RU2220458C1

RU2220458C1 - Method for modeling tumor process in testicle usable for investigating its regional lymph flow bed

Info

Publication number: RU2220458C1
Application number: RU2002116461/14A
Authority: RU
Inventors: И.Е. Мичурин; Ю.И. Бородин; В.В. Асташов; П.М. Ларионов; В.И. Исаенко; М.В. Малыгин
Original assignee: Научно-исследовательский институт клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН
Priority date: 2002-06-18
Filing date: 2002-06-18
Publication date: 2003-12-27
Also published as: RU2002116461A

Abstract

FIELD: medicine. SUBSTANCE: method involves introducing ascitic Ehrlich carcinoma in concentration of 2,5-5,0•10⁵ tumor cells per 1 ml into testicle parenchyma. EFFECT: high reliability and velocity of tumor development without disturbing testicle anatomy, its blood supply and lymph circulation. 12 dwg

Description

Изобретение относится к области медицины, а именно к урологии, экспериментальной онкологии и лимфологии, и может быть применено для моделирования опухолевого процесса в яичке и для изучения реакции его регионарного лимфатического русла. The invention relates to medicine, namely to urology, experimental oncology and lymphology, and can be used to model the tumor process in the testicle and to study the reaction of its regional lymphatic channel.

Интерес к проблеме злокачественных опухолей яичка обусловлен тем, что составляя всего около 2% в структуре заболеваемости опухолями мочеполовой системы (Н.А. Лопаткин, 1992), они являются одной из основных причин смерти от рака среди мужчин молодого возраста (до 35 лет), то есть наиболее репродуктивно способной и социально значимой части населения. Несмотря на значительное улучшение результатов лечения опухоли яичка, с внедрением в схемы полихимиотерапии цитостатиков на основе платины, смертность от поздних стадий заболевания, в зависимости от гистологического строения опухоли, составляет по данным ВОЗ (1999 год) от 68 до 100%. Основной причиной, приводящей к гибели пациентов с опухолью яичка, является ее метастазирование как по кровеносным сосудам, так и по лимфатическим путям (Маринбах Е.Б., 1977). Поэтому является актуальным разработка новых цитостатиков и исследование их действия на опухолевый рост и лимфатическую систему. Для фундаментальных исследований создаются модели опухоли яичка на лабораторных животных. В литературе описано достаточно много способов моделирования опухоли яичка. Их можно условно разделить на 2 группы:
И.О. Михайловский в 1928 г. впервые получил 10 тератоидных опухолей яичка с помощью инъекций в яичко петухов 5% раствора хлористого цинка. Было установлено, что индукция опухоли удавалась только в весенние месяцы, т.е. в период наиболее активного сперматогенеза. Л.И. Фалин и соавторы (1940, 1946) ввели растворы хлористого цинка в яички 116 петухам и только лишь у 15 петухов были получены опухоли. В 1966 г. Б.В. Ключарев получил опухоли яичка с помощью канцерогенного углеводорода - он вводил 135 крысам и 31 мыши 9,10-диметил,1,2-безантрацен. Опухоль получена у 11 животных. Модели этой группы, основанные на введении в яичко химических канцерогенных веществ, отличаются невысоким процентом развития экспериментальных опухолей, кроме того, канцероген оказывает определенное влияние на лимфатическую систему, что нарушает чистоту эксперимента.The interest in the problem of testicular malignant tumors is due to the fact that constituting only about 2% in the structure of the incidence of tumors of the genitourinary system (N.A. Lopatkin, 1992), they are one of the main causes of cancer death among young men (under 35 years old), that is, the most reproductive capable and socially significant part of the population. Despite a significant improvement in the treatment of testicular tumors with the introduction of platinum-based cytostatics into polychemotherapy regimens, mortality from late stages of the disease, depending on the histological structure of the tumor, ranges from 68 to 100% according to WHO data (1999). The main reason leading to the death of patients with a testicular tumor is its metastasis both in the blood vessels and in the lymphatic paths (Marinbakh EB, 1977). Therefore, it is relevant to develop new cytostatics and study their effects on tumor growth and the lymphatic system. For basic research, testicular tumor models are created in laboratory animals. The literature describes a lot of methods for modeling a testicular tumor. They can be divided into 2 groups:
AND ABOUT. Mikhailovsky in 1928 for the first time received 10 teratoid tumors of the testis by injecting a 5% zinc chloride solution into the testicle of the rooster. It was found that tumor induction was successful only in the spring months, i.e. during the period of the most active spermatogenesis. L.I. Falin et al. (1940, 1946) injected zinc chloride solutions into the testes of 116 cocks, and only 15 cocks received tumors. In 1966, B.V. Klyucharyov received testicular tumors using a carcinogenic hydrocarbon - he injected 135 rats and 31 mice with 9,10-dimethyl, 1,2-non-anthracene. The tumor was obtained in 11 animals. Models of this group, based on the introduction of chemical carcinogens into the testicle, are characterized by a low percentage of experimental tumors; in addition, the carcinogen has a certain effect on the lymphatic system, which violates the purity of the experiment.

