RU2200420C2 - Method for obtaining oil emulsion (variants), emulsion, preparation for feeding fish, method for obtaining oil emulsion for local application and oil emulsion for local application - Google Patents

Method for obtaining oil emulsion (variants), emulsion, preparation for feeding fish, method for obtaining oil emulsion for local application and oil emulsion for local application Download PDF

Info

Publication number
RU2200420C2
RU2200420C2 RU99128048A RU99128048A RU2200420C2 RU 2200420 C2 RU2200420 C2 RU 2200420C2 RU 99128048 A RU99128048 A RU 99128048A RU 99128048 A RU99128048 A RU 99128048A RU 2200420 C2 RU2200420 C2 RU 2200420C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
oil
emulsion
oil bodies
washed
phase
Prior art date
Application number
RU99128048A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU99128048A (en
Inventor
Харм М. ДЕКЕРС
Роэйен Гейс Ван
Джозеф Бут
Джэнис ГОЛЛ
Морис Молони
Сохейл Сайед МАХМУД
Original Assignee
Сембиосис Джинетикс Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Сембиосис Джинетикс Инк. filed Critical Сембиосис Джинетикс Инк.
Publication of RU99128048A publication Critical patent/RU99128048A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2200420C2 publication Critical patent/RU2200420C2/en

Links

Images

Landscapes

  • Cosmetics (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

FIELD: food industry, butter and fats industry. SUBSTANCE: method for obtaining oil emulsion deals with obtaining oil bodies out of cell, washing oil bodies by obtain washed oil bodies containing whole oil bodies of similar size, shape and density and mixing washed oil bodies with liquid phase to obtain emulsion. Oil bodies are obtained from plant seeds due to their grinding, removal of solid substances out of ground seeds and separation of oil bodies' phase against watery phase. Emulsion obtained contains preparation of washed oil bodies of similar size, shape and density. It is obtained emulsion-covered preparation to feed fish. Oil emulsion could be, also, used as means of individual hygiene, food products and fodder products. The innovation enables to obtain stable emulsion due to application of washed oil bodies at the highest adsorptive capacity, more prolonged terms of storage and decreased allergic reaction. EFFECT: higher efficiency. 41 cl, 2 dwg, 22 ex, 13 tbl

Description

Настоящее изобретение обеспечивает новые эмульсии, содержащие масляные включения. Изобретение также предлагает способ приготовления таких эмульсий и их применение в различных бытовых и промышленных композициях. The present invention provides new emulsions containing oil inclusions. The invention also provides a method for preparing such emulsions and their use in various household and industrial compositions.

Эмульсии представляют собой смеси, получаемые из двух взаимно нерастворимых компонентов. Из этих компонентов можно получить смеси макроскопически однородного внешнего вида путем выбора подходящих условий смешивания и управления ими. Наиболее распространенным видом эмульсий являются те, в которых применяют водный компонент и липофильный компонент и которые на практике часто называют эмульсиями типа масло-в-воде и вода-в-масле. В эмульсиях типа масло-в-воде липофильная фаза диспергирована в воде, тогда как в эмульсиях типа вода-в-масле водная фаза диспергирована в липофильной фазе. Широко известные бытовые примеры основанных на эмульсиях композиций включают майонез, маргарин, мороженое, косметические композиции и краски. Эмульсионные системы также широко используются в таких отраслях промышленности, как фармацевтическая и агрохимическая промышленность, где часто желательно вводить активные ингредиенты в виде эмульсии. Emulsions are mixtures obtained from two mutually insoluble components. From these components, mixtures of a macroscopically uniform appearance can be obtained by selecting and mixing suitable mixing conditions. The most common type of emulsions are those in which the aqueous component and the lipophilic component are used and which in practice are often called oil-in-water and water-in-oil emulsions. In oil-in-water emulsions, the lipophilic phase is dispersed in water, while in water-in-oil emulsions, the aqueous phase is dispersed in the lipophilic phase. Well-known household examples of emulsion-based compositions include mayonnaise, margarine, ice cream, cosmetic compositions, and paints. Emulsion systems are also widely used in industries such as pharmaceuticals and agrochemicals, where it is often desirable to administer the active ingredients in the form of an emulsion.

Обычно эмульсии готовят в присутствии множества других веществ для того, чтобы достичь желаемого баланса эмульгирования, вязкости, стабильности и внешнего вида Например, получение эмульсии часто требует по меньшей мере одного, а часто комбинации нескольких эмульгирующих агентов. Эти агенты обеспечивают диспергирование одной несмешивающейся фазы в другой и помогают стабилизировать эмульсии. Эмульгаторы включают широкое разнообразие синтетических и природных компонентов. Например, моноглицериды и их химические производные широко используются в качестве эмульгаторов в пищевых продуктах, таких как маргарины и выпечка. Примером природного эмульгатора является лецитин, фосфолипид, присутствующий в яичном желтке, который обычно используют при приготовлении майонеза. Можно также включать в эмульсию активные ингредиенты. Это особенно важно в композициях, включающих активные агенты, которые трудно растворять в водных растворах, такие как некоторые витамины и нуклеотиды. Активные ингредиенты также часто приготавливают в виде эмульсий для того, чтобы улучшить их стабильность. Пример эмульсионной системы, включающей фармацевтические агент, описан в патенте США 5602183, который описывает композицию для заживления ран, содержащую противовоспалительный агент. Вышесказанное приводит пример лишь нескольких из множества известных в практике компонентов, которые включены в эмульсионные композиции. Исчерпывающий обзор эмульгирующих агентов и их применений можно найти в книге Becher P., Encyclopedia of Emulsion Technology, DekkerEd, 1983. Typically, emulsions are prepared in the presence of many other substances in order to achieve the desired balance of emulsification, viscosity, stability and appearance. For example, obtaining an emulsion often requires at least one, and often a combination of several emulsifying agents. These agents disperse one immiscible phase into another and help stabilize emulsions. Emulsifiers include a wide variety of synthetic and natural ingredients. For example, monoglycerides and their chemical derivatives are widely used as emulsifiers in food products such as margarines and pastries. An example of a natural emulsifier is lecithin, a phospholipid present in egg yolk, which is commonly used in the preparation of mayonnaise. Active ingredients may also be included in the emulsion. This is especially important in compositions comprising active agents that are difficult to dissolve in aqueous solutions, such as certain vitamins and nucleotides. Active ingredients are also often formulated as emulsions in order to improve their stability. An example of an emulsion system comprising a pharmaceutical agent is described in US Pat. No. 5,602,183, which describes a wound healing composition comprising an anti-inflammatory agent. The foregoing gives an example of only a few of the many known components in practice that are included in emulsion compositions. A comprehensive review of emulsifying agents and their uses can be found in Becher P., Encyclopedia of Emulsion Technology, DekkerEd, 1983.

В семенах масличных культур, в которые входят экономически важные культуры, такие как соевые бобы, рапс, подсолнечник и пальмы, нерастворимый в воде масляный компонент содержится в дискретных субклеточных структурах, по-разному называемых в литературе как масляные тельца, олеосомы, липидные тельца или сферосомы (Huang 1992, Ann. Rev. Plant. Mol. Biol., 43-177-200). Кроме смеси масел (триглицеридов), которые химически определяются как сложные эфиры глицерина и жирных кислот, масляные тельца включают фосфолипиды и целый ряд связанных протеинов, в общем называемых протеинами масляных телец. Со структурной точки зрения масляные тельца рассматриваются как трглицеридная матрица, окруженная монослоем фосфолипидов, в который включены протеины масляных телец (Huang 1992, Ann. Rev. Plant. Mol. Biol., 43, 177-200). Растительные масла, присутствующие во фракции масляных телец этих видов растений, являются смесью различных триглицеридов, точный состав которых зависит от вида растения, из которого получено масло. Путем комбинации классических методов скрещивания и генной инженерии стало возможным управлять масляным составом семян и расширить доступный набор составов растительного масла. Обзор современных усилий в этой области можно найти в книге Designer Oil Crops/Breeding, Processing and Biotechnology, D.J. Murphy Ed., 1994, VCH Verlagsgesellschaft, Weinheim, Germany. In oilseeds, which include economically important crops such as soybeans, rape, sunflower and palm trees, the water-insoluble oil component is found in discrete subcellular structures, differently referred to in the literature as oil bodies, oleosomes, lipid bodies or spherosomes (Huang 1992, Ann. Rev. Plant. Mol. Biol., 43-177-200). In addition to a mixture of oils (triglycerides), which are chemically defined as glycerol and fatty acid esters, oil bodies include phospholipids and a number of related proteins, commonly referred to as oil body proteins. From a structural point of view, oil bodies are regarded as a triglyceride matrix surrounded by a monolayer of phospholipids, which includes oil body proteins (Huang 1992, Ann. Rev. Plant. Mol. Biol., 43, 177-200). The vegetable oils present in the oil body fraction of these plant species are a mixture of various triglycerides, the exact composition of which depends on the type of plant from which the oil is derived. By combining classical methods of crossbreeding and genetic engineering, it became possible to control the oil composition of the seeds and expand the available set of compositions of vegetable oil. An overview of current efforts in this area can be found in Designer Oil Crops / Breeding, Processing and Biotechnology, D.J. Murphy Ed., 1994, VCH Verlagsgesellschaft, Weinheim, Germany.

Масла из семян растений используются в различных промышленных целях, в особенности в производстве продуктов питания, детергентов и косметики. Для того чтобы получить растительные масла, используемые в этих целях, семена размалывают или отжимают и затем рафинируют, используя такие способы, как органическую экстракцию, обессмоливание, нейтрализацию, осветление и фильтрацию. Описана также водная экстракция масличных семян (например, Embong and Jelen, 1977, Can.Inst.Food Sci. Technol. J. 10: 239-243). Поскольку целью этих способов согласно предшествующей практике является получение чистого масла, масляные тельца в ходе этих производственных процессов теряют свою целостность. Таким образом, ранее известные эмульсии, получаемые из растительных масел, в общем случае не содержат целых масляных телец. Oils from plant seeds are used for various industrial purposes, especially in the production of food products, detergents and cosmetics. In order to obtain the vegetable oils used for this purpose, the seeds are ground or squeezed and then refined using methods such as organic extraction, resin reduction, neutralization, clarification and filtration. Water extraction of oilseeds has also been described (e.g., Embong and Jelen, 1977, Can. Inst. Food Sci. Technol. J. 10: 239-243). Since the purpose of these methods according to previous practice is to obtain pure oil, oil bodies during their production processes lose their integrity. Thus, previously known emulsions derived from vegetable oils generally do not contain whole oil bodies.

Хотя существует много областей, где продукты на основе минеральных масел господствуют на рынке в других областях применения, масла, полученные из растительных источников и ископаемых источников, составляют им прямую конкуренцию. Лауриловые масла, например, получают из минерального масла, а также из кокосового масла и совсем недавно из семян рапса, полученного генной инженерией (Knauf V.C., 1994, Fat Sci. Techn., 96: 408). Однако существует текущая и возрастающая потребность в биоразлагаемых источниках сырья. Although there are many areas where mineral-based products dominate the market in other applications, oils derived from plant sources and fossil sources are in direct competition with them. Lauryl oils, for example, are derived from mineral oil as well as coconut oil and more recently from rapeseed obtained by genetic engineering (Knauf V.C., 1994, Fat Sci. Techn., 96: 408). However, there is an ongoing and increasing need for biodegradable sources of raw materials.

Эмульсии на основе масляных телец растений по настоящему изобретению обладают тем преимуществом по сравнению с композициями на основе минеральных масел, что их получают из возобновляемого и дружественного к окружающей среде источника. Патенты США 5683710 и 5613583 описывают эмульсии, включающие липидные пузырьки из масличных растений. Описанные в этих патентах эмульсии приготавливают из относительно сырых экстрактов семян и содержат многочисленные компоненты семян, включая гликозилированные и негликозилированные протеины. Недостатком эмульсий, к которым относятся эти патенты является то, что они включают загрязняющие семена компоненты, придающие эмульсиям множество нежелательных свойств, которые могут включать аллергенность и нежелательные запах, вкус, цвет и органолептические характеристики. Из-за присутствия таких загрязнений препараты липидных пузырьков, описанные в этих патентах, имеют ограниченное применение. Plant oil body emulsions of the present invention have the advantage over mineral oil compositions in that they are obtained from a renewable and environmentally friendly source. US patents 5683710 and 5613583 describe emulsions, including lipid vesicles from oil plants. The emulsions described in these patents are prepared from relatively crude seed extracts and contain numerous seed components, including glycosylated and non-glycosylated proteins. The disadvantage of the emulsions to which these patents relate is that they include seed contaminants that give the emulsions many undesirable properties, which may include allergenicity and undesirable odor, taste, color and organoleptic characteristics. Due to the presence of such contaminants, the lipid vesicle preparations described in these patents have limited use.

Настоящее изобретение относится к новым рецептурам эмульсий, которые содержат масляные тельца. Эмульсионные рецептуры, являющиеся предметом изобретения, могут быть получены в нетоксичных и пригодных для пищевых продуктов формах. Кроме того, эмульсионные рецептуры успешно готовятся из препаратов масляных телец, которые кремообразны по текстуре и поэтому могут быть легко применены для множества бытовых и промышленных целей. Обнаружено, что фракции масляных телец живых клеток полезны для приготовления множества новых основанных на эмульсиях пищевых, косметических, фармацевтических и промышленных продуктов. В общем виде, настоящее изобретение предлагает эмульсионную рецептуру, включающую промытые масляные тельца, полученные из клетки. The present invention relates to new formulations of emulsions that contain oil bodies. The emulsion formulations of the invention can be prepared in non-toxic and edible forms. In addition, emulsion formulations are successfully prepared from oil body preparations, which are creamy in texture and therefore can be easily applied for many domestic and industrial purposes. It has been found that fractions of oily bodies of living cells are useful for the preparation of many new emulsion-based food, cosmetic, pharmaceutical and industrial products. In general terms, the present invention provides an emulsion formulation comprising washed oil bodies obtained from a cell.

Изобретение также предлагает способы получения эмульсионных рецептур и применение эмульсионных рецептур в различных бытовых и промышленных композициях. The invention also provides methods for preparing emulsion formulations and the use of emulsion formulations in various household and industrial compositions.

Соответственно настоящее изобретение предлагает способ приготовления эмульсионных рецептур, включающий: 1) получение масляных телец из клетки; 2) промывку масляных телец; 3) превращение промытых масляных телец в эмульсию. Accordingly, the present invention provides a method for preparing emulsion formulations, comprising: 1) obtaining oil bodies from a cell; 2) washing the oil bodies; 3) the conversion of washed oil bodies into an emulsion.

В предпочтительном варианте осуществления препарат промытых масляных телец получают из семян растений, включающих рапс, соевые бобы, кукурузу и подсолнечник. Соответственно изобретение предлагает способ приготовления эмульсионных рецептур из семян растений, предусматривающий
(a) размол семян растений;
(b) удаление твердых веществ из размолотых семян;
(c) отделение фазы масляных телец от водной фазы;
(d) промывку фазы масляных телец для получения препарата промытых масляных телец;
(e) превращение препарата промытых масляных телец в эмульсию.
In a preferred embodiment, the washed oil body preparation is obtained from plant seeds, including rapeseed, soybeans, corn, and sunflower. Accordingly, the invention provides a method for preparing emulsion formulations from plant seeds, comprising
(a) grinding of plant seeds;
(b) removing solids from crushed seeds;
(c) separating the oil body phase from the aqueous phase;
(d) washing the oil body phase to obtain a washed oil body preparation;
(e) converting the washed oil body preparation to an emulsion.

В предпочтительном выполнении изобретения жидкую фазу добавляют к семенам перед или вслед за размолом семян. In a preferred embodiment of the invention, the liquid phase is added to the seeds before or after the grinding of the seeds.

В еще одном предпочтительном варианте изобретения получение эмульсии (е) включает добавление жидкой фазы к препарату промытых масляных телец. In yet another preferred embodiment of the invention, the preparation of emulsion (e) comprises adding a liquid phase to a washed oil body preparation.

Эмульсии по изобретению могут использоваться для разнообразных целей, включая приготовление пищи и пищевых продуктов, фармацевтических продуктов, средств личной гигиены и промышленных продуктов. Эмульсионная рецептура по изобретению особенно подходит для приготовления пищевых продуктов, поскольку она нетоксична, кремообразна по текстуре и биоразлагаема. The emulsions of the invention can be used for a variety of purposes, including cooking and food products, pharmaceutical products, personal care products, and industrial products. The emulsion formulation of the invention is particularly suitable for the preparation of food products since it is non-toxic, creamy in texture and biodegradable.

Дополнительные задачи, преимущества и характеристики настоящего изобретения будут понятны после рассмотрения сопровождающих иллюстраций и последующего подробного описания изобретения. Additional objects, advantages, and characteristics of the present invention will become apparent after consideration of the accompanying illustrations and the following detailed description of the invention.

На фиг. 1 представлен окрашенный бриллиантовым голубым гель препарата промытых масляных телец из семян белой горчицы, рапса (Brassica napus), соевых бобов, земляного ореха тыквы, льна, подсолнечника, сафлора и кукурузы. In FIG. 1 shows a blue-colored gel gel preparation of washed oil bodies from seeds of white mustard, rapeseed (Brassica napus), soybeans, pumpkin, flax, sunflower, safflower and corn.

На фиг. 2А-2С изображены окрашенные бриллиантовым голубым гели, показывающие профили протеинов из фракций различных семян, полученных из Brassica napus (канола) (А), подсолнечника (В) и кукурузы (С). Гели показывают следующие фракции: (1) общий протеин зерна (ОПЗ), (2) декантированная жидкая фаза (ДЖ), (3) непромытые масляные тельца (ЛФ1), (4) три промывки водой (ЛФ4), (5) четыре промывки водой и одна промывка 100 мМ Na2СО3 (промытый).In FIG. 2A-2C depict brilliant blue stained gels showing protein profiles from fractions of various seeds obtained from Brassica napus (canola) (A), sunflower (B), and corn (C). The gels show the following fractions: (1) total grain protein (SCR), (2) decanted liquid phase (J), (3) non-washed oil bodies (LF1), (4) three washes with water (LF4), (5) four washes water and one washing with 100 mm Na 2 CO 3 (washed).

Как упомянуто выше, настоящее изобретение относится к эмульсионным композициям, включающим масляные тельца (включения), полученные из клеток. Один из объектов изобретения предлагает эмульсионную композицию, содержащую промытые масляные тельца. As mentioned above, the present invention relates to emulsion compositions comprising oil bodies (inclusions) derived from cells. One of the objects of the invention provides an emulsion composition containing washed oil bodies.

Другой объект изобретения предлагает способ получения эмульсионной рецептуры, предусматривающий: 1) получение масляных телец из клетки; 2) промывку масляных телец; 3) превращение промытых масляных телец в эмульсию. Another object of the invention provides a method for producing an emulsion formulation, comprising: 1) obtaining oil bodies from a cell; 2) washing the oil bodies; 3) the conversion of washed oil bodies into an emulsion.

Клетка может быть любой клеткой, содержащей масляные тельца (или подобные масляным тельцам структуры), включая клетки растений, животных, грибов и бактерий. В предпочтительном варианте масляные тельца получают из клеток растений. Масляные тельца можно получать из клеток растений путем разрушения мембран и стенок клеток, используя любой способ, высвобождающий компоненты клеток без существенного нарушения структурной целостности масляных телец. Предпочтительно масляные тельца получают из семян растений. Соответственно настоящее изобретение предлагает способ получения эмульсионной рецептуры, предусматривающий:
(1) получение масляных телец из семян растений способом, который включает:
(a) размол семян растений;
(b) удаление твердых веществ из размолотых семян;
(c) отделение фазы масляных телец от водной фазы;
(2) промывку фазы масляных телец с получением препарата промытых масляных телец, содержащего целые масляные тельца приблизительно одинаковых размера, формы и плотности;
(3) превращение препарата промытых масляных телец в эмульсию.
A cell may be any cell containing oil bodies (or oil-body-like structures), including cells of plants, animals, fungi, and bacteria. In a preferred embodiment, oil bodies are derived from plant cells. Oil bodies can be obtained from plant cells by breaking membranes and cell walls using any method that releases cell components without significantly compromising the structural integrity of the oil bodies. Preferably, the oil bodies are obtained from plant seeds. Accordingly, the present invention provides a method for preparing an emulsion formulation, comprising:
(1) obtaining oil bodies from plant seeds in a manner that includes:
(a) grinding of plant seeds;
(b) removing solids from crushed seeds;
(c) separating the oil body phase from the aqueous phase;
(2) washing the oil body phase to form a washed oil body preparation containing whole oil bodies of approximately the same size, shape and density;
(3) the conversion of the washed oil body preparation to an emulsion.

В предпочтительном варианте изобретения жидкую фазу добавляют к семенам до или после размола. In a preferred embodiment, the liquid phase is added to the seeds before or after grinding.

В еще одном предпочтительном варианте образование эмульсии (е) включает добавление жидкой фазы к препарату промытых масляных телец. In a further preferred embodiment, the formation of emulsion (e) comprises adding a liquid phase to the washed oil body preparation.

Термин "размол", как он использован здесь, означает размол жерновами, дроблением, раздавливанием или разрезанием семян и эти термины могут быть использованы взаимозаменяемо по всей заявке. Во время этого процесса клетки семян раскрываются. The term "grinding", as used here, means grinding with millstones, crushing, crushing or cutting seeds, and these terms can be used interchangeably throughout the application. During this process, the seed cells open.

Термин "твердые вещества", как он использован здесь, означает любой материал, который нерастворим в водной фазе или в фазе масляных телец, такой как оболочки семян. The term "solids", as used here, means any material that is insoluble in the aqueous phase or in the phase of the oil bodies, such as seed coat.

Термин "промывка масляных телец", как он использован здесь, означает любой процесс, который удаляет клеточные примеси из фазы масляных телец, в частности любую примесь, которая придает нежелательные свойства эмульсионной композиции, такие как аллергенные свойства, нежелательный цвет, запах, вкус или органолептические характеристики, или любое другое нежелательное свойство. Примеры способов промывки включают методы, основанные на гравитации, такие как центрифугирование, и методы, основанные на исключении по размерам, такие как мембранная ультрафильтрация и микрофильтрация в перекрестном потоке. Способы и условия промывки выбирают в соответствии с желаемой чистотой препарата масляных телец. The term “oil body wash” as used herein means any process that removes cellular impurities from the oil body phase, in particular any impurity that imparts undesirable properties of the emulsion composition, such as allergenic properties, undesirable color, smell, taste or organoleptic characteristics, or any other undesirable property. Examples of washing methods include gravity based methods such as centrifugation and size exclusion based methods such as membrane ultrafiltration and cross-flow microfiltration. The washing methods and conditions are selected in accordance with the desired purity of the oil body preparation.

