RU2240792C2 - Комбинации на основе нетропсина или его бис-производного, обладающие антигерпетической активностью - Google Patents
Комбинации на основе нетропсина или его бис-производного, обладающие антигерпетической активностью Download PDFInfo
- Publication number
- RU2240792C2 RU2240792C2 RU2002120074/15A RU2002120074A RU2240792C2 RU 2240792 C2 RU2240792 C2 RU 2240792C2 RU 2002120074/15 A RU2002120074/15 A RU 2002120074/15A RU 2002120074 A RU2002120074 A RU 2002120074A RU 2240792 C2 RU2240792 C2 RU 2240792C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- netropsin
- bis
- combinations
- effect
- combination
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к разработке новых комбинаций антигерпетического действия. Предложена комбинация, состоящая из нетропсина и ацикловира, или ганцикловира, или фосфоноуксусной кислоты, или видарабина (Ара-А). Предложена также комбинация бис-производного нетропсина (фиг.2) и фосфоноуксусной кислоты, или видарабина (Ара-А). Комбинации обеспечивают высокий уровень противовирусной активности в отношении вируса герпеса. 2 н.п. ф-лы, 1 табл., 2 ил.
Description
Изобретение относится к области медицинской вирусологии и касается разработки и создания новых комбинаций, обеспечивающих высокоэффективное ингибирование инфекции, вызываемой вирусом герпеса простого типа 1, на основе использования двух классов соединений, обладающих принципиально различным механизмом подавления герпесвирусной инфекции - с одной стороны, производных нетропсина и, с другой стороны, модифицированных нуклеозидов или фосфоноуксусной кислоты.
Противовирусная активность и механизм действия противоопухолевых антибиотиков нетропсина и дистамицина хорошо известны. Они связываются в узкой бороздке ДНК в области связывания транскрипционных факторов с сайтами, состоящими из 4-5 пар АТ-оснований соответственно, ингибируя инициацию транскрипции [1, 2]. Они также ингибируют активность ДНК-топоизомераз I и II [3, 4], обратной транскриптазы и интегразы вируса иммунодефицита человека [5]. Однако эти антибиотики не нашли применения в клинической практике из-за высокой токсичности.
Одним из путей повышения селективности (избирательности) связывания этих соединений с ДНК является синтез бис-производных нетропсина и дистамицина, ковалентно связанных друг с другом в различных ориентациях. Начиная с 80-х годов, известная группа Е. DeClercq с соавторами изучала активность бис-производных нетропсина, соединенных алифатической цепочкой, состоящей из 0-10 метиленовых звеньев, в ориентации хвост-к-хвосту [6] и производных нетропсина, содержащих дополнительные пиррольные циклы [7]. Было установлено, что эта группа соединений обладает противоопухолевой активностью, способна селективно ингибировать репродукцию вируса вакцины (химиотерапевтический индекс (ХТИ) до 500). Была обнаружена невысокая активность этих соединений в отношении вируса герпеса простого типа 2 (ХТИ 6 и ниже). В отношении вируса герпеса простого типа 1 (ВПГ-1) активность практически отсутствовала. В ряде случаев минимальная цитотоксическая концентрация была снижена в 5-10 раз по сравнению с нетропсином.
В доступной нам литературе данных об изучении противовирусной активности комбинации нетропсина и дистамицина или их производных с модифицированными нуклеозидами или аналогами пирофосфата обнаружено не было.
Нами был синтезирован ряд бис-производных нетропсина, оказавшихся высокоселективными ингибиторами репродукции ВПГ-1 [8]. Была проверена их способность усиливать противогерпетическую активность известных лекарственных препаратов, что могло позволить также снизить токсический эффект благодаря снижению активных концентраций.
Сущность изобретения заключается в создании двухкомпонентных комбинаций на основе нетропсина или его бис-производного с модифицированными нуклеозидами или фосфоноуксусной кислотой, обеспечивающих значительное усиление противогерпетического действия по сравнению с каждым из комбинируемых противовирусных соединений, взятых в отдельности, и приводящих к увеличению избирательности противогерпетического действия.
При изучении противогерпетической активности соединений и их комбинаций in vitro культуру клеток Vero инфицировали ВПГ-1 штамм L2 с множественностью 0,1 БОЕ/кл (где БОЕ - бляшкообразующая единица) и инкубировали под жидкой средой поддержки, содержащей препараты или их комбинации в известных концетрациях. После 48 часов инкубации, когда в контроле вируса развивался 95-100% цитопатический эффект, определяли концентрации, на 50% ингибирующие развитие вирусиндуцированного цитопатического эффекта по сравнению с контролем - ИД50. Эффект комбинации соединений оценивали путем вычисления индекса FIC (fractional inhibitory concentration) как сумму отношений ИД50 каждого из комбинируемых соединений в комбинации к ИД50 соединения при использовании отдельно. При величине FIC <0,5 эффект комбинации оценивался как выраженный синергидный, при FIC <0,9 как синергидный, при FIC = 1,0 как аддитивный, при FIC >1,0 индифферентный или антагонизм.