В 1959 году В. М. Бреслеру впервые удалось получить экспериментальные тератомы у мышей и крыс при введении в яичко прижигающей эмульсии и нарушении гормонального обмена путем введения малых доз тестостерона. Индукция опухоли удается только при сочетании двух указанных факторов. In 1959, V.M. Bresler was the first to obtain experimental teratomas in mice and rats by introducing a cauterizing emulsion into the testis and impaired hormonal metabolism by administering small doses of testosterone. Tumor induction is possible only with a combination of these two factors.

Через несколько лет М. Ривьер и соавторы (1964) индуцировали сперматогенные семиномы у хомячков введением эстрогенов. Модели этой группы, основанные на создании искусственного гормонального фона, отличаются достаточно медленным развитием опухоли (до нескольких лет), создание их трудоемко, дорого, кроме того, процент развития опухоли не всегда высок. A few years later, M. Riviere et al. (1964) induced spermatogenous seminomas in hamsters by the administration of estrogen. Models of this group, based on the creation of an artificial hormonal background, are distinguished by a rather slow tumor development (up to several years), their creation is laborious, expensive, in addition, the percentage of tumor development is not always high.

Целью нашего исследования было создание такой модели опухоли яичка, которая бы отличалась надежностью и быстротой развития опухоли, по возможности, простотой создания, при этом не должна нарушаться топографическая анатомия яичка, его кровоснабжение и лимфооток. Кроме того, отсутствовали бы факторы, которые могли бы сами по себе вызывать реакцию лимфатической системы, которая бы затушевывала ответ лимфатической системы на опухоль и ее коррекцию. The aim of our study was to create such a model of testicular tumor, which would be distinguished by the reliability and speed of tumor development, if possible, ease of creation, while the topographic anatomy of the testicle, its blood supply and lymphatic flow should not be disturbed. In addition, there would be no factors that could themselves cause a reaction of the lymphatic system, which would obscure the response of the lymphatic system to the tumor and its correction.

До настоящего времени решающее значение при отборе противоопухолевых препаратов во всех странах мира имеют испытания in vivo на перевиваемых опухолях мышей и крыс (Ларионов Л.Ф., 1962; Бокаева С.С., 1965; Булкина З.П., 1972). Для терапевтических опытов рекомендуется использовать перевиваемые опухоли, которые до настоящего времени остаются основной моделью при первичном отборе противоопухолевых препаратов. Until now, in vivo tests on transplantable tumors of mice and rats (Larionov L.F., 1962; Bokaeva S.S., 1965; Bulkina Z.P., 1972) are crucial in the selection of antitumor drugs in all countries of the world. For therapeutic experiments, it is recommended to use transplantable tumors, which until now remain the main model in the initial selection of antitumor drugs.

