RU2223498C1 - Способ выявления сенсибилизации к аллергенам - Google Patents
Способ выявления сенсибилизации к аллергенам Download PDFInfo
- Publication number
- RU2223498C1 RU2223498C1 RU2002119334/15A RU2002119334A RU2223498C1 RU 2223498 C1 RU2223498 C1 RU 2223498C1 RU 2002119334/15 A RU2002119334/15 A RU 2002119334/15A RU 2002119334 A RU2002119334 A RU 2002119334A RU 2223498 C1 RU2223498 C1 RU 2223498C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- allergens
- sensitization
- antibodies
- ige
- fluorescent
- Prior art date
Links
- 239000013566 allergen Substances 0.000 title claims abstract description 22
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 title claims abstract description 20
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 title claims abstract description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 11
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims abstract description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 9
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 5
- 241001494479 Pecora Species 0.000 claims description 3
- 235000021245 dietary protein Nutrition 0.000 claims description 2
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 abstract 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 229960004784 allergens Drugs 0.000 description 9
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 8
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 8
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 7
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 7
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 7
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 239000000428 dust Substances 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 5
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 5
- 208000037656 Respiratory Sounds Diseases 0.000 description 5
- 206010039085 Rhinitis allergic Diseases 0.000 description 5
- 206010047924 Wheezing Diseases 0.000 description 5
- 201000010105 allergic rhinitis Diseases 0.000 description 5
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 5
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 5
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 5
- 206010041232 sneezing Diseases 0.000 description 5
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 4
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 4
- 230000005713 exacerbation Effects 0.000 description 4
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 4
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 4
- 230000007803 itching Effects 0.000 description 4
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 4
- 210000003800 pharynx Anatomy 0.000 description 4
- 230000001020 rhythmical effect Effects 0.000 description 4
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 3
- 206010003645 Atopy Diseases 0.000 description 3
- 241001672694 Citrus reticulata Species 0.000 description 3
- 206010010744 Conjunctivitis allergic Diseases 0.000 description 3
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 3
- 208000010201 Exanthema Diseases 0.000 description 3
- 241000612182 Rexea solandri Species 0.000 description 3
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 3
- 208000002205 allergic conjunctivitis Diseases 0.000 description 3
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 3
- 208000024998 atopic conjunctivitis Diseases 0.000 description 3
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 3
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 3
- 201000005884 exanthem Diseases 0.000 description 3
- 239000013568 food allergen Substances 0.000 description 3
- 208000030603 inherited susceptibility to asthma Diseases 0.000 description 3
- 206010037844 rash Diseases 0.000 description 3
- 235000009051 Ambrosia paniculata var. peruviana Nutrition 0.000 description 2
- 235000003097 Artemisia absinthium Nutrition 0.000 description 2
- 240000001851 Artemisia dracunculus Species 0.000 description 2
- 235000017731 Artemisia dracunculus ssp. dracunculus Nutrition 0.000 description 2
- 235000003261 Artemisia vulgaris Nutrition 0.000 description 2
- 235000018185 Betula X alpestris Nutrition 0.000 description 2
- 235000018212 Betula X uliginosa Nutrition 0.000 description 2
- 206010006440 Bronchial obstruction Diseases 0.000 description 2
- 241000272470 Circus Species 0.000 description 2
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 2
- 240000008620 Fagopyrum esculentum Species 0.000 description 2
- 235000009419 Fagopyrum esculentum Nutrition 0.000 description 2
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 2
- 241000234642 Festuca Species 0.000 description 2
- 208000004262 Food Hypersensitivity Diseases 0.000 description 2
- 206010023644 Lacrimation increased Diseases 0.000 description 2
- 206010028735 Nasal congestion Diseases 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 2
- 239000001138 artemisia absinthium Substances 0.000 description 2
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 2
