RU2281328C2 - Biocatalyst for dextrin saccharification, method for production thereof and method for dextrin saccharification - Google Patents
Biocatalyst for dextrin saccharification, method for production thereof and method for dextrin saccharification Download PDFInfo
- Publication number
- RU2281328C2 RU2281328C2 RU2004127159/13A RU2004127159A RU2281328C2 RU 2281328 C2 RU2281328 C2 RU 2281328C2 RU 2004127159/13 A RU2004127159/13 A RU 2004127159/13A RU 2004127159 A RU2004127159 A RU 2004127159A RU 2281328 C2 RU2281328 C2 RU 2281328C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- biocatalyst
- dextrin
- saccharification
- carrier
- glucoamylase
- Prior art date
Links
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/52—Improvements relating to the production of bulk chemicals using catalysts, e.g. selective catalysts
Landscapes
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к биокатализаторам, способам их приготовления и способам осахаривания ферментативно-разжиженного крахмала (декстрина) с целью получения сахаристых веществ - крахмальных паток различного состава - и может быть использовано в крахмало-паточной промышленности. Известно, что применение таких сахаристых веществ в производстве кондитерских изделий, мороженного, напитков и продуктов диетического питания существенно улучшает качество производимых изделий, замедляя процессы высыхания и затвердевания.The invention relates to biocatalysts, methods for their preparation and methods for saccharification of enzymatically liquefied starch (dextrin) in order to obtain sugar substances - starch syrups of various compositions - and can be used in the starch-syrup industry. It is known that the use of such sugary substances in the manufacture of confectionery, ice cream, drinks and dietary food products significantly improves the quality of the products produced, slowing down the drying and hardening processes.
Известен способ осахаривания ферментативно-разжиженного крахмала (декстрина) с помощью фермента - глюкоамилазы, когда раствор декстрина и раствор фермента смешивают в емкости, выдерживают при повышенной температуре в течение нескольких часов и получают конечный продукт - крахмальную патоку [Крахмал и крахмалопродукты. Под ред. Гулюка Н.Г. М.: Агропромиздат. 1985. 239 с.]. Недостатком данного способа являются необратимые потери относительно дорогостоящего фермента глюкоамилазы и необходимость дополнительной очистки конечного продукта.A known method of saccharification of enzymatically liquefied starch (dextrin) using an enzyme - glucoamylase, when the dextrin solution and the enzyme solution is mixed in a container, kept at elevated temperature for several hours and get the final product - starch syrup [Starch and starch products. Ed. Gulyuk N.G. M .: Agropromizdat. 1985. 239 p.]. The disadvantage of this method is the irreversible loss of the relatively expensive enzyme glucoamylase and the need for additional purification of the final product.
Наиболее близким является способ осахаривания крахмала с помощью биокатализатора, приготовленного путем иммобилизации глюкоамилазы на твердом носителе [Пат. RU 2167197, C 12 N 11/14, 20.05.2001]. В качестве твердого носителя используют зауглероженный алюмосиликат, выполненный в форме гранул, сотовых монолитов и пеноматериала, имеющий удельную поверхность не менее 2 м2/г. Процесс проводят в непрерывном режиме с использованием неподвижного слоя биокатализатора при температуре не ниже 50°С.The closest is a method of saccharification of starch using a biocatalyst prepared by immobilization of glucoamylase on a solid carrier [US Pat. RU 2167197, C 12 N 11/14, 05.20.2001]. Carbonized aluminosilicate made in the form of granules, honeycomb monoliths and foam having a specific surface area of at least 2 m 2 / g is used as a solid support. The process is carried out in a continuous mode using a fixed biocatalyst layer at a temperature of at least 50 ° C.
Недостатком данного способа является то, что биокатализатор обладает относительно низкой биокаталитической активностью. При использовании биокатализатора, выполненного в форме сотовых монолитов или пеноматериала, в реакторе с неподвижным слоем биокатализатора создаются условия для возникновения застойных, так называемых "мертвых зон", при этом эффективность использования биокатализатора падает.The disadvantage of this method is that the biocatalyst has a relatively low biocatalytic activity. When using a biocatalyst made in the form of cellular monoliths or foam in a reactor with a fixed bed of biocatalyst, conditions are created for the occurrence of stagnant, so-called "dead zones", while the efficiency of using the biocatalyst decreases.