Термин "препарат промытых масляных телец", как он использован здесь, означает препарат масляных телец, из которого удалено значительное количество клеточного материала, включая загрязнения, которые придают нежелательные свойства эмульсионной композиции, такие как аллергенные свойства, нежелательный цвет, запах, вкус или органолептические характеристики, или любое другое нежелательное свойство. Предпочтительно препарат промытых масляных телец содержит менее 10% других протеинов семян. The term “washed oil body preparation,” as used herein, means an oil body preparation from which a significant amount of cellular material has been removed, including contaminants that impart undesirable properties to the emulsion composition, such as allergenic properties, undesirable color, smell, taste, or organoleptic characteristics , or any other undesirable property. Preferably, the washed oil body preparation contains less than 10% of other seed proteins.

Под "превращением масляных телец в эмульсию" понимается, что препарат промытых масляных телец перемешивают или гомогенизируют, если необходимо, до тех пор, пока не образуется эмульсия. В предпочтительном варианте добавляют дополнительный ингредиент, такой как жидкая фаза и препарат промытых масляных телец, и жидкую фазу перемешивают до тех пор, пока не получат гомогенную смесь. By "converting the oil bodies to an emulsion" is meant that the preparation of the washed oil bodies is mixed or homogenized, if necessary, until an emulsion is formed. In a preferred embodiment, an additional ingredient is added, such as the liquid phase and the washed oil body preparation, and the liquid phase is mixed until a homogeneous mixture is obtained.

Препараты промытых масляных телец особенно подходят для образования эмульсий благодаря их благоприятным свойствам, перечисленным ниже. The washed oil body preparations are particularly suitable for emulsion formation due to their favorable properties listed below.

Свойства масляных телец
Эмульсионные рецептуры по изобретению включают целые промытые масляные тельца приблизительно одинаковых размера, формы и плотности. При изучении под микроскопом видно, что масляные тельца являются структурами более или менее сферической формы (см. Murphy D.J. and Cummins I., 1989, Phytochemistry, 28: 2063-2069; Jacks T.J. et al., 1990, JAOCS, 67: 353-361). Типичные размеры масляных телец колеблются между 0,4 и 1,5 мкм (Murphy D.J. and Cummins I. , 1989, Phytochemistry, 28: 2063-2069). При анализе с использованием Malvern Size Analyzer было найдено, что масляные тельца в препарате промытых масляных телец, выделенном из рапса, были симметрично и единообразно распределены вокруг размера 1 мкм. Используя Malvern Size Analyzer, можно четко отличить препарат промытых масляных телец от имеющихся в продаже эмульсий масло-в-воде, включая соевое молоко, майонез (Kraft Real Mayonnaise) и двух рецептур кокосового молока (Tosca, Aroy-D).
Properties of oil bodies
The emulsion formulations of the invention include whole washed oil bodies of approximately the same size, shape and density. When examined under a microscope, it is seen that oil bodies are structures of a more or less spherical shape (see Murphy DJ and Cummins I., 1989, Phytochemistry, 28: 2063-2069; Jacks TJ et al., 1990, JAOCS, 67: 353- 361). Typical sizes of oil bodies vary between 0.4 and 1.5 microns (Murphy DJ and Cummins I., 1989, Phytochemistry, 28: 2063-2069). In an analysis using the Malvern Size Analyzer, it was found that the oil bodies in the washed oil body preparation isolated from rapeseed were symmetrically and uniformly distributed around a 1 μm size. Using the Malvern Size Analyzer, you can clearly distinguish the washed oil body preparation from commercially available oil-in-water emulsions, including soy milk, mayonnaise (Kraft Real Mayonnaise) and two coconut milk recipes (Tosca, Aroy-D).

Точные размер и плотность масляных телец зависят по меньшей мере частично, от конкретного соотношения протеин/фосфолипид/триглицерид, которое имеется в наличии. Приготовление промытых масляных телец по изобретению не приводит к существенному изменению формы масляных телец по сравнению с тельцами, присутствовавшими в целом семени, если рассматривать их под электронным микроскопом. The exact size and density of the oil bodies depends at least in part on the specific protein / phospholipid / triglyceride ratio that is available. The preparation of the washed oil bodies according to the invention does not lead to a significant change in the shape of the oil bodies as compared to the bodies present in the whole seed when viewed under an electron microscope.

После раскрытия клетки, содержащей масляные тельца, фракция масляных телец может быть быстро и просто отделена от водных растворов, поскольку в водных растворах фракция масляных телец всплывает после приложения центробежной силы. В растворах, где плотность фракции масляных телец выше плотности растворителя, такого как 95%-ный этанол, масляные тельца осядут при тех же условиях. Фракция масляных телец может быть также отделена от водной фракции способами разделения, основанными на исключении по размеру, такими как мембранная фильтрация, преимуществом чего может быть возможность получения более однородных размеров масляных телец. After the cell containing the oil bodies is opened, the oil body fraction can be quickly and easily separated from the aqueous solutions, since in the aqueous solutions the oil body fraction floats up after the application of centrifugal force. In solutions where the density of the oil body fraction is higher than the density of a solvent such as 95% ethanol, the oil bodies will settle under the same conditions. The oil body fraction can also be separated from the aqueous fraction by separation methods based on size exclusion, such as membrane filtration, the advantage of which may be the possibility of obtaining more uniform oil body sizes.

Масляные тельца, присутствующие в препаратах промытых масляных телец по изобретению, являются устойчивыми к воздействию сильных кислот и оснований, включая продолжительную выдержку в кислых условиях при рН, по меньшей мере столь низком, как рН 2, и при щелочных условиях при рН, по меньшей мере столько высоком, как рН 10. При выдержке при рН 12 наблюдается небольшая потеря масла, что указывает на потерю целостности структуры масляных телец. Кроме того, экстракция различными органическими растворителями, включая метанол, этанол, гексан, изопропиловый спирт и этилацетат, не нарушает или лишь слегка нарушает целостность структуры масляных телец. Было также найдено, что масляные тельца, присутствующие в препаратах промытых масляных телец, выдерживают смешивание с анионным детергентом, додецилсульфатом натрия (SDS), с катионным детергентом, гексадецилтриметилбромидом, и с Твин-80, неионным детергентом. Обнаружено, что кипячение препарата промытых масляных телец в присутствии SDS приводит по меньшей мере частично к дезинтеграции структуры масляных телец. Масляные тельца, присутствующие в препарате промытых масляных телец, остаются стабильными при выдержке в течение 2 часов при по меньшей мере 100oС. Медленное замораживание и плавление препаратов промытых масляных телец приводит к изменению их физического внешнего вида, характеризующемуся образованием комков в противоположность гомогенной эмульсии. Комкование масляных телец после замораживания-плавления может быть также в значительной степени предотвращено либо а) быстрым замораживанием в жидком азоте вместо медленного замораживания при -20oС, либо b) добавлением глицерина в 5%-ном (об./об.) избытке к препарату масляных телец перед замораживанием. Устойчивость к сравнительно жестким химическим и физическим условиям является уникальной характеристикой масляных телец, содержащихся в препарате промытых масляных телец по изобретению.The oil bodies present in the washed oil body preparations of the invention are resistant to strong acids and bases, including prolonged exposure to acidic conditions at a pH of at least as low as pH 2 and under alkaline conditions at a pH of at least as high as pH 10. When exposed to a pH of 12, there is a slight loss of oil, which indicates a loss of structural integrity of the oil bodies. In addition, extraction with various organic solvents, including methanol, ethanol, hexane, isopropyl alcohol and ethyl acetate, does not violate or only slightly violates the structural integrity of the oil bodies. It was also found that the oil bodies present in the washed oil body preparations can withstand mixing with anionic detergent, sodium dodecyl sulfate (SDS), cationic detergent, hexadecyl trimethyl bromide, and Tween-80, a non-ionic detergent. It has been found that boiling the washed oil body preparation in the presence of SDS leads to at least partially disintegrating the oil body structure. The oil bodies present in the washed oil body preparation remain stable for 2 hours at a temperature of at least 100 ° C. Slow freezing and melting of the washed oil body preparations leads to a change in their physical appearance, characterized by the formation of lumps as opposed to a homogeneous emulsion. The clumping of oil bodies after freezing-melting can also be largely prevented by either a) rapid freezing in liquid nitrogen instead of slow freezing at -20 o C, or b) adding glycerol in a 5% (v / v) excess to oil body preparation before freezing. Resistance to relatively harsh chemical and physical conditions is a unique characteristic of the oil bodies contained in the washed oil body preparation of the invention.

Настоящее изобретение предлагает эмульсионные рецептуры, включающие масляные тельца, из которых удалено значительное количество зерновых примесей. Такие примеси включают протеины летучие и другие соединения, которые могут внести нежелательный цвет, запах, вкус, органолептические характеристики и другие нежелательные свойства. Сообщалось, что многие зерновые протеины вызывают аллергические реакции. Например, Ogawa et al. (1993, Biosci. Biotechnol. Biochem. , 57: 1030-1033) сообщили об аллергенности гликопротеина сои Р34 (иначе называемого Gly m Bd 30К). Сообщалось также об аллергических реакциях на протеины семян рапса, пшеницы и ячменя (Armentia et al., 1993, Clin. Exp. Allergy, 23: 410-415, Monslave et al., 1993, Clin. Exp. Allergy, 27: 833-841). Поэтому удаление загрязняющих препарат протеинов является благоприятным. Условия промывки могут быть выбраны так, чтобы получить практически чистый препарат промытых масляных телец. В этом случае в препарате присутствуют практически только протеины масляных телец. The present invention provides emulsion formulations comprising oil bodies, from which a significant amount of grain impurities has been removed. Such impurities include volatile proteins and other compounds that may contribute an undesirable color, smell, taste, organoleptic characteristics and other undesirable properties. Many cereal proteins have been reported to cause allergic reactions. For example, Ogawa et al. (1993, Biosci. Biotechnol. Biochem., 57: 1030-1033) reported the allergenicity of soybean glycoprotein P34 (otherwise called Gly m Bd 30K). Allergic reactions to rapeseed, wheat, and barley seed proteins have also been reported (Armentia et al., 1993, Clin. Exp. Allergy, 23: 410-415; Monslave et al., 1993, Clin. Exp. Allergy, 27: 833- 841). Therefore, the removal of contaminating drug proteins is favorable. Washing conditions can be selected so as to obtain a substantially pure preparation of washed oil bodies. In this case, practically only oil body proteins are present in the preparation.

Для многих применений считается также, что чем чище полученный препарат масляных телец, тем он лучше, так как это позволяет лучше управлять процессом приготовления конечной эмульсии. Для того чтобы препарат промытых масляных телец был включен в различный набор эмульсий, желательно, чтобы летучие вещества были сведены к минимуму и чтобы цвет был предпочтительно светлым или белым. Промывка препарата промытых масляных телец дает более светлый препарат. Кроме того, промывкой удаляются соединения, которые ускоряют рост микроорганизмов, так как было установлено, что препарат промытых масляных телец имеет более продолжительный срок хранения, чем непромытый препарат. Другие соединения, которые удаляются промывкой, включают непитательные глюкозинилаты и/или продукты их распада и волокнистый материал. Обнаружено, что при тепловой обработке при 60 или 80oС большие количества воды остаются поглощенными препаратом промытых масляных телец по сравнению с непромытым препаратом. После охлаждения до комнатной температуры и центрифугирования наблюдали, что препарат промытых масляных телец остается стабильным, тогда как в непромытом препарате происходит разделение фаз. Благодаря улучшенной стабильности промытых масляных телец они предпочтительны там, где процесс приготовления включает нагревание. При нагреве до 40oС препарат промытых масляных телец способен поглотить большее количество введенной извне воды, не приводя к разделению фаз. Таким образом, при образовании водных эмульсий предпочтительны промытые масляные тельца. Сравнивалась также способность препарата промытых масляных телец и непромытого препарата абсорбировать введенное извне масло. К препарату промытых масляных телец можно добавить большее количество масла прежде, чем образуется нестабильная эмульсия. Это является преимуществом в тех рецептурах, где в процесс вводятся извне масла или воски, как в случае производства смазочных веществ или косметики. При сравнении вязкости препарата промытых масляных телец и непромытого препарата было обнаружено, что препарат промытых масляных телец является более вязким. Более вязкий препарат масляных телец является желательным, так как это устраняет необходимость добавления загустителей в процесс образования.For many applications, it is also believed that the cleaner the oil body preparation obtained, the better it is, since this allows you to better control the preparation of the final emulsion. In order for the washed oil body preparation to be included in a different set of emulsions, it is desirable that the volatiles are minimized and that the color is preferably light or white. Washing the preparation with washed oil bodies gives a lighter preparation. In addition, washing removes compounds that accelerate the growth of microorganisms, since it was found that the preparation of the washed oil bodies has a longer shelf life than the unwashed preparation. Other compounds that are removed by washing include non-nutritive glucosinylates and / or their degradation products and fibrous material. It was found that during heat treatment at 60 or 80 o With large amounts of water remain absorbed by the preparation of washed oil bodies in comparison with the non-washed preparation. After cooling to room temperature and centrifugation, it was observed that the preparation of the washed oil bodies remained stable, while phase separation occurred in the non-washed preparation. Due to the improved stability of the washed oil bodies, they are preferred where the cooking process involves heating. When heated to 40 o With the preparation of washed oil bodies can absorb a larger amount of water introduced from the outside, without leading to phase separation. Thus, in the formation of aqueous emulsions, washed oil bodies are preferred. The ability of a washed oil body and an unwashed preparation to absorb externally administered oil was also compared. A larger amount of oil can be added to the washed oil body preparation before an unstable emulsion forms. This is an advantage in those formulations where oils or waxes are introduced into the process from the outside, as in the case of the production of lubricants or cosmetics. When comparing the viscosity of the washed oil body preparation and the unwashed preparation, it was found that the washed oil body preparation is more viscous. A more viscous oil body preparation is desirable as this eliminates the need to add thickeners to the formation process.

Таким образом, предлагаемый препарат промытых масляных телец превосходит непромытый препарат во многих отношениях. Препарат промытых масляных телец по изобретению является лучше определяемым препаратом с более длительным сроком хранения и более предпочтительным цветом, запахом и вязкостью. Препарат промытых масляных телец также имеет превосходящие свойства водной и масляной абсорбции. Наконец, благодаря удалению существенного количества протеинов зерна маловероятно появление аллергических реакций. Эти свойства позволяют использовать препарат промытых масляных телец для многих бытовых и промышленных эмульсий. Thus, the proposed preparation of washed oil bodies is superior to the unwashed preparation in many ways. The washed oil body preparation of the invention is a better defined preparation with a longer shelf life and more preferred color, smell and viscosity. The washed oil body preparation also has superior water and oil absorption properties. Finally, due to the removal of a significant amount of grain proteins, allergic reactions are unlikely. These properties make it possible to use the preparation of washed oil bodies for many household and industrial emulsions.

Вышеприведенные наблюдения были сделаны при использовании промытого и непромытого препаратов масляных телец, полученных из рапса и приготовленных, как подробно описано в примере 2. Есть основания считать, что устойчивость при сравнительно жестких химических и физических условиях будет характерной для масляных телец, присутствующих в препарате промытых масляных телец по изобретению, независимо от источника масляных телец. Однако является вероятным, что одно или несколько из описанных здесь выше свойств для масляных телец рапса будет некоторым образом варьироваться в зависимости от клеток, из которых получен препарат промытых масляных телец. Тем не менее следует ясно понимать, что предметом изобретения является препарат масляных телец, который может быть получен из любых клеток, включающих масляные тельца. The above observations were made using washed and unwashed oil body preparations obtained from rapeseed and prepared as described in detail in Example 2. There is reason to believe that stability under relatively harsh chemical and physical conditions will be characteristic of oil bodies present in the washed oil preparation Taurus according to the invention, regardless of the source of the oil bodies. However, it is likely that one or more of the properties described above for rapeseed oil bodies will vary in some way depending on the cells from which the washed oil body preparation was obtained. Nevertheless, it should be clearly understood that the subject of the invention is an oil body preparation, which can be obtained from any cells including oil bodies.

В варианте изобретения масляные тельца получают из семян растений. Присутствие целых масляных телец в эмульсии и описанные характеристики этих масляных телец четко отличают эмульсионную композицию, являющуюся предметом изобретения, от других материалов, которые могут быть получены из семян растений. In an embodiment of the invention, oil bodies are obtained from plant seeds. The presence of whole oil bodies in the emulsion and the described characteristics of these oil bodies clearly distinguish the emulsion composition of the invention from other materials that can be obtained from plant seeds.

Источники и получение масляных телец
Препарат промытых масляных телец по изобретению может быть получен из любых клеток, содержащих масляные тельца, или подобных масляным тельцам органелл. Эти источники включают клетки животных, клетки растений, клетки грибов, клетки дрожжей (Leber R. et al., 1994, Yeast 10: 1421-1428), бактериальные клетки (Pieper-Furst et al., 1994, J. Bacterol., 176: 4328-4337) и клетки водорослей (Rossler P.G., 1988, J.Physiol. (London), 24: 394-400). В предпочтительном варианте изобретения масляные тельца получают из клеток растений, включая клетки пыльцы, спор, семян или вегетативных органов растений (Huang, 1992, Ann. Rev. Plant Physiol., 43: 177-200). Более предпочтительно, препарат промытых масляных телец по изобретению получают из семян растений и наиболее предпочтительно из группы растений, включающей рапс (Brassica spp.), сою (Glycine max.), подсолнечник (Helianthus annuus), масличную пальму (Elaesis guineeis), хлопок (Gossypium spp.), земляной орех (Arachis hypogaea), кокосовый орех (Cocus nucifera), касторку (Ricinus communis), сафлор (Carthamus tinctonus), горчицу (Brassica spp. и Sinapsis alba), кориандр (Coriandrum sativum), тыкву (Cucurbita maxima), лен (Linum usitatissimum), бразильский орех (Bertholletia excela), жожоба (Simmondsia chinensis) и кукурузу (Zea mays). Растения выращивают и у них собирают семена, используя методы ведения сельского хозяйства, хорошо известные специалистам. После сбора урожая зерна и, если желательно, удаления такого материала, как камешки или оболочки семян, например, просеиванием или промывкой и необязательно сушки семян, семена последовательно подвергают механическому отжиму, размолу или измельчению. В предпочтительном осуществлении перед размолом семян добавляют жидкую фазу. Это известно как мокрый размол. Предпочтительно жидкостью является вода, хотя могут также использоваться органические растворители, такие как этанол. Об использовании влажного размола в процессах извлечения масла сообщалось для многих видов растений, включая горчицу (Aguilar et al. , 1990, Journal of Texture Studies 22: 59-84), сою (патент США 3971856, Carter et al., 1974, J.Am. Oil Chem. Soc., 51: 137-141), земляной орех (патент США 4025658; патент США 4362759), семена хлопка (Lawhon et al. , 1977, J.Am. Oil Chem. Soc., 63: 533-534) и кокосовый орех (Kumar et al. , 1995, INFORM 6 (II): 1217-1240). Может также быть выгодно пропитывать семена жидкой фазой в течение периода от пятнадцати минут до примерно двух суток перед размолом. Пропитка может размягчить стенки клеток и облегчить процесс размола. Пропитка в течение более длительного периода времени может имитировать процесс проращивания и привести к некоторым благоприятным изменениям содержания компонентов зерна. В другом варианте жидкую фазу добавляют после размола семян. Это известно как сухой размол. Предпочтительно добавляемой жидкой фазой является вода.
Sources and production of oil bodies
The washed oil body preparation of the invention can be obtained from any cells containing oil bodies or similar to oil bodies of organelles. These sources include animal cells, plant cells, fungal cells, yeast cells (Leber R. et al., 1994, Yeast 10: 1421-1428), bacterial cells (Pieper-Furst et al., 1994, J. Bacterol., 176 : 4328-4337) and algae cells (Rossler PG, 1988, J.Physiol. (London), 24: 394-400). In a preferred embodiment, the oil bodies are derived from plant cells, including pollen, spore, seed or vegetative organ cells (Huang, 1992, Ann. Rev. Plant Physiol., 43: 177-200). More preferably, the washed oil body preparation preparation of the invention is derived from plant seeds and most preferably from a group of plants including rapeseed (Brassica spp.), Soybean (Glycine max.), Sunflower (Helianthus annuus), oil palm (Elaesis guineeis), cotton ( Gossypium spp.), Peanut (Arachis hypogaea), coconut (Cocus nucifera), castor (Ricinus communis), safflower (Carthamus tinctonus), mustard (Brassica spp. And Sinapsis alba), coriander (Coriandrum sativumbit), pumpkin maxima), flax (Linum usitatissimum), Brazil nut (Bertholletia excela), jojoba (Simmondsia chinensis) and corn (Zea mays). Plants are grown and seeds are harvested using agricultural methods well known to specialists. After harvesting the grain and, if desired, removing material such as pebbles or shells of seeds, for example by sieving or washing and optionally drying the seeds, the seeds are subsequently subjected to mechanical extraction, grinding or grinding. In a preferred embodiment, a liquid phase is added before grinding the seeds. This is known as wet grinding. Preferably, the liquid is water, although organic solvents such as ethanol may also be used. The use of wet grinding in oil extraction processes has been reported for many plant species, including mustard (Aguilar et al., 1990, Journal of Texture Studies 22: 59-84), soybeans (US patent 3971856, Carter et al., 1974, J. Am. Oil Chem. Soc., 51: 137-141), peanuts (US Pat. No. 4,025,658; US Pat. No. 4,362,759), cotton seeds (Lawhon et al., 1977, J. Am. Oil Chem. Soc., 63: 533 -534) and coconut (Kumar et al., 1995, INFORM 6 (II): 1217-1240). It may also be advantageous to soak the seeds in a liquid phase for a period of from fifteen minutes to about two days before grinding. Impregnation can soften the walls of cells and facilitate the grinding process. Impregnation over a longer period of time can mimic the germination process and lead to some favorable changes in the content of grain components. In another embodiment, the liquid phase is added after grinding the seeds. This is known as dry grinding. Preferably, the added liquid phase is water.

