RU2210352C1

RU2210352C1 - Композиция для лечения воспалительных заболеваний пародонта на основе клеточных культур

Info

Publication number: RU2210352C1
Application number: RU2001133505/14A
Authority: RU
Inventors: Н.П. Глинских; И.А. Новикова; Г.И. Ронь; нцев И.В. Усть; И.В. Устьянцев
Original assignee: Глинских Нина Поликарповна; Новикова Ирина Андреевна
Priority date: 2001-12-07
Filing date: 2001-12-07
Publication date: 2003-08-20
Also published as: RU2001133505A

Abstract

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии. Композиция содержит культуру фибробластов в виде штамма диплоидных клеток легкого эмбриона человека ЛЭЧ-4(81), среду роста ИГЛА-МЕМ с добавлением 10%-ной сыворотки крови плодов крупного рогатого скота и остеопластический материал Гапкол или Коллапан в следующем соотношении компонентов, мас.%: среда роста ИГЛА-МЕМ 84,75-86,2, остеопластический материал 0,86-5,08, культура фибробластов (60000-80000 кл/мл среды роста) 10,17-12,94. Использование композиции позволяет повысить лечебный эффект и увеличить сроки ремиссии хронического заболевания.

Description

Изобретение относится к стоматологии и может быть использовано при лечении воспалительно-деструктивной формы пародонта.

Патология пародонта - одна из наиболее часто встречающихся и сложных патологий. Во всех странах мира до 50% людей молодого возраста страдают различными формами гингивита. С возрастом частота пародонтальных коллизий увеличивается. Болезни пародонта, являясь тяжелым недугом, по распространенности занимают четвертое место среди неинфекционных заболеваний, уступая лишь патологии сердечно-сосудистой системы, онкологическим заболеваниям и сахарному диабету.

Неэффективность оказываемой специализированной помощи, невозможность поведения комплексного лечения в полном объеме приводит к увеличению больных с тяжелой степенью заболеваний пародонта.

В возникновении заболеваний пародонта имеет место сочетание экзогенных и эндогенных факторов, воздействующих на организм в целом (питание климатические и географические условия, профессиональные вредности, заболевания внутренних органов, иммунный и гормональный гомеостаз), и факторов, влияющих непосредственно на пародонт (микрофлора, зубной камень, перегрузка и недогрузка, состав и свойства слюны и т.д.). Сочетание этих факторов приводит в движение пусковые механизмы, среди которых ведущими являются иммунопатологический и сосудисто-трофический механизмы.

Известен способ лечения заболеваний пародонта путем поддесневой и поднадкостничной имплантации остеотропной мембраны на основе коллагена, содержащей костный порошок, и применением лекарственных средств - гликозамингликаны (пат. РФ 2159101, А 61 К 6/097).

Известен биосовместимый материал для стоматологии, включающий неорганические соли, коллаген, сульфатированные гликозамингликаны и воду (пат. РФ 2155024, А 61 К 6/04).

Известно средство для лечения заболеваний пародонта с использованием бактериофагов (пат. РФ на изобретение 2165766 от 24.04.2000 А 61 К 35/74, А 61 К 6/00, А 61 К 7/16).

Для восстановления костных структур при лечении заболеваний пародонта используются различные виды костных ауто-, аллоксенотрансплантатов ("Применение культуры аллофибробластов в комплексном лечении заболеваний пародонта". - "Наука-практике" - ЦНИИ стоматологии МЗ РФ, М., 1988, с.164-167).

Известно использование коллапана для заполнения костных карманов при хирургическом лечении заболеваний пародонта, причем костные карманы сначала заполняют гелеобразным коллапаном на 30-40% объема дефекта, а затем полностью заполняют дефект и область межзубных промежутков гранулированным коллапаном (пат. РФ 2130293, А 61 В 17/24 от 29.08.97).

Известно применение биологического протеза на основе коллагена для устранения дефекта костной ткани, причем в качестве основы используют гемостатическую коллагеновую губку, на которую наносят аутогенный костный мозг и пропитывают ее эстрогеном в дозе 0,5 мг/кг (пат. РФ 2055535, А 61 В 17/56 от 20.10.93).

Известно использование остеотропной мембраны на основе коллагена и лекарственных средств для лечения заболеваний пародонта (пат. РФ 2159101, А 61 К 6/097 от 25.03.99).

Известно использование коллапана в качестве синтетического трансплантата для лечения быстропрогрессирующих пародонтитов (пат. РФ 2150903, А 61 В 17/24 от 22.06.99).

Широко известно использование коллапана (гранулы, пластины, гель) в травматологии, ортопедии, стоматологии. Коллапан - это биоактивный костно-пластический материал на основе композиции особо чистого гидроксиапатита, коллагена специальной обработки и антибиотика (фирма "ИНТЕРМЕДАПАТИТ", Москва).

Известно использование различного вида культур клеток, чаще фибробластов в качестве оптимизаторов раневого заживления в хирургической пародонтологии (ж. "Цитология", 9, т. 43, 2001 г., стр. 854) - прототип.

Исследована активность фибробластов, культивируемых in vitro с различными подсадочными материалами. В качестве подсадочных материалов рассмотрены остеопластические материалы: Гапкол, Колапол, Гидроксиапол ГАП-85, Коллапан. Композиция содержит остеопластический материал, суспензию культивируемых фибробластов человека М-22 в концентрации 140•10³-180•10³ клеток в 1 мл. Клетки культивируют в среде Игла-МЕМ с добавлением сыворотки крупного рогатого скота (см. там же).

