RU2196600C2 - Method of preparing glycoside eliciting cardiotonic effect - Google Patents
Method of preparing glycoside eliciting cardiotonic effect Download PDFInfo
- Publication number
- RU2196600C2 RU2196600C2 RU99123307A RU99123307A RU2196600C2 RU 2196600 C2 RU2196600 C2 RU 2196600C2 RU 99123307 A RU99123307 A RU 99123307A RU 99123307 A RU99123307 A RU 99123307A RU 2196600 C2 RU2196600 C2 RU 2196600C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- chloroform
- extract
- alcohol
- ethyl alcohol
- glycosides
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, в частности к способам получения гликозидов, обладающих кардиотоническим действием, применяемых в медицинской практике для лечения сердечно-сосудистых заболеваний. The invention relates to the pharmaceutical industry, in particular to methods for producing glycosides having a cardiotonic effect, used in medical practice for the treatment of cardiovascular diseases.
Известен способ получения сердечных гликозидов, согласно которому сухие измельченные листья акокантеры ядовитой экстрагируют 96% этиловым спиртом до отрицательной реакции на сердечные гликозиды. Спиртовый экстракт упаривают в вакууме до густого остатка, который растворяют в 35% этиловом спирте, после чего фильтруют через оксид алюминия (соотношение густой экстракт-адсорбент 1: 5). Адсорбент промывают 35% спиртом этиловым. Из спирто-водного раствора сердечные гликозиды трижды извлекают хлороформом, а затем трижды смесью хлороформа и спирта этилового (2:1). Объединенные спирто-хлороформные извлечения промывают дважды дистиллированной водой и упаривают досуха в вакууме, получают очищенную сумму гликозидов (1). There is a method of producing cardiac glycosides, according to which dry powdered leaves of poisonous acocanters are extracted with 96% ethanol to negatively react to cardiac glycosides. The alcoholic extract is evaporated in vacuo to a thick residue, which is dissolved in 35% ethanol, and then filtered through alumina (ratio of thick extract-adsorbent 1: 5). The adsorbent is washed with 35% ethyl alcohol. From an alcohol-water solution, cardiac glycosides are extracted three times with chloroform, and then three times with a mixture of chloroform and ethyl alcohol (2: 1). The combined alcohol-chloroform extracts are washed twice with distilled water and evaporated to dryness in vacuo to give a purified amount of glycosides (1).
Известен способ получения сердечных гликозидов, согласно которому экстракт, полученный при извлечении гликозидов из наперстянки шерстистой 80-90% этанолом, концентрируют в вакууме. Из концентрата, содержащего ланатозид С и около 20-25% спирта, экстрагируют хлорофиллы толуолом при перемешивании с последующим разделением фаз. Водно-спиртовую фазу дополнительно экстрагируют толуолом два раза аналогичным образом. Получают очищенный водно-спиртовой раствор, содержащий ланатозид С (2). A known method of producing cardiac glycosides, according to which the extract obtained by extracting glycosides from digitalis woolly 80-90% ethanol, is concentrated in vacuo. From a concentrate containing lanatoside C and about 20-25% alcohol, chlorophylls are extracted with toluene with stirring, followed by phase separation. The aqueous-alcoholic phase is further extracted with toluene twice in a similar manner. A purified aqueous-alcoholic solution is obtained containing lanatoside C (2).