Семена предпочтительно размалывают на коллоидной мельнице, такой как MZ130 (Fryma Inc). Кроме коллоидных мельниц в описываемом здесь изобретении может быть применено другое оборудование для размола и измельчения, пригодное для переработки промышленных количеств зерна, включая плющильные вальцы, дисковые мельницы, коллоидные мельницы, стержневые мельницы, жерновые мельницы, мельницы IKA и промышленные гомогенизаторы. Выбор мельницы может зависеть от требований к производительности по зерну, а также от источника зерна, который используется. Критически важным является то, чтобы масляные тельца зерна оставались неповрежденными во время размола. Поэтому любые рабочие условия, обычно применяемые при переработке масличных семян, ведущие к повреждению масляных телец, непригодны для использования в процессе по изобретению. Температура размола предпочтительно составляет 10-90oС и более предпочтительно 26-30oС, тогда как рН предпочтительно поддерживают между 2,0 и 10.The seeds are preferably milled in a colloid mill, such as MZ130 (Fryma Inc). In addition to colloid mills, other milling and grinding equipment suitable for processing industrial quantities of grain can be used in the invention described herein, including flattening rollers, disk mills, colloid mills, core mills, millstones, IKA mills and industrial homogenizers. The choice of a mill may depend on the requirements for grain productivity, as well as the source of grain that is used. It is critical that the oil bodies of the grain remain intact during grinding. Therefore, any operating conditions commonly used in the processing of oilseeds, leading to damage to the oil bodies, are unsuitable for use in the process according to the invention. The grinding temperature is preferably 10-90 ° C and more preferably 26-30 ° C, while the pH is preferably maintained between 2.0 and 10.

Твердые примеси, такие как оболочки зерна, волокнистый материал, нерастворенные карбогидраты, протеины и другие нерастворимые примеси, удаляют из фракции размолотого зерна. Отделение твердых примесей может быть выполнено при использовании отстойных центрифуг, таких как двухфазная отстойная центрифуга HASCO 200 или NX310B (Alpha Laval). Solid impurities, such as grain shells, fibrous material, insoluble carbohydrates, proteins and other insoluble impurities, are removed from the milled grain fraction. Separation of solid impurities can be carried out using settling centrifuges such as the HASCO 200 two-phase settling centrifuge or NX310B (Alpha Laval).

В зависимости от требований к производительности по зерну производительность отстойной центрифуги может меняться при использовании других моделей отстойных центрифуг, таких как трехфазные декантаторы. Рабочие условия меняются в зависимости от конкретной применяемой центрифуги и должны подбираться так, чтобы нерастворимые загрязняющие материалы оседали и оставались в осадке после отстоя. При этих условиях может наблюдаться частичное разделение фазы масляных телец и водной фазы. Depending on the grain capacity requirements, the performance of a settling centrifuge may vary with other settling centrifuge models, such as three-phase decanters. Operating conditions vary depending on the particular centrifuge used and must be selected so that insoluble contaminants settle and remain in the sediment after settling. Under these conditions, a partial separation of the oil body phase and the aqueous phase may be observed.

После удаления нерастворимых загрязнении фаза масляных телец отделяется от водной фазы. В предпочтительном варианте изобретения используют трубчатую барабанную центрифугу. В других вариантах могут быть применены гидроциклоны, пакетно-дисковые центрифуги или разделение фаз под действием естественной гравитации, или другой способ разделения, основанный на гравитации. Можно также отделить фракцию масляных телец от водной фазы, применяя методы исключения по размерам, такие как мембранная ультрафильтрация и микрофильтрация в перекрестном потоке. В предпочтительном варианте трубчатой барабанной центрифугой является центрифуга Sharpies модель AS-16 (Alpha Laval) или AS-46 Sharpies (Alpha Laval). Критическим параметром является размер запорного кольца, используемого при работе центрифуги. Запорные кольца являются съемными кольцами с центральным круговым отверстием, меняющимся в случае AS-16 от 28 до 36 мм и регулирующим отделение водной фазы от фазы масляных телец, управляя тем самым чистотой получаемой фракции масляных телец. В предпочтительном варианте при использовании AS-16 используют запорное кольцо размером 29 или 30 мм. Точный размер применяемого запорного кольца зависит от типа используемых масличных семян, а также от желаемой конечной консистенции препарата масляных телец. На эффективность разделения, кроме того, влияет скорость потока. При использовании AS-16 скорость потока составляет обычно 750-1000 мл/мин (размер запорного кольца 29) или 400-600 мл/мин (размер запорного кольца 30), а температуру поддерживают предпочтительно между 26 и 30oС. В зависимости от модели используемой центрифуги скорости потока и размер запорного кольца должны регулироваться так, чтобы достичь оптимального отделения фазы масляных телец от водной фазы. Эта регулировка будет легко понятна специалисту.After removal of insoluble contamination, the oil body phase is separated from the aqueous phase. In a preferred embodiment, a tubular drum centrifuge is used. In other embodiments, hydrocyclones, packet disk centrifuges, or phase separation by natural gravity, or another gravity-based separation method may be used. It is also possible to separate the oil body fraction from the aqueous phase using size exclusion methods such as membrane ultrafiltration and cross-flow microfiltration. In a preferred embodiment, the tubular drum centrifuge is a Sharpies Model AS-16 (Alpha Laval) or AS-46 Sharpies (Alpha Laval) Centrifuge. The critical parameter is the size of the locking ring used during centrifuge operation. The locking rings are removable rings with a central circular hole, changing in the case of AS-16 from 28 to 36 mm and regulating the separation of the aqueous phase from the phase of the oil bodies, thereby controlling the purity of the obtained fraction of oil bodies. In a preferred embodiment, when using AS-16, a snap ring of 29 or 30 mm is used. The exact size of the locking ring used depends on the type of oilseed used, as well as the desired final consistency of the oil body preparation. Separation efficiency is also influenced by the flow rate. When using AS-16, the flow rate is usually 750-1000 ml / min (closure ring size 29) or 400-600 ml / min (closure ring size 30), and the temperature is preferably maintained between 26 and 30 o C. Depending on the model the centrifuge used, the flow rate and the size of the locking ring should be adjusted so as to achieve optimal separation of the oil body phase from the aqueous phase. This adjustment will be readily apparent to those skilled in the art.

Отделение твердых веществ и отделение водной фазы от фракции масляных телец можно также вести одновременно, используя способ разделения, основанный на гравитации, такой как 3-фазная трубчатая барабанная центрифуга или декантатор, или гидроциклон, или способ разделения, основанный на исключении по размеру. Separation of solids and separation of the aqueous phase from the oil body fraction can also be carried out simultaneously using a separation method based on gravity, such as a 3-phase tube centrifuge or decanter, or a hydrocyclone, or a separation method based on size exclusion.

Композиции, получаемые на этой стадии процесса, обычно являются относительно сырыми и содержат многочисленные протеины зерна, включающие гликозилированные и негликозилированные протеины и другие загрязнения, такие как крахмал или глюкозинилаты или продукты их распада. Настоящее изобретение предусматривает удаление существенного количества зерновых загрязнений. Для того, чтобы осуществить удаление загрязняющего материала зерна препарат масляных телец полученный после отделения от водной фазы, промывают по меньшей мере один раз путем ресуспендирования фракции масляных телец и центрифугирования ресуспендированной фракции. Этот процесс обеспечивает продукт, называемый здесь препаратом промытых масляных телец. Число промывок будет в общем случае зависеть от желаемой чистоты фракции масляных телец. В зависимости от применяемых условий промывки может быть получена практически чистая фракция масляных телец. В таком препарате единственными присутствующими протеинами будут протеины масляных телец. Для того, чтобы промыть фракцию масляных телец, могут быть использованы трубчатые барабанные центрифуги или другие центрифуги, такие как гидроциклоны или пакетно-дисковые центрифуги. Промывку масляных телец можно осуществлять, используя воду, буферные системы, например хлористый натрий, в концентрациях от 0,01 М и до по меньшей мере 2М, 0,1М карбонат натрия и буфер с малым содержанием соли и высоким рН, такой как 50 мМ Трис-НСl, рН 7,5, органические растворители, детергенты или любую другую жидкую фазу. В предпочтительном варианте все промывки проводят при высоком рН (11-12). Жидкая фаза, используемая для промывки, а также условия промывки, такие как рН и температура, могут меняться в зависимости от типа используемых семян. Может быть предпочтительна промывка при ряде различных рН между рН 2 и рН 11-12, поскольку это может позволить вести ступенчатое удаление загрязнений, в особенности протеинов. Условия промывки выбирают таким образом, чтобы стадия промывки приводила к удалению существенного количества загрязнений без нарушения структурной целостности масляных телец. В тех осуществлениях, где проводят более одной стадии промывки, условия промывки могут быть различными для различных стадий. SDS гель-электрофорез или другие аналитические методы могут успешно использоваться для контроля удаления протеинов зерна и других загрязнений после промывки масляных телец. Не требуется удалять всю водную фазу между стадиями промывки, и конечный препарат промытых масляных телец может быть ресуспендирован в воде, в буферной системе, например 50 мМ Трис-HCl, рН 7,5, или в любой другой жидкой фазе, и, если требуется, желаемая величина рН может регулироваться до любого значения рН между рН 2 и рН 10. Compositions obtained at this stage of the process are usually relatively crude and contain numerous grain proteins, including glycosylated and non-glycosylated proteins and other contaminants, such as starch or glucosinylates or their breakdown products. The present invention provides for the removal of a significant amount of grain contaminants. In order to remove the contaminating material of the grain, the oil body preparation obtained after separation from the aqueous phase is washed at least once by resuspending the oil body fraction and centrifuging the resuspended fraction. This process provides a product, referred to herein as a washed oil body preparation. The number of washes will generally depend on the desired purity of the oil body fraction. Depending on the washing conditions used, a substantially pure fraction of oil bodies can be obtained. In such a preparation, the only proteins present are oil body proteins. In order to flush the oil body fraction, tubular drum centrifuges or other centrifuges such as hydrocyclones or packet disk centrifuges can be used. The washing of the oil bodies can be carried out using water, buffer systems, for example sodium chloride, in concentrations from 0.01 M to at least 2 M, 0.1 M sodium carbonate and a buffer with a low salt content and high pH, such as 50 mM Tris -HCl, pH 7.5, organic solvents, detergents or any other liquid phase. In a preferred embodiment, all washes are carried out at high pH (11-12). The liquid phase used for washing, as well as the washing conditions, such as pH and temperature, may vary depending on the type of seed used. Washing may be preferable at a number of different pH between pH 2 and pH 11-12, as this may allow stepwise removal of contaminants, especially proteins. The washing conditions are chosen so that the washing stage removes a significant amount of contaminants without violating the structural integrity of the oil bodies. In those implementations where more than one washing step is carried out, the washing conditions may be different for different stages. SDS gel electrophoresis or other analytical methods can be successfully used to control the removal of grain proteins and other contaminants after washing the oil bodies. It is not necessary to remove the entire aqueous phase between the washing stages, and the final preparation of the washed oil bodies can be resuspended in water, in a buffer system, for example 50 mM Tris-HCl, pH 7.5, or in any other liquid phase, and, if required, the desired pH can be adjusted to any pH between pH 2 and pH 10.

Процесс получения препарата промытых масляных телец может осуществляться периодически или в непрерывном процессе. В частности, при использовании зубчатой барабанной центрифуги система насосов, работающих между стадиями (а), (b) и (с) и стадиями (с) и (d), создает непрерывную технологическую систему. В предпочтительном варианте насосами являются 1-дюймовые двойные диафрагменные насосы с пневмоприводом М2 Wilden. В других вариантах могут применяться гидравлические или перистальтические насосы. Для того чтобы обеспечить гомогенную консистенцию питания отстойной центрифуги и трубчатой барабанной центрифуги между стадиями разделения могут быть установлены гомогенизаторы, такие как гомогенизатор IKA. Гомогенизаторы на потоке могут быть также установлены между различными центрифугами или оборудованием для разделения, основанным на исключении по размерам, которые применяются для промывки препарата масляных телец. Размеры запорных колец, составы буферов, температура и рН на каждой стадии промывки могут отличаться от использованных на первой стадии разделения. The process of obtaining the drug washed oil bodies can be carried out periodically or in a continuous process. In particular, when using a gear drum centrifuge, a system of pumps operating between steps (a), (b) and (c) and steps (c) and (d) creates a continuous process system. In a preferred embodiment, the pumps are 1-inch Wilden M2 air-driven twin diaphragm pumps. In other embodiments, hydraulic or peristaltic pumps may be used. In order to ensure a homogeneous feed consistency of the settling centrifuge and the tubular drum centrifuge, homogenizers such as an IKA homogenizer can be installed between the separation stages. Flow homogenizers can also be installed between different centrifuges or separation equipment based on size exclusions that are used to flush the oil body preparation. The sizes of the locking rings, the composition of the buffers, the temperature and pH at each washing stage may differ from those used in the first separation stage.

В тех осуществлениях изобретения, когда масляные тельца выделяют из более мягких тканей, например из ткани мезокарпия оливок, методы, применяемые для раскрытия клетки, могут в чем-то отличаться от методов, используемых для раскрытия более твердых семян. Например, способы, основанные на прессовании, могут быть более предпочтительны, чем способы размола. Методика выделения масляных телец в малом масштабе была описана для выделения масляных телец из тканей мезокарпия оливы (Olea europeana) и авокадо (Persea americana) (Ross et al. , Plant Science, 1993, 93: 203-210) и из полученных из микроспор зародышей рапса (Brassica napus) (Holbrook et al., Plant Physiol., 1991, 97: 1051-1058). In those implementations of the invention when oil bodies are isolated from softer tissues, for example, from olive mesocarp tissue, the methods used to open the cells may be somewhat different from the methods used to open harder seeds. For example, compression-based methods may be preferable to grinding methods. The small-scale oil body isolation technique has been described for the isolation of oil bodies from the tissues of the mesocarp olives (Olea europeana) and avocados (Persea americana) (Ross et al., Plant Science, 1993, 93: 203-210) and from nuclei obtained from microspores rapeseed (Brassica napus) (Holbrook et al., Plant Physiol., 1991, 97: 1051-1058).

В осуществлениях изобретения, когда масляные тельца выделяют из нерастительных клеток, препарат промытых масляных телец выделяют, следуя процедурам, которые подобны описанной выше. Методология выделения масляных телец из дрожжей описана в литературе (Ting et al., 1997, Journal Biol. Chem., 272: 3699-3706). In embodiments of the invention, when oil bodies are isolated from non-plant cells, a washed oil body preparation is isolated following procedures that are similar to those described above. A methodology for isolating oil bodies from yeast is described in the literature (Ting et al., 1997, Journal Biol. Chem., 272: 3699-3706).

Физические и химические свойства масляной фракции могут варьироваться по меньшей мере двумя путями. Во-первых, разные виды растений содержат масляные тельца с различным составом масла. Например, кокосовый орех богат лауриловыми маслами (C12), тогда как масла эруконовой кислоты (C22) обильно присутствуют в некоторых Brassica spp. Во-вторых, некоторое количество масел может быть модифицировано в конкретных видах растений путем применения селекции и методов генной инженерии, известных опытным специалистам. Цель обоих этих методов заключается в изменении относительной активности ферментов, контролирующих пути метаболизма, участвующие в синтезе масла. Путем применения этих методов можно получить семена с усложненным набором различных масел. Например, усилия по селекции привели к получению рапса с низким содержанием эруконовой кислоты (Canola) (Bestor Т.Н., 1994, Dev.Genet., 15: 458), и путем генной инженерии была получена линия растений с маслами с изменениями в положении и количестве двойных связей, вариацией длины цепи жирной кислоты и с введением желаемых функциональных групп (Topfer et al., 1995, Science, 268: 681-685). Используя подобные подходы, специалист в данной области сможет дополнительно расширить уже доступные источники масляных телец. Таким образом, путем подбора масличных семян или их смесей от различных видов или линий растений в качестве источника масляных телец, можно получить широкое разнообразие эмульсий с различными текстурой и вязкостью.The physical and chemical properties of the oil fraction can vary in at least two ways. Firstly, different types of plants contain oil bodies with different oil compositions. For example, coconut is rich in lauryl oils (C 12 ), while eruconic acid oils (C 22 ) are abundant in some Brassica spp. Secondly, a certain amount of oil can be modified in specific types of plants by applying selection and genetic engineering methods known to experienced specialists. The goal of both of these methods is to change the relative activity of enzymes that control the metabolic pathways involved in oil synthesis. By applying these methods, seeds with a complicated set of various oils can be obtained. For example, selection efforts led to the production of low eruconic acid rapeseed (Canola) (Bestor T.N., 1994, Dev.Genet., 15: 458), and a line of plants with oils with changes in position was obtained by genetic engineering and the number of double bonds, varying the chain length of the fatty acid and introducing the desired functional groups (Topfer et al., 1995, Science, 268: 681-685). Using similar approaches, a person skilled in the art will be able to further expand the already available sources of oil bodies. Thus, by selecting oilseeds or mixtures thereof from various species or plant lines as a source of oil bodies, a wide variety of emulsions with different texture and viscosity can be obtained.

Образование эмульсии
Препарат промытых масляных телец может быть превращен в эмульсию при использовании методов, известных из практики. Предпочтительно к препарату промытых масляных телец добавляют по меньшей мере один дополнительный ингредиент. Дополнительный ингредиент может добавляться в виде раствора, суспензии, геля или твердого вещества, а количество дополнительного ингредиента зависит от рецептуры. Дополнительный ингредиент после образования эмульсии может стать связанным с масляными тельцами, остающимися суспендированными в растворе, или образует суспензию, в которой диспергированы масляные тельца. Ингредиент может также проникать в фосфолипидный монослой, окружающий масляное тельце или триглицеридную матрицу. Ингредиенты, которые могут проникать в масляное тельце, включают масла, воски и краситель нильский красный. В предпочтительном осуществлении дополнительным ингредиентом является жидкая фаза. В еще одном предпочтительном варианте жидкой фазой является вода. Вода может быть добавлена или непосредственно, или в виде влаги, связанной с другим ингредиентом. Конечное количество воды не является критическим до тех пор, пока после смешения ингредиентов образуется стабильная эмульсия. Обычно композиции содержат по меньшей мере 1% воды и до 99% воды. Обычно требуется перемешивание для получения пригодной эмульсии, и может потребоваться применение тепла или давления.
Emulsion formation
The washed oil body preparation can be emulsified using methods known in the art. Preferably, at least one additional ingredient is added to the washed oil body preparation. The additional ingredient may be added in the form of a solution, suspension, gel or solid, and the amount of the additional ingredient depends on the formulation. The additional ingredient after emulsion formation may become associated with the oil bodies remaining suspended in the solution, or form a suspension in which the oil bodies are dispersed. The ingredient may also penetrate the phospholipid monolayer surrounding the oil body or triglyceride matrix. Ingredients that can penetrate the oil body include oils, waxes, and Nile red. In a preferred embodiment, the additional ingredient is a liquid phase. In another preferred embodiment, the liquid phase is water. Water can be added either directly or as moisture bound to another ingredient. The final amount of water is not critical until a stable emulsion forms after mixing the ingredients. Typically, the compositions contain at least 1% water and up to 99% water. Generally mixing is required to obtain a suitable emulsion, and heat or pressure may be required.

В другом предпочтительном варианте дополнительным ингредиентом является масло или воск. Масла или воски могут распределяться в триглицеридной матрице масляных телец, и таким образом растворимые в липидах ингредиенты, такие как липидорастворимые витамины, могут быть введены в матрицу масляных телец. Если дополнительный ингредиент включает масла или воски, масляные тельца могут остаться суспендированными в липофильной фазе или может образоваться двойная эмульсия. In another preferred embodiment, the additional ingredient is oil or wax. Oils or waxes can be distributed in the triglyceride matrix of oil bodies, and thus lipid-soluble ingredients, such as lipid-soluble vitamins, can be incorporated into the oil body matrix. If the additional ingredient includes oils or waxes, the oil bodies may remain suspended in the lipophilic phase or a double emulsion may form.

Конечная композиция может быть в твердой или жидкой форме или иметь любую другую желаемую вязкость. Эмульсию можно загустить, используя гелеобразующие агенты, такие как целлюлоза и ее производные, карбопол и его производные, кароб, каррегинаны и их производные, ксантановую смолу, склерановую смолу, алканоламиды с длинной цепью, и бентон и его производные, обычно присутствующие в концентрациях ниже 2 мас.%. The final composition may be in solid or liquid form or have any other desired viscosity. The emulsion can be thickened using gelling agents such as cellulose and its derivatives, carbopol and its derivatives, carob, carreginans and their derivatives, xanthan gum, glue, long chain alkanolamides, and benton and its derivatives, usually present in concentrations below 2 wt.%.

Эмульсия может дополнительно включать поверхностно-активные вещества для того, чтобы увлажнить, вспенить, пенетрировать, эмульгировать, солюбилизировать или диспергировать выбранный материал. Если требуется, могут быть добавлены, например, анионные поверхностно-активные вещества, такие как натриймоноглицерид сульфонат кокоса, катионные поверхностно-активные вещества, такие как лаурилтриметиламмонийхлорид, цетилпиридинийхлорид и триметиламмонийбромид, неионные поверхностно-активные вещества, включая плюрониевые, и продукты конденсации полиэтиленоксида с алкилфенолами и цвиттер-ионные поверхностно-активные вещества, такие как производные соединений алифатического четвертичного аммония, фосмомия и сульфония. The emulsion may further include surfactants in order to moisturize, foam, penetrate, emulsify, solubilize or disperse the selected material. If required, for example, anionic surfactants such as sodium monoglyceride coconut sulfonate, cationic surfactants such as lauryltrimethylammonium chloride, cetylpyridinium chloride and trimethylammonium bromide, nonionic surfactants, including pluronium polyethylene oxides and condensate products, can be added. and zwitterionic surfactants, such as derivatives of compounds of aliphatic quaternary ammonium, phosmomy and sulfonium.

Если требуется, в эмульсионную композицию могут быть включены также хелатирующие агенты, способные связывать ионы металлов, такие как винная кислота, ЭДТК, лимонная кислота, цитраты щелочных металлов, пирофосфатные соли или анионные полимерные поликарбоксилаты. If desired, chelating agents capable of binding metal ions such as tartaric acid, EDTA, citric acid, alkali metal citrates, pyrophosphate salts or anionic polymeric polycarboxylates may also be included in the emulsion composition.