- 210000000991 chicken egg Anatomy 0.000 description 2
- 235000020971 citrus fruits Nutrition 0.000 description 2
- 235000020247 cow milk Nutrition 0.000 description 2
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 description 2
- 210000003746 feather Anatomy 0.000 description 2
- 235000020932 food allergy Nutrition 0.000 description 2
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 2
- 230000004317 lacrimation Effects 0.000 description 2
- 231100000046 skin rash Toxicity 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 241000219495 Betulaceae Species 0.000 description 1
- 208000009079 Bronchial Spasm Diseases 0.000 description 1
- 208000014181 Bronchial disease Diseases 0.000 description 1
- 206010006482 Bronchospasm Diseases 0.000 description 1
- 101100287724 Caenorhabditis elegans shk-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 240000006162 Chenopodium quinoa Species 0.000 description 1
- 241000579895 Chlorostilbon Species 0.000 description 1
- 235000001543 Corylus americana Nutrition 0.000 description 1
- 240000007582 Corylus avellana Species 0.000 description 1
- 235000007466 Corylus avellana Nutrition 0.000 description 1
- 208000001840 Dandruff Diseases 0.000 description 1
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 description 1
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 206010014950 Eosinophilia Diseases 0.000 description 1
- 206010052140 Eye pruritus Diseases 0.000 description 1
- 244000020551 Helianthus annuus Species 0.000 description 1
- 235000003222 Helianthus annuus Nutrition 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000801195 Homo sapiens TLE family member 5 Proteins 0.000 description 1
- 206010020565 Hyperaemia Diseases 0.000 description 1
- 241000746983 Phleum pratense Species 0.000 description 1
- 102100040678 Programmed cell death protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710089372 Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 206010057190 Respiratory tract infections Diseases 0.000 description 1
- 240000000528 Ricinus communis Species 0.000 description 1
- 235000004443 Ricinus communis Nutrition 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 210000000621 bronchi Anatomy 0.000 description 1
- 229940124630 bronchodilator Drugs 0.000 description 1
- 239000011545 carbonate/bicarbonate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 235000013345 egg yolk Nutrition 0.000 description 1
- 229910052876 emerald Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010976 emerald Substances 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 208000024711 extrinsic asthma Diseases 0.000 description 1
- 210000000744 eyelid Anatomy 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 229940046528 grass pollen Drugs 0.000 description 1
- 102000056245 human TLE5 Human genes 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 238000010185 immunofluorescence analysis Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 230000010352 nasal breathing Effects 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000019612 pigmentation Effects 0.000 description 1
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 238000006748 scratching Methods 0.000 description 1
- 230000002393 scratching effect Effects 0.000 description 1
- 238000009589 serological test Methods 0.000 description 1
- 208000013220 shortness of breath Diseases 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 229940046536 tree pollen allergenic extract Drugs 0.000 description 1
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к аллергологии, и может быть использовано при выявлении сенсибилизации к аллергенам у взрослых и детей. Сущностью способа является проведение непрямого метода флуоресцирующих антител с использованием диагностикумов, содержащих очищенные белки пищевых, бытовых, пыльцевых, эпидермалъных аллергенов, и меченых анти-IgE антител, в качестве которых используют моноклоналъные антитела к IgE человека, меченные красителем - изотиоцианатом флуоресцеина. Полученный комплекс исследуют в люминесцентном микроскопе и при наличии у эритроцитов специфического флуоресцирующего ободка выявляют сенсибилизацию к соответствующему аллергену. Техническим результатом является выявление сенсибилизации к широкому спектру аллергенов и повышение специфичности реакции.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно аллергологии, и может быть использовано при выявлении сенсибилизации к аллергенам (гиперчувствительности) у взрослых и детей.
В аллергологии для выявления гиперчувствительности к пищевым аллергенам используют различные серологические тесты, из которых наиболее доступным, простым и экономичным является иммунофлуоресцентный анализ.
Известен способ диагностики пищевой аллергии к молоку, куриному мясу, цельному куриному яйцу, желтку яйца и белку яйца в непрямом методе флуоресцирующих антител (Способ диагностики пищевой аллергии. Патент на изобретение 2140085, зарегистрирован в Госреестре изобретений 20 октября 1999 г. ).