Известен способ получения дигоксина, согласно которому измельченные листья наперстянки шерстистой увлажняют водой с добавлением толуола и карбоната кальция и выдерживают в термостате 48 ч при 38-42oС. Затем сырье переносят в реактор с мешалкой, прибавляют смесь хлористого метилена-этанола и хлористый натрий, перемешивают, после чего экстракт сливают в емкость, сушат безводным сульфатом натрия и упаривают до густого остатка. Упаренный экстракт смешивают с окисью алюминия и сушат на воздухе. В колонку помещают чистую окись алюминия, а затем окись алюминия с экстрактом. Промывают колонку вначале толуолом, а затем хлороформом. Хлороформные извлечения упаривают досуха и нагревают с толуолом. После охлаждения толуол декантируют, а остаток растворяют при нагревании в ацетоне и оставляют при 0o С на 4 ч. Выпавшие кристаллы дигоксина отфильтровывают под вакуумом и вносят в колбу с этилацетатом. Смесь кипятят 5 мин на водяной бане и фильтруют. Полученные кристаллы растворяют в смеси хлористый метилен-этанол (2:1), добавляют активированный уголь, фильтруют, упаривают и отделяют выпавшие кристаллы на фильтре под вакуумом, после чего сушат на воздухе и получают чистый дигоксин (3).A known method of producing digoxin, according to which the chopped digitalis wool leaves are moistened with water with the addition of toluene and calcium carbonate and kept in a thermostat for 48 hours at 38-42 o C. Then the raw materials are transferred to a reactor with a stirrer, a mixture of methylene chloride-ethanol and sodium chloride is added, stirred, after which the extract is poured into a container, dried with anhydrous sodium sulfate and evaporated to a thick residue. One stripped off extract is mixed with alumina and dried in air. Pure alumina and then alumina with extract are placed in the column. The column is washed first with toluene and then with chloroform. The chloroform extracts are evaporated to dryness and heated with toluene. After cooling, toluene is decanted, and the residue is dissolved in acetone by heating and left at 0 ° C. for 4 hours. The precipitated digoxin crystals are filtered off under vacuum and introduced into a flask with ethyl acetate. The mixture is boiled for 5 minutes in a water bath and filtered. The obtained crystals were dissolved in a mixture of methylene chloride-ethanol (2: 1), activated carbon was added, filtered, evaporated and the precipitated crystals were separated on a filter under vacuum, then dried in air and pure digoxin was obtained (3).
Известен способ получения дигоксина, согласно которому измельченные листья наперстянки шерстистой увлажняют водой и выдерживают в термостате 25 ч при 37-40oС. Затем сырье переносят в реактор с мешалкой, прибавляют смесь хлористого метилена-этанола (9:1), перемешивают в течение 4 ч и экстракт отфильтровывают на нутч-фильтре. Отфильтрованное сырье аналогичным образом экстрагируют еще два раза. Объединенный экстракт промывают дистиллированной водой и упаривают. Полученный густой экстракт растворяют в формамиде. К раствору прибавляют смесь хлороформ-бензол (2:3), перемешивают, отстаивают, затем отделяют хлороформно-бензольный слой. Такую обработку проводят пять раз. Из очищенного формамидного раствора дигоксин извлекают семь раз хлороформом, перемешивают и отстаивают. Хлороформный раствор промывают от остатков формамида три раза водой. Промывные воды для извлечения из них частично перешедшего дигоксина обрабатывают смесью хлороформ-изопропанол (4:1,2). Спирто-хлороформный экстракт присоединяют к основному хлороформному раствору и упаривают. Остаток растворяют в смеси хлороформ-изопропанол (3:1), прибавляют раствор карбоната натрия, перемешивают и после отстаивания отделяют содовый слой. Спирто-хлороформный раствор промывают дистиллированной водой до нейтральной реакции и упаривают. Кубовый остаток растворяют в ацетоне, прибавляют бензол и сгущают при нагревании на кипящей водяной бане, при этом дигоксин выпадает в осадок в виде густой массы. Такую очистку из бензола повторяют еще два раза. Аморфный дигоксин растворяют в ацетоне, сгущают раствор на горячей водяной бане и оставляют