RU2295330C2

RU2295330C2 - Pharmaceutical composition for prophylaxis and additional chemotherapy of tuberculosis

Info

Publication number: RU2295330C2
Application number: RU2004135345/15A
Authority: RU
Inventors: Александр Владимирович Балышев (RU); Александр Владимирович Балышев; Тать на Владимировна Гребенникова (RU); Татьяна Владимировна Гребенникова; Тать на Вадимовна Плетенева (RU); Татьяна Вадимовна Плетенева; Антон Владимирович Сыроешкин (RU); Антон Владимирович Сыроешкин; Вадим Юрьевич Коломин (RU); Вадим Юрьевич Коломин
Original assignee: Александр Владимирович Балышев; Татьяна Владимировна Гребенникова; Татьяна Вадимовна Плетенева; Вадим Юрьевич Коломин; Антон Владимирович Сыроешкин
Priority date: 2004-12-03
Filing date: 2004-12-03
Publication date: 2007-03-20
Also published as: RU2004135345A

Abstract

FIELD: medicine.

SUBSTANCE: invention relates to pharmaceutical composition for peroral administration for prophylaxis and additional chemotherapy of tuberculosis. Claimed composition contains aqueous solution of zinc sulfate and glycine.

EFFECT: non-toxic composition with high effectiveness having no side effects and additionally stimulating of immune system functions.

4 ex

Description

Изобретение относится к области медицины и касается нового лекарственного препарата, предотвращающего развитие нефагоцитируемых колониальных форм микобактерий туберкулеза и стимулирующего функции иммунной системы.The invention relates to medicine and relates to a new drug that prevents the development of non-phagocytic colonial forms of mycobacterium tuberculosis and stimulates the function of the immune system.

В настоящее время в связи с увеличивающимся числом случаев заболеваний туберкулезом особое значение приобретает поиск безопасных фармацевтических препаратов, обладающих профилактическими свойствами и позволяющих повысить эффект стандартной химиотерапии [Хоменко А.Г. Туберкулез. - М.: Медицина, 1992. - 312 с.; Перельман М.И. О концепции Национальной российской программы борьбы с туберкулезом // Проблемы туберкулеза. - 2000. - №3. - С.51-55, Treatment of tuberculosis. Guidelines for national programs. WHO; 1997]. Одним из важнейших факторов защиты организма при инфицировании туберкулезом является клеточный иммунитет. Однако он недостаточно эффективен. Одна из причин неэффективности - недоступность микобактерий туберкулеза для фагоцитоза вследствие образования ими полицеллюлярных колониальных форм, а также ультрамелких форм [Дорожкова И.Р. и др. L-трансформация микобактерий в свете текущей эпидемиологической ситуации туберкулеза в мире // Вестник РАМН. - 1995. - №7. - С.30-33].Currently, in connection with an increasing number of cases of tuberculosis diseases, the search for safe pharmaceutical drugs that have prophylactic properties and can enhance the effect of standard chemotherapy is of particular importance [Khomenko A.G. Tuberculosis. - M .: Medicine, 1992. - 312 p .; Perelman M.I. About the concept of the National Russian tuberculosis control program // Problems of Tuberculosis. - 2000. - No. 3. - S.51-55, Treatment of tuberculosis. Guidelines for national programs. WHO 1997]. One of the most important factors in protecting the body when infected with tuberculosis is cellular immunity. However, it is not effective enough. One of the reasons for inefficiency is the inaccessibility of tuberculosis mycobacteria for phagocytosis due to the formation of polycellular colonial forms, as well as ultrafine forms [Dorozhkova I.R. et al. L-transformation of mycobacteria in the light of the current epidemiological situation of tuberculosis in the world // Vestnik RAMS. - 1995. - No. 7. - S.30-33].