Технический результат изобретения заключается в увеличении биокаталитической глюкоамилазной активности и стабильности биокатализатора для осахаривания декстрина.The technical result of the invention is to increase the biocatalytic glucoamylase activity and stability of the biocatalyst for saccharification of dextrin.
Этот технический результат достигается тем, что биокатализатор для осахаривания декстрина получают с помощью твердого гранулированного углеродного носителя, приготовленного на основе технического углерода - сажи и имеющего мезопористую структуру со средним диаметром пор 100-400 Å и объемом пор 0,6-0,9 см3/г, и фермента глюкоамилазы. Твердый носитель выполнен в виде гранул правильной округлой формы размером от 0,5 мм до 3 мм, организующих упакованный неподвижный слой биокатализатора в реакторе без застойных "мертвых зон", что приводит к увеличению эффективности использования биокатализатора.This technical result is achieved in that the biocatalyst for saccharification of dextrin is obtained using a solid granular carbon carrier prepared on the basis of carbon black - soot and having a mesoporous structure with an average pore diameter of 100-400 Å and a pore volume of 0.6-0.9 cm 3 / g, and glucoamylase enzyme. The solid support is made in the form of granules of regular round shape from 0.5 mm to 3 mm in size, organizing a packed fixed biocatalyst layer in the reactor without stagnant "dead zones", which leads to an increase in the efficiency of using the biocatalyst.
Технический результат достигается тем, что на твердом гранулированном углеродном носителе, приготовленном на основе технического углерода - сажи и имеющего мезопористую структуру со средним диаметром пор 100-400 Å и объемом пор 0,7-0,9 см3/г, фермент глюкоамилаза иммобилизованн путем адсорбции (без использования токсичных химических реагентов), что позволяет сохранить его биокаталитическую активность на высоком уровне. Мезопористая структура твердого гранулированного углеродного носителя, в которой преобладают поры 100-400 Å, позволяет максимально стабилизировать фермент глюкоамилазу, размер молекулы которой составляет ~200 Å в водном окружении, за счет многоточечного связывания в подходящих по размеру порах.The technical result is achieved by the fact that on a solid granular carbon carrier prepared on the basis of carbon black - soot and having a mesoporous structure with an average pore diameter of 100-400 Å and a pore volume of 0.7-0.9 cm 3 / g, the glucoamylase enzyme is immobilized by adsorption (without the use of toxic chemicals), which allows to maintain its biocatalytic activity at a high level. The mesoporous structure of a solid granular carbon carrier, in which pores of 100-400 Å predominate, maximally stabilizes the glucoamylase enzyme, whose molecule size is ~ 200 Å in an aqueous environment, due to multipoint binding in suitable pores.
Технический результат достигается тем, что осахаривание декстрина осуществляют в реакторе с неподвижным слоем с помощью биокатализатора, полученного на основе твердого гранулированного углеродного носителя из технического углерода - сажи - и имеющего мезопористую структуру со средним диаметром пор 100-400 Å и объемом пор 0,7-0,9 см3/г и иммобилизованной глюкоамилазы, при температуре не ниже 50°С.The technical result is achieved by the fact that saccharification of dextrin is carried out in a fixed-bed reactor using a biocatalyst obtained on the basis of a solid granular carbon carrier made of carbon black — soot — and having a mesoporous structure with an average pore diameter of 100-400 Å and a pore volume of 0.7- 0.9 cm 3 / g and immobilized glucoamylase, at a temperature not lower than 50 ° C.