Известные композиции либо недостаточно эффективны, либо сложны в изготовлении, либо имеют побочные эффекты.

Технической задачей изобретения является повышение лечебного эффекта и устранение побочных эффектов при использовании композиции для хирургического лечения воспалительных заболеваний пародонта.

Для решения поставленной задачи предлагается композиция для лечения заболеваний пародонта на основе клеточных культур, содержащая культуру фибробластов, среду роста, остеопластический материал, отличающаяся тем, что в качестве культуры фибробластов она содержит авторский штамм диплоидных клеток легкого эмбриона человека ЛЭЧ-4(81), в качестве остеопластического материала - Гапол или Коллапан, в качестве среды роста - ИГЛА-МЕМ с добавлением 10% сыворотки крови плодов крупного рогатого скота (КРС) в следующем соотношении компонентов, мас.%: среда роста ИГЛА-МЕМ 84,75-86,2%; остеопластический материал 0,86-5,08; культура фибробластов (60000-80000 кл/мл) 10,17-12,94%,
Композиция приготавливается следующим образом.

Остеопластический материал Гапкол (пластина 0,1-0,15 г) или Коллапан (пластина 0,1-0,13 г) замачивается на 24 часа в растворе антисептика (0,05%-ный раствор хлоргексидина биглюконата или растворе метронидазола из расчета 500 мг на 100 мл раствора). Затем раствор антисептика сливают, а остеопластический материл замачивают на 5 часов в стерильной среде ИГЛА, затем отмывают свежими порциями среды ИГЛА три раза по 10 минут каждый раз. Отмытый остеопластический материал помещают в культуральный стерильный сосуд, куда затем вносят взвесь клеток фибробластов из расчета 60000-80000 клеток на 1 мл среды роста. В качестве среды роста используют среду ИГЛА-МЕМ с добавлением сыворотки крови плодов КРС в соотношении: 10% сыворотки; 90% ИГЛА-МЕМ с кислотностью среды роста рН 7,2-7,4.

В сосуд объемом 0,10-0,25 л вносится 15-30 мл соответственно клеточной суспензии. Сосуд помещают в термостат при температуре 35-37^oС на 48-72 часа. Подготовленный материал - трансплантат хранят при температуре 4-6^oС и используют в течение 3-4 суток.

Использование предлагаемой композиции - комбинированного тканевого трансплантата при хирургическом лечении воспалительных заболеваний пародонта для заполнения костных дефектов позволяет: повысить лечебный эффект за счет стимулирующей активности клеточного компонента, способствующего сокращению сроков заживления раневой поверхности, подавления воспалительных реакций; снизить выраженность постоперационной ретракции десны и обеспечить увеличение сроков ремиссии хронического заболевания.

Лечение с использованием культуры аллофибробластов было проведено у 50 больных в возрасте от 35 до 55 лет, страдающих пародонтитом средней и тяжелой степени. Курс предоперационной подготовки включал обучение пациента гигиене полости рта, гигиенический контроль, общую и местную противовоспалительную терапию, лечение кариеса и его осложнений, удаление над- и поддесневых зубных отложений. При наличии супраконтактов и недостаточной стираемости эмалевых бугров проводили функциональное избирательное пришлифовывание по Дженкельсону. Зубы с подвижностью II-III степени (если не было показаний к их удалению) шинировали. Составляли план дальнейшего ортопедического лечения. После проведения всего комплекса предварительного лечения и по достижении пациентами стабильно хорошей гигиены полости рта (индекс Грина-Вермильона меньше либо равен 1) приступали непосредственно к операции.

Состояние пародонта оценивали с помощью критериев: клинического (глубина пародонтального кармана и рецессия десны) и рентгенологического (сопоставление ортопантомограмм до и после лечения).

У всех больных, которым применяли хирургическое лечение с использованием комбинированного аллотрансплантата, в сроки до 30 дней уменьшались пародонтальные карманы, исчезал запах изо рта, прекращалась кровоточивость десен, слизистая оболочка приобретала бледно-розовый цвет, т.е. визуализировалась положительная динамика заболевания. При рентгенологическом контроле в сроки от 6 до 12 месяцев определялся прирост костной ткани, уменьшение глубины и ширины пародонтальных костных карманов, что свидетельствует о реминерализации костной ткани. Подвижность зубов II степени исчезала, при подвижности III степени достигала уровня I степени.

Claims

Композиция для лечения воспалительных заболеваний пародонта на основе клеточных культур, содержащая культуру фибробластов, среду роста, остеопластический материал, отличающаяся тем, что в качестве культуры фибробластов она содержит штамм диплоидных клеток легкого эмбриона человека ЛЭЧ-4(81), в качестве среды роста среду ИГЛА-МЕМ с добавлением 10%-ной сыворотки крови плодов крупного рогатого скота, в качестве остеопластического материала Гапкол или Коллапан в следующем соотношении компонентов, мас. %:
Среда роста ИГЛА-МЕМ - 84,75-86,2
Остеопластический материал - 0,86-5,08
Культура фибробластов (60000-80000 кл/мл среды роста) - 10,17-12,94