В настоящее время разработка новых противотуберкулезных средств производится в основном за счет изменения соотношений между уже известными действующими компонентами (синтетические препараты, антибиотики), применения дополнительно к основной химиотерапии неспецифических препаратов растительного или животного сырья [патент РФ №2211035], а также синтеза новых соединений на основе уже известных [патент РФ №93057160, №2169565]. Это не решает имеющиеся проблемы, а именно: возникновение мультирезистентных штаммов, нейро-, нефро- и гепатотоксичность препаратов [Туберкулез. Патогенез, защита, контроль. Под ред. Б.Р.Блума. - М.: Медицина. - 2002].Currently, the development of new anti-TB drugs is mainly due to changes in the ratios between already known active ingredients (synthetic drugs, antibiotics), the use of non-specific preparations of plant or animal raw materials in addition to the main chemotherapy [RF patent No. 2211035], as well as the synthesis of new compounds for the basis of the already known [RF patent No. 93057160, No. 2169565]. This does not solve the existing problems, namely: the emergence of multiresistant strains, neuro-, nephro- and hepatotoxicity of drugs [Tuberculosis. Pathogenesis, protection, control. Ed. B.R. Bloom. - M.: Medicine. - 2002].

Задачей предлагаемого изобретения являлось создание новой высокоэффективной, нетоксичной, без побочных эффектов фармацевтической композиции, обладающей действием как по предотвращению образования нефагоцитируемых колониальных и ультрамелких форм микобактерий туберкулеза, так и стимулирующей функции иммунной системы.The objective of the invention was the creation of a new highly effective, non-toxic, without side effects, pharmaceutical composition, which has the effect of both preventing the formation of non-phagocytic colonial and ultrafine forms of mycobacterium tuberculosis, and stimulating the function of the immune system.

Заявляемая фармацевтическая композиция является новой и в литературе не описана.The inventive pharmaceutical composition is new and is not described in the literature.

Указанные задачи по предотвращению образования нефагоцитируемых форм микобактерий туберкулеза с одновременной активацией иммунитета решаются путем создания фармацевтической композиции, содержащей в качестве действующего вещества раствор сульфата цинка и глицина, таким образом, чтобы не менее 70% ионов цинка находились в составе аквакомплекса Zn²⁺с глицином. Расчет аналитических (добавленных) концентраций необходимых для образования комплекса ионов цинка с глицином ведется стандартным способом с использованием уравнения для константы равновесия реакции комплексообразования [например, Физическая химия. По ред. Б.П.Никольского. - Л., Химия. - 1987; Россоти Ф., Россоти X. Определение констант устойчивости и других констант равновесия в растворах. - М.: Мир. - 1965] и табличными данными для константы диссоциации цинк-глициновых комплексов [например, Справочник химика. - Л. Химия. - 1965].These tasks to prevent the formation of non-phagocytosed forms of mycobacterium tuberculosis with the simultaneous activation of immunity are solved by creating a pharmaceutical composition containing a solution of zinc sulfate and glycine as an active substance, so that at least 70% of zinc ions are part of the Zn ²⁺ aqua ^complex with glycine. The calculation of the analytical (added) concentrations necessary for the formation of a complex of zinc ions with glycine is carried out in a standard way using the equation for the equilibrium constant of the complexation reaction [for example, Physical chemistry. Ed. B.P. Nikolsky. - L., Chemistry. - 1987; Rossoti F., Rossoti X. Determination of stability constants and other equilibrium constants in solutions. - M .: World. - 1965] and tabular data for the dissociation constant of zinc-glycine complexes [eg, Handbook of a chemist. - L. Chemistry. - 1965].