раствор на 20 мин при 20oС. Выпавшие кристаллы дигоксина отфильтровывают, промывают ацетоном и высушивают. Полученный технический дигоксин растворяют в смеси хлороформ-этанол (85: 15) и очищают, пропуская через слой окиси алюминия. Адсорбат промывают чистым растворителем, а фильтрат сгущают под вакуумом, прибавляют горячий этанол и снова сгущают. Кристаллы дигоксина отделяют, промывают этанолом и высушивают, получая чистый дигоксин. Маточные и бензольные растворы, оставшиеся после получения аморфного дигоксина, объединяют, упаривают и полученный остаток хроматографируют на колонке в системе растворителей ацетон-бензол (1: 3), этиленгликоль. В качестве носителя стационарной фазы применяют окись алюминия. Носитель пропитывают этиленгликолем, смешивают с ацетон-бензолом (1: 3), насыщенным этиленгликолем, и переносят в колонку. Дигоксин, полученный из маточных растворов растворяют при нагревании в смеси ацетон-бензол (1:3), насыщенной этиленгликолем, и наносят на колонку. Элюирование проводят той же системой растворителей. Фракции, содержащие дигоксин, объединяют, упаривают, кристаллизуют из этанола и дополнительно получают чистый дигоксин (4).A known method of producing digoxin, according to which the crushed digitalis wool leaves are moistened with water and incubated for 25 hours at 37-40 o C. Then the raw materials are transferred to a reactor with a stirrer, a mixture of methylene chloride-ethanol (9: 1) is added, stirred for 4 h and the extract is filtered on a suction filter. The filtered feed was similarly extracted two more times. The combined extract was washed with distilled water and evaporated. The resulting thick extract is dissolved in formamide. A mixture of chloroform-benzene (2: 3) was added to the solution, stirred, settled, then the chloroform-benzene layer was separated. This treatment is carried out five times. From the purified formamide solution, digoxin is extracted seven times with chloroform, stirred and asserted. The chloroform solution is washed from the residues of formamide three times with water. Wash water to extract partially converted digoxin from them is treated with a mixture of chloroform-isopropanol (4: 1,2). The alcohol-chloroform extract was added to the basic chloroform solution and evaporated. The residue was dissolved in a mixture of chloroform-isopropanol (3: 1), sodium carbonate solution was added, stirred, and after settling, the soda layer was separated. The alcohol-chloroform solution is washed with distilled water until neutral and evaporated. The bottom residue is dissolved in acetone, benzene is added and concentrated by heating in a boiling water bath, while the digoxin precipitates as a thick mass. This benzene purification is repeated two more times. Amorphous digoxin is dissolved in acetone, the solution is concentrated in a hot water bath and the solution is left for 20 min at 20 ° C. The precipitated digoxin crystals are filtered off, washed with acetone and dried. The resulting technical digoxin is dissolved in a mixture of chloroform-ethanol (85:15) and purified by passing through a layer of alumina. The adsorbate is washed with a pure solvent, and the filtrate is concentrated under vacuum, hot ethanol is added and concentrated again. Digoxin crystals are separated, washed with ethanol and dried to give pure digoxin. The mother and benzene solutions remaining after the preparation of amorphous digoxin are combined, evaporated and the obtained residue is chromatographed on a column in a solvent system of acetone-benzene (1: 3), ethylene glycol. Alumina is used as the carrier of the stationary phase. The carrier is impregnated with ethylene glycol, mixed with acetone-benzene (1: 3) saturated with ethylene glycol, and transferred to a column. Digoxin obtained from mother liquors is dissolved by heating in a mixture of acetone-benzene (1: 3) saturated with ethylene glycol and applied to the column. Elution is carried out with the same solvent system. Fractions containing digoxin are combined, evaporated, crystallized from ethanol and additionally pure digoxin is obtained (4).
