is given per 10 mg of the drug used.
Эти тесты проводили, для того чтобы удостовериться в том, что происходит достаточное высвобождение ЦсА из носителей и, следовательно, выполняется условие проникновения в кожу человека.These tests were carried out in order to make sure that there is a sufficient release of CsA from the carriers and, therefore, the condition of penetration into human skin is fulfilled.
Тесты на проникновениеPenetration tests
Использовали кожу груди человека, полученную при хирургической пластике по уменьшению груди. Кусочки кожи, нарезанные по размеру, хранили при -3°С. После размораживания жидкость, оставшуюся на поверхности, удаляли ватным тампоном и выштамповывали определенную поверхность 3,14 см2. На эту поверхность наносили приблизительно 6 мг радиоактивно меченного тестируемого препарата на см2 таким образом, что на поверхности кожи образовывалась по возможности однородная пленка. Затем кусочек кожи, лежащий на марле, натягивали на диффузионную ячейку Франца, которую хранили при температуре 32°С. То же самое было сделано до начала теста в заполненном состоянии до фазы равновесия на 30 минуте. Акцепторная среда, которую постоянно помешивали для уменьшения толщины диффузионного слоя, непосредственно примыкала к внутренней поверхности кожи или марле. Для имитации физиологических условий в качестве акцепторной жидкости использовали изотонический раствор NaCl. Тесты проводили соответственно на 3 разных операционных препаратах для трехкратного определения. После окончания воздействия кусочки кожи удаляли и фиксировали на пенополистироловой коробке, покрытой алюминиевой фольгой с помощью иголок. Затем тестируемые препараты протирали марлевым тампоном.Used the skin of the human chest obtained by surgical plastic surgery to reduce breast. Sliced skin pieces were stored at -3 ° C. After thawing, the liquid remaining on the surface was removed with a cotton swab and a defined surface of 3.14 cm 2 was stamped. Approximately 6 mg of the radiolabelled test preparation per cm 2 was applied to this surface so that as uniform a film as possible was formed on the skin surface. Then, a piece of skin lying on gauze was pulled onto a Franz diffusion cell, which was stored at 32 ° C. The same was done before the test started in the filled state to the equilibrium phase at 30 minutes. The acceptor medium, which was constantly stirred to reduce the thickness of the diffusion layer, directly adjoined to the inner surface of the skin or gauze. An isotonic NaCl solution was used as an acceptor fluid to simulate physiological conditions. Tests were carried out respectively on 3 different operating preparations for triple determination. After exposure, skin pieces were removed and fixed on a polystyrene foam box covered with aluminum foil using needles. Then the test drugs were wiped with a gauze swab.
Удаление рогового слоя осуществляли через матрицу, содержащую круглое углубление (диаметр = 16 мм). Сквозь это углубление 20 полосок пленки Tesa (Tesa Film® 4 204, 33 м×19 мм; Со. Beiersdorf AG, Hamburg) удаляли с 2,0106 см2 поверхности кожи. Две последовательно полученные полоски, соответственно, измеряли вместе.Removal of the stratum corneum was carried out through a matrix containing a circular recess (diameter = 16 mm). Through this recess, 20 strips of Tesa film (Tesa Film® 4 204, 33 m × 19 mm; Co. Beiersdorf AG, Hamburg) were removed from 2.0106 cm 2 of the skin surface. Two consecutively obtained strips, respectively, were measured together.
Из оставшегося куска кожи с помощью штампа Кромайера (диаметр 6 мм; Stiefel Laboratorium GmbH, Offenbach) примерно из центрального участка кожи выштамповывали 3 цилиндра с общей поверхностью 0,848 см2. С помощью замораживающего микротома полученные таким образом цилиндры ткани подвергали последовательно глубокой заморозке до -40°С и нарезали горизонтально по отношению к поверхности кожи. Срезы 10×20 мкм затем удаляли, чтобы убрать компоненты живого эпидермиса, и срезы 15×18 мкм брали для обработки дермы. После этого остались остаток и акцепторная среда.3 cylinders with a total surface of 0.848 cm 2 were stamped from the remaining piece of leather using a Cromeyer stamp (
Из Фиг.3-5 следует, что в случае всех трех препаратов, уже через 30 минут >25% (ИПП 35%, ОА 32%, ДМСО 27%) содержащегося ЦсА проникает в акцептор. В случае более длительного времени тестирования проникающее количество фармацевтического средства слегка увеличивается. На Фиг.6-8, для лучшего сравнения носителей с различной концентрацией, количества проникающего фармацевтического средства приведены в мкг.From Fig.3-5 it follows that in the case of all three preparations, after 30 minutes> 25% (PPI 35%, OA 32%, DMSO 27%) of the contained CsA penetrates the acceptor. In the case of a longer test time, the penetrating amount of the pharmaceutical agent increases slightly. 6-8, for a better comparison of carriers with different concentrations, the amount of penetrating pharmaceutical agent is given in micrograms.