Фармацевтическая композиция предпочтительно применяется в виде раствора перорально. Концентрации сульфата цинка и глицина, лежащие в интервале 0,75-1,25 мМ и 15-25 мМ соответственно, являются наиболее оптимальными по следующим причинам. Более 70% ионов цинка связаны в комплекс с глицином, что потенциально увеличивает биодоступность цинка [например, патент РФ №2222996, патент №2000116327]. В этих концентрациях при приеме человеком per os по 200-400 мл утром и вечером может быть достигнута достаточная концентрация цинка и глицина в крови и легких, как следует из данных по фармакокинетике компонентов препарата [Государственный реестр лекарственных средств. - М.: Минздрав России, Фонд Фармацевтической информации, 2003; Авцын А.П., Жаворонков А.А., Риш М.А., Строчкова Л.С. Микроэлементозы человека (этиология, классификация, органопатология). - М.: Медицина, 1991. - 496 с.]. В этих концентрациях препарат не имеет вкуса и запаха. Это открывает возможность его простого использования не только в медицине, но и в ветеринарии при замене им питьевой воды у животных. Возможно применение фармацевтической композиции и при других концентрациях компонентов при соответствующем изменении дозировки.The pharmaceutical composition is preferably administered as a solution orally. The concentration of zinc sulfate and glycine, lying in the range of 0.75-1.25 mm and 15-25 mm, respectively, are the most optimal for the following reasons. More than 70% of zinc ions are complexed with glycine, which potentially increases the bioavailability of zinc [for example, RF patent No. 2222996, patent No. 20010116327]. At these concentrations, when a person takes 200-400 ml per os per day in the morning and evening, a sufficient concentration of zinc and glycine in the blood and lungs can be achieved, as follows from the pharmacokinetics of the components of the drug [State Register of Medicines. - M .: Ministry of Health of the Russian Federation, Pharmaceutical Information Fund, 2003; Avtsyn A.P., Zhavoronkov A.A., Rish M.A., Strochkova L.S. Human microelementoses (etiology, classification, organopathology). - M .: Medicine, 1991. - 496 p.]. In these concentrations, the drug has no taste or smell. This opens up the possibility of its simple use not only in medicine, but also in veterinary medicine when it replaces drinking water in animals. It is possible to use the pharmaceutical composition at other concentrations of the components with a corresponding dosage change.

Указанные в композиции компоненты являются естественными метаболитами, содержащимися в растительных и животных тканях, и представляют собой официнальные порошкообразные вещества белого цвета без запаха, хорошо растворимые в воде, трудно растворимые в этиловом спирте и маслах. В медицине глицин применяется как антистрессовое, ноотропное, нормализующее обменные процессы средство [например, патент РФ №2096034]. Цинка сульфат используют наружно как антисептик, внутрь при недостатке этого элемента [Государственный реестр лекарственных средств. - М.: Минздрав России, Фонд фармацевтической информации, 2003].The components indicated in the composition are natural metabolites contained in plant and animal tissues, and they are offical white offical powdery substances that are readily soluble in water and difficult to dissolve in ethyl alcohol and oils. In medicine, glycine is used as an anti-stress, nootropic, normalizing metabolic process agent [for example, RF patent No. 2096034]. Zinc sulfate is used externally as an antiseptic, inside with a lack of this element [State Register of Medicines. - M.: Ministry of Health of Russia, Pharmaceutical Information Fund, 2003].

Фармацевтическая композиция содержит в качестве растворителя дистиллированную воду или воду, обедненную по дейтерию, или воду, обогащенную по дейтерию, что увеличивает неспецифическую резистентность эукариотической клетки [Сыроешкин А.В., Фролов В.А. От теории топологии и кинетики клеточного формообразования к направленному управлению нормальными и патологическими реакциями клеточных популяций. // Патофизиология и современная медицина. Вторая международная конференция. 22-24 апреля 2004 г. - Москва, Издательство РУДН, 2004. - С.377-379].The pharmaceutical composition contains, as a solvent, distilled water or deuterium depleted water, or deuterium enriched water, which increases the non-specific resistance of a eukaryotic cell [Syroeshkin A.V., Frolov V.A. From the theory of topology and kinetics of cell morphogenesis to the directional control of normal and pathological reactions of cell populations. // Pathophysiology and modern medicine. The second international conference. April 22-24, 2004 - Moscow, RUDN Publishing House, 2004. - S.377-379].