Известен способ получения эрихрозида, согласно которому измельченное сырье желтушника левкойного экстрагируют 96% спиртом этиловым, экстракт упаривают, переводят в водный раствор, который очищают петролейным эфиром. Экстракцию гликозидов проводят смесью хлороформ-спирт этиловый (2:1), полученный экстракт упаривают, остаток растворяют в 50% этаноле, этанольный раствор очищают гидроксидом свинца. Из водного раствора сумму гликозидов повторно извлекают смесью хлороформ - спирт этиловый (2:1) и полученный очищенный экстракт хроматографируют на оксиде алюминия III степени активности. Кристаллизуют эрихрозид из ацетона-эфира или ацетона-воды. В результате получают продукт сравнительно низкого качества, что связано с возможностью окисления его в используемых для кристаллизации смесях: ацетон-эфир или ацетон-вода (5). A known method of producing erichroside, according to which the crushed raw materials of the lefthandica, is extracted with 96% ethyl alcohol, the extract is evaporated, transferred to an aqueous solution, which is purified with petroleum ether. The glycosides are extracted with chloroform-ethyl alcohol (2: 1), the extract is evaporated, the residue is dissolved in 50% ethanol, the ethanol solution is purified with lead hydroxide. The amount of glycosides from the aqueous solution is re-extracted with a mixture of chloroform - ethyl alcohol (2: 1) and the obtained purified extract is chromatographed on alumina of the III degree of activity. Erichroside is crystallized from acetone-ether or acetone-water. The result is a product of relatively low quality, which is associated with the possibility of oxidizing it in the mixtures used for crystallization: acetone-ether or acetone-water (5).
Наиболее близким является способ получения эризимозида (структурного аналога эрихрозида, обладающего кардиотоническим действием), согласно которому измельченные семена желтушника обезжиривают бензином: сначала 10 л в течение 2-4 суток, а затем еще 6 раз порциями по 6 л с интервалами 10-12 ч. После удаления остатков бензина в вакууме в экстрактор заливают 10 л 96% спирта. Через 10-12 ч экстракт сливают и повторяют спиртовую экстракцию еще 8 раз с интервалами 5-6 ч. Экстракт упаривают и охлаждают. В осадок после фильтрования добавляют 5 л ацетона, оставляют на 4-5 ч, сливают жидкость над осадком, который затем 2 раза промывают ацетоном. Фильтраты и промывной ацетон объединяют, полученный раствор сгущают. Сгущенный раствор промывают 4 раза эфиром до выпадения осадка, который растворяют в метаноле, добавляют воду. Водно-метанольный раствор промывают трижды хлороформом и пропускают через колонку с анионитом. К фильтрату добавляют 5,0-7,5% хлористого натрия и из полученного раствора эризимозид шестикратно экстрагируют смесью хлороформ : изопропиловый спирт (1:1). Объединенные экстракты упаривают до появления кристаллов эризимозида, которые отфильтровывают, промывают эфиром. Из маточного раствора получают дополнительное количество вещества, добавляя в него эфир. Перекристаллизовывают эризимозид из изопропилового спирта (6). The closest is the method of producing erisimoside (a structural analogue of erichroside with a cardiotonic effect), according to which the crushed seeds of yellock are degreased with gasoline: first 10 l for 2-4 days, and then another 6 times in portions of 6 l at intervals of 10-12 hours. After removing gasoline residues in vacuo, 10 L of 96% alcohol is poured into the extractor. After 10-12 hours, the extract is drained and alcohol extraction is repeated an additional 8 times at intervals of 5-6 hours. The extract is evaporated and cooled. After filtering, add 5 L of acetone to the precipitate, leave for 4-5 hours, drain the liquid over the precipitate, which is then washed 2 times with acetone. The filtrates and wash acetone are combined, the resulting solution is concentrated. The thickened solution is washed 4 times with ether until a precipitate is formed which is dissolved in methanol, water is added. The methanol-water solution was washed three times with chloroform and passed through an anion exchange column. 5.0-7.5% sodium chloride was added to the filtrate, and from the resulting solution, erisimoside was extracted six times with a mixture of chloroform: isopropyl alcohol (1: 1). The combined extracts are evaporated until erisimoside crystals appear, which are filtered off, washed with ether. An additional amount of substance is obtained from the mother liquor by adding ether to it. Recrystallized erisimoside from isopropyl alcohol (6).