Недостатки способа:
1. Заявленный набор аллергенов обеспечивает диагностику аллергии лишь к ограниченному количеству пищевых аллергенов.
1. Заявленный набор аллергенов обеспечивает диагностику аллергии лишь к ограниченному количеству пищевых аллергенов.
2. Неудовлетворительная специфичность непрямого метода флуоресцирующих антител (нМФА) вследствие использования поликлональных флуоресцирующих иммуноглобулинов против иммуноглобулинов Е человека.
Изобретение направлено на решение задач: выявление сенсибилизации у людей к широкому спектру аллергенов (пищевые, бытовые, эпидермальные, пыльцевые), повышение специфичности нМФА.
Указанные задачи достигаются за счет использования нМФА, который отличается тем, что применяют диагностикумы - формалинизированные танизированные эритроциты барана, сенсибилизированные очищенными белками пищевых (гречневая крупа, говядина, свинина, курица, хек, мандарин), бытовых (библиотечная пыль, домашняя пыль, клещ домашней пыли), эпидермальных (перо подушки, шерсть кошки, шерсть собак, шерсть овцы, перхоть лошади), пыльцевых (пыльца сорных трав, тимофеевка, лебеда, полынь, подсолнечник береза, ольха) аллергенов, а флуоресцирующие анти-IgE антитела получают путем конъюгации моноклональных антител (МКА) к иммуноглобулинам Е человека с красителем - изотиоцианатом флуоресцеина (ФИТЦ).
Приготовление флуоресцирующих aнти-IgE антител осуществляют по следующей методике: в МКА к иммуноглобулинам Е человека с концентрацией белка 10 мг/мл добавляют раствор ФИТЦ. Для этого навеску ФИТЦ, взятую из расчета 1,5 мг на 100 мг белка, растворяют в 0,15 мл карбонатно-бикарбонатного буферного раствора, рН 9,0, и добавляют по каплям в раствор МКА. Конъюгацию проводят при непрерывном перемешивании в течение 18 часов при 2-8oС. По истечении времени конъюгации меченые МКА освобождают от непрореагировавшего красителя методом гель-фильтрации на сефадексе Г-50. В полученных флуоресцирующих aнти-IgE антителах определяют молярное соотношение ФИТЦ/белок, количество белка, красящий титр и рабочее разведение, оценивают специфичность в нМФА.
При постановке нМФА с сывороткой крови больного аллергией на диагностикуме образуется комплекс (аллерген + специфический IgE сыворотки человека + флуоресцирующее анти-IgE антитело), который выявляют при исследовании в люминесцентном микроскопе в виде флуоресцирующего ободка у эритроцита. При флуоресценции ободка эритроцита интенсивностью от 1+ до 4+ выявляют уровень сенсибилизации к данному аллергену.
Способ осуществляется следующим образом. На мазки из аллергенов (8 аллергенов на одном предметном стекле) наносят по 5 мкл исследуемой сыворотки в цельном разведении. Стекла с мазками помещают во влажную камеру и выдерживают 20 мин при температуре 37oС. По истечении сроков инкубации предметные стекла с мазками достают и промывают в 0,9%-ном растворе хлорида натрия с добавлением 0,01 М фосфатного буфера, рН 7,4 (промывающий раствор), дважды по 7 мин, затем высушивают. На все мазки наносят флуоресцирующие анти-IgE антитела, взятые в рабочем разведении, в объеме 5 мкл.
Рабочее разведение флуоресцирующих анти-IgE антител представляет собой сконцентрированный в 2 раза красящий титр, т.е. их максимальное разведение, обеспечивающее специфическую флуоресценцию, не ниже чем на 3+, комплекса: диагностикум + сыворотка человека, содержащая IgE к данному диагностикуму. Например, красящий титр (максимальное разведение) флуоресцирующих анти-IgЕ антител - 1:8, тогда рабочее разведение препарата составит 1:4. Рабочее разведение определяется производителем и всегда указывается на этикетке ампулы.