Обычно эмульсионные композиции должны быть обработаны так, чтобы предотвратить загрязнение бактериями, грибками, микоплазмой, вирусами и подобным или нежелательные химические реакции, такие как окислительные реакции. В предпочтительном варианте это достигается добавлением консервантов, например метабисульфита натрия, или других химических добавок, или облучением, например, ионизирующей радиацией, такой как радиация кобальта-60 или цезия-137, или ультрафиолетовым облучением. Typically, emulsion compositions should be processed so as to prevent contamination by bacteria, fungi, mycoplasma, viruses and the like, or undesirable chemical reactions such as oxidative reactions. In a preferred embodiment, this is achieved by adding preservatives, for example sodium metabisulfite, or other chemical additives, or by irradiation, for example, ionizing radiation, such as cobalt-60 or cesium-137 radiation, or ultraviolet radiation.

Кроме того, к препарату промытых масляных телец могут быть добавлены активные вещества. Например, косметические композиции могут быть приготовлены в виде стабильных суспензий, используя настоящую эмульсионную рецептуру, и витамины и увлажняющие агенты могут быть включены в кремы для кожи. Особенно благоприятным способом, которым активный ингредиент может быть включен в эмульсии по изобретению, является создание лигандов гена олеозина, как описано в WO 96/21029. Вкратце, WO 96/21029 описывает способ получения протеинов и пептидов в виде лигандов олеозина. Эти протеины создают путем лигирования гена, кодирующего олеозин, с геном, кодирующим интересующий пептид или протеин. Экспрессия лигированного в, например, масличное растение приводит к синтезу протеина-лиганда, который затем конъюгируется с масляным тельцем. In addition, active substances may be added to the washed oil body preparation. For example, cosmetic compositions can be prepared in the form of stable suspensions using the present emulsion formulation, and vitamins and moisturizing agents can be incorporated into skin creams. A particularly favorable method by which the active ingredient can be incorporated into the emulsions of the invention is to create ligands for the oleosin gene, as described in WO 96/21029. Briefly, WO 96/21029 describes a method for producing proteins and peptides in the form of oleosin ligands. These proteins are created by ligation of a gene encoding oleosin with a gene encoding a peptide or protein of interest. Expression of the ligated into, for example, an oil plant leads to the synthesis of a protein ligand, which is then conjugated to an oil body.

Выделение фракции масляных телец приводит к извлечению лиганда. В принципе, любой желаемый протеин или пептид может быть получен при использовании этой технологии. Например, показано, что антифризные пептиды полярных рыб (Davies P. L. et al., 1990, FASEB J. 4: 2460-2468) продуцируются как протеины-лиганды с олеозином. Препарат промытых масляных телец может быть затем применен для получения мороженого, молочных коктейлей или других замороженных пищевых материалов с улучшенными свойствами замерзания благодаря ингибированию или предотвращения образования кристаллов льда. В другом примере терапевтический протеин может быть получен в виде лиганда с олеозином. Масляные тельца могут быть затем использованы для приготовления желаемой эмульсии, которая может предназначаться для перорального введения или для местного наложения на кожу. Этот вариант изобретения дополнительно пояснен в Примере 11 описания, где приготавливают корм для рыб, включающий масляные тельца, содержащие лиганд олеозина с гормоном роста карпа. The selection of the fraction of oil bodies leads to the extraction of the ligand. In principle, any desired protein or peptide can be obtained using this technology. For example, it has been shown that polar fish antifreeze peptides (Davies P. L. et al., 1990, FASEB J. 4: 2460-2468) are produced as ligand proteins with oleosin. The washed oil body preparation can then be used to make ice cream, milkshakes or other frozen food materials with improved freezing properties by inhibiting or preventing the formation of ice crystals. In another example, a therapeutic protein can be obtained in the form of a ligand with oleosin. Oil bodies can then be used to prepare the desired emulsion, which can be intended for oral administration or for topical application to the skin. This embodiment of the invention is further explained in Example 11 of the description, where fish food is prepared comprising oil bodies containing an oleosin ligand with carp growth hormone.

Может быть также приготовлена эмульсия с пленкообразующими свойствами. Такая эмульсия, когда она нанесена на поверхность и высыхает, образует покрытие. Примером эмульсии для нанесения покрывающей пленки масляных тельц является корм для рыб, на который наносят масляные тельца, чтобы улучшить его пищевую ценность. An emulsion with film-forming properties may also be prepared. Such an emulsion, when applied to the surface and dries, forms a coating. An example of an emulsion for applying a coating film of oil bodies is a fish feed on which oil bodies are applied in order to improve its nutritional value.

Пленкообразующая эмульсия особенно полезна в тех вариантах изобретения, когда желательно регулируемое высвобождение активного ингредиента, таких как доставка лекарств, или летучих веществ, таких как благовония. Время высвобождения активного ингредиента из пленки эмульсии, которая образуется при высыхании, зависит, среди прочих факторов, от толщины пленки. Когда нанесена более толстая пленка, более длительное время высыхания приводит к более медленному высвобождению активного агента. В варианте рассматриваемых композиций высвобождение агента наступает, только когда пленка сухая. Другие факторы, такие как состав эмульсии и тип и концентрация активного ингредиента также определяют характеристики высвобождения. Например, добавочные растворители, такие как этанол, могут быть включены в рецептуру и влиять на время высвобождения. Высвобождение активного ингредиента также желательно для пищевых продуктов, у которых вкусовой агент, заключенный в эмульсии, высвобождается при потреблении. Высвобождение вкусовой добавки, в зависимости от точной рецептуры эмульсии, может вызвать внезапное сильное ощущение или более тонкую смесь вкусов и ароматов. A film-forming emulsion is particularly useful in those embodiments of the invention where a controlled release of the active ingredient, such as drug delivery, or volatile substances, such as incense, is desired. The release time of the active ingredient from the film of the emulsion, which is formed upon drying, depends, among other factors, on the thickness of the film. When a thicker film is applied, a longer drying time leads to a slower release of the active agent. In an embodiment of the present compositions, release of the agent occurs only when the film is dry. Other factors, such as the composition of the emulsion and the type and concentration of the active ingredient, also determine the release characteristics. For example, additional solvents, such as ethanol, may be included in the formulation and affect the release time. The release of the active ingredient is also desirable for foods in which the emulsified flavoring agent is released upon consumption. The release of the flavor, depending on the exact formulation of the emulsion, can cause a sudden strong sensation or a finer mixture of tastes and aromas.

Эмульсия по изобретению может также использоваться в разбрызгивателях и аэрозолях. Для этой цели предпочтительно использовать масляные тельца малого размера, например 11 мкм и менее в диаметре, такие как обнаруженные в B. napus. В такие разбрызгиваемые эмульсии могут быть включены летучие вещества, такие как алкоголь и благовония. Эмульсии такого типа могут также распыляться на поверхность высушенных пищевых продуктов, таких как картофельные чипсы и сухие супы. Эмульсии могут включать вкусовую добавку и улучшать сохранность или способствовать поддержанию требуемого уровня влажности пищевого продукта. The emulsion according to the invention can also be used in sprinklers and aerosols. For this purpose, it is preferable to use oil bodies of small size, for example 11 μm or less in diameter, such as those found in B. napus. Volatile substances such as alcohol and incense may be included in such spray emulsions. Emulsions of this type can also be sprayed onto the surface of dried food products such as potato chips and dry soups. Emulsions may include flavoring and improve shelf life or help maintain the desired moisture level of the food product.

Применение эмульсионной рецептуры
Рассматриваемое изобретение направлено на получение эмульсий, которые используются в бытовых и промышленных композициях. Указано, что эмульсии могут быть применены в композициях, которые широко варьируются по физическим свойствам и применению. Так, конкретные варианты включают такие применения, как пища и пищевые продукты, фармацевтические продукты, продукты личной гигиены и промышленные продукты.
The use of emulsion formulations
The invention is aimed at obtaining emulsions that are used in domestic and industrial compositions. It is indicated that emulsions can be used in compositions that vary widely in physical properties and application. Thus, specific options include applications such as food and food products, pharmaceutical products, personal care products and industrial products.

Применения в пище и пищевых продуктах включают немолочные заменители, немолочный сыр, немолочный йогурт, маргарин, майонез, винегрет (соус для заправки салата), глазурь, мороженое, салатные заправки, искусственную горчицу, сладости, жевательную резинку, пудинг, выпечные изделия, приправы, соки, детское питание, вкусовые носители, текстурирующие агенты, питание для домашних животных и домашнего скота. Применения в качестве продуктов личной гигиены включают мыла, косметику, кремы для кожи, кремы для лица, зубную пасту, губную помаду, отдушки, макияж, подложки, румяна, тушь для ресниц, тени для глаз, солнцезащитные лосьоны, кондиционер для волос и краски для волос. Фармацевтические продукты, которые могут быть приготовлены с использованием препарата промытых масляных телец по изобретению, включают терапевтические агенты, диагностические агенты и доставляющие агенты. В качестве терапевтического или диагностического агента эмульсия должна дополнительно содержать активный ингредиент. Активный ингредиент может быть любым веществом, которое желательно доставить хозяину. В одном варианте активный ингредиент может быть протеином или пептидом, имеющим терапевтическую или диагностическую ценность. Такие пептиды включают антигены (для вакцинных форм), антитела, цитокины, факторы свертывания крови и гормоны роста. Промышленные применения эмульсий по изобретению включают краску, покрытия, смазочные вещества, пленки, гели, жидкости для бурения, грунтовки бумаги, латекс, строительные материалы или материалы для дорожного строительства, чернила, красители, воски, полировки и химикаты для сельского хозяйства. В предпочтительных вариантах рассматриваемое изобретение направлено на композиции, которые могут быть съедобными для животных и людей. Следовательно, для того чтобы композиции могли быть съедобными, они должны быть пищевого качества. Конкретный продукт и конкретная форма, в которой применяют эмульсию, однако, не имеет большого значения и могут быть любыми по желанию. Совершенно ясно, что эмульсия, приготовленная из препарата промытых масляных телец, может использоваться в любом бытовом или промышленном продукте. Applications in food and food products include non-dairy substitutes, non-dairy cheese, non-dairy yogurt, margarine, mayonnaise, vinaigrette (dressing for salad dressing), glaze, ice cream, salad dressings, artificial mustard, sweets, chewing gum, pudding, baked goods, seasonings, juices, baby food, flavor vehicles, texturing agents, food for pets and livestock. Applications as personal care products include soaps, cosmetics, skin creams, face creams, toothpaste, lipstick, perfumes, makeup, substrates, blush, mascara, eye shadow, sunscreen lotions, hair conditioner and hair colors hair. Pharmaceutical products that can be prepared using the washed oil body preparation of the invention include therapeutic agents, diagnostic agents, and delivery agents. As a therapeutic or diagnostic agent, the emulsion must additionally contain the active ingredient. The active ingredient may be any substance that is desired to be delivered to the host. In one embodiment, the active ingredient may be a protein or peptide of therapeutic or diagnostic value. Such peptides include antigens (for vaccine forms), antibodies, cytokines, blood coagulation factors, and growth hormones. Industrial applications of the emulsions of the invention include paints, coatings, lubricants, films, gels, drilling fluids, paper primers, latex, building materials or materials for road construction, inks, dyes, waxes, polishes and chemicals for agriculture. In preferred embodiments, the subject invention is directed to compositions that can be edible to animals and humans. Therefore, in order for the compositions to be edible, they must be food grade. The specific product and the specific form in which the emulsion is used, however, is not of great importance and can be any as desired. It is quite clear that an emulsion prepared from a washed oil body preparation can be used in any household or industrial product.

Стабильность настоящей эмульсионной композиции при низких рН может быть использована при приготовлении кислых эмульсий. Например, эмульсионная композиция может быть использована при приготовлении майонезоподобного пищевого продукта, который, кроме препарата промытых масляных телец, включает, если требуется, растительное масло, горчицу, уксус и яичный желток. Текучие эмульсии, такие как заправки для салатов, могут быть приготовлены путем увеличения относительного количества уксуса и/или добавления воды. The stability of the present emulsion composition at low pH can be used in the preparation of acidic emulsions. For example, the emulsion composition can be used in the preparation of a mayonnaise-like food product, which, in addition to the preparation of washed oil bodies, includes, if required, vegetable oil, mustard, vinegar and egg yolk. Flowable emulsions, such as salad dressings, can be prepared by increasing the relative amount of vinegar and / or adding water.

Примером применения, когда может использоваться нагревание без явных вредных эффектов, является приготовление вкусовых соусов, таких как соус бешамель, или сладких соусов, таких как шоколадные соусы. В этих применениях препарат промытых масляных телец используют как заменитель соуса для жарки. Для приготовления соуса бешамель к 1 части нагретого препарата промытых масляных телец добавляют 1 часть (по весу) муки и перемешивают до образования тонкой суспензии. Постепенно добавляют умеренно нагретое молоко до тех пор, пока не получат соус с желаемой вязкостью. An example of an application where heating can be used without obvious harmful effects is the preparation of flavoring sauces, such as bechamel sauce, or sweet sauces, such as chocolate sauces. In these applications, the washed oil body preparation is used as a substitute for frying sauce. To prepare bechamel sauce, 1 part (by weight) of flour is added to 1 part of the heated preparation of washed oil bodies and mixed until a fine suspension is formed. Moderately heated milk is gradually added until a sauce with the desired viscosity is obtained.

Эмульсионная композиция может быть также использована в качестве заменителя масла. В таких применениях к препарату промытых масляных телец добавляют небольшие количества воды, например менее 10%, до получения желаемой вязкости. Если требуется, могут быть добавлены вкусовые добавки натурального масла и загустители. Заменитель масла можно использовать со сладкой кукурузой, хлебом, в смесях для кексов или в хлебопечении. Соль, которая придает вкус и действует как консервант, может быть добавлена обычно до количества около 2,5% (вес/объем). Если требуется, для получения более сильного окрашивания могут добавляться красители, например экстракт семян аннатто или каротин. Достоинством такого применения является то, что масло на основе масляных телец не содержит гидрированных жирных кислот, которые используются в рецептурах маргаринов и подобных продуктов для достижения требуемой консистенции, но также связаны с сердечно-сосудистыми заболеваниями. The emulsion composition may also be used as an oil substitute. In such applications, small amounts of water, for example less than 10%, are added to the washed oil body preparation to obtain the desired viscosity. If desired, natural oil flavors and thickeners may be added. The butter substitute can be used with sweet corn, bread, in muffin mixes or in bread baking. The salt, which gives flavor and acts as a preservative, can usually be added to an amount of about 2.5% (weight / volume). If desired, colorants, such as annatto seed extract or carotene, may be added to obtain stronger staining. The advantage of this application is that oil-based oil does not contain hydrogenated fatty acids, which are used in the formulations of margarines and similar products to achieve the desired consistency, but are also associated with cardiovascular diseases.

Можно готовить шортенинги с различной степенью жесткости - от пены до текучего шортенинга. В этом применении воздух вбивается в эмульсионную композицию, и эмульсионная композицию можно рассматривать диспергированной в непрерывной фазе, воздухе. Шортенинги могут применяться для смесей, в которых желательны пенистость и взбитость. Эти смеси включают глазури, искусственные сливки, мороженое и взбитое тесто для тортов. You can prepare shortenings with various degrees of rigidity - from foam to fluid shortening. In this application, air is driven into the emulsion composition, and the emulsion composition can be considered dispersed in a continuous phase, air. Shortenings can be used for mixtures in which frothiness and overrun are desired. These mixes include icing, artificial cream, ice cream, and whipped cake dough.

Имитацию фруктового сока можно получать из искусственных или натуральных вкусовых добавок и питательных веществ. Такая имитация соков не имеет должного внешнего вида, и из-за прозрачности кажется слабой или разбавленной. При добавлении небольших количеств, например от 0,1 до 1,0 об.%, препарата промытых масляных телец или его эмульсии можно вызвать помутнение, чтобы придать соку хороший внешний вид. Таким образом, препарат масляных телец можно использовать как замутняющий агент. Imitation of fruit juice can be obtained from artificial or natural flavors and nutrients. Such imitation of juices does not have the proper appearance, and because of transparency it seems weak or diluted. When adding small amounts, for example from 0.1 to 1.0 vol.%, Of the preparation of washed oil bodies or its emulsion, turbidity can be caused to give the juice a good appearance. Thus, the oil body preparation can be used as a clouding agent.

В другом приложении, имеющем дело с соками, препарат промытых масляных телец или его эмульсия может добавляться к сокам с оседающими твердыми веществами, таким как томатный сок. Добавляя небольшие количества препарата промытых масляных телец, например от 0,1 до 1,0 об.%, можно снизить скорость осаждения твердых веществ в соке и способствовать сохранению хорошего внешнего вида продукта. In another application dealing with juices, a washed oil body preparation or emulsion thereof may be added to juices with settling solids such as tomato juice. By adding small amounts of the washed oil body preparation, for example from 0.1 to 1.0 vol.%, It is possible to reduce the sedimentation rate of solids in the juice and help maintain a good appearance of the product.

Предусмотрено также местное применение препарата промытых масляных телец по изобретению. В этом варианте эмульсию готовят как дерматологически приемлемую эмульсию, которая может использоваться, например, для увлажнения кожи лица и/или тела, включая ногти и губы, и может противодействовать старению кожи, прыщам, пигментации, выпадению волос или ускорять удаление волос, способствовать заживлению ран и/или реструктуризации ткани кожи. Препарат промытых масляных телец составляет предпочтительно 1-99 вес.% конечной композиции. Local use of the washed oil body preparation of the invention is also contemplated. In this embodiment, the emulsion is prepared as a dermatologically acceptable emulsion, which can be used, for example, to moisturize the skin of the face and / or body, including nails and lips, and can counteract skin aging, acne, pigmentation, hair loss or accelerate hair removal, promote wound healing and / or skin tissue restructuring. The washed oil body preparation is preferably 1-99% by weight of the final composition.

Косметические композиции по изобретению могут включать дополнительно углеводородные соединения, такие как растительные, животные, минеральные или синтетические масла или воски или их смеси. Они включают парафин, вазелин, пергидросквален, масло арары, миндальное масло, масло кальфиллума, масло авокадо, конопляное масло, касторовое масло, масло жожоба, оливковое масло или масло зерновых зародышей. Могут быть включены сложные эфиры, такие как эфиры ланолевой кислоты, олеиновой кислоты, лауриловой кислоты, стеариновой кислоты, миристиновой кислоты. Можно также включать спирты, например, олеоиловый спирт, линолеиловый спирт или линолениловый спирт, изостеариловый спирт или октилдодеканол, спирты или полиспирты. Другими углеводородными соединениями, которые могут быть включены, являются октаноаты, деканоаты, рицинолеаты, каприловые/капроновые триглицериды или триглицериды жирных кислот от С10 до С22. Добавление этих веществ может приводить к образованию двойных эмульсий.The cosmetic compositions of the invention may further include hydrocarbon compounds, such as vegetable, animal, mineral or synthetic oils or waxes, or mixtures thereof. These include paraffin, petroleum jelly, perhydrosqualene, arara oil, almond oil, calfillum oil, avocado oil, hemp oil, castor oil, jojoba oil, olive oil or grain germ oil. Esters may be included, such as those of lanolic acid, oleic acid, lauric acid, stearic acid, myristic acid. You can also include alcohols, for example, oleoyl alcohol, linoleyl alcohol or linolenyl alcohol, isostearyl alcohol or octyldodecanol, alcohols or polyalcohols. Other hydrocarbon compounds that may be included are octanoates, decanoates, ricinoleates, caprylic / nylon triglycerides, or C 10 to C 22 fatty acid triglycerides. The addition of these substances can lead to the formation of double emulsions.

Гидрированные масла, которые являются твердыми при 25oС, такие как гидрированное касторовое масло, пальмовое масло или кокосовое масло, или гидрированный топленый жир, моно-, ди-, три- или сахароглицериды, ланолины и жирные кислоты, которые являются твердыми при 25oС, также могут быть включены в косметические композиции по изобретению. В число восков, которые могут быть включены, входят животные воски, такие как пчелиный воск, растительные воски, такие как воск карнаубы, воск канделлии, воск араукарии, японский воск или воски коркового дерева или сахарного тростника, минеральные воски, например парафинистый воск, лигнитный воск, микрокристаллические воски или озокериты и синтетические воски.Hydrogenated oils that are solid at 25 ° C, such as hydrogenated castor oil, palm oil or coconut oil, or hydrogenated ghee, mono-, di-, tri- or sugar glycerides, lanolins and fatty acids that are solid at 25 ° C C may also be included in the cosmetic compositions of the invention. Waxes that can be included include animal waxes such as beeswax, vegetable waxes such as carnauba wax, candellia wax, araucaria wax, Japanese wax or cortex or sugar cane waxes, mineral waxes such as paraffin wax, lignite wax, microcrystalline waxes or ozokerites and synthetic waxes.

Могут быть включены пигменты, которые могут быть белыми или окрашенными, неорганическими или органическими и/или жемчужными. Эти пигменты включают двуокись титана, окись цинка, двуокись циркония, черную, желтую, красную и бурую окиси железа, двуокись церия, окись хрома, берлинскую лазурь, сажу, бариевые, стронциевые, кальциевые и алюминиевые лаки и слюду, покрытую окисью титана или окисью висмута. Pigments may be included, which may be white or colored, inorganic or organic and / or pearl. These pigments include titanium dioxide, zinc oxide, zirconia, black, yellow, red and brown iron oxides, cerium dioxide, chromium oxide, Prussian blue, carbon black, barium, strontium, calcium and aluminum varnishes and mica coated with titanium oxide or bismuth oxide .

В косметические и/или дерматологические композиции могут быть включены активные ингредиенты, обычно применяемые в кремах для кожи, такие как витамины, например, витамин А или С, и альфа-гидроксикислоты, такие как лимонная, гликолевая, молочная и винная. Например, в патенте США 560283 указывается, что витамин С, или аскорбиновая кислота, ускоряет рост соединительной ткани, особенно в коже, усиливает сопротивляемость кожи к внешним воздействиям, таким как дым и УФ-радиация. Увлажняющими агентами, которые могут быть включены в кремы для кожи и косметику, являются, например, минеральные масла и мочевина. Могут также добавляться антиоксиданты, такие как встречающиеся в природе токоферолы и полифенолы или бутилированный гидрокситолуол и гидроксианизол. Для приготовления лосьонов для солнечного загара можно применять экранирующие солнечный свет вещества, такие как октилметоксициннамат (Parsol МСХ), 3-бензофенон (Uvinul М40) и бутилметоксидибензоилметан (Parsol 1789). Фармацевтически активные ингредиенты, которые могут использоваться при приготовлении косметических композиций, включают, например, антибиотики, фунгициды и противовоспалительные агенты. The cosmetic and / or dermatological compositions may include active ingredients commonly used in skin creams, such as vitamins, for example, vitamin A or C, and alpha hydroxy acids, such as citric, glycolic, lactic and tartaric. For example, US Pat. No. 560,283 teaches that vitamin C, or ascorbic acid, accelerates the growth of connective tissue, especially in the skin, and enhances skin resistance to external influences such as smoke and UV radiation. Moisturizing agents that may be included in skin creams and cosmetics are, for example, mineral oils and urea. Antioxidants such as naturally occurring tocopherols and polyphenols or butylated hydroxytoluene and hydroxyanisole may also be added. To prepare sunburn lotions, you can use sunlight-shielding agents such as octyl methoxycinnamate (Parsol MCX), 3-benzophenone (Uvinul M40) and butyl methoxy dibenzoylmethane (Parsol 1789). Pharmaceutically active ingredients that can be used in the preparation of cosmetic compositions include, for example, antibiotics, fungicides and anti-inflammatory agents.