Перевиваемые опухоли животных являются более отдаленной моделью опухолей человека, чем спонтанные и индуцированные опухоли (Коноплев В.Н., 1960; Чернуха А.М., 1980). Последние стоят ближе к опухолям человека в том отношении, что образуются в организме заново, в то время как при перевивке происходит лишь перенос возникшей опухоли от одного животного к другому. Но в то же время перевиваемые опухоли имеют ряд значительных преимуществ, т.к. легко и быстро могут быть получены в большом количестве, это дает возможность постановки массовых экспериментов. Кроме того, перевиваемые опухоли характеризуются относительным постоянством строения и биологических свойств (Караиванова М.Х., 1971 Васильева Г.С. 1982). Transplanted animal tumors are a more distant model of human tumors than spontaneous and induced tumors (Konoplev V.N., 1960; Chernukha A.M., 1980). The latter stand closer to human tumors in the sense that they are formed in the body anew, while transplantation only transfers the resulting tumor from one animal to another. But at the same time, transplanted tumors have a number of significant advantages, because can be easily and quickly obtained in large quantities, this makes it possible to set up mass experiments. In addition, transplantable tumors are characterized by relative constancy of structure and biological properties (Karaivanova M.Kh., 1971 Vasilieva G.S. 1982).

В странах Западной Европы, объединенных в единую скрининговую группу EORTC (Европейская организация для исследований по лечению рака), первичный отбор in vivo ведется на лейкозе L 1210 и опухоли Эрлиха (Першин Г.Н.,1971; Софьина З.П., 1976). In the countries of Western Europe, united in a single screening group EORTC (European Organization for Research on Cancer Treatment), the initial in vivo selection is carried out on leukemia L 1210 and Ehrlich tumors (Pershin G.N., 1971; Sof'ina Z.P., 1976) .

Нами предлагается следующий способ моделирования опухоли яичка, который может быть с успехом использован, в том числе, и для изучения его регионарного лимфатического русла. Он заключается в следующем. We propose the following method for modeling a testicular tumor, which can be successfully used, including for studying its regional lymphatic channel. It is as follows.

Непосредственно перед операцией у мыши - носителя опухоли Эрлиха шприцем из брюшной полости, в стерильных условиях, аспирируется 0,375 мл асцитической жидкости, содержащей большое количество клеток опухоли Эрлиха. Асцитическая жидкость помещается в стерильную чашку Петри, разбавляется 8 мл 0,9% раствора NaСl (физиологического раствора) и тщательно перемешивается. Путем подсчета клеток опухоли Эрлиха в камере Горяева по формуле высчитывается их концентрация в 1 мл. Концентрация 250000 клеток опухоли Эрлиха в 1 мл выведена опытным путем и должна считаться оптимальной, позволяя, с одной стороны, быть уверенным в том, что опухоль будет индуцирована, а с другой - обеспечивает необходимую продолжительность жизни экспериментальных животных. Мышь вводится в наркоз (мы применяли медицинский эфир). После удаления с операционного поля шерсти и обработки его (двукратно) дезинфицирующим раствором ножницами производится диагональный разрез кожи мошонки. Как показывает практика, у 90% процентов мышей яички находятся в брюшной полости. Стерильными ножницами выполняется разрез париетальной брюшины длинной 0,5 мл. Путем легкого надавливания на живот мыши яичко выводится в операционную рану. В паренхиму органа инсулиновым шприцем вводится 0,075 приготовленной заранее асцитической жидкости. После этого рана трижды обрабатывается антисептической раствором (фурациллин 1:5000, раствор борной кислоты). Яичко возвращается в брюшную полость. Кетгутом 3/0 на атравматической игле двумя одиночными узловыми швами ушивается дефект брюшины. Таким же способом ушивается кожа, операционная рана обрабатывается 2% раствором Н₂O₂. Повязка на рану не накладывается в связи со сложностью ее фиксации и низким риском нагноения раны - выявлено на основании собственного опыта.Immediately prior to the operation, in a mouse carrier of an Ehrlich tumor, a syringe from the abdominal cavity, under sterile conditions, aspirates 0.375 ml of ascitic fluid containing a large number of Ehrlich tumor cells. The ascitic fluid is placed in a sterile Petri dish, diluted with 8 ml of 0.9% NaCl solution (physiological saline) and mixed thoroughly. By counting the Ehrlich tumor cells in the Goryaev chamber, their concentration of 1 ml is calculated by the formula. The concentration of 250,000 Ehrlich tumor cells in 1 ml was removed experimentally and should be considered optimal, allowing, on the one hand, to be sure that the tumor will be induced and, on the other hand, to provide the necessary lifespan of experimental animals. The mouse is injected into anesthesia (we used medical ether). After removing wool from the surgical field and treating it (twice) with a disinfectant solution, scissors make a diagonal incision of the scrotum skin. As practice shows, in 90% of mice, the testes are in the abdominal cavity. Sterile scissors perform an incision of the parietal peritoneum with a length of 0.5 ml. By lightly pressing on the stomach of the mouse, the testicle is excreted into the surgical wound. 0.075 ascites fluid prepared in advance is injected into the organ parenchyma with an insulin syringe. After this, the wound is treated three times with an antiseptic solution (furatsillin 1: 5000, a solution of boric acid). The testicle returns to the abdominal cavity. Catgut 3/0 on the atraumatic needle with two single interrupted sutures sutured defect of the peritoneum. The skin is sutured in the same way, the surgical wound is treated with a 2% solution of H ₂ O ₂ . The wound dressing is not applied due to the complexity of its fixation and low risk of suppuration of the wound - revealed on the basis of personal experience.