Предметное стекло с мазками вновь помещают во влажную камеру и инкубируют в течение 20 мин при температуре 37oС. Затем предметные стекла с мазками вновь дважды промывают по 7 мин промывающим раствором. Стекла с мазками высушивают на воздухе и просматривают под иммерсионным объективом люминесцентного микроскопа.
При наличии в сыворотке аллергенспецифических IgE иммуноглобулинов к соответствующим аллергенам наблюдают специфическую флуоресценцию ободка у эритроцитов.
Оценку интенсивности флуоресценции ободка эритроцитов и оценку степени сенсибилизации людей к аллергену проводят по четырехкрестовой шкале:
4+ - изумрудная, зеленого цвета флуоресценция ободка вокруг эритроцита (очень высокая степень сенсибилизации);
3+ - яркая зеленого цвета флуоресценция ободка вокруг эритроцита (высокая степень сенсибилизации);
2+ - зеленого цвета флуоресценция ободка вокруг эритроцита (средняя степень сенсибилизации);
1+ - слабая, едва заметная флуоресценция ободка вокруг эритроцита (низкая степень сенсибилизации);
- отсутствие флуоресценции, (отсутствие сенсибилизации).
4+ - изумрудная, зеленого цвета флуоресценция ободка вокруг эритроцита (очень высокая степень сенсибилизации);
3+ - яркая зеленого цвета флуоресценция ободка вокруг эритроцита (высокая степень сенсибилизации);
2+ - зеленого цвета флуоресценция ободка вокруг эритроцита (средняя степень сенсибилизации);
1+ - слабая, едва заметная флуоресценция ободка вокруг эритроцита (низкая степень сенсибилизации);
- отсутствие флуоресценции, (отсутствие сенсибилизации).
Постановка реакции должна сопровождаться следующими контролями:
1. Заведомо положительный контроль: диагностикум + стандартная сыворотка к данному аллергену + флуоресцирующие анти-IgE антитела. Наличие 4+ - 3+ флуоресценции.
1. Заведомо положительный контроль: диагностикум + стандартная сыворотка к данному аллергену + флуоресцирующие анти-IgE антитела. Наличие 4+ - 3+ флуоресценции.
2. Заведомо отрицательный контроль: диагностикум + исследуемая сыворотка + флуоресцирующие анти-IgE антитела. Отсутствие флуоресценции.
3. Контроль конъюгата: диагностикум + флуоресцирующие анти-IgE антитела. Отсутствие флуоресценции.
Продолжительность реакции 1 час 30 мин. Примеры конкретного выполнения.
Пример 1.
Больная Г., 24.12.90 года рождения. В период обращения жалоб не предъявляет.
Из анамнеза: зуд кожи, гиперемия, расчесы в подколенных ямках, локтевых сгибах после употребления цитрусовых, куриного яйца, морской рыбы. Отмечает многократное чихание с водянистым отделяемым из носа, зуд глаз, слезотечение, бронхоспазмы после контакта с кошкой.
Осмотр: состояние удовлетворительное. Зев спокойный, лимфоузлы не увеличены. Дыхание везикулярное, хрипов нет.
Обследование.
1. Спирография: умеренная обструкция на уровне крупных бронхов. Время выдоха (ВВ) нормальное. Проба с бронходилятатором (БД) положительная.
2. Индекс местной эозинофилии (ИМЭ) 10,4.
3 Скарификационные кожные пробы (СКП): тест с контрольной жидкостью (ТКЖ) отриц. , гистамин 3+, цельное куриное яйцо (ЦКЯ) 3+, желток куриного яйца (ЖКЯ) 3+, белок куриного яйца (БКЯ) 1+, треска 3+, шерсть кошки (ШК) 3+.
4. Общий IgE 340 ME/мл.
5. Специфический IgE: треска 3+, ЦКЯ 3+, мясо куриное (МК) 2+.
6. нМФА: ШК 3+, ЦКЯ 3+, ЖКЯ 3+, БКЯ 2+, хек 3+.
Диагноз: пищевая, эпидермальная сенсибилизация.
Бронхиальная астма атопическая, интермиттирующая, ремиссия.
Аллергический ринит, интермиттирующий, ремиссия.