Конечный косметический продукт может быть в виде свободно текучего или уплотненного порошка (основания, румян, теней для глаз), в виде относительно жирного продукта, такого как губная помада, тушь для ресниц, или в виде масла или лосьона для тела или лица. The final cosmetic product may be in the form of a free-flowing or densified powder (base, blush, eye shadow), in the form of a relatively oily product such as lipstick, mascara, or in the form of oil or body or face lotion.

Препарат промытых масляных телец может также использоваться в качестве орально приемлемого носителя в зубной пасте, которая может дополнительно включать силикаты, поверхностно-активные вещества, хелатирующие агенты, фторид, загустители, подслащиватели вкусовые добавки, как, например, масло перечной мяты, ферменты и биоциды. The washed oil body preparation may also be used as an orally acceptable carrier in toothpaste, which may further include silicates, surfactants, chelating agents, fluoride, thickeners, sweeteners, flavoring agents, such as peppermint oil, enzymes and biocides.

Примером промышленного продукта, который может быть приготовлен, является краска, в которой основная смола, такая как смолы, основанные на соединениях типа силиконов, акриловых соединений, полиэфиров, фторидов, эпоксидов, полиуретана, может быть частично или полностью заменена препаратом промытых масляных телец по изобретению. В красящую композицию если требуется, могут быть введены дополнительные добавки, такие как пигменты, красители, стеклянные чешуйки и алюминиевые чешуйки, диспергаторы пигмента, загустители, активаторы, катализаторы отверждения, отвердители, такие как диизоцианаты, катализаторы отверждения, ингибиторы гелеобразования, вещества, поглощающие ультрафиолет, агенты гашения свободных радикалов и т д. An example of an industrial product that can be prepared is a paint in which a base resin, such as resins based on compounds such as silicones, acrylics, polyesters, fluorides, epoxides, polyurethanes, can be partially or completely replaced by the washed oil body preparation of the invention . Additional additives, such as pigments, dyes, glass flakes and aluminum flakes, pigment dispersants, thickeners, activators, curing catalysts, hardeners such as diisocyanates, curing catalysts, gel inhibitors, ultraviolet absorbing agents, can be added to the dye composition, if desired. , free radical quenching agents, etc.

Препарат промытых масляных телец может также образовывать смазочные вещества. Например, препарат промытых масляных телец может использоваться для частичной или полной замены смазочных масел, таких как животные масла, растительные масла, нефтяные смазочные масла, синтетические смазочные масла, или смазки, такие как литиевая смазка, мочевинная смазка и кальциевая смазка. Другие композиции, применяемые в смазочной рецептуре, включают антиоксиданты, диспергаторы детергента, агенты маслянистости, модификаторы трения, присадки, улучшающие индекс вязкости, депрессанты точки помутнения, твердый смазочный материал, ингибиторы ржавления и антивспениватели. The washed oil body preparation may also form lubricants. For example, a washed oil body preparation may be used to partially or completely replace lubricating oils such as animal oils, vegetable oils, petroleum lubricating oils, synthetic lubricating oils, or lubricants such as lithium grease, urea grease and calcium grease. Other compositions used in the lubricant formulation include antioxidants, detergent dispersants, oil agents, friction modifiers, viscosity index improvers, cloud point depressants, solid lubricants, rust inhibitors, and antifoams.

Используя препарат промытых масляных телец по изобретению, можно также получить воски. Они включают воски типа восков для промывки, таких как воски, обеспечивающие стабильно гидрофобную финишную пленку на автомобилях и другие защитные покрытия. Другие композиции, используемые при получении воска, включают поверхностно-активные вещества, минеральные масла, такие как смешанные парафинистые и ароматические/нафтеновые масла, отдушки, биоциды, окрашивающие агенты, которые по желанию могут добавляться в совместимых количествах. Using the washed oil body preparation of the invention, waxes can also be obtained. They include waxes such as washing waxes, such as waxes, which provide a stably hydrophobic finish film on automobiles and other protective coatings. Other compositions used in the preparation of waxes include surfactants, mineral oils, such as mixed paraffinic and aromatic / naphthenic oils, perfumes, biocides, coloring agents, which, if desired, can be added in compatible amounts.

Если готовят промышленные продукты, такие как краски или смазочные материалы, чистота фазы масляных телец может быть менее критической и может не быть необходимым подвергать масляные тельца промывке. Промышленную эмульсию можно получить путем (1) получения масляных телец из клетки и (2) введением масляных телец в промышленную эмульсию. Масляные тельца могут быть получены путем (а) размола семян растений; (b) удалением твердых веществ из размолотых семян; (с) отделением фазы масляных телец от водной фазы. Изобретение также включает промышленную эмульсию, содержащую масляные тельца, полученные по настоящему изобретению. If industrial products such as paints or lubricants are prepared, the purity of the oil body phase may be less critical and it may not be necessary to rinse the oil body. An industrial emulsion can be obtained by (1) obtaining oil bodies from a cell and (2) introducing oil bodies into an industrial emulsion. Oil bodies can be obtained by (a) grinding plant seeds; (b) removing solids from the crushed seeds; (c) separating the oil body phase from the aqueous phase. The invention also includes an industrial emulsion containing oil bodies obtained by the present invention.

Следующие неограничивающие примеры являются поясняющими для настоящего изобретения. The following non-limiting examples are illustrative of the present invention.

Пример 1
Получение препарата промытых масляных телец из рапса, сои, подсолнечника, белой горчицы, земляного ореха, тыквы, льна, сафлора и кукурузы (лабораторный масштаб).
Example 1
Obtaining a preparation of washed oil bodies from rapeseed, soybean, sunflower, white mustard, peanut, pumpkin, flax, safflower and corn (laboratory scale).

Сухие созревшие семена, полученные от Brassies napus или Westar, сои, подсолнечника, земляного ореха, тыквы, льна, сафлора и кукурузы гомогенизируют в пяти объемах холодного буфера для размола (50 мМ Трис-HCl, рН 7,5, 0,4 М сахароза и 0,5 NaCl), используя политрон, работающий с высокой скоростью. Гомогенизат центрифугируют при 10G в течение 30 минут для того, чтобы удалить частицы вещества и отделить масляные тельца от водной фазы, содержащей основное количество растворимого протеина семян. Фракцию масляных телец снимают с поверхности супернатанта металлическим шпателем и добавляют в один объем буфера для размола. Обнаружено, что для того, чтобы достичь эффективной промывки на следующих стадиях, необходимо тщательно редиспергировать масляные тельца в буфере для размола. Этого добиваются путем мягкой гомогенизации масляных телец в буфере для размола при использовании политрона, работающего на низкой скорости. Используя шприц, редиспергированные масляные тельца осторожно наносят слоем на поверхность пяти объемов холодного буфера 50 мМ Трис-НСl, рН 7,5, и центрифугируют, как описано выше. После центрифугирования масляные тельца удаляют и операцию промывки повторяют два раза. Конечный препарат промытых масляных телец ресуспендируют в одном объеме холодного Трис-НСl, рН 7,5, и редиспергированного политроном. Dry ripened seeds obtained from Brassies napus or Westar, soybeans, sunflowers, peanuts, pumpkins, flax, safflower and corn are homogenized in five volumes of cold grinding buffer (50 mM Tris-HCl, pH 7.5, 0.4 M sucrose and 0.5 NaCl) using a high speed polytron. The homogenizate is centrifuged at 10G for 30 minutes in order to remove particles of the substance and to separate the oil bodies from the aqueous phase containing the bulk soluble protein of the seeds. The oil body fraction is removed from the surface of the supernatant with a metal spatula and added to one volume of grinding buffer. It has been found that in order to achieve effective flushing in the following steps, it is necessary to carefully redispers the oil bodies in the grinding buffer. This is achieved by gently homogenizing the oil bodies in the grinding buffer using a low speed polytron. Using a syringe, redispersed oil bodies are carefully applied to the surface of five volumes of cold 50 mM Tris-Hcl buffer, pH 7.5, and centrifuged as described above. After centrifugation, the oil bodies are removed and the washing operation is repeated twice. The final preparation of washed oil bodies is resuspended in one volume of cold Tris-Hcl, pH 7.5, and redispersed by a polytron.

Образцы масляных телец растворяют в буфере SDS (додецилсульфат натрия) для проб и анализируют методом SDS гель-электрофореза. Результаты показаны на фиг.1. Samples of oil bodies are dissolved in SDS buffer (sodium dodecyl sulfate) for samples and analyzed by SDS gel electrophoresis. The results are shown in FIG.

Полученный таким образом материал готов для использования в различных рецептурах. Thus obtained material is ready for use in various formulations.

Пример 2
Получение препарата промытых масляных телец из маслиничного рапса, подсолнечника и кукурузы в большом масштабе.
Example 2
Obtaining a preparation of washed oil bodies from oilseed rape, sunflower and corn on a large scale.

Этот пример описывает извлечение фракции масляных телец из семян канолы, подсолнечника и кукурузы в большом масштабе. Полученный препарат содержит целые масляные тельца и сравним по чистоте с препаратом, полученным при использовании процедур лабораторного масштаба. This example describes the large scale extraction of oil body fractions from canola, sunflower and corn seeds. The resulting preparation contains whole oil bodies and is comparable in purity with the preparation obtained using laboratory scale procedures.

Размол семян. Всего 10-15 кг сухих семян канолы (Brassica napus или Westar), подсолнечника (Helianthus annuus) или кукурузы (Zea mays) загружают через бункер в коллоидную мельницу (Colloid mill, MZ-130 (Fryma) производительностью 500 кг/ч), которая оборудована размалывающим устройством типа ротор/статор с крестообразными зубцами и верхним загрузочным буфером. Перед размолом через выходящий наружу шланг вводят приблизительно 50-75 л воды. Мельница работает при зазоре 1R, установленном так, чтобы достичь размера частиц менее 100 микрон, при 18 и 30oС. После размола семян добавляют водопроводную воду до получения суспензии семян с конечным объемом 90 литров.Grinding seeds. A total of 10-15 kg of dry canola seeds (Brassica napus or Westar), sunflower (Helianthus annuus) or corn (Zea mays) are loaded through a hopper into a colloid mill (Colloid mill, MZ-130 (Fryma) with a capacity of 500 kg / h), which equipped with a rotor / stator type grinder with cross teeth and top loading buffer. Before grinding, approximately 50-75 L of water is introduced through the outgoing hose. The mill operates with a gap of 1R, set so as to achieve a particle size of less than 100 microns, at 18 and 30 o C. After grinding the seeds add tap water to obtain a suspension of seeds with a final volume of 90 liters.

Удаление твердых частиц. Полученную суспензию подают насосом в отстойную центрифугу (двухфазная отстойная центрифуга Hasco 200 с максимальной рабочей скоростью 6000 об/мин) после разгона центрифуги до рабочей скорости 3500 об/мин. Передачу продукта из мельницы в центрифугу при расходе 360 л/ч осуществляют, используя 1-дюймовый двойной диафрагменный насос с пневмоприводом М2 Wilden. За 15-20 минут декантируют примерно 15 кг семян. Particulate matter removal. The resulting suspension is pumped to a settling centrifuge (Hasco 200 two-phase settling centrifuge with a maximum operating speed of 6000 rpm) after the centrifuge is dispersed to an operating speed of 3500 rpm. Product transfer from the mill to the centrifuge at a flow rate of 360 l / h is carried out using a 1-inch Wilden M2 air-driven double diaphragm pump. About 15 kg of seeds are decanted in 15-20 minutes.

Отделение масляных телец. Отделение фракции масляных телец проводят, используя центрифугу с трубчатым барабаном Sharpies, модель AS-16 (Alpha Laval), оборудованную барабаном для разделения трех фаз и рядом съемных запорных колец, производительностью 50 л/ч, запорное кольцо 30 мм. Рабочая скорость была 15000 об/мин (13200 G) Перистальтический насос Watson-Marlow (Model 704) используют для закачки декантированной жидкой фазы (ДЖ) в трубчатую центрифугу после разгона центрифуги до рабочей скорости. Это приводит к разделению декантированной жидкой фазы на тяжелую фазу (ТФ), включающую воду и растворимые протеины семян, и легкую фазу (ЛФ), включающую масляные тельца. Фракцию масляных телец, получаемую после одного прохода через центрифугу, называют препаратом непромытых масляных телец. Затем фракцию масляных телец пропускают через центрифугу еще три раза. Между каждым проходом через центрифугу концентрированные масляные тельца смешивают с примерно пятью объемами свежей воды. Всю операцию проводят при комнатной температуре. Все препараты, полученные после второго разделения, рассматривают как препарат промытых масляных телец. После трех промывок выводится большая часть загрязняющего растворимого протеина, и профили протеина масляных телец, полученные путем SDS гель-электрофореза, внешне подобны профилям, полученным при операции в лабораторном масштабе. Department of oil bodies. The separation of the oil body fraction is carried out using a Sharpies tubular drum centrifuge, model AS-16 (Alpha Laval), equipped with a drum for separating three phases and a series of removable locking rings, capacity 50 l / h, locking ring 30 mm. The operating speed was 15,000 rpm (13,200 G). A Watson-Marlow (Model 704) peristaltic pump was used to pump the decanted liquid phase (J) into a tubular centrifuge after the centrifuge was accelerated to operating speed. This leads to the separation of the decanted liquid phase into a heavy phase (TF), including water and soluble seed proteins, and a light phase (LF), including oil bodies. The oil body fraction obtained after a single pass through a centrifuge is called a non-washed oil body preparation. Then the fraction of oil bodies is passed through a centrifuge three more times. Between each passage through the centrifuge, concentrated oil bodies are mixed with about five volumes of fresh water. The entire operation is carried out at room temperature. All preparations obtained after the second separation are considered as a preparation of washed oil bodies. After three washes, most of the contaminating soluble protein is excreted, and the oil body protein profiles obtained by SDS gel electrophoresis are similar in appearance to those obtained during laboratory-scale surgery.

Пример 3
Удаление протеинов семян путем промывки фазы масляных телец.
Example 3
Removal of seed proteins by washing the oil body phase.

Этот пример описывает извлечение фракции промытых масляных телец из семян канолы, кукурузы и подсолнечника. При использовании различных условий промывки было показано, что промывки приводят к удалению существенного количества протеинов зерна из препарата масляных телец. Эти протеины включают протеины, которые могут быть аллергенами. This example describes the extraction of the washed oil body fraction from canola, corn, and sunflower seeds. Using various washing conditions, it was shown that washing leads to the removal of a significant amount of grain proteins from the preparation of oil bodies. These proteins include proteins that can be allergens.

Всего 10-15 кг сухих семян канолы (Brassica napus или Westar), подсолнечника (Helianthus annuus) или кукурузы (Zea mays) загружают через бункер в коллоидную мельницу (Colloid mill, MZ-130 (Fryma)), которая оборудована размалывающим устройством типа ротор/статор с крестообразными зубцами и верхним загрузочным буфером. Перед размолом через выходящий наружу шланг вводят приблизительно 50-75 л воды. Мельница работает при зазоре 1R, установленному так, чтобы достичь размера частиц менее 100 микрон, при 18 и 30oС. После размола семян к суспензии семян добавляют водопроводную воду до конечного объема 60-90 литров и отбирают пробу суспензии семян для SDS гель-электрофореза. Затем суспензию подают насосом в отстойную центрифугу (двухфазная отстойная центрифуга Hasco 200 с максимальной рабочей скоростью 6000 об/мин) после разгона центрифуги до рабочей скорости 3500 об/мин. Передачу продукта из мельницы в центрифугу при расходе 360 л/ч осуществляют используя 1-дюймовый двойной диафрагменный насос с пневмоприводом М2 Wilden. За 15-20 минут декантируют примерно 15 кг семян. Образец декантированной жидкой фазы отбирает для SDS гель-электрофореза. Отделение фракции масляных телец проводят, используя центрифугу с трубчатым барабаном Sharpies, модель AS-16 (Alpha Laval), оборудованную барабаном для разделения трех фаз и рядом съемных запорных колец, производительность 150 л/ч, запорное кольцо 29 мм. Рабочая скорость 15000 об/мин (13200 G). Перистальтический насос Watson-Marlow (Model 704) используют для закачки декантированной жидкой фазы в трубчатую центрифугу после разгона центрифуги до рабочей скорости. Получают фазу непромытых масляных телец и смешивают ее с приблизительно 5 объемами воды. Эту операцию повторяют полностью еще три раза. Фазу масляных телец, получаемую после первого оборота, называют препаратом непромытых масляных телец. Все другие препараты являются препаратами промытых масляных телец. Образцы для анализа на SDS гель-электрофорезе отбирают после первого и четвертого разделения.Only 10-15 kg of dry canola seeds (Brassica napus or Westar), sunflower (Helianthus annuus) or corn (Zea mays) are loaded through a hopper into a colloid mill (Colloid mill, MZ-130 (Fryma)), which is equipped with a rotor-type milling device stator with cruciform teeth and upper loading buffer. Before grinding, approximately 50-75 L of water is introduced through the outgoing hose. The mill operates with a 1R gap set to reach a particle size of less than 100 microns, at 18 and 30 o C. After grinding the seeds, tap water is added to the seed suspension to a final volume of 60-90 liters and a sample of the seed suspension is taken for SDS gel electrophoresis . Then, the suspension is pumped into a settling centrifuge (Hasco 200 two-phase settling centrifuge with a maximum operating speed of 6000 rpm) after the centrifuge is dispersed to an operating speed of 3500 rpm. Product transfer from the mill to the centrifuge at a flow rate of 360 l / h is carried out using a 1-inch Wilden M2 air-driven double diaphragm pump. About 15 kg of seeds are decanted in 15-20 minutes. A sample of the decanted liquid phase is taken for SDS gel electrophoresis. The separation of the oil body fraction is carried out using a Sharpies tube drum centrifuge, model AS-16 (Alpha Laval), equipped with a drum for separating three phases and a series of removable locking rings, capacity 150 l / h, locking ring 29 mm. Operating speed 15000 rpm (13200 G). The Watson-Marlow peristaltic pump (Model 704) is used to pump the decanted liquid phase into a tubular centrifuge after the centrifuge is accelerated to operating speed. A phase of unwashed oil bodies is obtained and mixed with approximately 5 volumes of water. This operation is repeated completely three more times. The oil body phase obtained after the first revolution is called the preparation of unwashed oil bodies. All other drugs are washed oil body preparations. Samples for analysis on SDS gel electrophoresis are taken after the first and fourth separation.

После завершения четвертой промывки 0,9 мл пробу препарата масляных телец гомогенизируют в 0,1 мл 1М Na2СО3 и оставляют при перемешивании при комнатной температуре на 30 минут. Затем фракцию масляных телец извлекают последующим центрифугированием, промывают и готовят для SDS гель-электрофореза.After completing the fourth wash, 0.9 ml of the sample of the oil body preparation is homogenized in 0.1 ml of 1M Na 2 CO 3 and left to stir at room temperature for 30 minutes. The fraction of oil bodies is then recovered by centrifugation, washed and prepared for SDS gel electrophoresis.

Все образцы растворяют в буфере SDS для проб и пробы анализируют методом SDS гель-электрофореза. Результаты показаны на фиг.2. All samples were dissolved in SDS sample buffer and samples were analyzed by SDS gel electrophoresis. The results are shown in FIG.

Пример 4
Влияние промывки фазы масляных телец на характеристики удерживания воды.
Example 4
The effect of washing the oil body phase on the water retention characteristics.

Препарат промытых масляных телец и фазу непромытых масляных телец готовят из рапса, как в примере 2. Для того чтобы определить разницу между непромытой фазой масляных телец и препаратом промытых масляных телец в способности к удерживанию воды, тщательно перемешивают 30 мл препаратов масляных телец, используя встряхивающее устройство. Затем препараты инкубируют в течение 2 часов в водяной бане при 40, 60 или 80oС и пробы центрифугируют при 1500 G в течение 20 минут (неразбавленные образцы). Другой набор образцов готовят путем смешения 15 г препарата промытых или непромытых масляных телец с 15 мл воды. Образцы перемешивают на встряхивающем устройстве, затем инкубируют в течение 2 часов в водяной бане при 40, 60 или 80oС и определяют количество присутствующей в пробах воды последующим центрифугированием при 1500 G в течение 20 минут (разбавленные образцы). Потерю массы, приписываемую испарению, измеряют при 80 и 60oС.The washed oil body preparation and the unwashed oil body phase are prepared from rapeseed, as in Example 2. In order to determine the difference between the washed oil body phase and the washed oil body preparation in water retention, 30 ml of the oil body preparation are thoroughly mixed using a shaking device . Then the preparations are incubated for 2 hours in a water bath at 40, 60 or 80 o C and the samples are centrifuged at 1500 G for 20 minutes (undiluted samples). Another set of samples is prepared by mixing 15 g of the preparation of washed or unwashed oil bodies with 15 ml of water. The samples are mixed on a shaker, then incubated for 2 hours in a water bath at 40, 60 or 80 o C and determine the amount of water present in the samples by subsequent centrifugation at 1500 G for 20 minutes (diluted samples). The mass loss attributed to evaporation is measured at 80 and 60 o C.

При 80oС неразбавленные препараты, содержащие масляные тельца, теряют значительное количество воды путем испарения. Препарат непромытых масляных телец потерял 26% своей массы, тогда как промытый препарат потерял 16%. При центрифугировании непромытый препарат выделил приблизительно 2,5 мл водной фазы, тогда как препарат промытых масляных телец остался в той же самой фазе. Оба разбавленных препарата поглощали воду. Объем масляных телец в обоих случаях увеличился до 18,5±1 мл.At 80 o With undiluted preparations containing oil bodies, lose a significant amount of water by evaporation. The preparation of unwashed oil bodies lost 26% of its mass, while the washed preparation lost 16%. During centrifugation, the unwashed preparation separated out approximately 2.5 ml of the aqueous phase, while the washed oil body preparation remained in the same phase. Both diluted preparations absorbed water. The volume of oil bodies in both cases increased to 18.5 ± 1 ml.