Наблюдение за развитием опухолевого процесса проводилось в течение 15 суток. Observation of the development of the tumor process was carried out for 15 days.

Через 5 суток с момента прививки опухоли пораженное яичко на 3 мм по длиннику и на 2 мм по поперечнику больше интактного, резко уплотнено, видны участки кровоизлияний, форма еще остается правильной овальной, оболочки интимно подпаяны к паренхиме. 5 days after the inoculation of the tumor, the affected testicle is 3 mm longer and 2 mm longer than intact, sharply densified, hemorrhages are visible, the shape still remains regular oval, the membranes are intimately soldered to the parenchyma.

После умерщвления животных под эфирным наркозом по стандартной методике были изготовлены срединные продольные гистологические срезы с опухолевого узла толщиной 5-7 мкм, окрашенные гематоксилин-эозином и по Ван-Гизон. Микроскопическое исследование гистологических препаратов опухоли (увеличение 100, 400, 1000) показало, что на 5 сутки в нижней половине пораженного яичка (куда непосредственно и прививалась опухоль) наблюдается резко выраженный тканевой и клеточный атипизм (для сравнения на фиг.1 приведена микроскопическая картина здорового яичка). В месте инъекции опухолевых клеток (фиг.2) определяется скопление атипичных клеток, по периферии опухолевого узла очаги кровоизлияния, некроз железистой паренхимы яичка (фрагменты извитых семенных канальцев, инфильтрированных лейкоцитами, клеточный детрит), распространение бластных клеток. Опухоль представлена атипичными, полиморфными клетками (фиг. 3): крупные клетки с большими ядрами, крупные клетки с большими гиперхромными "уродливыми" ядрами, смещение ядер к периферии клеток, увеличение числа ядер в одной клетке. В верхней половине яичка атипичных клеток не обнаружено, железистая паренхима яичка сохранена. Отмечается выраженный лимфостаз, выявлены расширенные лимфатические капилляры и сосуды, содержащие большое количество жировых (фиг. 4, 5). По стандартной методике (метод "полей") нами был произведен анализ ядерно-цитоплазматического и стромально-паренхиматозного соотношений в ткани опухоли. Для анализа клеток и тканей использовалась окулярная тест-система с 25 равноудаленными точками (Автандилов Г.Г., 1990 г.). After killing the animals under ether anesthesia, the median longitudinal histological sections were made from a tumor node 5-7 μm thick, stained with hematoxylin-eosin and Van Gieson using standard techniques. Microscopic examination of histological preparations of the tumor (an increase of 100, 400, 1000) showed that on day 5 in the lower half of the affected testicle (where the tumor directly grafted) there was a pronounced tissue and cell atypism (for comparison, a microscopic picture of a healthy testicle is shown in Fig. 1 ) At the injection site of tumor cells (Fig. 2), an accumulation of atypical cells is determined, hemorrhage foci along the periphery of the tumor node, testicular glandular parenchyma necrosis (fragments of convoluted seminiferous tubules infiltrated by leukocytes, cell detritus), blast cell spread. The tumor is represented by atypical, polymorphic cells (Fig. 3): large cells with large nuclei, large cells with large hyperchromic "ugly" nuclei, displacement of nuclei to the periphery of cells, increase in the number of nuclei in one cell. No atypical cells were found in the upper half of the testis; the glandular parenchyma of the testis was preserved. Marked lymphostasis is noted, dilated lymphatic capillaries and blood vessels containing a large amount of fat have been identified (Figs. 4, 5). Using a standard technique (the "field" method), we analyzed the nuclear-cytoplasmic and stromal-parenchymal ratios in the tumor tissue. For the analysis of cells and tissues, an ocular test system with 25 equidistant points was used (G. Avtandilov, 1990).