Ранее опубликованные данные о галеновых препаратах в отношении препаратов для местного применения, содержащих циклоспорин, выявили неадекватное высвобождение и/или проникновение действующего вещества. При этом были тестированы гидрофильные и липофильные стандартные системы или липосомальные препараты. Во многих случаях в публикациях не было никаких точных указаний в отношении содержания использованных препаратов, типа приготовления или медицинских данных. Две причины указаны в отношении отсутствия клинического эффекта. Во-первых, из-за сильной липофильности ЦсА происходит слишком низкое высвобождение и/или проникновение активного ингредиента в дермальные слои кожи. Во-вторых, при высокой молярной массе обнаружен фактор, значительно ингибирующий проникновение. Настоящие результаты впервые выявили скорости высвобождения и проникновения приблизительно 25-30% применяемой концентрации активного ингредиента в течение первых 30-100 минут в здоровую, то есть имеющую интактный барьер кожу ex vivo. Существенно, что при повреждении кожи (например, бляшки при псориазе) могут быть достигнуты более благоприятные условия для проникновения по сравнению со здоровой кожей.Previously published data on galenic preparations for topical preparations containing cyclosporine have revealed inadequate release and / or penetration of the active substance. In this case, hydrophilic and lipophilic standard systems or liposomal preparations were tested. In many cases, the publications did not provide any precise indications regarding the contents of the preparations used, type of preparation or medical data. Two reasons are indicated regarding the lack of clinical effect. Firstly, due to the strong lipophilicity of CsA, the release and / or penetration of the active ingredient into the dermal layers of the skin is too low. Secondly, at a high molar mass, a factor significantly inhibiting penetration was detected. These results first revealed the release and penetration rates of approximately 25-30% of the applied concentration of the active ingredient during the first 30-100 minutes into healthy, i.e. ex vivo intact barrier skin. It is significant that if the skin is damaged (for example, plaques in psoriasis), more favorable conditions for penetration can be achieved compared to healthy skin.
Местное применение ЦсА по сравнению с системным лечением предоставляет существенные преимущества. В случае местного применения, даже при лечении на большой площади, должны быть приняты во внимание лишь минимальные и не имеющие клинического значения системные побочные эффекты. Известные нежелательные действия фармацевтических средств, в частности, нарушение функции почек и артериальная гипертония, либо не ожидаются вообще, либо ожидаются в более низкой степени. Применение возможно даже для пациентов, у которых уже имеются развившиеся побочные действия в результате системного лечения и которые поэтому больше не лечатся ЦсА. В дополнение, благодаря местному применению получают увеличенный спектр эффективности. При множестве воспалительных дерматозов образование и действие монооксида азота (NO), который образуется из L-аргинина посредством фермента NO-синтазы, является центральным для патогенеза. Результаты самых последних исследований выявили, что индукция и поддержание воспаления в случае псориаза по существу опосредованы NO. ЦсА, как известно, представляет собой достаточный блокатор NO-синтазы (NOS), которая присутствует также в дермальных микроваскулярных эндотелиальных клетках благодаря изоферментам eNOS и iNOS, и ингибируется высокой концентрацией в ткани ЦсА после местного применения в большей степени, чем после системного применения. В дополнение, ЦсА также обладает ингибирующим пролиферацию действием в отношении кератиноцитов, которые влияют синергически на действие в отношении псориатической кожи при местном применении. Снижение стоимости лечения на пациента вследствие меньшего требуемого количества ЦсА также является благоприятным.Topical application of CSA compared with systemic treatment provides significant advantages. In case of local application, even during treatment over a large area, only minimal and not clinically significant systemic side effects should be taken into account. Known undesirable effects of pharmaceuticals, in particular, impaired renal function and arterial hypertension, are either not expected at all, or are expected to a lower degree. Application is possible even for patients who already have developed side effects as a result of systemic treatment and who therefore are no longer treated with CSA. In addition, through topical application, an increased spectrum of efficacy is obtained. In many inflammatory dermatoses, the formation and action of nitrogen monoxide (NO), which is formed from L-arginine through the enzyme NO synthase, is central to pathogenesis. The most recent studies have revealed that the induction and maintenance of inflammation in the case of psoriasis is essentially mediated by NO. CSA is known to be a sufficient blocker of NO synthase (NOS), which is also present in dermal microvascular endothelial cells due to eNOS and iNOS isoenzymes, and is inhibited by a high concentration of CSA in tissue after topical application to a greater extent than after systemic use. In addition, CSA also has a proliferation-inhibitory effect on keratinocytes, which act synergistically on psoriatic skin when applied topically. Reducing the cost of treatment per patient due to the lower amount of CSA required is also beneficial.