К недостаткам прототипа следует отнести то, что последовательность и взаимосвязь технологических операций, а также выбранные режимы и параметры этого способа не позволяют достичь получения целевого продукта с высоким выходом в более короткий срок. Кроме того, в технологическом процессе прототипа используются в качестве реагентов огнеопасные растворители, в том числе и ацетон, который способствует аутооксидации целевого продукта по альдегидной группе с образованием эризимозид-19-карбоновой кислоты, имеющего очень слабую кардиотоническую активность, и его присутствие отрицательно влияет на качество целевого продукта. The disadvantages of the prototype should include the fact that the sequence and relationship of technological operations, as well as the selected modes and parameters of this method do not allow to achieve the target product with a high yield in a shorter time. In addition, in the technological process of the prototype, flammable solvents are used as reagents, including acetone, which promotes the autooxidation of the target product by the aldehyde group with the formation of erisimoside-19-carboxylic acid, which has a very weak cardiotonic activity, and its presence negatively affects the quality target product.
В основу изобретения поставлена задача создания способа получения эрихрозида из травы желтушника левкойного путем подбора технологических операций в такой последовательности и взаимосвязи и с такими режимами и параметрами, которые бы обеспечили при уменьшении продолжительности технологического процесса получение чистого целевого продукта, а также исключение из технологии огнеопасных растворителей, в том числе и ацетона. Кроме того, ацетон способствует аутооксидации целевого продукта по альдегидной группе с образованием эрихрозид-19-карбоновой кислоты, который имеет очень слабую кардиотоническую активность, его присутствие отрицательно влияет на качество готового продукта. Поэтому требуется его дополнительная очистка, что значительно снижает выход. The basis of the invention is the task of creating a method for producing erichroside from lefthandica herb by selecting technological operations in such a sequence and interconnection with such modes and parameters that would ensure a pure target product while reducing the duration of the technological process, as well as eliminating flammable solvents from the technology, including acetone. In addition, acetone contributes to the autooxidation of the target product by the aldehyde group with the formation of erichroside-19-carboxylic acid, which has a very weak cardiotonic activity, its presence negatively affects the quality of the finished product. Therefore, it requires additional purification, which significantly reduces the yield.
Поставленная задача решается тем, что способ получения гликозида, обладающего кардиотоническим действием, включающий экстракцию желтушника 96% спиртом этиловым, упаривание экстракта и обработку полученного густого экстракта с последующей кристаллизацией и перекристаллизацией, в соответствии с изобретением, для экстракции используют траву желтушника левкойного, обработку густого экстракта проводят путем растворения его в 10-40% спирте этиловом, очистки полученного раствора толуолом или ксилолом с последующей экстракцией суммы гликозидов из раствора хлороформом, затем смесью хлороформа и спирта этилового (2:1) после добавления натрия хлорида, обезвоживанием полученного экстракта натрия сульфатом с последующим его упариванием и очисткой путем растворения в 40% спирте этиловом, добавления неактивированного алюминия оксида и фильтрацией, повторной экстракцией суммы гликозидов из фильтрата хлороформом, затем смесью хлороформа и спирта этилового (2:1) после добавления натрия хлорида, обезвоживанием полученного экстракта натрия сульфатом с последующим упариванием спирто-хлороформного экстракта, хроматографированием суммы гликозидов на алюминия оксиде III степени активности с использованием в качестве элюента смеси хлороформа со спиртом этиловым с добавлением в элюент 0,5-2,0% этилацетата, упариванием фракций элюата, содержащих эрихрозид, сушкой готового продукта. The problem is solved in that the method of producing a glycoside having a cardiotonic effect, comprising extracting the yellock with 96% ethyl alcohol, evaporating the extract and processing the obtained thick extract, followed by crystallization and recrystallization, in accordance with the invention, for the use of lefthandium grass, processing of the thick extract carried out by dissolving it in 10-40% ethyl alcohol, purifying the resulting solution with toluene or xylene, followed by extraction of the amount of glycoside s of the solution with chloroform, then with a mixture of chloroform and ethyl alcohol (2: 1) after adding sodium chloride, dehydration of the obtained sodium extract with sulfate, followed by evaporation and purification by dissolving in 40% ethyl alcohol, adding inactive aluminum oxide and filtering, re-extraction of the amount glycosides from the filtrate with chloroform, then with a mixture of chloroform and ethyl alcohol (2: 1) after adding sodium chloride, dehydration of the obtained sodium extract with sulfate, followed by evaporation of alcohol oroformnogo extract amount chromatography on alumina glycosides III degree of activity, using as eluent a mixture of chloroform with ethyl alcohol with the addition of 0.5-2.0% of ethyl acetate eluent, evaporation of the eluate fractions containing erihrozid, drying the final product.