Заявляемая фармацевтическая композиция предотвращает развитие нефагоцитируемых колониальных форм Mycobacteria tuberculosis и обладает профилактическим действием при туберкулезе, а также стимулирует функции иммунной системы, как показано ниже в примерах. Из примеров следует, что заявляемая фармацевтическая композиция имеет и иное применение, а именно как средство для дополнительной химиотерапии туберкулеза, предотвращая развитие микобактерий туберкулеза не за счет бактериостатического или бактерицидного действия, а за счет блокирования межпопуляционных переходов. Известные противотуберкулезные средства, включающие изониазид, рифампицин, ПАСК и другие, действуют бактериостатически и бактерицидно [Хоменко А.Г. Туберкулез. - М.: Медицина, 1992. - 312 с. Государственный реестр лекарственных средств. - М.: Минздрав России], снижая концентрацию микобактерий туберкулеза в организме больного. Заявляемая фармацевтическая композиция будет дополнительно оказывать терапевтический эффект за счет ингибированния образования колониальных форм и L-форм микобактерий туберкулеза, снижая таким образом вероятность формирования устойчивости к химиопрепаратам. Повышенная устойчивость L-форм к химиотерапии хорошо известна [Дорожкова И.Р. и др. L-трансформация микобактерий в свете текущей эпидемиологической ситуации туберкулеза в мире // Вестник РАМН. - 1995. - №7. - С.30-33]. Образование полицеллюлярных (колониальных) форм является общей для многих организмов адаптивной реакцией на неблагоприятные внешние воздействия, включая химиотерапию [Бухарин О.В. Персистенция патогенных бактерий. - М.: Медицина, 1999. - 366 с.]. Следовательно, предотвращая образование ассоциатов, мы улучшаем доступность микобактерий для воздействия противотуберкулезных средств. Также хорошо известно, что противотуберкулезная химиотерапия вызывает целый комплекс побочных эффектов: гепато- нефро- и нейротоксические реакции, а также угнетение клеточного иммунитета [Хоменко А.Г. Туберкулез. - М.: Медицина, 1992. - 312 с. Treatment of tuberculosis. Guidelines for national programs. WHO; 1997]. Неспецифическая активация резистентности эукариотической клетки и активация иммунного ответа, вызываемые заявляемой фармацевтической композицией, приведут к снижению побочного токсического действия стандартной противотуберкулезной химиотерапии.The inventive pharmaceutical composition prevents the development of non-phagocytic colonial forms of Mycobacteria tuberculosis and has a prophylactic effect on tuberculosis, and also stimulates the functions of the immune system, as shown in the examples below. From the examples it follows that the claimed pharmaceutical composition has other uses, namely as a means for additional chemotherapy for tuberculosis, preventing the development of mycobacterium tuberculosis not due to bacteriostatic or bactericidal action, but due to blocking interpopulation transitions. Known anti-TB drugs, including isoniazid, rifampicin, PASK and others, act bacteriostatically and bactericidal [Khomenko A.G. Tuberculosis. - M .: Medicine, 1992 .-- 312 p. State register of medicines. - M .: Ministry of Health of Russia], reducing the concentration of mycobacterium tuberculosis in the patient's body. The inventive pharmaceutical composition will additionally have a therapeutic effect by inhibiting the formation of colonial forms and L-forms of tuberculosis mycobacteria, thereby reducing the likelihood of the formation of resistance to chemotherapeutic agents. The increased resistance of L-forms to chemotherapy is well known [I. Dorozhkova et al. L-transformation of mycobacteria in the light of the current epidemiological situation of tuberculosis in the world // Vestnik RAMS. - 1995. - No. 7. - S.30-33]. The formation of polycellular (colonial) forms is a common adaptive reaction for many organisms to adverse external influences, including chemotherapy [O. Bukharin The persistence of pathogenic bacteria. - M.: Medicine, 1999. - 366 p.]. Therefore, by preventing the formation of associates, we are improving the availability of mycobacteria for exposure to anti-TB drugs. It is also well known that anti-tuberculosis chemotherapy causes a whole complex of side effects: hepatonephro- and neurotoxic reactions, as well as inhibition of cellular immunity [Khomenko A.G. Tuberculosis. - M .: Medicine, 1992 .-- 312 p. Treatment of tuberculosis. Guidelines for national programs. WHO 1997]. Nonspecific activation of eukaryotic cell resistance and activation of the immune response caused by the claimed pharmaceutical composition will reduce the toxic side effects of standard anti-tuberculosis chemotherapy.