Твердый гранулированный углеродный носитель (торговая марка Сибунит) приготовлен по Пат. RU 1706690, С 01 В 31/10, 23.01.92. путем высокотемпературной карбонизации и газификации технического углерода - сажи - с последующей активацией носителя водяным паром. Сибунит имеет мезопористую структуру со средним диаметром пор 100-1000 Å и объемом пор не менее 0,6 см3/г. Удельная поверхность твердого носителя составляет не менее 100 м2/г. Еще раз следует отметить, что размер пор соответствует размеру молекулы иммобилизуемого фермента-глюкоамилазы (~200 Å), что приводит к увеличению стабильности ферментаза счет "клеточного эффекта", приводящего к ужесточению структуры молекулы. Показано также, что твердый углеродный носитель Сибунит обладает хорошими адсорбционными свойствами в отношении к биологически активным веществам [Коваленко Г.А., Семиколенов В.А., Кузнецова Е.В. и др. Коллоидн. Ж., 1999, т.61, №6, с.787-795], тогда как биокаталитические свойства (активность, стабильность) иммобилизованной глюкоамилазы практически не изучены.A solid granular carbon carrier (Sibunit trademark) is prepared according to Pat. RU 1706690, C 01 B 31/10, 01/23/92. by high-temperature carbonization and gasification of carbon black - soot - followed by activation of the carrier with water vapor. Sibunit has a mesoporous structure with an average pore diameter of 100-1000 Å and a pore volume of at least 0.6 cm 3 / g. The specific surface area of the solid support is at least 100 m 2 / g. Once again, it should be noted that the pore size corresponds to the size of the molecule of the immobilized glucoamylase enzyme (~ 200 Å), which leads to an increase in the stability of the enzyme due to the "cellular effect", which leads to a tightening of the structure of the molecule. It was also shown that the solid carbon carrier Sibunit has good adsorption properties in relation to biologically active substances [Kovalenko GA, Semikolenov VA, Kuznetsova EV and other colloidn. J., 1999, v. 61, No. 6, pp. 787-795], while the biocatalytic properties (activity, stability) of immobilized glucoamylase are practically not studied.
Сущность изобретения иллюстрируется следующими примерами.The invention is illustrated by the following examples.
Пример 1. Осахаривание кукурузного декстрина с помощью биокатализатора, приготовленного путем иммобилизации глюкоамилазы на твердом гранулированном углеродном носителе.Example 1. Saccharification of corn dextrin using a biocatalyst prepared by immobilization of glucoamylase on a solid granular carbon carrier.
Твердым гранулированным носителем для приготовления биокатализатора для осахаривания декстрина является носитель Сибунит, полученный путем карбонизации и газификации технического углерода - сажи - в атмосфере аргона при 800°С (без последующей активации водяным паром). Этот носитель имеет мезопористую структуру со средним диаметром пор 400 Å и объемом пор V∑=0,7 см3/г. Величина удельной поверхности составляет 110 м2/г. Размер гранул составляет 0,5-1 мм.A solid granular carrier for the preparation of a biocatalyst for saccharification of dextrin is the Sibunit carrier, obtained by carbonization and gasification of carbon black — soot — in an argon atmosphere at 800 ° C (without subsequent activation with water vapor). This carrier has a mesoporous structure with an average pore diameter of 400 Å and a pore volume V Σ = 0,7 cm 3 / g. The specific surface area is 110 m 2 / g. The granule size is 0.5-1 mm.
Иммобилизацию глюкоамилазы проводят путем адсорбции на твердом носителе при температуре 20°С в течение 18 ч в среде 0,05 М ацетатного буфера, рН 4,6. Полученный биокатализатор промывают буферным раствором и используют для осахаривания кукурузного декстрина.Glucoamylase immobilization is carried out by adsorption on a solid support at a temperature of 20 ° C for 18 hours in a medium of 0.05 M acetate buffer, pH 4.6. The resulting biocatalyst is washed with a buffer solution and used for saccharification of corn dextrin.
Биокатализатор имеет следующие характеристики:The biocatalyst has the following characteristics:
1) величина адсорбции глюкоамилазы составляет 13 мг белка/г адсорбента;1) the amount of glucoamylase adsorption is 13 mg of protein / g of adsorbent;
2) активность составляет 690 ЕА на 1 г биокатализатора; что в ~20 раз превышает активность известного катализатора;2) the activity is 690 EA per 1 g of biocatalyst; which is ~ 20 times the activity of the known catalyst;
3) стабильность: время полуинактивации t1/2 составляет 6 месяцев при периодической работе биокатализатора при 50°С.3) stability: the half-inactivation time t 1/2 is 6 months with periodic operation of the biocatalyst at 50 ° C.
Осахаривание 7%-ного раствора кукурузного декстрина проводят в реакторе с неподвижным слоем биокатализатора при скорости циркуляции раствора декстрина через слой биокатализатора 70 мл/мин и температуре 50°С. В данных условиях полный гидролиз декстрина в глюкозный сироп происходит за 5 ч.Saccharification of a 7% solution of corn dextrin is carried out in a reactor with a fixed bed of biocatalyst at a circulation speed of the dextrin solution through a layer of biocatalyst of 70 ml / min and a temperature of 50 ° C. Under these conditions, the complete hydrolysis of dextrin into glucose syrup occurs in 5 hours.