Технический результат, получаемый при осуществлении изобретения, заключается в исключении огнеопасных растворителей, в том числе ацетона, который способствует аутооксидации по альдегидной группе целевого продукта, что значительно снижает его выход, а также в обеспечении получения чистого эрихрозида при уменьшении продолжительности технологического процесса. The technical result obtained by carrying out the invention consists in eliminating flammable solvents, including acetone, which promotes autooxidation by the aldehyde group of the target product, which significantly reduces its yield, as well as to ensure the production of pure erichroside while reducing the duration of the process.
Приводим конкретные примеры осуществления изобретения. We give specific examples of the invention.
Пример 1. 40 кг измельченной травы желтушника левкойного экстрагируют 600 л 96% спирта этилового. Полученный экстракт упаривают в вакууме при 50oС до получения густого экстракта, который растворяют в 40 л 10% спирта этилового. Полученный спирто-водный раствор очищают от хлорофиллов, смол и других балластных веществ толуолом (3 раза по 5 л). Из очищенного раствора хлороформом экстрагируют сумму гликозидов (2 раза по 8 л), добавляют 7,5 кг натрия хлорида и снова экстрагируют (3 раза по 7 л) смесью хлороформ-спирт этиловый (2: 1). Спирто-хлороформный экстракт обезвоживают 6 кг натрия сульфата, затем фильтруют и упаривают в вакууме при 50oС до полного удаления растворителей. Полученный остаток растворяют в 40% спирте этиловом, добавляют 1,5 кг алюминия оксида неактивированного, перемешивают и фильтруют. Осадок адсорбента промывают 40% спиртом этиловым. Из фильтрата повторно экстрагируют сумму гликозидов хлороформом (2 раза по 2,5 л), добавляют 1,0 кг натрия хлорида и снова экстрагируют смесью хлороформ-спирт этиловый (3 раза по 2,5 л). Спирто-хлороформный экстракт обезвоживают 0,7 кг натрия сульфата и упаривают в вакууме при 50oС. Полученную сумму гликозидов хроматографируют на алюминия оксиде III степени активности, который берут в соотношении 30:1 к весу разделяемой суммы гликозидов. В качестве элюента используют смеси хлороформа со спиртом этиловым (92-70):(8-30) с добавлением этилацетата в количестве 0,5% от общего объема элюента. Полученные фракции элюата анализируют и те из них, которые содержат индивидуальный эрихрозид, объединяют и упаривают. Затем проводят кристаллизацию эрихрозида: полученный остаток, содержащий эрихрозид, растворяют в спирте метиловом, добавляют 30 мл спирта н-бутилового и при нагревании удаляют из раствора спирт метиловый. Раствор с выпавшими кристаллами отстаивают до полной кристаллизации эрихрозида. Полученные кристаллы отделяют, промывают спиртом н-бутиловым, перекристаллизовывают аналогичным образом и сушат. Маточные растворы, содержащие эрихрозид, объединяют, хроматографируют и кристаллизуют. Общий выход эрихрозида составляет 5,7 г.Example 1. 