Аллергический конъюнктивит, интермиттирующий, ремиссия.
Атонический дерматит, ограниченный, ремиссия.
Пример 2.
Больной Б. 3.11.87 года рождения. Жалобы на чихание, зуд носа, глаз, затрудненное дыхание после посещения цирка, зоопарка, контакта с кошкой. В период осмотра состояние удовлетворительное. Зев спокойный, лимфоузлы не увеличены. Дыхание жесткое, хрипов нет. Тоны соr ясные, ритмичные. Живот мягкий, безболезненный.
Обследование.
1. Спирография: на фоне умеренного снижения ФЖЕЛ умеренная генерализованная обструкция. ВВ увеличено. Проба с БД положительная.
2. ИМЭ 4,3.
3. Общий IgE 285 ME/ мл.
4. Специфический IgE: библиотечная пыль (БП) 2+, ШК 1+.
5. СКП: ТКЖ отриц, гистамин 2+, домашняя пыль (ДП) 2+, БП 2+, ШК 2+, перхоть лошади 2+.
6. Внутрикожные пробы (В/к пробы): ТКЖ отриц., гистамин 3+, клещ домашней пыли (КДП) 2+, перо подушки (ПП) 2+, ШК 2+, ДП 2+, БП 2+.
7. нМФА: ШК 2+, ДП 2+, КДП 2+.
Диагноз: бытовая, эпидермальная сенсибилизация.
Бронхиальная астма атопическая, субремиссия.
Аллергический ринит, интермиттирующий, ремиссия.
Аллергический конъюнктивит, интермиттирующий, ремиссия.
Пример 3.
Больной П. 25.04.96 года рождения. Жалобы на приступы затрудненного дыхания, заложенность носа в утреннее время.
Из анамнеза стало известно, что в весенне-летнее время двукратно имел место бронхообструктивный синдром.
Осмотр. Состояние удовлетворительное. По внутренним органам без отклонений.
Обследование.
1. ИМЭ (обострение) 20,6.
2. Общий IgE 640 ME/мл (обострение).
4. Специфический IgE: пшеничная мука (ПМ) 3+, гречневая крупа (ГК) 4+, пыльца деревьев (ПД )2+, ШК -0.
5. СКП: ТКЖ отриц., гистамин 3+, перхоть лошади 1+, ПД 4+.
5. нМФА. ШК-0, ПД 3+, ПМ 4+, ГК 4+.
Диагноз: пищевая, пыльцевая сенсибилизация.
Бронхиальная астма атопическая, ремиссия.
Аллергический ринит, персистирующий, субремиссия.
Пример 4.
Больная П. 17.10.95 года рождения. В момент обращения жалоб не предъявляет.
Из анамнеза известно, что после употребления коровьего молока, цитрусовых, куриного яйца, рыбы имеют место кожные высыпания в локтевых сгибах и подколенных ямках, сопровождающиеся сильным зудом. В весенний период (май) отмечаются зуд глаз, носа, чихание, бронхообструкция. Аналогичные симптомы появляются после посещения цирка.
При осмотре. Состояние удовлетворительное. Кожные покровы сухие, легкая пигментация кожи век. Дыхание везикулярное, хрипов нет. Тоны соr ясные, ритмичные.
Обследование.
1. СКП: ТКЖ отриц., гистамин 3+, мандарин 1+, коровье молоко (КМ) 1+, МК 1+, мясо говядины (МГ)1+, ЖКЯ 1+, БКЯ 1+, рыба (хек) 1+, овсяница 1+, полынь 1+, лещина 1+.
2. Общий IgE 956 ME/мл.
3. нМФА: KM 1+, ЦКЯ 1+, ЖКЯ 1+, БКЯ 1+, МГ 1+, МК 1+, хек 1+, мандарин 1+.
Диагноз: пищевая, пыльцевая сенсибилизация.
Бронхиальная астма атопическая, интермиттирующая, ремиссия.
Аллергический ринит, интермиттирующий, ремиссия.
Аллергический конъюнктивит, интермиттирующий, ремиссия.