Результаты исследований показали, что в динамике роста опухоли происходит увеличение ядерно-цитоплазматического и стромально-паренхиматозного соотношений. В здоровом яичке ядерно-цитоплазматическое соотношение 1,434±0,02, на 5 сутки ядерно-цитоплазматическое соотношение 2,127±0,03, т. е. достоверно увеличивается на 48,32%; стромально-паренхиматозное соотношение в здоровом яичке составляет 0,068±0,01, а на 5 сутки 0,101±0,02, т.е. достоверно увеличивается на 48,52%. The research results showed that in the dynamics of tumor growth there is an increase in nuclear-cytoplasmic and stromal-parenchymal ratios. In a healthy testicle, the nuclear cytoplasmic ratio is 1.434 ± 0.02; on day 5, the nuclear cytoplasmic ratio is 2.127 ± 0.03, that is, it significantly increases by 48.32%; the stromal-parenchymal ratio in a healthy testicle is 0.068 ± 0.01, and on day 5 0.101 ± 0.02, i.e. significantly increases by 48.52%.

Через 10 суток с момента прививки макроскопически размеры больного яичка на 7-8 мм по длиннику и на 3-4 мм в поперечнике больше, чем в интактном, яичко плотной "деревянистой" консистенции, серого цвета с очагами кровоизлияний, поверхность бугристая, оболочки интимно подпаяны к паренхиме. After 10 days from the moment of inoculation, the size of the diseased testicle is macroscopically 7-8 mm long and 3-4 mm wider than in the intact testicle, with a dense "woody" consistency, gray in color with foci of hemorrhage, the surface is tuberous, and the membranes are intimately soldered to the parenchyma.

При микроскопическом исследовании гистологических срезов опухоли на малом увеличении (об. 10*ок 10) через 10 суток с момента прививки повсеместно наблюдаются тяжи опухолевой ткани, между которыми определяются очаги некроза, кровоизлияния, остатки извитых семенных канальцев (фиг.6). На большом увеличении (об. 100*ок 10) опухолевые тяжи состоят из атипичных, полиморфных клеток: крупные клетки с большими ядрами, смещение ядер к периферии клеток, мелкие клетки с гиперхромными ядрами - выраженный полиморфизм опухолевых клеток. Бласты располагаются вокруг венул, наблюдается выраженный стаз крови в мелких сосудах. Отмечаются множественные митозы (фиг.7). Microscopic examination of histological sections of the tumor at low magnification (vol. 10 * approx. 10) after 10 days from the moment of inoculation leads to the presence of tumor tissue bands, between which foci of necrosis, hemorrhage, and the remains of convoluted seminiferous tubules are determined (Fig. 6). At a large magnification (vol. 100 * approx. 10), the tumor cords consist of atypical, polymorphic cells: large cells with large nuclei, displacement of nuclei to the periphery of cells, small cells with hyperchromic nuclei — pronounced polymorphism of tumor cells. Blasts are located around the venules, there is a pronounced stasis of blood in small vessels. Multiple mitoses are noted (Fig. 7).

Ядерно-цитоплазматическое соотношение через 10 суток с момента прививки составляет 2,865±0,03, что достоверно на 34,69% превышает такой же показатель на 5 сутки наблюдения. Стромально-паренхиматозное соотношение составило 0,138±0,01, что достоверно на 36,63% превышает такой же показатель на 5 сутки наблюдения. The nuclear-cytoplasmic ratio after 10 days from the moment of vaccination is 2.865 ± 0.03, which is significantly higher by 34.69% than the same indicator on the 5th day of observation. The stromal-parenchymal ratio was 0.138 ± 0.01, which is significantly 36.63% higher than the same indicator on the 5th day of observation.