При 60oС неразбавленные препараты теряли приблизительно 10% воды путем испарения. При последующем центрифугировании непромытый препарат выделил приблизительно 0,5 мл водной фазы, тогда как препарат промытых масляных телец остался в той же самой фазе. Оба разбавленных препарата поглощали воду. При 60oС объем масляных телец в обоих случаях увеличился до 18±1 мл.At 60 ° C., undiluted preparations lost approximately 10% of their water by evaporation. Upon subsequent centrifugation, the unwashed preparation released approximately 0.5 ml of the aqueous phase, while the washed oil body preparation remained in the same phase. Both diluted preparations absorbed water. At 60 o With the volume of oil bodies in both cases increased to 18 ± 1 ml.

При 40oС оба неразбавленных образца выделили приблизительно 2 мл водной фазы. При сравнении разбавленных образцов непромытый препарат поглощал около 3 мл воды, как и в случаях 60 или 80oС. Промытый образец, однако, поглощал 8 мл воды при 40oС.At 40 ° C., both undiluted samples isolated approximately 2 ml of the aqueous phase. When comparing diluted samples, an unwashed preparation absorbed about 3 ml of water, as in the cases of 60 or 80 o C. The washed sample, however, absorbed 8 ml of water at 40 o C.

Эти эксперименты показывают, что в препарате промытых масляных телец, нагретом до 60 или 80oС, вода остается более прочно связанной с препаратом масляных телец, чем в непромытом препарате. Будучи охлажденным, препарат промытых масляных телец кажется более стабильным, чем непромытая эмульсия. Будучи нагретым до 40oС, препарат промытых масляных телец был способен абсорбировать больший объем экзогенно добавленной воды, не приводя к разделению фаз.These experiments show that in a washed oil body preparation heated to 60 or 80 ° C. , water remains more firmly bound to the oil body preparation than in an unwashed preparation. Being chilled, the washed oil body preparation seems more stable than the unwashed emulsion. Being heated to 40 o C, the preparation of washed oil bodies was able to absorb a larger volume of exogenously added water, without leading to phase separation.

Пример 5
Влияние промывки масляных телец на характеристику поглощения масла.
Example 5
The effect of flushing oil bodies on oil absorption characteristics.

Препарат промытых масляных телец и фазу непромытых масляных телец готовят из рапса, как в примере 2. Для того чтобы определить разницу между непромытой фазой масляных телец и препаратом промытых масляных телец в способности к поглощению масла, 2 г препаратов масляных телец диспергируют в 50 мл пробирке в 12 мл рафинированного осветленного дезодорированного масла канолы. Содержимое пробирки перемешивают 30 секунд каждые 5 минут в течение 30 минут. Затем пробирки центрифугируют при 4400 об/мин в течение 25 минут. Свободное масло декантируют и определяют процентное содержание абсорбированного масла по разнице массы. Испытывали три препарата промытых масляных телец и три препарата непромытых масляных телец. The washed oil body preparation and the washed oil body phase are prepared from rapeseed, as in Example 2. In order to determine the difference between the washed oil body phase and the washed oil body preparation in oil absorption, 2 g of the oil body preparation are dispersed in a 50 ml tube in 12 ml of refined clarified deodorized canola oil. The contents of the tube are mixed for 30 seconds every 5 minutes for 30 minutes. The tubes are then centrifuged at 4400 rpm for 25 minutes. The free oil is decanted and the percentage of absorbed oil is determined by the mass difference. Three preparations of washed oil bodies and three preparations of unwashed oil bodies were tested.

Обнаружено, что способность к поглощению масла у непромытых масляных телец существенно различается для трех загрузок и варьируется от 18,7 до 28%. Промытые масляные тельца имели воспроизводимое поглощение масла 32+1%. Таким образом, было найдено, что препарат промытых масляных телец лучше, так как (1) обеспечивает большее количество абсорбированного масла и (2) абсорбция происходит более воспроизводимым образом. It was found that the ability to absorb oil in unwashed oil bodies varies significantly for three loads and varies from 18.7 to 28%. The washed oil bodies had a reproducible oil absorption of 32 + 1%. Thus, it was found that the washed oil body preparation is better, since (1) provides a greater amount of absorbed oil and (2) absorption occurs in a more reproducible manner.

Пример 6
Приготовление майонезоподобной эмульсии, включающей препарат промытых масляных телец.
Example 6
Preparation of mayonnaise-like emulsion, including the preparation of washed oil bodies.

Препарат промытых масляных телец готовят из рапса, как в примере 2, и приготавливают майонезоподобную эмульсию путем смешивания следующих компонентов в бытовом электрическом смесителе, г:
Подсолнечное масло - 78
Яичный желток - 8
Уксус - 9
Соль - 0,5
Промытые масляные тельца - 5
Получен продукт майонезоподобной текстуры. Майонезоподобный продукт остается стабильным по меньшей мере 1 сутки при 4oС.
The washed oil body preparation was prepared from rapeseed, as in Example 2, and a mayonnaise-like emulsion was prepared by mixing the following components in a household electric mixer, g:
Sunflower oil - 78
Egg Yolk - 8
Vinegar - 9
Salt - 0.5
Washed oil bodies - 5
Received a product of mayonnaise-like texture. Mayonnaise-like product remains stable for at least 1 day at 4 o C.

Пример 7
Приготовление свободной от холестерина майонезоподобной эмульсии.
Example 7
Preparation of a cholesterol-free mayonnaise-like emulsion.

Препарат промытых масляных телец готовят из рапса, как в примере 2, и приготавливают майонезоподобную эмульсию путем смешивания следующих компонентов, г:
Подсолнечное масло - 200
Промытые масляные тельца - 100
Уксус, мл - 30
Получен продукт майонезоподобной текстуры. Поскольку майонез приготовлен без яичного желтка, ингредиента, обычно применяемого в имеющихся в продаже майонезах, то продукт, приготовленный с использованием промытых масляных телец, не содержит холестерина. Обнаружено, что майонез является таким же стабильным, как обычный майонез, если определять стабильность, используя центрифугирование.
The preparation of washed oil bodies is prepared from rapeseed, as in example 2, and a mayonnaise-like emulsion is prepared by mixing the following components, g:
Sunflower oil - 200
Washed oil bodies - 100
Vinegar, ml - 30
Received a product of mayonnaise-like texture. Since mayonnaise is prepared without egg yolk, an ingredient commonly used in commercially available mayonnaises, the product prepared using washed oil bodies does not contain cholesterol. Mayonnaise was found to be as stable as regular mayonnaise if stability was determined using centrifugation.

Пример 8
Приготовление заправки для салата (винегрета), включающей препарат промытых масляных телец.
Example 8
Preparation of salad dressing (vinaigrette), including the preparation of washed oil bodies.

Препарат промытых масляных телец готовят из рапса, как в примере 2, и приготавливают винегретоподобную эмульсию путем смешивания вручную следующих компонентов, г:
Подсолнечное масло - 17,5
Горчица - 0,4
Уксус - 0,5
Промытые масляные тельца - 7,7
Получен продукт винегретоподобной текстуры. Винегретоподобный продукт остается стабильным по меньшей мере 1 сутки при 4oС.
The preparation of the washed oil bodies is prepared from rapeseed, as in example 2, and a vinaigrette-like emulsion is prepared by manually mixing the following components, g:
Sunflower oil - 17.5
Mustard - 0.4
Vinegar - 0.5
Washed oil bodies - 7.7
The resulting product vinaigrette texture. Vinaigrette-like product remains stable for at least 1 day at 4 o C.

Пример 9
Приготовление размазываемого горчицеподобного продукта.
Example 9
Preparation of spreadable mustard-like product.

Препарат промытых масляных телец готовят из рапса, как описано в примере 2. Для получения горчицеподобного продукта смешивают следующие компоненты, г:
Горчица - 70
Промытые масляные тельца - 30
Полученная эмульсионная композиция является горчицеподобным продуктом, который легко размазывается и имеет кремоподобные, менее острые вкусовые характеристики, чем горчица.
The preparation of washed oil bodies is prepared from rapeseed, as described in example 2. To obtain a mustard-like product, the following components are mixed, g:
Mustard - 70
Washed oil bodies - 30
The resulting emulsion composition is a mustard-like product that is easily spread and has creamy, less acute taste characteristics than mustard.

Пример 10
Приготовление бешамелеподобного соуса.
Example 10
Cooking bechamele-like sauce.

Препарат промытых масляных телец готовят из рапса, как описано в примере 2. Препарат промытых масляных телец нагревают в умеренном тепле, добавляют равную часть муки и перемешивают с препаратом промытых масляных телец. Во время перемешивания вручную к этой смеси постепенно добавляют молоко. The washed oil body preparation was prepared from rapeseed as described in Example 2. The washed oil body preparation was heated to moderate heat, an equal part of the flour was added and mixed with the washed oil body preparation. During manual stirring, milk is gradually added to this mixture.

Мука - 50 г
Промытые масляные тельца - 50 г
Молоко - 100 мл - 1 л
Получен бешамелеподобный соус. Консистенция соуса может быть любой, как желательно, в зависимости от количества добавленного молока. Если требуется, могут быть также добавлены дополнительные вкусовые добавки. Отсутствие гидрированных жирных кислот в этом продукте дает ему преимущество перед соусом, приготовленным из обычного бытового маргарина.
Flour - 50 g
Washed oil bodies - 50 g
Milk - 100 ml - 1 L
Received a bechamel-like sauce. The consistency of the sauce can be any, as desired, depending on the amount of milk added. If desired, additional flavoring agents may also be added. The absence of hydrogenated fatty acids in this product gives it an advantage over sauce made from ordinary household margarine.

Пример 11
Приготовление фармацевтической эмульсии для нанесения на корм для рыб.
Example 11
Preparation of pharmaceutical emulsions for application to fish feed.

Препарат промытых масляных телец из трансгенного растения В.napus, который экспрессирует гормон роста карпа (кГР), лигированный с олеозином, где протеин-лиганд конъюгирован с масляными тельцами, получают следующим образом. Фрагмент ДНК, содержащий кодирующую кГР область без сигнальной 22-аминокислотной последовательности, амплифировали из плазмиды, содержащей инсерт ростового гормона карпа обыкновенного (Cyprinus carpio) кДНК (Koren et al. , 1989, Gene 67: 309-315), используя цепь реакций полимеразы в сочетании с двумя кГР-специфичными праймерами. Амплифированный фрагмент кГР был лигирован в правильной рамке считывания с 3' и олеозином Arabidopsis thaliana, используя pOThromb (van Rooijen, 1993, PhD Thesis, University of Calgari) в качестве родительской плазмиды и применяя стратегии клонирования, известные специалистам. Сайт расщепления тромбина в pOThromb был присоединен 3' к олеозин кодирующей последовательности, лигированный ген олеозин-кГР вводили в бинарный вектор pCGN1559 (McBnde and Summerfelt, 1990, Plant Mol. Biol., 14: 269-276) и полученную конструкцию использовали для трансформации A.tumefaciens. Для трансформации сеянцев B.napus или Westar применяли штамм агробактерий. Получали семена трансгенного растения и из трансгенных семян выделяли масляные тельца, как описано в примере 1. The preparation of the washed oil bodies from the transgenic B. napus plant, which expresses carp growth hormone (hGH), ligated with oleosin, where the protein ligand is conjugated to oil bodies, is prepared as follows. A DNA fragment containing a cGH region encoding a region without a 22-amino acid signal sequence was amplified from a plasmid containing the growth hormone insert of common carp (Cyprinus carpio) cDNA (Koren et al., 1989, Gene 67: 309-315) using the polymerase combined with two cGR-specific primers. The amplified cGR fragment was ligated in the correct reading frame with 3 'and Arabidopsis thaliana oleosin using pOThromb (van Rooijen, 1993, PhD Thesis, University of Calgari) as the parent plasmid and using cloning strategies known to those skilled in the art. The thrombin cleavage site in pOThromb was attached 3 ′ to the oleosin coding sequence, the ligated oleosin-cGH gene was introduced into the binary vector pCGN1559 (McBnde and Summerfelt, 1990, Plant Mol. Biol., 14: 269-276) and the resulting construct was used to transform A .tumefaciens. A strain of agrobacteria was used to transform B. napus or Westar seedlings. The seeds of the transgenic plant were obtained and oil bodies were isolated from the transgenic seeds as described in Example 1.

Масляные тельца затем отбирали шприцом и распыляли на корм для рыб, используя приблизительно 2,5 мкг протеина масляных телец на 1 мг корма для рыб. Затем корм для рыб, покрытый масляными тельцами, оставляли сохнуть до утра. Затем 50 мг корма для рыб смешивали с 10 мл воды и инкубировали в течение 0, 30, 45 или 60 минут. Затем корм собирали, ресуспендировали в 0,2 мл 50 мМ Трис-С1 (рН 7,5) и готовили для анализа методом SDS гель-электрофореза после кипячения в 2,5% SDS. Присутствие масляных телец на корме для рыб было подтверждено при использовании вестерн-блоттинга и моноклональных антител к кГР. The oil bodies were then taken with a syringe and sprayed onto fish feed using approximately 2.5 μg of oil body protein per 1 mg of fish feed. Then the fish food, covered with oil bodies, was left to dry until morning. Then, 50 mg of fish food was mixed with 10 ml of water and incubated for 0, 30, 45 or 60 minutes. Then the food was collected, resuspended in 0.2 ml of 50 mm Tris-C1 (pH 7.5) and prepared for analysis by SDS gel electrophoresis after boiling in 2.5% SDS. The presence of oil bodies in fish feed was confirmed using western blotting and monoclonal antibodies to cGR.

Судя по интенсивности сигнала единичной полосы, наблюдавшейся в каждой дорожке вестерн-блота, масляные тельца, включающие кГР, оставались прочно связанными с кормом для рыб после инкубации масляных телец в воде. Было показано, что корм для рыб, который инкубировали в течение 30, 45 или 60 минут, содержит приблизительно такие же количества кГР, как контрольный корм, который не инкубировали в воде. Judging by the signal intensity of a single band observed in each lane of the Western blot, the oil bodies, including cGR, remained firmly connected with fish food after incubation of the oil bodies in water. It has been shown that fish feed, which was incubated for 30, 45 or 60 minutes, contains approximately the same amount of cGR as a control feed that was not incubated in water.

Этот пример показывает, что можно получить множество трансгенных растений, которые придают эмульсии желаемые специфические свойства. Этот пример, кроме того, показывает, что из препарата промытых масляных телец можно получить эмульсию, которая может быть использована в качестве покрытия или пленки. Наконец, этот пример показывает, что препарат промытых масляных телец может быть использован для получения фармацевтической композиции. This example shows that you can get many transgenic plants that give the emulsion the desired specific properties. This example also shows that an emulsion can be obtained from the washed oil body preparation, which can be used as a coating or film. Finally, this example shows that a washed oil body preparation can be used to produce a pharmaceutical composition.

Хотя для пояснения настоящего изобретения были описаны определенные предпочтительные варианты осуществления, специалисту будут очевидны и другие применения, входящие в объем изобретения. Although certain preferred embodiments have been described to illustrate the present invention, other uses that are within the scope of the invention will be apparent to those skilled in the art.

Примеры 12-22 взяты из патента США N 6183762. Examples 12-22 are taken from US patent N 6183762.

Пример 12
Приготовление базовых составов эмульсий, содержащих промытые масляные тельца сафлора, для использования в продукте для личного ухода.
Example 12
Preparation of basic emulsion formulations containing washed safflower oil bodies for use in a personal care product.

Препарат из промытых масляных телец из сафлора готовили так же, как в Примере 2. К препарату из промытых масляных телец добавляли 0,1% Glydant Plus, 0,1% бутилированного гидроксианизола (ВНА), 0,1% бутилированного гидрокситолуола (ВНТ) и готовили базовый состав для использования в косметическом продукте следующим образом. Масляные тельца поместили в смеситель, добавили Keltrol и гидрировали при комнатной температуре высокоскоростной пропеллерной мешалкой. Затем добавили глицерин. Смесь затем нагрели до 45-50oС, при температуре 50oС добавили ВНА и ВНТ. В конце добавили Glydant Plus. Порядок приготовления базовых составов В и С несколько различался, так температуру затем повышали до 60oС, добавили Arlacel 165 и перемешивали до тех пор, пока структура смеси не стала гомогенной. Смесь затем быстро охлаждали до 30oС путем перемешивания при умеренной скорости.A washed safflower oil body preparation was prepared as in Example 2. 0.1% Glydant Plus, 0.1% butylated hydroxyanisole (BHA), 0.1% butylated hydroxytoluene (BHT) were added to the washed oil body preparation. prepared the basic composition for use in a cosmetic product as follows. The oil bodies were placed in a mixer, Keltrol was added and hydrogenated at room temperature with a high-speed propeller stirrer. Then glycerin was added. The mixture was then heated to 45-50 ° C. , BHA and BHT were added at a temperature of 50 ° C. At the end, Glydant Plus was added. The preparation of basic compositions B and C was somewhat different, so the temperature was then raised to 60 ° C. , Arlacel 165 was added and mixed until the structure of the mixture became homogeneous. The mixture was then rapidly cooled to 30 ° C. by stirring at moderate speed.

Базовый состав А (см. таблицу 1)
Базовый состав В (см. таблицу 2)
Базовый состав С (см. таблицу 3)
Собственно препарат из гидрированных масляных телец из сафлора и все три Базовых состава показали устойчивость к окислению и развитию микроорганизмов. Аналогичным образом у этих трех базовых составов наблюдали малые изменения или не наблюдали их вовсе как по цвету, так и по запаху.
Base composition A (see table 1)
Base composition B (see table 2)
Base composition C (see table 3)
The actual preparation of hydrogenated oil bodies from safflower and all three Base compounds showed resistance to oxidation and the development of microorganisms. Similarly, these three basic formulations observed small changes or did not observe them at all, both in color and in smell.

Химические анализы препарата из гидрированных масляных телец из сафлора показали, что образец содержал 50,82% воды и 49,18% сухого остатка. Сухой остаток (СО) состоял из 3,76% протеина, 93,56% масла и 2,68% прочее. Chemical analyzes of the drug from hydrogenated safflower oil bodies showed that the sample contained 50.82% water and 49.18% solids. The dry residue (CO) consisted of 3.76% protein, 93.56% oil and 2.68% other.

Пример 13
Приготовление базовых составов эмульсий для использования в косметическом продукте высокой категории.
Example 13
Preparation of basic emulsion formulations for use in a high category cosmetic product.

Базовый состав В дополнительно модифицировали для использования в косметических рецептурах высокой категории. Состав смешали с эмульсией в следующем порядке. Фазой I была водная фаза. В этой фазе воду залили в основной резервуар. Использовали пропеллерную мешалку для гидрирования Keltrol'a, пантенола и аллантоина при перемешивании с умеренной скоростью при комнатной температуре. Затем добавили глицерин при непрерывном перемешивании. Водную фазу нагрели до конечной температуры 75-77oС. Фазу II, масляную фазу, перемешали в отдельной емкости при умеренной скорости перемешивания и затем нагрели до температуры 75-77oС. В число ингредиентов масляной фазы входили: Диметикон 350, цетиловый спирт, Arlacel 165, Finsolv TN, кунжутное масло, витамин Е-ацетат и фенонип. Последний этап эмульгирования включал добавление масляной фазы (Фазы II) в водную фазу (Фазу I). Обе фазы смешивали при высокой скорости перемешивания пропеллерной мешалкой или гомогенизатором в течение 15 минут. Через 15 минут перемешивания смесь медленно охладили до 40oС. Скорость перемешивания снижали по мере понижения температуры. Приблизительно при температуре 40oС медленно добавили Базовый состав В. Предоставили возможность смеси охладиться до комнатной температуры (см. таблицу 4).Base composition B was further modified for use in high-grade cosmetic formulations. The composition was mixed with the emulsion in the following order. Phase I was the aqueous phase. In this phase, water was poured into the main tank. A propeller stirrer was used to hydrogenate Keltrol, panthenol and allantoin with moderate speed stirring at room temperature. Then glycerin was added with continuous stirring. The aqueous phase was heated to a final temperature of 75-77 o C. Phase II, the oil phase, was mixed in a separate container at a moderate stirring speed and then heated to a temperature of 75-77 o C. The ingredients of the oil phase included: Dimethicone 350, cetyl alcohol, Arlacel 165, Finsolv TN, sesame oil, vitamin E-acetate and phenonip. The final emulsification step included the addition of an oil phase (Phase II) to the aqueous phase (Phase I). Both phases were mixed at high speed with a propeller stirrer or homogenizer for 15 minutes. After 15 minutes of stirring, the mixture was slowly cooled to 40 ° C. The stirring speed was reduced as the temperature decreased. At approximately 40 ° C. , Base Composition B was slowly added. The mixture was allowed to cool to room temperature (see table 4).

Пример 14
Приготовление базовых составов эмульсий для использования в косметическом продукте высокой категории.
Example 14
Preparation of basic emulsion formulations for use in a high category cosmetic product.

Базовый состав С дополнительно модифицировали для использования в косметических рецептурах высокой категории. Состав смешали с эмульсией в следующем порядке. Фазой I была водная фаза. В этой фазе залили воду в основной резервуар. Использовали пропеллерную мешалку для гидрирования Keltrol'a, пантенола и аллантоина при перемешивании с умеренной скоростью при комнатной температуре. Затем добавили глицерин при непрерывном перемешивании. Водную фазу нагрели до конечной температуры 75-77oС. Фазу II, масляную фазу, перемешали в отдельной емкости при умеренной скорости перемешивания и затем нагрели до температуры 75-77oС. В число ингредиентов масляной фазы входили: Диметикон 350, цетиловый спирт, Arlacel 165, Finsolv TN, изогексадекан, витамин Е-ацетат и фенонип. Последний этап эмульгирования включал добавление масляной фазы (Фазы II) в водную фазу (Фазу I). Обе фазы смешивали при высокой скорости перемешивания пропеллерной мешалкой или гомогенизатором в течение 15 минут. Через 15 минут перемешивания смесь медленно охладили до 40oС. Скорость перемешивания снижали по мере понижения температуры. Приблизительно при температуре 40oС медленно добавили Базовый состав В. Предоставили возможность смеси охладиться до комнатной температуры (см. таблицу 5).Base composition C was further modified for use in high-grade cosmetic formulations. The composition was mixed with the emulsion in the following order. Phase I was the aqueous phase. In this phase, water was poured into the main tank. A propeller stirrer was used to hydrogenate Keltrol, panthenol and allantoin with moderate speed stirring at room temperature. Then glycerin was added with continuous stirring. The aqueous phase was heated to a final temperature of 75-77 o C. Phase II, the oil phase, was mixed in a separate container at a moderate stirring speed and then heated to a temperature of 75-77 o C. The ingredients of the oil phase included: Dimethicone 350, cetyl alcohol, Arlacel 165, Finsolv TN, isohexadecane, vitamin E-acetate and phenonip. The final emulsification step included the addition of an oil phase (Phase II) to the aqueous phase (Phase I). Both phases were mixed at high speed with a propeller stirrer or homogenizer for 15 minutes. After 15 minutes of stirring, the mixture was slowly cooled to 40 ° C. The stirring speed was reduced as the temperature decreased. At approximately 40 ° C. , Base Composition B was slowly added. The mixture was allowed to cool to room temperature (see table 5).