Пример 2. Осахаривание кукурузного декстрина с помощью биокатализатора, приготовленного путем иммобилизации глюкоамилазы на твердом гранулированном углеродном носителе.Example 2. Saccharification of corn dextrin using a biocatalyst prepared by immobilization of glucoamylase on a solid granular carbon carrier.
Для приготовления биокатализатора для осахаривания декстрина используют твердый гранулированный углеродный носитель Сибунит с мезопористой структурой со средним диаметром пор 300 Å и объемом пор V∑=0,9 см3/г. Величина удельной поверхности составляет 530 м2/г. Размер гранул составляет 2-3 мм.To prepare a biocatalyst for saccharification of dextrin, a solid granular carbon carrier Sibunit with a mesoporous structure with an average pore diameter of 300 Å and a pore volume of V ∑ = 0.9 cm 3 / g is used. The specific surface area is 530 m 2 / g. The granule size is 2-3 mm.
Способ приготовления гетерогенного биокатализатора аналогичен примеру 1.A method of preparing a heterogeneous biocatalyst is similar to example 1.
Полученный биокатализатор имеет следующие характеристики:The resulting biocatalyst has the following characteristics:
1) величина адсорбции глюкоамилазы составляет 8 мг белка/г адсорбента;1) the amount of glucoamylase adsorption is 8 mg of protein / g of adsorbent;
2) активность составляет 70 ЕА на 1 г биокатализатора;2) the activity is 70 EA per 1 g of biocatalyst;
3) стабильность: время полуинактивации t1/2 составляет 6 месяцев при периодической работе биокатализатора при 50°С.3) stability: the half-inactivation time t 1/2 is 6 months with periodic operation of the biocatalyst at 50 ° C.
Более низкая биокаталитическая активность биокатализатора, полученного иммобилизацией глюкоамилазы на более крупных гранулах твердого углеродного носителя, по сравнению с примером 1, объясняется тем, что осахаривание декстрина тормозится диффузией декстрина внутрь гранулы биокатализатора. Чем крупнее гранула биокатализатора, тем труднее проникнуть декстрину в ее внутренний объем, где находится иммобилизованная глюкоамилаза.The lower biocatalytic activity of the biocatalyst obtained by the immobilization of glucoamylase on larger granules of a solid carbon carrier compared to Example 1 is explained by the fact that saccharification of dextrin is inhibited by the diffusion of dextrin into the granule of the biocatalyst. The larger the biocatalyst granule, the more difficult it is for dextrin to penetrate into its internal volume, where the immobilized glucoamylase is located.
Осахаривание кукурузного декстрина проводят в реакторе с неподвижным слоем биокатализатора при скорости циркуляции раствора декстрина через слой биокатализатора 35 мл/мин при температуре 50°С. В данных условиях степень превращения 1%- и 3%-ного раствора декстрина составляет 72% и 51% за 1 ч, соответственно. Сравнительный анализ показывает, что биокатализаторы, приготовленные с использованием твердого гранулированного углеродного носителя Сибунит, в несколько десятков раз активнее биокатализаторов, описанных в прототипе (см. таблицу).Saccharification of corn dextrin is carried out in a reactor with a fixed bed of biocatalyst at a circulation speed of the dextrin solution through a layer of biocatalyst 35 ml / min at a temperature of 50 ° C. Under these conditions, the degree of conversion of 1% and 3% dextrin solution is 72% and 51% for 1 h, respectively. A comparative analysis shows that biocatalysts prepared using the solid granular carbon carrier Sibunit are several tens of times more active than the biocatalysts described in the prototype (see table).
Как видно из приведенных примеров и таблицы, предложенное изобретение позволяет существенно увеличить активность и стабильность биокатализаторов для процесса осахаривания ферментативно-ожижженного крахмала (декстрина), что открывает возможности их перспективного использования в крахмало-паточной промышленности.As can be seen from the above examples and tables, the proposed invention can significantly increase the activity and stability of biocatalysts for the saccharification process of enzymatically liquefied starch (dextrin), which opens up the possibility of their promising use in the starch-syrup industry.