Через 15 суток с момента прививки макроскопически больное яичко в 2-2,5 раза больше интактного, плотной "деревянистой" консистенции с участками размягчения, серого цвета с очагами кровоизлияний, форма неправильная с бугристыми контурами, оболочки не дифференцируются. After 15 days from the moment of inoculation, a macroscopically diseased testicle is 2-2.5 times larger than the intact, dense “woody” consistency with softening areas, gray in color with foci of hemorrhage, the shape is irregular with tuberous contours, the membranes do not differentiate.

При микроскопическом исследовании гистологических препаратов опухоли на малом увеличении (об.*10, ок*10) повсеместно определяется разрастание опухолевой паренхимы и стромы, компоненты нормальной тканевой структуры яичка практически отсутствуют (фиг.8). По периферии и внутри опухолевых тяжей наблюдается расширение прелимфатических, интерстициальных путей (фиг.8). При большом увеличении вокруг венул определяется скопление полиморфных, атипичных, опухолевых клеток (фиг.9): крупные клетки с большими ядрами, крупные клетки с большими гиперхромными "уродливыми" ядрами, смещение ядер к периферии клеток. На фиг.9 виден лизис стенки венулы, рядом атипичные клетки, содержащие гемосидерин. На 15 сутки ядерно-цитоплазматическое соотношение 3,380±0,04, что достоверно на 17,97% превышает такой же показатель на 10 сутки 0,176±0,02, что достоверно на 27,53% превышает такой же показатель на 10 сутки наблюдения. Данные, полученные при подсчете ядерно-цитоплазматического и стромально-паренхиматозного соотношений и сравнение этих показателей на разные сроки опухолевого роста свидетельствуют о тенденции нарастания как клеточного, так и тканевого атипизма. Microscopic examination of histological preparations of the tumor at a low magnification (vol. * 10, ok * 10) determines the growth of the tumor parenchyma and stroma everywhere, the components of the normal tissue structure of the testis are absent (Fig. 8). On the periphery and inside the tumor cords, there is an expansion of the prelimphatic, interstitial pathways (Fig. 8). With a large increase around the venules, an accumulation of polymorphic, atypical, tumor cells is determined (Fig. 9): large cells with large nuclei, large cells with large hyperchromic "ugly" nuclei, displacement of nuclei to the periphery of the cells. Figure 9 shows the lysis of the venule wall, near atypical cells containing hemosiderin. On the 15th day, the nuclear-cytoplasmic ratio was 3.380 ± 0.04, which significantly increased by 17.97% the same indicator on the 10th day 0.176 ± 0.02, which was significantly 27.53% higher than the same indicator on the 10th day of observation. The data obtained by calculating the nuclear-cytoplasmic and stromal-parenchymal ratios and comparing these indicators for different periods of tumor growth indicate a tendency to increase both cellular and tissue atypism.

Так же проводился микроскопический анализ гистологических срезов, окрашенных по стандартной методике гемотоксилином и эозином, регионарного лимфатического узла (правый парааортальный, околопочечный). На 15 сутки метастазы обнаружены в 1 из 6 (16,6%) исследованных лимфатических узлов. В другие сроки наблюдения метастазы не отмечены. При микроскопии выявлен одиночный метастаз в корковом веществе, представляющий собой скопление атипичных клеток (в основном полиморфные клетки опухоли, различные по размерам с крупными, смещенными к периферии ядрами и малым количеством цитоплазмы). В паренхиме лимфатического узла наблюдается расширение корковых промежуточных синусов, разрастание соединительной ткани, резкое расширение краевого синуса (фиг. 10, 11). A microscopic analysis of histological sections stained using the standard technique of hemotoxylin and eosin and a regional lymph node (right para-aortic, perinephric) was also performed. On day 15, metastases were found in 1 of 6 (16.6%) of the examined lymph nodes. In other periods of observation, metastases were not noted. Microscopy revealed a single metastasis in the cortical substance, which is an accumulation of atypical cells (mainly polymorphic tumor cells, different in size with large nuclei displaced to the periphery and a small amount of cytoplasm). In the parenchyma of the lymph node there is an expansion of the cortical intermediate sinuses, proliferation of connective tissue, a sharp expansion of the marginal sinus (Fig. 10, 11).