Недостатки местного применения и связанной с этим меньшей системной концентрации наблюдаются прежде всего в отсутствии эффекта в отношении лимфатических узлов, в которых происходит существенный процесс активации на уровне Т-клеток. В дополнение, не следует ожидать терапевтического эффекта в отношении артропатического псориаза.The disadvantages of local application and the associated lower systemic concentration are observed primarily in the absence of an effect on the lymph nodes, in which there is a significant activation process at the level of T cells. In addition, a therapeutic effect against arthropathic psoriasis should not be expected.
Представленные тесты, во-первых, показали, что можно разработать медицинскую систему, которая удовлетворяет условиям проникновения ЦсА в достаточной концентрации в верхние дермальные слои. Представлены стабильные системы-носители, в которые ЦсА может быть введен в достаточном количестве. Загрузка системы преднамеренно была выбрана очень высокой, для того чтобы полностью использовать медицинские свойства систем и для того чтобы обеспечить благоприятные предпосылки для клинического применения. Меньшие концентрации ЦсА могут быть достигнуты без труда с достаточной клинической эффективностью. Тесты на высвобождение выявили, что количества фармацевтического средства от 25 до 40% высвобождаются в релевантное время и доступны для проникновения в кожу.The presented tests, firstly, showed that it is possible to develop a medical system that satisfies the conditions for the penetration of CSA in sufficient concentration into the upper dermal layers. Stable carrier systems are presented in which CSA can be introduced in sufficient quantities. The loading of the system was deliberately chosen to be very high in order to fully utilize the medical properties of the systems and to provide favorable conditions for clinical use. Smaller concentrations of CSA can be achieved without difficulty with sufficient clinical efficacy. Tests for release revealed that amounts of the pharmaceutical agent from 25 to 40% are released at the relevant time and are available for penetration into the skin.
Тесты на проникновение в условиях ex vivo показали существенную важность для доклинической разработки. Они делают понятным, что после соответствующей продолжительности применения (30-100 мин) достигается проникновение концентрации активного ингредиента приблизительно 25-30% в дермальные слои или, соответственно, через них, и тем самым ингредиент становится доступным в желаемом месте действия.Ex vivo penetration tests have shown significant importance for preclinical development. They make it clear that after an appropriate duration of use (30-100 min), the concentration of the active ingredient of about 25-30% penetrates into the dermal layers or, respectively, through them, and thereby the ingredient becomes available at the desired site of action.
Составные части препаратов были выбраны в соответствии с дерматологической точкой зрения. Не содержатся никакие сильнодействующие сенсибилизирующие вещества, и сами тесты продемонстрировали хорошую переносимость, что делает появление раздражающего или токсического действия очень маловероятным, даже в случае нарушения барьерной функции при различных дерматозах. Основной областью показаний является псориаз хронического стационарного типа или атопический дерматит. В дополнение, дается множество возможных показаний в связи с системным лечением. Возможным рассматривается, в частности, применение при коллагенозах, ожогах, трансплантациях кожи или слизистой оболочки и хронических язвах.The components of the preparations were selected in accordance with the dermatological point of view. No potent sensitizing substances are contained, and the tests themselves have shown good tolerance, which makes the appearance of an irritant or toxic effect very unlikely, even in case of impaired barrier function in various dermatoses. The main area of evidence is psoriasis of a chronic stationary type or atopic dermatitis. In addition, there are many possible indications in connection with systemic treatment. Possible applications include collagenoses, burns, transplantations of skin or mucous membranes, and chronic ulcers.
Применение систем предложено не только в отношении наружной части кожи. Принципиально, имеется возможность применения на глаза после трансплантации роговицы, или для лечения рубцового пемфигоида слизистой оболочки, либо применения в области слизистой оболочки ротовой полости в случае красного лишая слизистой или в качестве клизмы в случае хронических воспалительных заболеваний кишечника (например, М.Crohn, язвенный колит), если необходимо, также в виде интралюминальной пены.The use of systems is proposed not only in relation to the outer part of the skin. In principle, it is possible to use the eyes after corneal transplantation, either for treating cicatricial pemphigoid mucous membrane, or use it in the area of the oral mucosa in case of red lichen mucosa or as an enema in case of chronic inflammatory bowel disease (e.g. M. Crohn, ulcerative colitis), if necessary, also in the form of an intraluminal foam.