Фармакологическое действие заявляемой композиции изучали в экспериментах в суспензии культуры клеток М. tuberculosis на модельной эукариотической клетке и на лабораторных животных. В качестве иллюстрации ее эффективности приведены следующие примеры.The pharmacological effect of the claimed composition was studied in experiments in a suspension of M. tuberculosis cell culture on a model eukaryotic cell and in laboratory animals. The following examples are provided to illustrate its effectiveness.

Пример 1. При изучении влияния заявляемой композиции на развитие микобактерий туберкулеза было установлено, что при их размножении в среде Сатона образуются полицеллюлярные колониальные формы, которым принадлежит на определенных стадиях развития (4 неделя) до 90% биомассы клеток. Максимум массового распределения колоний составляет 80 мкм. Внесение в среду культивирования предлагаемой композиции, включающей сульфат цинка и глицин до концентраций 1 мМ и 20 мМ соответственно, приводило к изменению массовых соотношений субпопуляций в полиморфной культуре М. tuberculosis и перераспределению биомассы в сторону образования фагоцитируемых одиночных форм с максимумом массового распределения около 4-8 мкм: 90% биомассы после инкубации в среде Сатона с сульфатом цинка и глицина принадлежит палочковидным формам. Кроме снижения более чем в 10 раз концентрации колониальных полицеллюлярных форм, происходило также практически полное исчезновение ультрамелких форм.Example 1. When studying the effect of the claimed composition on the development of mycobacterium tuberculosis, it was found that when they multiply in Saton’s medium, polycellular colonial forms are formed, which at certain stages of development (4 weeks) belong to 90% of the cell biomass. The maximum mass distribution of the colonies is 80 μm. The introduction of the proposed composition into the culture medium, including zinc sulfate and glycine to concentrations of 1 mM and 20 mM, respectively, led to a change in the mass ratios of subpopulations in the polymorphic culture of M. tuberculosis and redistribution of biomass towards the formation of phagocytosed single forms with a maximum mass distribution of about 4-8 μm: 90% of the biomass after incubation in Saton’s medium with zinc sulfate and glycine belongs to rod-shaped forms. In addition to a decrease of more than 10 times the concentration of colonial polycellular forms, the ultrafine forms also almost disappeared.

Эти данные подтверждают, что заявляемая композиция обладает выраженным влиянием на процессы формообразования при развитии культуры микобактерий туберкулеза в сторону образования фагоцитируемых форм.These data confirm that the claimed composition has a pronounced effect on the processes of morphogenesis during the development of a culture of tuberculosis mycobacteria towards the formation of phagocytosed forms.

Пример 2. На кроликах породы Шиншилла массой 3,0-3,5 кг (25 голов) было показано влияние как самой изучаемой фармацевтической композиции, так и ее составляющих (сульфата цинка и глицина) на активность естественных киллеров (ЕК), являющихся одним из факторов клеточного иммунитета. Они опосредуют один из основных цитотоксических эффекторных механизмов, направленных на элиминирование антигенно измененных клеток.Example 2. On rabbits of Chinchilla breed weighing 3.0-3.5 kg (25 animals), the influence of both the studied pharmaceutical composition and its components (zinc sulfate and glycine) on the activity of natural killers (EC), which is one of factors of cellular immunity. They mediate one of the main cytotoxic effector mechanisms aimed at eliminating antigenically altered cells.

Опытные группы кроликов получали по 150 мл в течение пяти суток фармацевтическую композицию (1 мМ ZnSO₄+ 20 мМ глицин) или один из ее компонентов: 1 мМ ZnSO₄, или 20 мМ глицин перорально. Контрольная группа животных не получала препаратов. Через 5 суток у опытных и контрольных кроликов отбирали пробы крови по 20 мл и определяли активность ЕК согласно стандартной методике [Рыкова М.П. и др. Новая высокочувствительная техника тестирования нормальных киллеров. // Иммунология. - 1981. - №3. - С.88-90].Experimental groups of rabbits received 150 ml for five days, the pharmaceutical composition (1 mm ZnSO ₄ + 20 mm glycine) or one of its components: 1 mm ZnSO ₄ , or 20 mm oral glycine. The control group of animals did not receive drugs. After 5 days, 20 ml blood samples were taken from the experimental and control rabbits and the EC activity was determined according to the standard method [Rykova MP and others. A new highly sensitive technique for testing normal killers. // Immunology. - 1981. - No. 3. - S.88-90].