Пример 15
Приготовление базовых составов эмульсий для использования в косметическом продукте высокой категории.
Example 15
Preparation of basic emulsion formulations for use in a high category cosmetic product.

Базовый состав В дополнительно модифицировали для использования в косметических рецептурах высокой категории. Состав смешали с эмульсией в следующем порядке. Фазой I была водная фаза. В этой фазе воду залили в основной резервуар. Использовали пропеллерную мешалку для гидрирования Keltrol'a, пантенола и аллантоина при перемешивании с умеренной скоростью при комнатной температуре. Затем добавили глицерин при непрерывном перемешивании. Водную фазу нагрели до конечной температуры 75-77oС. Фазу II, масляную фазу, перемешали в отдельной емкости при умеренной скорости перемешивания и затем нагрели до температуры 75-77oС. В число ингредиентов масляной фазы входили: SEE 839, цетиловый спирт, Arlacel 165, Finsolv TN, витамин Е-ацетат и фенонип. Последний этап эмульгирования включал добавление масляной фазы (Фазы II) в водную фазу (Фазу I). Обе фазы смешивали при высокой скорости перемешивания пропеллерной мешалкой или гомогенизатором в течение 15 минут. Через 15 минут перемешивания смесь медленно охладили до 40oС. Скорость перемешивания снижали по мере понижения температуры. Приблизительно при температуре 40oС медленно добавили Базовый состав В. Предоставили возможность смеси охладиться до комнатной температуры (см. таблицу 6).Base composition B was further modified for use in high-grade cosmetic formulations. The composition was mixed with the emulsion in the following order. Phase I was the aqueous phase. In this phase, water was poured into the main tank. A propeller stirrer was used to hydrogenate Keltrol, panthenol and allantoin with moderate speed stirring at room temperature. Then glycerin was added with continuous stirring. The aqueous phase was heated to a final temperature of 75-77 o C. Phase II, the oil phase was mixed in a separate container at a moderate stirring speed and then heated to a temperature of 75-77 o C. The ingredients of the oil phase included: SEE 839, cetyl alcohol, Arlacel 165, Finsolv TN, Vitamin E-acetate and phenonip. The final emulsification step included the addition of an oil phase (Phase II) to the aqueous phase (Phase I). Both phases were mixed at high speed with a propeller stirrer or homogenizer for 15 minutes. After 15 minutes of stirring, the mixture was slowly cooled to 40 ° C. The stirring speed was reduced as the temperature decreased. At approximately 40 ° C. , Base Composition B was slowly added. The mixture was allowed to cool to room temperature (see table 6).

Пример 16
Приготовление крема от загара с фактором защиты 8 от солнечных лучей.
Example 16
Cooking sunblock with protection factor 8 from sunlight.

Базовый состав В дополнительно модифицировали для использования в косметическом креме от загара высокой категории. Состав смешали с эмульсией в следующем порядке. Фазой I была водная фаза. В этой фазе воду залили в основной резервуар. Использовали пропеллерную мешалку для гидрирования Keltrol'a, пантенола и аллантоина при перемешивании с умеренной скоростью при комнатной температуре. Затем добавили глицерин при непрерывном перемешивании. Водную фазу нагрели до конечной температуры 75-77oС. Фазу II, масляную фазу, перемешали в отдельной емкости при умеренной скорости перемешивания и затем нагрели до температуры 75-77oС. В число ингредиентов масляной фазы входили: Диметикон, цетиловый спирт, Arlacel 165, Finsolv TN, кунжутное масло, витамин Е-ацетат и фенонип. Последний этап эмульгирования включал добавление масляной фазы (Фазы II) в водную фазу (Фазу I). Обе фазы смешивали при высокой скорости перемешивания пропеллерной мешалкой или гомогенизатором в течение 15 минут. Через 15 минут перемешивания смесь медленно охладили до 40oС. Скорость перемешивания снижали по мере понижения температуры. Приблизительно при температуре 40oС медленно добавили Базовый состав В. Предоставили возможность смеси охладиться до комнатной температуры (см. таблицу 7).The basic composition B was further modified for use in a cosmetic cream from a tan of a high category. The composition was mixed with the emulsion in the following order. Phase I was the aqueous phase. In this phase, water was poured into the main tank. A propeller stirrer was used to hydrogenate Keltrol, panthenol and allantoin with moderate speed stirring at room temperature. Then glycerin was added with continuous stirring. The aqueous phase was heated to a final temperature of 75-77 o C. Phase II, the oil phase was mixed in a separate container at a moderate stirring speed and then heated to a temperature of 75-77 o C. The ingredients of the oil phase included: Dimethicone, cetyl alcohol, Arlacel 165, Finsolv TN, sesame oil, vitamin E-acetate, and phenonip. The final emulsification step included the addition of an oil phase (Phase II) to the aqueous phase (Phase I). Both phases were mixed at high speed with a propeller stirrer or homogenizer for 15 minutes. After 15 minutes of stirring, the mixture was slowly cooled to 40 ° C. The stirring speed was reduced as the temperature decreased. At approximately 40 ° C. , Base Composition B was slowly added. The mixture was allowed to cool to room temperature (see table 7).

Пример 17
Приготовление крема от загара с фактором защиты 8 от солнечных лучей.
Example 17
Cooking sunblock with protection factor 8 from sunlight.

Состав смешали с эмульсией в следующем порядке. Фазой I была водная фаза. В этой фазе воду залили в основной резервуар. Использовали пропеллерную мешалку для гидрирования каолина и Veegum Ultra при умеренной скорости перемешивания при комнатной температуре. Затем добавили глицерин при непрерывном перемешивании. Водную фазу нагрели до конечной температуры 75-77oС и добавили метилпарабен. Фазу II, масляную фазу, перемешали в отдельной емкости при умеренной скорости перемешивания и затем нагрели до температуры 75-77oС. В число ингредиентов масляной фазы входили: Диметикон 350, цетиловый спирт, Arlacel 165, пропилпарабен, сафлоровое масло, Trivalin SF, Palemol OL и Parsol MCX. Последний этап эмульгирования включал добавление масляной фазы (Фазы II) в водную фазу (Фазу I). Обе фазы смешивали при высокой скорости перемешивания пропеллерной мешалкой или гомогенизатором в течение 15 минут. Через 15 минут перемешивания смесь медленно охладили до 40oС. Скорость перемешивания снижали по мере понижения температуры. При температуре 40oС добавили Germall 115 и, когда температура достигала около 37-40oС, медленно добавляли масляные тельца сафлора. Предоставили возможность смеси охладиться до комнатной температуры и добавили краситель (красный раствор 33). Конечный водородный показатель (рН) составлял 6,0, а вязкость 25000 сП (см. таблицу 8).The composition was mixed with the emulsion in the following order. Phase I was the aqueous phase. In this phase, water was poured into the main tank. A propeller stirrer was used to hydrogenate kaolin and Veegum Ultra at a moderate stirring speed at room temperature. Then glycerin was added with continuous stirring. The aqueous phase was heated to a final temperature of 75-77 ° C. and methyl paraben was added. Phase II, the oil phase, was mixed in a separate container at a moderate stirring speed and then heated to a temperature of 75-77 o C. The ingredients of the oil phase included: Dimethicone 350, cetyl alcohol, Arlacel 165, propyl paraben, safflower oil, Trivalin SF, Palemol OL and Parsol MCX. The final emulsification step included the addition of an oil phase (Phase II) to the aqueous phase (Phase I). Both phases were mixed at high speed with a propeller stirrer or homogenizer for 15 minutes. After 15 minutes of stirring, the mixture was slowly cooled to 40 ° C. The stirring speed was reduced as the temperature decreased. Germall 115 was added at a temperature of 40 ° C. and, when the temperature reached about 37-40 ° C. , safflower oil bodies were slowly added. The mixture was allowed to cool to room temperature and dye was added (red solution 33). The final pH (pH) was 6.0 and the viscosity was 25,000 cP (see table 8).

Пример 18
Приготовление крема для ухода за кожей, содержащего стабильную производную витамина А, ретинилпальмитат.
Example 18
Preparation of a skin care cream containing a stable derivative of vitamin A, retinyl palmitate.

Базовый состав С дополнительно модифицировали для использования в косметическом креме высокой категории для ухода за кожей, содержащем стабильную производную витамина А, ретинилпальмитат. Состав смешали с эмульсией в следующем порядке. Фазой I была водная фаза. В этой фазе воду залили в основной резервуар. Использовали пропеллерную мешалку для гидрирования Keltrol'a, пантенола и аллантоина при перемешивании с умеренной скоростью при комнатной температуре. Затем добавили глицерин при непрерывном перемешивании. Водную фазу нагрели до конечной температуры 75-77oС. Фазу II, масляную фазу, перемешали в отдельной емкости при умеренной скорости перемешивания и затем нагрели до температуры 75-77oС. В число ингредиентов масляной фазы входили: Диметикон 350, цетиловый спирт, Arlacel 165, Finsolv TN, Перметил 101А, фенонип и ретинилпальмитат.The base composition C was further modified for use in a high-grade skin care cosmetic cream containing a stable derivative of vitamin A, retinyl palmitate. The composition was mixed with the emulsion in the following order. Phase I was the aqueous phase. In this phase, water was poured into the main tank. A propeller stirrer was used to hydrogenate Keltrol, panthenol and allantoin with moderate speed stirring at room temperature. Then glycerin was added with continuous stirring. The aqueous phase was heated to a final temperature of 75-77 o C. Phase II, the oil phase, was mixed in a separate container at a moderate stirring speed and then heated to a temperature of 75-77 o C. The ingredients of the oil phase included: Dimethicone 350, cetyl alcohol, Arlacel 165, Finsolv TN, Permethyl 101A, phenonip and retinyl palmitate.

Последний этап эмульгирования включал добавление масляной фазы (Фазы II) в водную фазу (Фазу I). Обе фазы смешивали при высокой скорости перемешивания пропеллерной мешалкой или гомогенизатором в течение 15 минут. Через 15 минут перемешивания смесь медленно охладили до 40oС. Скорость перемешивания снижали по мере понижения температуры. При температуре 40oС медленно добавили Базовый состав С (см. таблицу 9).The final emulsification step included the addition of an oil phase (Phase II) to the aqueous phase (Phase I). Both phases were mixed at high speed with a propeller stirrer or homogenizer for 15 minutes. After 15 minutes of stirring, the mixture was slowly cooled to 40 ° C. The stirring speed was reduced as the temperature decreased. At a temperature of 40 ° C. , Basic Composition C was slowly added (see table 9).

Пример 19
Приготовление сухого крема.
Example 19
Preparation of dry cream.

Состав смешали с эмульсией в следующем порядке. Фазой I была водная фаза. В этой фазе воду залили в основной резервуар. Использовали пропеллерную мешалку для гидрирования каолина и силиката магния и алюминия при перемешивании с умеренной скоростью при комнатной температуре. Затем добавили глицерин при непрерывном перемешивании. Водную фазу нагрели до конечной температуры 75-77oС. Фазу II, масляную фазу, перемешали в отдельной емкости при умеренной скорости перемешивания и затем нагрели до температуры 75-77oС. В число ингредиентов масляной фазы входили: Диметикон 350, цетиловый спирт, Arlacel 165, Trivalin SF и Palemol OL. Последний этап эмульгирования включал добавление масляной фазы (Фазы II) в водную фазу (Фазу I). Обе фазы смешивали при высокой скорости перемешивания пропеллерной мешалкой или гомогенизатором в течение 15 минут. Через 15 минут перемешивания смесь медленно охладили до 40oС. Скорость перемешивания снижали по мере понижения температуры. При температуре 40oС медленно добавили Germaben II и, когда температура достигла около 37-40oС, медленно добавили масляные тельца сафлора. Предоставили возможность смеси охладиться до комнатной температуры. Конечный водородный показатель (рН) был доведен до значения 6,0, а конечная вязкость составляла 25060 сП (см. таблицу 10).The composition was mixed with the emulsion in the following order. Phase I was the aqueous phase. In this phase, water was poured into the main tank. A propeller stirrer was used to hydrogenate kaolin and magnesium and aluminum silicate with stirring at moderate speed at room temperature. Then glycerin was added with continuous stirring. The aqueous phase was heated to a final temperature of 75-77 o C. Phase II, the oil phase, was mixed in a separate container at a moderate stirring speed and then heated to a temperature of 75-77 o C. The ingredients of the oil phase included: Dimethicone 350, cetyl alcohol, Arlacel 165, Trivalin SF and Palemol OL. The final emulsification step included the addition of an oil phase (Phase II) to the aqueous phase (Phase I). Both phases were mixed at high speed with a propeller stirrer or homogenizer for 15 minutes. After 15 minutes of stirring, the mixture was slowly cooled to 40 ° C. The stirring speed was reduced as the temperature decreased. At a temperature of 40 ° C. Germaben II was slowly added, and when the temperature reached about 37-40 ° C. , safflower oil bodies were slowly added. The mixture was allowed to cool to room temperature. The final pH (pH) was adjusted to 6.0, and the final viscosity was 25060 cP (see table 10).

Пример 20
Приготовление ночного крема.
Example 20
Cooking night cream.

Состав смешали с эмульсией в следующем порядке. Фазой I была водная фаза. В этой фазе воду залили в основной резервуар. Использовали пропеллерную мешалку для гидрирования каолина и силиката магния, алюминия при перемешивании с умеренной скоростью при комнатной температуре. Затем добавили глицерин при непрерывном перемешивании. Водную фазу нагрели до конечной температуры 75-77oС. Фазу II, масляную фазу, перемешали в отдельной емкости при умеренной скорости перемешивания и затем нагрели до температуры 75-77oС. В число ингредиентов масляной фазы входили: Диметикон 350, цетиловый спирт, Arlacel 165, Trivalin SF и Palemol OL. Последний этап эмульгирования включал добавление масляной фазы (Фазы II) в водную фазу (Фазу I). Обе фазы смешивали при высокой скорости перемешивания пропеллерной мешалкой или гомогенизатором в течение 15 минут. Через 15 минут перемешивания смесь медленно охладили до 60oС. Скорость перемешивания снижали по мере понижения температуры. При температуре 60oС добавили гликолевую кислоту, при 50oС добавили 25%-ный раствор гидроокиси натрия, при 40oС добавили Germall 115 и, когда температура достигла около 37-40oС, медленно добавили масляные тельца сафлора. Конечный водородный показатель (рН) был доведен до значения 3,64, а конечная вязкость составляла 35000 сП (см. таблицу 11).The composition was mixed with the emulsion in the following order. Phase I was the aqueous phase. In this phase, water was poured into the main tank. A propeller stirrer was used to hydrogenate kaolin and magnesium silicate, aluminum while stirring at moderate speed at room temperature. Then glycerin was added with continuous stirring. The aqueous phase was heated to a final temperature of 75-77 o C. Phase II, the oil phase, was mixed in a separate container at a moderate stirring speed and then heated to a temperature of 75-77 o C. The ingredients of the oil phase included: Dimethicone 350, cetyl alcohol, Arlacel 165, Trivalin SF and Palemol OL. The final emulsification step included the addition of an oil phase (Phase II) to the aqueous phase (Phase I). Both phases were mixed at high speed with a propeller stirrer or homogenizer for 15 minutes. After 15 minutes of stirring, the mixture was slowly cooled to 60 ° C. The stirring speed was reduced as the temperature decreased. Glycolic acid was added at a temperature of 60 ° C, a 25% sodium hydroxide solution was added at 50 ° C, Germall 115 was added at 40 ° C, and when the temperature reached about 37-40 ° C, safflower oil bodies were slowly added. The final pH (pH) was adjusted to 3.64, and the final viscosity was 35,000 cP (see table 11).

Пример 21
Приготовление препарата маски для лица.
Example 21
Preparation of facial mask preparation.

Состав смешали с эмульсией в следующем порядке. Фазой I была водная фаза. В этой фазе воду залили в основной резервуар. Использовали пропеллерную мешалку для гидрирования каолина и силиката магния, алюминия при перемешивании с умеренной скоростью при комнатной температуре. Затем добавили глицерин при непрерывном перемешивании. Водную фазу нагрели до конечной температуры 75-77oС и добавили сырую глину и Бентонит NF ВС. Фазу II, масляную фазу, перемешали в отдельной емкости при умеренной скорости перемешивания и затем нагрели до температуры 75-77oС. В число ингредиентов масляной фазы входили: Диметикон 350, Trivent OC-G, Arlacel 165, полипарабин и сафлоровое масло. Последний этап эмульгирования включал добавление масляной фазы (Фазы II) в водную фазу (Фазу I). Обе фазы смешивали при высокой скорости перемешивания пропеллерной мешалкой или гомогенизатором в течение 15 минут. Через 15 минут перемешивания смесь медленно охладили до 40oС. Скорость перемешивания снижали по мере понижения температуры. При температуре 40oС добавили Germall 115 и фитиновую кислоту и, когда температура достигла около 37-40oС, медленно добавили масляные тельца сафлора. Конечный водородный показатель (рН) составлял 1,49, а вязкость составляла 45000 сП (см. таблицу 12).The composition was mixed with the emulsion in the following order. Phase I was the aqueous phase. In this phase, water was poured into the main tank. A propeller stirrer was used to hydrogenate kaolin and magnesium silicate, aluminum while stirring at moderate speed at room temperature. Then glycerin was added with continuous stirring. The aqueous phase was heated to a final temperature of 75-77 ° C. and crude clay and Bentonite NF BC were added. Phase II, the oil phase, was mixed in a separate container at a moderate stirring speed and then heated to a temperature of 75-77 o C. The ingredients of the oil phase included: Dimethicone 350, Trivent OC-G, Arlacel 165, polyparabine and safflower oil. The final emulsification step included the addition of an oil phase (Phase II) to the aqueous phase (Phase I). Both phases were mixed at high speed with a propeller stirrer or homogenizer for 15 minutes. After 15 minutes of stirring, the mixture was slowly cooled to 40 ° C. The stirring speed was reduced as the temperature decreased. At a temperature of 40 ° C. Germall 115 and phytic acid were added, and when the temperature reached about 37-40 ° C. , safflower oil bodies were slowly added. The final pH (pH) was 1.49 and the viscosity was 45,000 cP (see table 12).

Пример 22
Сравнение косметических препаратов, в которых использовали промытые масляные тельца и липидные везикулы.
Example 22
Comparison of cosmetic preparations using washed oil bodies and lipid vesicles.

Промытые масляные тельца готовили так же, как это описано в Примере 2, их пастеризовали и добавляли 0,1% BHT, 0,1% ВНА и 0,1% Glydant Plus. Липидные везикулы готовили в соответствии с описанием патента США 5683740 за исключением того, что их готовили из семян сафлора, пастеризовали и добавляли 0,1% BHT, 0,1% ВНА и 0,1% Glydant Plus. The washed oil bodies were prepared as described in Example 2, they were pasteurized and 0.1% BHT, 0.1% BHA and 0.1% Glydant Plus were added. Lipid vesicles were prepared as described in US Pat. No. 5,683,740, except that they were prepared from safflower seeds, pasteurized, and 0.1% BHT, 0.1% BHA and 0.1% Glydant Plus were added.

Масляные тельца и липидные везикулы сравнивали по стабильности эмульсии, изменению цвета, изменению запаха, вязкости, развитию микроорганизмов и желательным для косметических препаратов параметрам. Для оценки стабильности образцы испытывали при 45oС, 4oС и комнатной температуре (три месяца при 45oС эквивалентны приблизительно двум годам хранения при комнатной температуре). Для оценки стабильности эмульсии по 150 г каждого образца выдерживали при 45oС и по 75 г каждого образца выдерживали при комнатной температуре или при 4oС. Стабильность эмульсии оценивали по разделению эмульсии, отделению капель масла и коалисценции. Образцы, выдерживавшиеся при 4oС, использовали в качестве эталонов для сравнения. Изменение цвета оценивали визуально. Цвет оценивали по образцу, который подвергали ускоренному "старению" в термокамере (при 45oС), и образцу, выдерживавшемуся при комнатной температуре, и сравнивали с образцом, хранившимся при 4oС в качестве эталона. Запах оценивали так же, как и цвет, и сравнивали с образцом, хранившимся при 4oС в качестве эталона. Для обеспечения достоверности запах определяли два эксперта, которые соглашались на дегустирование. Вязкость каждого образца определяли при комнатной температуре, используя вискозиметр модели RVT со шпинделем Е при скорости 10 об/мин. Развитие микроорганизмов определяли по пробе массой 10 г от каждого образца. Пробу растворяли и 1 мл раствора вводили в триптиковый соевый агар при 49oС, подвергали вихревой обработке и предоставляли возможность охлаждения. Посевы в чашках Петри инкубировали при 35oС в течение 48 часов и определяли количество колоний микроорганизмов. Наконец, косметические свойства оценивали три эксперта, из которых два были знакомы с масляными тельцами и липидными везикулами, а один эксперт - нет. Косметические свойства включали: проникновение в кожу, осадок, остающийся на коже после того, как образец втирали в кожу, сухость (недостаток влаги) и жирность.Oil bodies and lipid vesicles were compared for emulsion stability, color change, odor, viscosity, development of microorganisms and parameters desirable for cosmetic preparations. To assess stability, the samples were tested at 45 ° C, 4 ° C and room temperature (three months at 45 ° C are equivalent to approximately two years of storage at room temperature). To assess the stability of the emulsion, 150 g of each sample was kept at 45 ° C and 75 g of each sample was kept at room temperature or at 4 ° C. The stability of the emulsion was evaluated by separation of the emulsion, separation of oil droplets and coalescence. Samples aged at 4 ° C. were used as reference for comparison. Color change was evaluated visually. The color was evaluated by the sample, which was subjected to accelerated "aging" in a heat chamber (at 45 ° C), and the sample, which was kept at room temperature, and compared with the sample stored at 4 ° C as a reference. Odor was evaluated in the same way as color, and compared with a sample stored at 4 ° C. as a reference. To ensure authenticity, the smell was determined by two experts who agreed to the tasting. The viscosity of each sample was determined at room temperature using a model RVT viscometer with spindle E at a speed of 10 rpm. The development of microorganisms was determined by a sample weighing 10 g from each sample. The sample was dissolved and 1 ml of the solution was introduced into tryptic soy agar at 49 ° C, subjected to vortex processing and allowed to cool. Crops in Petri dishes were incubated at 35 o C for 48 hours and the number of colonies of microorganisms was determined. Finally, three experts evaluated the cosmetic properties, of which two were familiar with oil bodies and lipid vesicles, while one expert was not. Cosmetic properties included: penetration into the skin, a residue remaining on the skin after the sample was rubbed into the skin, dryness (lack of moisture) and fat content.