Пример 1. Изучение биологической активности комбинации нетропсина с модифицированными нуклеозидами и фосфоноуксусной кислотой на модели ВПГ-1 в культуре клеток.
Комбинация нетропсина с ацикловиром, ганцикловиром, Ара-А и фосфоноуксусной кислотой приводит к усилению противогерпетического эффекта. 50%-ное ингибирование вирусиндуцированного цитопатического эффекта достигается при сочетанном применении нетропсина (фиг.1) в неэффективной концентрации 2,5 мкг/мл (1/2 ИД50) и ацикловира, ганцикловира, видарабина(Ара-А) и фосфоноуксусной кислоты, также взятыми в неэффетивных концентрациях, в 5, 5, 2 и 4 раза меньших, чем ИД50 этих соединений, взятых в отдельности. Соответствующие данные приведены в таблице. Полученный эффект можно оценить как синергидный (FIC <0,9 для комбинации нетропсина с ацикловиром, ганцикловиром и фосфоноуксусной кислотой) или аддитивный (FIC = 1,0 для комбинации с видарабином (Ара-А).
Пример 2. Изучение биологической активности комбинации бис-нетропсина 1 с модифицированными нуклеозидами и фосфоноуксусной кислотой на модели ВПГ-1 в культуре клеток.
При сочетанном применении бис-нетропсина 1 (фиг.2) и ацикловира на 50% ингибировать развитие вирусиндуцированного цитопатического эффекта удается при их использовании в концентрациях в 33 и 6 раз меньших, чем ИД50 при монотерапии. При использовании бис-нетропсина 1 в комбинации с ганцикловиром их концентрации удается снизить в 16 и 5 раз соответственно (выраженный синергидный эффект). При комбинации бис-нетропсина-1 с фосфоноуксусной кислотой отмечен синергидный эффект. При использовании бис-нетропсина 1 в комбинации с видарабином (Ара-А) 50% ингибирование вирусиндуцированного цитопатического эффекта достигается при сочетанном применении этих соединений в концентрациях, равных 1/2 ЦД50 (аддитивный эффект).
Пример 3. Изучение цитотоксического действия нетропсина, бис-нетропсина 1 и их комбинаций in vitro.
В таблице представлены результаты изучения токсического действия нетропсина и бис-нетропсина 1, а также их комбинаций в культуре клеток Vero с использованием метода окрашивания клеток трипановым голубым, основанным на способности мертвых клеток окрашиваться красителем. После 72-часовой инкубации клеток в присутствии изучаемых соединений или их комбинаций клетки подсчитывали с помощью гемоцитометра и определяли величину ЦД50 - концентрацию соединений, в присутствии которых погибает не более 50% клеток по сравнению с контролем, инкубируемым без препаратов. Как видно из таблицы, предлагаемые комбинации малотоксичны: при их использовании в диапазоне концентраций, обеспечивающих активное подавление герпесвирусной инфекции, величина ЦД50 не достигается.
Таким образом комбинация нетропсина, бис-нетропсинов с модифицированными нуклеозидами или фосфоноуксусной кислотой обеспечивает ингибирующее аддитивное и синергидное действие на модели ВПГ-1 в культуре клеток.
В основе усиления противогерпетического эффекта комбинаций бис-нетропсинов и модифицированных нуклеозидов лежит различный механизм их действия на синтез вирусной ДНК. Нетропсин и бис-нетропсины специфически связываются в узкой бороздке ДНК с кластерами из нескольких АТ-пар оснований, препятствуя таким образом связыванию белков, участвующих в регуляции процессов транскрипции или репликации ДНК. Модифицированные нуклеозиды, являясь аналогами природных нуклеозидов в виде трифосфатов, включаются в состав синтезируемой цепочки вирусной ДНК, приводя к терминации синтеза ДНК, ингибируют активность ДНК-полимеразы. Фосфоноуксусная кислота конкурирует с обменом пирофосфата из дезоксинуклеозидтрифосфата, связываясь с ДНК-полимеразой, ингибирует ДНК-полимеразу. Положительный эффект изобретения заключается в создании комбинаций соединений (бис-нетропсинов с модифицированными нуклеозидами или фосфоноуксусной кислотой), обеспечивающих значительное усиление противогерпетического действия по сравнению с каждым из комбинируемых противовирусных веществ, взятых в отдельности.
Литература
1. Dervan P.B., Burli R.W. // Current Opinion in Chem. Biol., 1999, V.3, P. 688-693.
2. Korka M.L., Yoon D., Goodsell D et al. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1985. V.82. P. 1376-1380.
3. Beerman T.A., Woynarowski J.M., Sigmund R.D. et al. // Biochim. Biophys. Acta, 1991, 1090. P. 52-60.
4. Burkhardt G., Simon H., Storl К et al. // J. Biomol. Struct. Dyn., 1997. V.15. P. 81-95.
5. Filipowsky M.E., Kopka M.L., Brazil-Zison M. et al. // Biochemistry, 1996. V.35. P. 15397-15410.
6. Lown J.W., Krowicki K., Balzarini J. et al. // J. Med. Chem., 1989. V.32. P. 2368-2375.
7. Baraldi P.O., Balboni G., Pavani M.G. et al. // J.Med.Chem., 2001. V.44. P. 2536-2543.
8. Андронова В.Л., Гроховский С.Л., Суровая А.Н. и др. // ДАН, 2001. Т.380, №4. С. 1-4.