В качестве мишеней использовали монослойно-суспензионную клональную сублинию перевиваемых клеток почки эмбриона свиньи ППК-66-б (4×10⁴ клеток в 0,2 мл). Клетки метили ³H-уридином (конечная концентрация 5 мккюри/мл) и проводили реакцию в течение четырех часов с лейкоцитами крови кроликов (эффекторы). Эффекторы добавляли к мишеням в объеме 0,05 мл при соотношениях 25:1 и вносили 0,05 мл панкреатической РНК-зы с конечной концентрацией 40 мг/мл. После инкубирования в атмосфере 5% двуокиси углерода при 37°С в течение 18 часов содержимое проб отмывали на ультрафильтрах физиологическим раствором, холодной 5% трихлоруксусной кислотой и этанолом. Радиоактивность фильтров измеряли в сцинтилляционном счетчике. Активность ЕК оценивали по индексам цитотоксичности, рассчитанным как отношение радиоактивности надосадка пробы, содержащей клетки-мишени и клетки-эффекторы, к радиоактивности надосадка пробы, содержащей только клетки-мишени.As targets, we used a monolayer-suspension clonal subline of transplanted cells of the kidney of the pig embryo PPK-66-b (4 × 10 ⁴ cells in 0.2 ml). Cells were labeled with ³ H-uridine (final concentration of 5 μcurie / ml) and reacted for four hours with rabbit blood leukocytes (effectors). Effectors were added to the targets in a volume of 0.05 ml at ratios of 25: 1 and 0.05 ml of pancreatic RNAse were added with a final concentration of 40 mg / ml. After incubation in an atmosphere of 5% carbon dioxide at 37 ° C for 18 hours, the contents of the samples were washed on ultrafilters with physiological saline, cold 5% trichloroacetic acid and ethanol. The radioactivity of the filters was measured in a scintillation counter. EC activity was evaluated by cytotoxicity indices calculated as the ratio of the radioactivity of the supernatant of the sample containing target cells and effector cells to the radioactivity of the supernatant of the sample containing only target cells.

Этими исследованиями было показано, что прием изучаемой композиции приводит к увеличению активности ЕК в 2,5 раза, в то время как употребление только раствора сульфата цинка приводило к увеличению активности ЕК в 2,0, а глицина - в 1,4 раза. Таким образом, фармацевтическая композиция более эффективна, чем каждый из компонентов в отдельности, и обладает выраженным иммуностимулирующим действием.These studies showed that taking the studied composition leads to an increase in EC activity by 2.5 times, while the use of only a solution of zinc sulfate led to an increase in EC activity by 2.0, and glycine by 1.4 times. Thus, the pharmaceutical composition is more effective than each of the components individually, and has a pronounced immunostimulating effect.

Пример 3. Исследования синергетического действия фармацевтической композиции проводили на клеточном биосенсоре Spirostomum ambigua, которое выражалось в усилении выживаемости S. ambigua, проявляющемся в десятикратном увеличением продолжительности жизни клеток. Использование воды, обогащенной дейтерием, приводило к смещению максимума выживаемости в сторону более низких температур (от 30 до 27°С), означающее усиление триггерной активации неспецифической резистентности эукариотической клетки.Example 3. Studies of the synergistic effect of the pharmaceutical composition were carried out on a Spirostomum ambigua cell biosensor, which was expressed in enhancing the survival of S. ambigua, which manifests itself in a ten-fold increase in cell life. The use of water enriched in deuterium led to a shift in the survival maximum towards lower temperatures (from 30 to 27 ° C), which means an increase in the trigger activation of nonspecific resistance of the eukaryotic cell.