Атопический дерматит, ограниченный, ремиссия.
Пример 5.
Больной О. 01.06.89 года рождения. Обратился с жалобами на кожные высыпания, заложенность носа, чихание.
Осмотр. Состояние удовлетворительное. Зев спокойный. Лимфоузлы не увеличены. На коже по всему телу сыпь. Носовое дыхание затруднено. В легких дыхание везикулярное, хрипов нет. Тоны cor ясные, ритмичные. Живот мягкий, безболезненный.
Обследование.
1. ИМЭ 32,2 (ИМЭ в ремиссии 5,5.
2. Общий IgE 1075 МЕ/мл.
3. В/кожные пробы: ТКЖ -, гистамин 3+, КДП 2+, ШК 1+, ПП 2+, ДП 2+, БП 2+.
4. нМФА: ШК 3+, ДП 2+, ПД 1+, КПД 2+, БП 2+, ПП 3+.
Диагноз: бытовая, эпидермальная сенсибилизация.
Аллергический ринит, интермиттирующий, обострение. Строфулюс, обострение.
Пример 6.
Больной П., 30.08.98 года рождения. В момент обращения жалоб не предъявляет.
Из анамнеза известно, что весной появляются зуд глаз и носа, слезотечение, чихание многократное с обильным водянистым отделяемым.
При осмотре. Состояние удовлетворительное. Зев спокойный. Лимфоузлы не увеличены. Дыхание везикулярное, хрипов нет. Тоны соr ясные, ритмичные. Живот мягкий, безболезненный.
Обследование.
1. ИМЭ 5,37.
2. СКП: ТКЖ-, гистамин 3+, ДК 0, береза 0, клещевина 0, овсянница 0.
3. Общий IgE 975 МЕ/мл.
4. нМФА: ШК 0, ДП 0, ГК 0, KM 0, ПД 0, ЦКЯ 0, ЖЯ 0, БЯ 0.
Диагноз: острая респираторная инфекция. Реакция на аллергены отсутствует.
Положительный эффект: способ позволяет выявлять сенсибилизацию к широкому спектру аллергенов: бытовых, эпидермальных, пыльцевых, а также к расширенному спектру пищевых аллергенов, позволяет повысить специфичность реакции за счет использования флуоресцирующих моноклональных антител против IgE человека.
Claims (1)
- Способ выявления сенсибилизации к аллергенам непрямым методом флуоресцирующих антител в сыворотке крови с использованием диагностикумов, содержащих формалинизированные и танизированные эритроциты барана, сенсибилизированные пищевыми белковыми аллергенами, и меченных анти-IgE антител, отличающийся тем, что для исследования используют цельную сыворотку в объеме 5 мкл, используемые диагностикумы сенсибилизированы очищенными белками пищевых, бытовых, пыльцевых, эпидермальных аллергенов, а ФИТЦ-меченые анти-IgE антитела представляют собой моноклональные антитела к IgE человека, взятые в объеме 5 мкл.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2002119334/15A RU2223498C1 (ru) | 2002-07-17 | 2002-07-17 | Способ выявления сенсибилизации к аллергенам |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2002119334/15A RU2223498C1 (ru) | 2002-07-17 | 2002-07-17 | Способ выявления сенсибилизации к аллергенам |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2223498C1 true RU2223498C1 (ru) | 2004-02-10 |
| RU2002119334A RU2002119334A (ru) | 2004-02-27 |
Family
ID=32173031
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2002119334/15A RU2223498C1 (ru) | 2002-07-17 | 2002-07-17 | Способ выявления сенсибилизации к аллергенам |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2223498C1 (ru) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4849337A (en) * | 1983-01-31 | 1989-07-18 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Assaying allergen specific IgE levels with fluorogenic enzyme labeled antibody |
| RU2140085C1 (ru) * | 1998-01-05 | 1999-10-20 | Пермская государственная медицинская академия | Способ диагностики пищевой аллергии |
| RU2143696C1 (ru) * | 1995-06-27 | 1999-12-27 | Нижегородский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии | Способ выявления сенсибилизации к лекарственным аллергенам |