Claims (3)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2004127159/13A RU2281328C2 (en) | 2004-09-09 | 2004-09-09 | Biocatalyst for dextrin saccharification, method for production thereof and method for dextrin saccharification |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2004127159/13A RU2281328C2 (en) | 2004-09-09 | 2004-09-09 | Biocatalyst for dextrin saccharification, method for production thereof and method for dextrin saccharification |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2004127159A RU2004127159A (en) | 2006-02-20 |
RU2281328C2 true RU2281328C2 (en) | 2006-08-10 |
Family
ID=36050632
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2004127159/13A RU2281328C2 (en) | 2004-09-09 | 2004-09-09 | Biocatalyst for dextrin saccharification, method for production thereof and method for dextrin saccharification |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2281328C2 (en) |
-
2004
- 2004-09-09 RU RU2004127159/13A patent/RU2281328C2/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
КОВАЛЕНКО Г.А. и др. Иммобилизация ферментов на углеродминеральных носителях. Некоторые закономерности адсорбционной иммобилизации ферментов. Биотехнология. 1997, №4, с.3-12. КОВАЛЕНКО Г.А. и др. Углеродсодержащие макроструктурированные керамические носители для адсорбционной иммобилизации ферментов и микроорганизмов. Биокаталитические свойства адсоробированной глюкоамилазы. Биотехнология. 2002, №5, с.81-93. КОВАЛЕНКО Г.А. и др. Углеродные материалы как адсорбенты для биологически активных веществ и бактериальных клеток. Коллоидный журнал, 1999, том 61, №6, с.787-795. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2004127159A (en) | 2006-02-20 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4587127A (en) | Process for producing liquid seasoning | |
Singh et al. | Biocatalytic strategies for the production of high fructose syrup from inulin | |
Katchalski-Katzir | Immobilized enzymes—learning from past successes and failures | |
KR101411073B1 (en) | A method for industrial production of biocatalysts in the form of enzymes or microorganisms immobilized in polyvinyl alcohol gel their use and devices for their production | |
FI87658B (en) | FOERFARANDE FOER FRAMSTAELLNING AV EN PRODUCT INNEHAOLLANDE ETHANOL GENOM ANVAENDNING AV IMMOBILISERAD JAEST | |
AU2012251903A1 (en) | Process for the production of isomaltulose from plant juices | |
CN107208085B (en) | Immobilized cell and preparation method thereof | |
JPH08173109A (en) | Liquid food raw material and its preparation | |
RU2281328C2 (en) | Biocatalyst for dextrin saccharification, method for production thereof and method for dextrin saccharification | |
CN1831145A (en) | Method for prodn. of whole sugar powder by using cornstarch as raw material | |
Khamkeaw et al. | Hydrolysis of cassava starch by co-immobilized multi-microorganisms of Loog-Pang (Thai rice cake starter) for ethanol fermentation | |
US7981639B2 (en) | Starch-derived products | |
CA2405125A1 (en) | Method of producing active dry yeast | |
Delcheva et al. | Performance of Aspergillus niger B 03 β-xylosidase immobilized on polyamide membrane support | |
CN110157603A (en) | A kind of Immobilized Aspergillus niger produces the fermentation reactor and its method of citric acid | |
De Lathouder et al. | Carbon coated monoliths as support material for a lactase from Aspergillus oryzae: Characterization and design of the carbon carriers | |
US3847741A (en) | Temperature-programmed process for the production of levulose-bearing syrups | |
RU2279475C2 (en) | Biocatalyst for sucrose inversion, carrier for biocatalyst, method for production of biocatalyst and method for sucrose inversion | |
CN101875889A (en) | Immobilizing method for yellow rice wine brewing yeast | |
CN111607625B (en) | Method for producing ascorbyl palmitate by enzymatic method | |
CN102226174A (en) | Bacterial cellulose immobilized yeast and application thereof | |
RU2224020C2 (en) | Biocatalyst for preparing invert sugar and method for preparing invert sugar | |
RU2341560C1 (en) | Biocatalyst, method of its preparation and method of obtaining glucose-fructose syrups | |
Taibi et al. | Comparison of Immobilized and Free Amyloglucosidase Process in Glucose SyrupsProduction from White Sorghum Starch | |
RU2372403C1 (en) | Biocatalyst, method of preparing said biocatalyst and method of producing invert syrup using said biocatalyst |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20110910 |