Пример 4. Противотуберкулезное действие заявляемой композиции изучали на 40 белых мышах стадного разведения обоего пола массой 19-24 г, которые были разделены на две группы. Первая - была заражена М. tuberculosis. Вторая была заражена М. tuberculosis и получала (с момента инфицирования) содержащую цинк и глицин композицию в количестве 1 мл в сутки. Для заражения отбирали культуру М. tuberculosis в конце логарифмической фазы роста при концентрации клеток 10⁸ кл./мл, которую вводили мышам внутрибрюшинно в количестве 0,1 см³.Example 4. The anti-tuberculosis effect of the claimed composition was studied on 40 white mice of a herd dilution of both sexes weighing 19-24 g, which were divided into two groups. The first - was infected with M. tuberculosis. The second was infected with M. tuberculosis and received (from the moment of infection) a composition containing zinc and glycine in an amount of 1 ml per day. For infection, a culture of M. tuberculosis was selected at the end of the logarithmic growth phase at a cell concentration of 10 ⁸ cells / ml, which was administered to the mice intraperitoneally in an amount of 0.1 cm ³ .

На 30-й день с момента заражения мышей декапитировали и отбирали кровь, печень и легкие для исследований. Для выявления и идентификации М. tuberculosis в тканях животных применяли метод полимеразной цепной реакции (ПЦР), использовали тест-систему с использованием внутренних и внешних праймеров. Полученные данные показывают, что заявляемая композиция обладает профилактическими свойствами, препятствуя развитию микобактерий туберкулеза при инфицировании животных. Так, в крови и легких инфицированных мышей возбудитель М. tuberculosis определяли соответственно у 60% и 10% животных. У мышей, получавших заявляемую композицию, М. tuberculosis в крови и органах не обнаружили.On the 30th day after infection, the mice were decapitated and blood, liver and lungs were taken for research. To identify and identify M. tuberculosis in animal tissues, the method of polymerase chain reaction (PCR) was used, a test system using internal and external primers was used. The data obtained show that the claimed composition has prophylactic properties, inhibiting the development of mycobacterium tuberculosis during infection of animals. Thus, in the blood and lungs of infected mice, the pathogen M. tuberculosis was determined in 60% and 10% of animals, respectively. In mice treated with the claimed composition, M. tuberculosis was not found in the blood and organs.

Кроме того, было отмечено, что инфицирование животных микобактериями туберкулеза приводит к резкому снижению марганца (по данным атомно-абсорбционной спектрометрии с электротермической атомизацией и зеемановской коррекцией фона) в крови и легких. Так, у здоровых мышей содержание марганца в крови составляло 0,29±0,12 мкг на г ткани, а в легких - 0,33±0,01 мкг на г ткани. У мышей, инфицированных микобактериями туберкулеза, содержание марганца в крови и легких было менее 0,005 мкг на г ткани. У животных, принимавших заявляемую фармацевтическую композицию, демонстрировали содержание марганца в крови и легких, которое было такое же, как и у здоровых. Таким образом, заявляемая фармацевтическая композиция препятствует изменению микроэлементного статуса при инфицировании микобактериями туберкулеза.In addition, it was noted that infection of animals with mycobacterium tuberculosis leads to a sharp decrease in manganese (according to atomic absorption spectrometry with electrothermal atomization and Zeeman background correction) in the blood and lungs. Thus, in healthy mice, the manganese content in the blood was 0.29 ± 0.12 μg per g of tissue, and in the lungs it was 0.33 ± 0.01 μg per g of tissue. In mice infected with Mycobacterium tuberculosis, the manganese content in the blood and lungs was less than 0.005 μg per g of tissue. Animals taking the inventive pharmaceutical composition showed a manganese content in the blood and lungs, which was the same as in healthy ones. Thus, the claimed pharmaceutical composition prevents the change in microelement status when infected with Mycobacterium tuberculosis.

Claims

Pharmaceutical composition for oral use for the prevention and additional chemotherapy of tuberculosis, consisting of an aqueous solution of zinc sulfate and glycine in the following ratio, mm:

Zinc sulphate 0.75-1.25 Glycine 15-25