Для приготовления микроэмульсий (ME), содержащих гидрокортизон, использовали способ, описанный выше для приготовления микроэмульсий в отсутствие гидрокортизона. Гидрокортизон добавляли сразу после добавления циклоспорина к липофильной фазе, а именно соответствующее количество микрокристаллического гидрокортизона растворяли в липофильной фазе при комнатной температуре. Все остальные стадии приготовления соответствуют приготовлению микроэмульсий в отсутствие гидрокортизона.To prepare microemulsions (ME) containing hydrocortisone, the method described above was used to prepare microemulsions in the absence of hydrocortisone. Hydrocortisone was added immediately after cyclosporin was added to the lipophilic phase, namely, the corresponding amount of microcrystalline hydrocortisone was dissolved in the lipophilic phase at room temperature. All other stages of preparation correspond to the preparation of microemulsions in the absence of hydrocortisone.
Claims (17)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2004121028/15A RU2301679C2 (en) | 2001-12-14 | 2001-12-14 | Ciclosporin-containing pharmaceutical preparation and its using |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2004121028/15A RU2301679C2 (en) | 2001-12-14 | 2001-12-14 | Ciclosporin-containing pharmaceutical preparation and its using |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2004121028A RU2004121028A (en) | 2005-04-20 |
RU2301679C2 true RU2301679C2 (en) | 2007-06-27 |
Family
ID=35634744
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2004121028/15A RU2301679C2 (en) | 2001-12-14 | 2001-12-14 | Ciclosporin-containing pharmaceutical preparation and its using |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2301679C2 (en) |
-
2001
- 2001-12-14 RU RU2004121028/15A patent/RU2301679C2/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
реферат Entrez-PubMed [Tran HS et al., «Site-specific immunosuppression using a new formulation of topical cyclosporine A with polyethylene glycol-8 glyceryl caprylate/caprate.», J Surg Res. 1999, 83(2), p.136-40., найдено в Интернет 13.12.2005]. * |
реферат MedLine [Ho VC et al, «Intermittent short courses of cyclosporine icroemulsion for the long-term management of psoriasis: a 2-year cohort study.», J Am Acad Dermatol. 2001,44(4), p.643-51., найдено в Интернет 13.12.2005]. реферат MedLine [Czech W et al, «A body-weight-independent dosing regimen of cyclosporine microemulsion is effective in severe atopic dermatitis and improves the quality of life.», J Am Acad Dermatol. 2000, 42(4), p.653-9., найдено в Интернет 13.12.2005]. реферат MedLine [Latteri M et al, «Pharmacokinetics of cyclosporin microemulsion in patients with inflammatory bowel disease.», Clin Pharmacokinet. 2001,40 (6), p.473-83., найдено в Интернет 13.12.2005]. реферат MedLine [Bhargava A et al., "Ocular allergic disease.", Drugs Today (Bare). 1998, 34 (11), p.957-71., найдено в Интернет 20.12.2005]. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2004121028A (en) | 2005-04-20 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DK2714010T3 (en) | TOPICAL PHARMACEUTICAL COMPOSITION BASED ON SEMIFLUORED ALKANES | |
ES2764081T3 (en) | Compositions for transdermal oxybutynin therapy | |
US4719239A (en) | Pharmaceutical multicomponent systems and method of preparing same | |
Kikwai et al. | In vitro and in vivo evaluation of topical formulations of spantide II | |
CN108273065B (en) | Ophthalmic composition | |
US8568748B2 (en) | Pharmaceutical formulation comprising cyclosporin and use thereof | |
CN109310647A (en) | Pharmaceutical composition with enhancing infiltration | |
JP2023120393A (en) | Topical therapy for the treatment of skin malignancies using nanoparticles of taxanes | |
RU2560677C2 (en) | Skin composition, including vitamin d analogue and mixture of solvent and surface-active substances | |
CN109310646A (en) | Enhance the adrenaline composition of delivering | |
RU2741504C2 (en) | Composition for local application containing tacrolimus | |
CN111465391A (en) | Compositions of epinephrine and prodrug with enhanced delivery | |
JP2023139134A (en) | Fenoldopam topical formulations for treating skin disorders | |
JPH09255565A (en) | Hydrogel patch for dermal local anesthesia | |
CZ292378B6 (en) | Formulation containing cyclosporine and process of its preparation | |
BR112012015449B1 (en) | CALCIPOTRIOL MONOHYDRATE SUSPENSION, AND PROCESS TO PREPARE CALCIPOTRIOL MONOHYDRATE NANOCRYSTALS | |
RU2301679C2 (en) | Ciclosporin-containing pharmaceutical preparation and its using | |
KR20200079502A (en) | Topical formulation for treating dermatological disorders including male pattern baldness | |
KR100341203B1 (en) | Pharmaceutical Composition Comprising Oily Vitamin and process for the preparation thereof | |
PL205818B1 (en) | Pharmaceutical formulation comprising cyclosporin and use thereof |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20191215 |