Морфогенез опухоли яичка у мышей при проведенном нами морфологическом, структурном анализе практически идентичен строению типичной семиномы у человека (фиг.12). The morphogenesis of a testicular tumor in mice with our morphological, structural analysis is almost identical to the structure of a typical seminoma in humans (Fig. 12).

Список использованной литературы
1. Васильева Г.С. Биология трансплантируемых опухолей. - Алма-Ата, 1982. - С.47-58.List of references
1. Vasiliev G.S. Biology of transplanted tumors. - Alma-Ata, 1982.- P.47-58.

2. Булкина З.П., Киндзельский Л.П., Лосева И.М. Исследование препаратов на противолейкозную активность. Онкология (Республиканский межведомственный сборник). - Киев, 1972. - Вып.3. - С.164-167. 2. Bulkina Z.P., Kindzelsky L.P., Loseva I.M. The study of drugs for anti-leukemia activity. Oncology (Republican interdepartmental collection). - Kiev, 1972. - Issue 3. - S.164-167.

3. Бокаева С. С. Сравнительное изучение спектра действия противоопухолевых препаратов из группы алкилирующих агентов на перевиваемые опухоли мышей // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 1965. - 3. - С.86-88. 3. Bokaeva S. S. A comparative study of the spectrum of action of antitumor drugs from the group of alkylating agents on transplantable tumors of mice // Bull. an experiment. biol. and honey. - 1965. - 3. - P.86-88.

4. Маринбах Е. Б. Опухоли яичка и его придатка. - Москва.: Медицина, 1972. - С. 8-10, 25, 30. 4. Marinbach Ye. B. Tumors of the testis and its appendage. - Moscow .: Medicine, 1972. - S. 8-10, 25, 30.

5. Урология под редакцией Лопаткина Н.А. - Москва.: Медицина, 1995. - С. 428-429. 5. Urology edited by N. Lopatkina - Moscow .: Medicine, 1995 .-- S. 428-429.

6. Караиванова М.Х. К методике первичного отбора противоопухолевых средств // Вопросы онкологии. - 1971. - Т.17. - 2. - С.62-66. 6. Karaivanova M.Kh. To the methodology of the primary selection of anticancer drugs // Questions of Oncology. - 1971. - T.17. - 2. - P.62-66.

7. Коноплев А.Е. Перевиваемые опухоли. - В кн. Модели и методы экспериментальной онкологии. - М., Медгиз, 1960. - С.144-237. 7. Konoplev A.E. Transplanted tumors. - In the book. Models and methods of experimental oncology. - M., Medgiz, 1960 .-- S.144-237.

8. Ларионов Л.Ф. Первичный отбор противоопухолевых препаратов. - В кн. Химиотерапия злокачественных опухолей. - Москва, 1962. - С.74-79. 8. Larionov L.F. Primary selection of anticancer drugs. - In the book. Chemotherapy of malignant tumors. - Moscow, 1962. - P.74-79.

9. Першин Г. Н. Методы экспериментальной химиотерапии. - М.: Медицина, 1971. 357-366. 9. Pershin G. N. Methods of experimental chemotherapy. - M.: Medicine, 1971.357-366.

10. Софьина З.П. Модели и методы, применяемые для отбора противоопухолевых препаратов в СССР и за рубежом // Вопросы онкологии. - 1976. - Т.22. - 4. - С.82-91. 10. Sof'ina Z.P. Models and methods used for the selection of anticancer drugs in the USSR and abroad // Oncology issues. - 1976.- T.22. - 4. - P.82-91.

11. Автандилов Г.Г. "Медицинская морфометрия". - Москва, 1990. - С.382. 11. Avtandilov G.G. "Medical morphometry". - Moscow, 1990. - P.382.

12. Beutow SA: Epidemiology of testicular cancer. Epidemiol Rev 17; 433, 1995. 12. Beutow SA: Epidemiology of testicular cancer. Epidemiol Rev 17; 433, 1995.

Claims

A method for modeling a testicular tumor, which involves introducing a tumor growth inducer into the testicular parenchyma, characterized in that Ehrlich ascites carcinoma is introduced into the testicular parenchyma at a concentration of 2.5-5.0 · 10 ⁵ tumor cells per 1 ml.