| RU2153673C2 (ru) * | 1998-06-01 | 2000-07-27 | Республиканская детская клиническая больница | Способ определения сенсибилизации к аллергенам |
-
2002
- 2002-07-17 RU RU2002119334/15A patent/RU2223498C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4849337A (en) * | 1983-01-31 | 1989-07-18 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Assaying allergen specific IgE levels with fluorogenic enzyme labeled antibody |
| RU2143696C1 (ru) * | 1995-06-27 | 1999-12-27 | Нижегородский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии | Способ выявления сенсибилизации к лекарственным аллергенам |
| RU2140085C1 (ru) * | 1998-01-05 | 1999-10-20 | Пермская государственная медицинская академия | Способ диагностики пищевой аллергии |
| RU2153673C2 (ru) * | 1998-06-01 | 2000-07-27 | Республиканская детская клиническая больница | Способ определения сенсибилизации к аллергенам |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| MONERET-VAUTRIN D.A. et al. Detection of antifood IgE by in vitro tests and diagnosis of food allergy. Allerg. Immunol. (Paris). 1993, May 25(5), p.198-204. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2002119334A (ru) | 2004-02-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Bousquet et al. | Comparison between RAST and Pharmacia CAP system: a new automated specific IgE assay | |
| Miyamoto et al. | Atopic allergy in Japanese subjects: studies primarily with radioallergosorbent test | |
| CN102993299A (zh) | 食物致敏原，检测食物过敏原的方法和检测诱导食物过敏原的食物的方法 | |
| DE69730479T2 (de) | Marker und immunologisches Reagens für Dialyse verbundenen Amyloidosis, Diabetes Mellitus und Diabetes Mellitus-Komplikationen | |
| CN102135535B (zh) | 一种直接进行半定量分析的免疫胶体金属检测技术及其制备方法和用途 | |
| Paul et al. | The co-occurrence of Toxocara ocular and visceral larva migrans syndrome: a case series | |
| RU2223498C1 (ru) | Способ выявления сенсибилизации к аллергенам | |
| CN109613252A (zh) | 细粒棘球绦虫高免卵黄抗体和试纸条及制备方法和应用 | |
| Ffrench et al. | A survey of toxoplasmosis in an Ontario community | |
| JPS61228356A (ja) | 細菌毒素に対する抗体の血液凝集による用量決定試薬、その製法および使用 | |
| Thalhimer et al. | A slide test modification of the hemagglutination test for antibodies against tubercle bacilli | |
| RU2225984C1 (ru) | Способ определения функциональной активности фагоцитов при аллергии | |
| US12000826B2 (en) | Methods for testing for food allergies and allergens in foods | |
| Behbehani et al. | Epidemiology of toxoplasmosis in Kuwait. I. Detection of antibodies to Toxoplasma gondii and percentage distribution among the inhabitants | |
| RU2339038C2 (ru) | Способ прижизненной диагностики трихинеллеза плотоядных и всеядных животных | |
| Leibowitz | Infectious mononucleosis: the value of differential absorption tests in its serologic diagnosis | |
| RU2144190C1 (ru) | Способ диагностики стафилококковой инфекции | |
| RU2195666C2 (ru) | Способ комплексной диагностики аллергии у детей с инфекционной патологией | |
| RU2008687C1 (ru) | Способ диагностики отсроченной аллергической реакции | |
| Florman et al. | Specific serological reactions which follow naturally acquired mumps | |
| RU2257581C2 (ru) | Способ получения эритроцитарного диагностикума для реакции непрямой гемагглютинации (рнга) при сальмонеллезах животных | |
| Veršilova et al. | Diagnosis of human and animal brucellosis by the indirect haemagglutination test | |
| JP3804817B2 (ja) | 抗体測定試薬及びその製造法 | |
| KUULIALA et al. | Haemagglutinating antibodies to cat dander in relation to exposure and respiratory allergy | |
| RU2140085C1 (ru) | Способ диагностики пищевой аллергии |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20080718 |