В Таблице 13 представлены результаты испытаний масляных телец. рН образца масляных телец был постоянно на уровне 6,50 во всех испытаниях при комнатной температуре и при 45oС. Препарат из масляных телец при нанесении его на кожу распределяли равномерно по коже, при этом он быстро проникал в кожу и почти не оставалось осадка на поверхности кожи. Препарат из масляных телец также сохранял цвет, запах, вязкость и стабильность эмульсии.Table 13 presents the test results of oil bodies. The pH of the sample of oil bodies was constantly at 6.50 in all tests at room temperature and at 45 o C. The preparation of oil bodies when applied to the skin was distributed evenly over the skin, while it quickly penetrated the skin and there was almost no residue on skin surface. The oil body preparation also retained the color, smell, viscosity and stability of the emulsion.

В Таблице 14 представлены результаты испытаний липидных везикул. рН образца из липидных везикул было сложно определять из-за полного разделения, но приблизительно он составлял 6,8. Препарат из липидных везикул при нанесении на кожу был очень жирным и оставлял осадок в виде пленки на коже. Препарат из липидных везикул был стабильным по отношению к развитию микроорганизмов, но не сохранял цвет, запах и стабильность эмульсии. Table 14 presents the test results of lipid vesicles. The pH of the sample from lipid vesicles was difficult to determine due to complete separation, but it was approximately 6.8. The preparation of lipid vesicles when applied to the skin was very oily and left a residue in the form of a film on the skin. The preparation of lipid vesicles was stable against the development of microorganisms, but did not preserve the color, smell and stability of the emulsion.

Упомянутые выше результаты показывают, что препарат из промытых в масле масляных телец отчетливо превосходит препарат из липидных везикул как по физическим параметрам (цвету, запаху, стабильности), так и по косметическим параметрам (проницаемости, остающемуся осадку и жирности). Эти свойства весьма существенны для препаратов, предназначенных для личного ухода. The results mentioned above show that the preparation of oil bodies washed in oil is clearly superior to the preparation of lipid vesicles both in physical parameters (color, smell, stability) and in cosmetic parameters (permeability, remaining sediment and fat content). These properties are very important for drugs intended for personal care.

Claims (41)

1. Способ получения масляной эмульсии, предусматривающий 1) получение масляных телец из клетки, 2) промывку масляных телец с получением промытых масляных телец, содержащих целые масляные тельца одинаковых размера, формы и плотности, и 3) смешивание промытых масляных телец с жидкой фазой для образования эмульсии. 1. A method for producing an oil emulsion, comprising 1) obtaining oil bodies from a cell, 2) washing oil bodies to obtain washed oil bodies containing whole oil bodies of the same size, shape and density, and 3) mixing the washed oil bodies with a liquid phase to form emulsions. 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что клетка представляет собой клетку растения. 2. The method according to p. 1, characterized in that the cell is a plant cell. 3. Способ по п. 2, отличающийся тем, что указанную клетку растения получают из спор, пыльцы, семян или вегетативного органа растения. 3. The method according to p. 2, characterized in that the said plant cell is obtained from spores, pollen, seeds or the vegetative organ of the plant. 4. Способ по п. 3, отличающийся тем, что масляные тельца получают из семян растения. 4. The method according to p. 3, characterized in that the oil bodies are obtained from the seeds of the plant. 5. Способ по любому из пп. 1-4, отличающийся тем, что указанная стадия включает добавление консервирующего агента. 5. The method according to any one of paragraphs. 1-4, characterized in that said step comprises the addition of a preservative agent. 6. Способ по любому из пп. 1-4, отличающийся тем, что указанная эмульсия представляет собой пищевой или кормовой продукт, продукт личной гигиены, фармацевтический продукт или промышленный продукт. 6. The method according to any one of paragraphs. 1-4, characterized in that the emulsion is a food or feed product, personal care product, pharmaceutical product or industrial product. 7. Способ по п. 4, отличающийся тем, что указанное растение является масличным растением. 7. The method according to p. 4, characterized in that said plant is an oilseed plant. 8. Способ по п. 4, отличающийся тем, что указанное растение выбирают из группы растений, состоящей из рапса (Brassica spp. ), сои (Glycine max), подсолнечника (Helianthus annuus), масличной пальмы (Elaeis guineeis), хлопка (виды Gossypium), земляного ореха (Arachis hypogaea), кокосового ореха (Cocus nucifera), касторки (Ricinus communis), сафлора (Carthamus tinctorius), горчицы (Brassica spp. и Sinapis alba), кориандра (Coriandrum sativum), тыквы (Cucurbita maxima), льна (Linum usitatissimum), бразильского ореха (Bertholletia excelsa), жожоба (Simmondsia chinensis) и кукурузы (Zea mays). 8. The method according to p. 4, characterized in that said plant is selected from the group of plants consisting of rapeseed (Brassica spp.), Soybean (Glycine max), sunflower (Helianthus annuus), oil palm (Elaeis guineeis), cotton (species Gossypium), peanuts (Arachis hypogaea), coconut (Cocus nucifera), castor oil (Ricinus communis), safflower (Carthamus tinctorius), mustard (Brassica spp. And Sinapis alba), coriander (Coriandrum sativuma), pumpkin , flax (Linum usitatissimum), Brazil nut (Bertholletia excelsa), jojoba (Simmondsia chinensis) and corn (Zea mays). 9. Способ получения масляной эмульсии, предусматривающий 1) получение масляных телец из семян растений способом, который включает a) размол семян растений, b) удаление твердых веществ из размолотых семян, c) отделение фазы масляных телец от водной фазы; 2) промывку масляных телец с получением промытых масляных телец, содержащих целые масляные тельца одинаковых размера, формы и плотности; 3) смешивание промытых масляных телец с жидкой фазой для образования эмульсии. 9. A method for producing an oil emulsion, comprising 1) obtaining oil bodies from plant seeds by a method that includes a) grinding the seeds of plants, b) removing solids from the milled seeds, c) separating the oil body phase from the aqueous phase; 2) washing the oil bodies with obtaining washed oil bodies containing whole oil bodies of the same size, shape and density; 3) mixing the washed oil bodies with the liquid phase to form an emulsion. 10. Способ по п. 9, отличающийся тем, что жидкую фазу добавляют перед или за стадией размола. 10. The method according to p. 9, characterized in that the liquid phase is added before or after the grinding stage. 11. Способ по п. 10, отличающийся тем, что жидкую фазу добавляют к промытым масляным тельцам и жидкую фазу и промытые масляные тельца перемешивают до тех пор, пока не образуется эмульсия. 11. The method according to p. 10, characterized in that the liquid phase is added to the washed oil bodies and the liquid phase and the washed oil bodies are mixed until an emulsion is formed. 12. Способ по п. 10 или 11, отличающийся тем, что указанной жидкой фазой является вода. 12. The method according to p. 10 or 11, characterized in that the said liquid phase is water. 13. Способ по п. 12, отличающийся тем, что указанная жидкая фаза присутствует в эмульсии в количестве 1 - 99 об. %/об. 13. The method according to p. 12, characterized in that the said liquid phase is present in the emulsion in an amount of 1 to 99 vol. %/about. 14. Способ по п. 9, отличающийся тем, что указанное растение является масличным растением. 14. The method according to p. 9, characterized in that said plant is an oilseed plant. 15. Способ по п. 9, отличающийся тем, что указанное растение выбирают из группы растений, состоящей из рапса (Brassica spp. ), сои (Glycine max), подсолнечника (Helianthus annuus), масличной пальмы (Elaeis guineeis), хлопка (виды Gossypium), земляного ореха (Arachis hypogaea), кокосового ореха (Cocus nucifera), касторки (Ricinus communis), сафлора (Carthamus tinctorius), горчицы (Brassica spp. и Sinapis alba), кориандра (Coriandrum sativum), тыквы (Cucurbita maxima), льна (Linum usitatissimum), бразильского ореха (Bertholletia excelsa), жожоба (Simmondsia chinensis) и кукурузы (Zea mays). 15. The method according to p. 9, characterized in that said plant is selected from the group of plants consisting of rapeseed (Brassica spp.), Soybean (Glycine max), sunflower (Helianthus annuus), oil palm (Elaeis guineeis), cotton (species Gossypium), peanuts (Arachis hypogaea), coconut (Cocus nucifera), castor oil (Ricinus communis), safflower (Carthamus tinctorius), mustard (Brassica spp. And Sinapis alba), coriander (Coriandrum sativuma), pumpkin , flax (Linum usitatissimum), Brazil nut (Bertholletia excelsa), jojoba (Simmondsia chinensis) and corn (Zea mays). 16. Способ по п. 9, отличающийся тем, что указанные твердые вещества удаляют путем центрифугирования или фильтрации указанных размолотых семян. 16. The method of claim 9, wherein said solids are removed by centrifugation or filtration of said ground seeds. 17. Способ по п. 9, отличающийся тем, что указанную фазу масляных телец отделяют от указанной водной фазы способом, основанным на гравитации, или способом, основанным на исключении по размеру. 17. The method according to p. 9, characterized in that the said phase of the oil bodies is separated from the specified aqueous phase by a method based on gravity, or by a method based on size exclusion. 18. Способ по п. 9, отличающийся тем, что промытые масляные тельца практически свободны от не принадлежащих масляным тельцам протеинов семян, непитательных компонентов, крахмала, глюкозинилатов или продуктов их распада и волокон. 18. The method according to p. 9, characterized in that the washed oil bodies are practically free of seed proteins, non-nutritional components, starch, glucosinylates or their breakdown products and fibers that do not belong to the oil bodies. 19. Способ по п. 18, отличающийся тем, что указанные протеины семян являются гликозилированными. 19. The method of claim 18, wherein said seed proteins are glycosylated. 20. Способ по любому из пп. 9-19, отличающийся тем, что указанная стадия смешивания включает добавление консервирующего агента. 20. The method according to any one of paragraphs. 9-19, characterized in that the said mixing step involves the addition of a preservative agent. 21. Способ по любому из пп. 9-19, отличающийся тем, что указанная эмульсия представляет собой пищевой или кормовой продукт, продукт личной гигиены, фармацевтический продукт или промышленный продукт. 21. The method according to any one of paragraphs. 9-19, characterized in that the emulsion is a food or feed product, personal care product, pharmaceutical product or industrial product. 22. Способ по п. 18, отличающийся тем, что семена погружают в жидкую фазу перед размолом на время от приблизительно 15 мин до приблизительно 2 суток. 22. The method according to p. 18, characterized in that the seeds are immersed in the liquid phase before grinding for a period of from about 15 minutes to about 2 days. 23. Эмульсия, содержащая препарат промытых масляных телец одинаковых размера, формы и плотности, полученная способом по п. 1. 23. An emulsion containing a preparation of washed oil bodies of the same size, shape and density, obtained by the method according to p. 1. 24. Эмульсия по п. 23, отличающаяся тем, что дополнительно включает жидкую фазу. 24. The emulsion according to p. 23, characterized in that it further includes a liquid phase. 25. Эмульсия по п. 24, отличающаяся тем, что указанной жидкой фазой является вода. 25. The emulsion according to p. 24, characterized in that the said liquid phase is water. 26. Эмульсия по п. 23, отличающаяся тем, что дополнительно содержит консервант. 26. The emulsion according to p. 23, characterized in that it further comprises a preservative. 27. Эмульсия по п. 23, отличающаяся тем, что масляные тельца получают из растения. 27. The emulsion according to claim 23, wherein the oil bodies are obtained from a plant. 28. Эмульсия по п. 27, отличающаяся тем, что масляные тельца получают из растения, выбранного из группы растений, состоящей из рапса (Brassica spp. ), сои (Glycine max), подсолнечника (Helianthus ainnuus), масличной пальмы (Elaeis guineeis), хлопка (виды Gossypium), земляного ореха (Arachis hypogaea), кокосового ореха (Cocus nucifera), касторки (Ricinus communis), сафлора (Carthamus tinctorius), горчицы (Brassica spp. и Sinapis alba), кориандра (Coriandrum sativum), тыквы (Cucurbita maxima), льна (Linum usitatissimum), бразильского ореха (Bertholletia excelsa), жожоба (Simmondsia chinensis) и кукурузы (Zea mays). 28. The emulsion according to claim 27, characterized in that the oil bodies are obtained from a plant selected from the group of plants consisting of rapeseed (Brassica spp.), Soybean (Glycine max), sunflower (Helianthus ainnuus), oil palm (Elaeis guineeis) , cotton (Gossypium species), peanut (Arachis hypogaea), coconut (Cocus nucifera), castor oil (Ricinus communis), safflower (Carthamus tinctorius), mustard (Brassica spp. and Sinapis alba), coriander (Coriandrum sativa) (Cucurbita maxima), flax (Linum usitatissimum), Brazil nut (Bertholletia excelsa), jojoba (Simmondsia chinensis) and corn (Zea mays). 29. Эмульсия по любому из пп. 23-28, отличающаяся тем, что указанная эмульсия представляет собой пищевой или кормовой продукт, продукт личной гигиены, фармацевтический продукт или промышленный продукт. 29. The emulsion according to any one of paragraphs. 23-28, characterized in that the emulsion is a food or feed product, personal care product, pharmaceutical product or industrial product. 30. Эмульсия по п. 29, отличающаяся тем, что указанный пищевой продукт выбран из группы, состоящей из немолочных заменителей, немолочного сыра, немолочного йогурта, маргарина, майонеза, винегрета (соуса для заправки салата), глазури, мороженого, салатных заправок, искусственной горчицы, сладостей, жевательной резинки, пудинга, выпечных продуктов, приправ, соков, детского питания, вкусовых носителей, текстурирующих агентов, майонеза без холестерина и соуса бешамель. 30. The emulsion according to claim 29, characterized in that said food product is selected from the group consisting of non-dairy substitutes, non-dairy cheese, non-dairy yogurt, margarine, mayonnaise, vinaigrette (salad dressing sauce), glaze, ice cream, salad dressings, artificial mustard, sweets, chewing gum, pudding, baked goods, seasonings, juices, baby food, flavoring agents, texturing agents, cholesterol-free mayonnaise and bechamel sauce. 31. Эмульсия по п. 29, отличающаяся тем, что указанный кормовой продукт представляет собой корм для домашних животных или домашнего скота или корм для рыб. 31. The emulsion according to p. 29, characterized in that said feed product is a pet food or livestock or fish feed. 32. Эмульсия по п. 29, отличающаяся тем, что указанный продукт личной гигиены выбран из группы, состоящей из мыла, косметических продуктов, кремов для кожи, кремов для лица, зубной пасты, губной помады, отдушки, макияжа, подложек, румян, туши для ресниц, теней для глаз, солнцезащитных лосьонов и продуктов для ухода за волосами. 32. The emulsion according to p. 29, characterized in that said personal care product is selected from the group consisting of soap, cosmetic products, skin creams, face creams, toothpaste, lipstick, perfume, makeup, substrates, blush, mascara for eyelashes, eye shadow, sun lotion and hair care products. 33. Эмульсия по п. 29, отличающаяся тем, что указанный фармацевтический продукт выбран из группы, состоящей из терапевтических агентов, диагностических агентов и доставляющих агентов. 33. The emulsion according to claim 29, wherein said pharmaceutical product is selected from the group consisting of therapeutic agents, diagnostic agents, and delivery agents. 34. Эмульсия по п. 33, отличающаяся тем, что указанный терапевтический агент представляет собой гормон роста. 34. The emulsion according to p. 33, wherein the specified therapeutic agent is a growth hormone. 35. Эмульсия по п. 29, отличающаяся тем, что указанный промышленный продукт выбран из группы, состоящей из красок, покрытий, смазывающих веществ, пленок, гелей, жидкости для бурения, грунтовки бумаги, латекса, строительных материалов или материалов для дорожного строительства, чернил, красителей, восков, полировок и химикатов для сельского хозяйства. 35. The emulsion according to claim 29, wherein said industrial product is selected from the group consisting of paints, coatings, lubricants, films, gels, drilling fluids, paper primers, latex, building materials or materials for road construction, ink , dyes, waxes, polishes and chemicals for agriculture. 36. Препарат для кормления рыб, покрытый эмульсией по любому из пп. 23-28. 36. A preparation for feeding fish, coated with an emulsion according to any one of paragraphs. 23-28. 37. Препарат для кормления рыб по п. 36, отличающийся тем, что указанная эмульсия дополнительно содержит терапевтический пептид. 37. A preparation for feeding fish according to claim 36, wherein said emulsion further comprises a therapeutic peptide. 38. Препарат для кормления рыб по п. 37, отличающийся тем, что указанный терапевтический пептид представляет собой гормон. 38. A preparation for feeding fish according to claim 37, characterized in that said therapeutic peptide is a hormone. 39. Способ получения масляной эмульсии для местного применения, предусматривающий 1) получение масляных телец из клетки растений; 2) промывку масляных телец с получением промытых масляных телец, содержащих целые масляные тельца одинаковых размера, формы и плотности; 3) смешивание промытых масляных телец с подходящей жидкой фазой для получения эмульсии для местного применения. 39. A method of producing an oil emulsion for topical application, comprising 1) obtaining oil bodies from plant cells; 2) washing the oil bodies with obtaining washed oil bodies containing whole oil bodies of the same size, shape and density; 3) mixing the washed oil bodies with a suitable liquid phase to obtain an emulsion for topical application. 40. Способ по п. 39, отличающийся тем, что стадии получения масляных телец из клетки растения включают a) размол семян растений, b) удаление твердых веществ из размолотых семян, и c) отделение фазы масляных телец от водной фазы. 40. The method of claim 39, wherein the steps of obtaining oil bodies from a plant cell include a) grinding the seeds of the plants, b) removing solids from the ground seeds, and c) separating the phase of the oil bodies from the aqueous phase. 41. Масляная эмульсия для местного применения, полученная способом по любому из п. 39 или 40 и содержащая промытые масляные тельца одинаковых размера, формы и плотности в количестве 1-99% и жидкую фазу. 41. An oil emulsion for topical application, obtained by the method according to any one of p. 39 or 40 and containing washed oil bodies of the same size, shape and density in an amount of 1-99% and a liquid phase. Приоритет по пунктам и признакам формулы:
27.05.1997 - по пп. 1-41, кроме признака "масляные тельца промывают";
27.05.1998 - по пп. 1-41 и касается признака "масляные тельца промывают".
Priority on points and signs of the formula:
05/27/1997 - on PP. 1-41, in addition to the sign “oil bodies washed”;
05/27/1998 - on PP. 1-41 and relates to the sign "oil bodies washed."
RU99128048A 1997-05-27 1998-05-27 Method for obtaining oil emulsion (variants), emulsion, preparation for feeding fish, method for obtaining oil emulsion for local application and oil emulsion for local application RU2200420C2 (en)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US4777997P 1997-05-27 1997-05-27
US4775397P 1997-05-27 1997-05-27
US60/047,779 1997-05-27
US60/047,753 1997-05-27
US60/075,864 1998-02-25
US60/075,863 1998-02-25

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU99128048A RU99128048A (en) 2001-11-27
RU2200420C2 true RU2200420C2 (en) 2003-03-20

Family

ID=26725395

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU99128048A RU2200420C2 (en) 1997-05-27 1998-05-27 Method for obtaining oil emulsion (variants), emulsion, preparation for feeding fish, method for obtaining oil emulsion for local application and oil emulsion for local application

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2200420C2 (en)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2735783C1 (en) * 2020-02-14 2020-11-09 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Волгоградский государственный аграрный университет" (ФГБОУ ВО Волгоградский ГАУ) Food thick sauce
RU2806276C2 (en) * 2018-06-22 2023-10-30 Джонсон И Джонсон Консьюмер Инк. Method of production of emulsion with a liquid crystal structure
WO2024047083A1 (en) * 2022-08-31 2024-03-07 Société des Produits Nestlé S.A. Spoonable oil product comprising stable polyunsaturated fatty acid

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2806276C2 (en) * 2018-06-22 2023-10-30 Джонсон И Джонсон Консьюмер Инк. Method of production of emulsion with a liquid crystal structure
RU2735783C1 (en) * 2020-02-14 2020-11-09 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Волгоградский государственный аграрный университет" (ФГБОУ ВО Волгоградский ГАУ) Food thick sauce
WO2024047083A1 (en) * 2022-08-31 2024-03-07 Société des Produits Nestlé S.A. Spoonable oil product comprising stable polyunsaturated fatty acid

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6183762B1 (en) Oil body based personal care products
EP0986309B1 (en) Uses of oil bodies
US6372234B1 (en) Products for topical applications comprising oil bodies
US11096884B2 (en) Composition containing oleosomes of different size distribution
US6599513B2 (en) Products for topical applications comprising oil bodies
US7585645B2 (en) Thioredoxin and thioredoxin reductase containing oil body based products
AU2012214094B2 (en) Artificial oil bodies
EP1905309A1 (en) Uses of oil bodies
MXPA01005276A (en) Oil bodies as topical delivery vehicles for active agents.
RU2200420C2 (en) Method for obtaining oil emulsion (variants), emulsion, preparation for feeding fish, method for obtaining oil emulsion for local application and oil emulsion for local application
CA2290278C (en) Oil body based personal care products
AU772919B2 (en) Uses of oil bodies
UA66360C2 (en) Use of oil emulsions
MXPA99010958A (en) Uses of oil bodies

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20130528