Claims (2)
1. Комбинация, обладающая антигерпетической активностью, состоящая из нетропсина и ацикловира, или ганцикловира, или фосфоноуксусной кислоты, или видарабина (Ара-А).
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2002120074/15A RU2240792C2 (ru) | 2002-07-30 | 2002-07-30 | Комбинации на основе нетропсина или его бис-производного, обладающие антигерпетической активностью |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2002120074/15A RU2240792C2 (ru) | 2002-07-30 | 2002-07-30 | Комбинации на основе нетропсина или его бис-производного, обладающие антигерпетической активностью |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2002120074A RU2002120074A (ru) | 2004-04-20 |
RU2240792C2 true RU2240792C2 (ru) | 2004-11-27 |
Family
ID=34309915
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2002120074/15A RU2240792C2 (ru) | 2002-07-30 | 2002-07-30 | Комбинации на основе нетропсина или его бис-производного, обладающие антигерпетической активностью |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2240792C2 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2013172732A1 (ru) | 2012-05-16 | 2013-11-21 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Вдс Фарма" | Комплексные соединения германия, способы их получения и лекарственные средства |
-
2002
- 2002-07-30 RU RU2002120074/15A patent/RU2240792C2/ru active IP Right Revival
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
АКБЕРОВА С.И. и др. Действие пара-аминобензойной кислоты и ее комбинаций с ацикловиром на герпетическую инфекцию. Антибиотики и химиотерапия. - М., 1995, т.40, №10, с. 25-29. * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2013172732A1 (ru) | 2012-05-16 | 2013-11-21 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Вдс Фарма" | Комплексные соединения германия, способы их получения и лекарственные средства |
US9745337B2 (en) | 2012-05-16 | 2017-08-29 | Obschesno S Ogranichennoi Otvetstvennostyu “Wds Farma” | Complex compounds of germanium, methods for producing same, and drugs |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Thi et al. | Sofosbuvir inhibits hepatitis E virus replication in vitro and results in an additive effect when combined with ribavirin | |
Robins et al. | HIV protease inhibitors: their anti-HIV activity and potential role in treatment | |
Meier et al. | cyclo Sal-Pronucleotides of 2 ‘-Fluoro-ara-and 2 ‘-Fluoro-ribo-2 ‘, 3 ‘-dideoxyadenosine as a Strategy to Bypass a Metabolic Blockade | |
Shirasaka et al. | Comparative analysis of anti-human immunodeficiency virus type 1 activities of dideoxynucleoside analogs in resting and activated peripheral blood mononuclear cells | |
Xu et al. | Structure–activity relationship studies on diversified salicylamide derivatives as potent inhibitors of human adenovirus infection | |
Julander et al. | Treatment of Venezuelan equine encephalitis virus infection with (−)-carbodine | |
Toth et al. | USC-087 protects Syrian hamsters against lethal challenge with human species C adenoviruses | |
Dal Pozzo et al. | In vitro evaluation of the anti-orf virus activity of alkoxyalkyl esters of CDV, cCDV and (S)-HPMPA | |
Hoggard et al. | Drug interactions with zidovudine phosphorylation in vitro | |
WO2010099169A2 (en) | A novel in vitro hiv-1 latency model for screening reactivation agents of hiv-1 | |
Leung | Iatrogenic mitochondriopathies: a recent lesson from nucleoside/nucleotide reverse transcriptase inhibitors | |
Miwa et al. | Comparative efficacy of acyclovir and vidarabine on the replication of varicella-zoster virus | |
US5824664A (en) | Suppression of HIV expression by organic thiophosphate | |
RU2240792C2 (ru) | Комбинации на основе нетропсина или его бис-производного, обладающие антигерпетической активностью | |
Mucsi et al. | Combination of benzo [a] phenothiazines with acyclovir against herpes simplex virus | |
WO1996018394A1 (en) | Inhibition of retroviral ltr promoters by calcium response modifiers | |
Taylor et al. | Combined anti-herpes virus activity of nucleoside analogs and interferon | |
Franchetti et al. | A new acyclic heterodinucleotide active against human immunodeficiency virus and herpes simplex virus | |
JPWO2009034945A1 (ja) | エプスタイン・バールウイルス関連疾患に対する薬剤およびそのスクリーニング法 | |
Andronova et al. | Antiherpetic activity of dimeric derivatives of netropsin. | |
EP0255420B1 (en) | Antiviral agent for inhibiting growth of virus of acquired immune deficiency syndrome (aids) | |
Brandi et al. | The potency of acyclovir can be markedly different in different cell types | |
Schnürer et al. | Inhibitory effects of foscarnet on herpesvirus multiplication in cell culture | |
Becker et al. | Congocidine and distamycin A, antipoxvirus antibiotics | |
CN115697383A (zh) | 治疗病毒感染和健康问题的方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20120731 |
|
NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20140820 |