40 kg of crushed grass of the lefthandica is extracted with 600 l of 96% ethyl alcohol. The resulting extract was evaporated in vacuo at 50 ° C. until a thick extract was obtained, which was dissolved in 40 l of 10% ethyl alcohol. The resulting alcohol-water solution is purified from chlorophylls, resins and other ballast substances with toluene (3 times 5 l). The amount of glycosides is extracted from the purified solution with chloroform (2 times, 8 L each), 7.5 kg of sodium chloride are added and extracted again (3 times 7 L each) with ethyl chloroform-ethyl alcohol (2: 1). The alcohol-chloroform extract is dehydrated with 6 kg of sodium sulfate, then filtered and evaporated in vacuo at 50 ° C. until the solvents are completely removed. The resulting residue was dissolved in 40% ethyl alcohol, 1.5 kg of non-activated aluminum oxide was added, stirred and filtered. The adsorbent precipitate is washed with 40% ethyl alcohol. The amount of glycosides is re-extracted from the filtrate with chloroform (2 times, 2.5 L each), 1.0 kg of sodium chloride is added and again extracted with a mixture of ethyl chloroform-alcohol (3 times 2.5 L each). The alcohol-chloroform extract is dehydrated with 0.7 kg of sodium sulfate and evaporated in vacuo at 50 o C. The resulting amount of glycosides is chromatographed on aluminum oxide of the III degree of activity, which is taken in a ratio of 30: 1 to the weight of the divided amount of glycosides. Mixtures of chloroform with ethyl alcohol (92-70): (8-30) with the addition of ethyl acetate in an amount of 0.5% of the total volume of the eluent are used as an eluent. The obtained eluate fractions are analyzed and those that contain an individual erichroside are combined and evaporated. Then, crystallization of erichroside is carried out: the resulting residue containing erichroside is dissolved in methyl alcohol, 30 ml of n-butyl alcohol is added, and when heated, methyl alcohol is removed from the solution. The solution with precipitated crystals is defended until the crystallization of erichroside is complete. The resulting crystals are separated, washed with n-butyl alcohol, recrystallized in a similar manner and dried. The mother liquors containing erichroside are combined, chromatographed and crystallized. The total yield of erichroside is 5.7 g.
Пример 2. 40 кг измельченной травы желтушника левкойного экстрагируют 600 л 96% спирта этилового. Полученный экстракт упаривают в вакууме при 65oС до получения густого экстракта, который растворяют в 35 л 25% спирта этилового. Полученный спирто-водный раствор очищают от хлорофиллов, смол и других балластных веществ ксилолом (3 раза по 5 л). Из очищенного раствора хлороформом экстрагируют сумму гликозидов (2 раза по 6 л), добавляют 6,5 кг натрия хлорида и снова экстрагируют (3 раза по 6 л) смесью хлороформ-спирт этиловый (2:1). Спирто-хлороформный экстракт обезвоживают 5,5 кг натрия сульфата, затем фильтруют и упаривают в вакууме при 65oС до полного удаления растворителей. Полученный остаток растворяют в 40% спирте этиловом, добавляют 1,5 кг алюминия оксида неактивированного, перемешивают и фильтруют. Осадок адсорбента промывают 40% спиртом этиловым. Из фильтрата повторно экстрагируют сумму гликозидов хлороформом (2 раза по 2,5 л), добавляют 1,0 кг натрия хлорида и снова экстрагируют смесью хлороформ-спирт этиловый (3 раза по 2,5 л). Спирто-хлороформный экстракт обезвоживают 0,7 кг натрия сульфата и упаривают в вакууме при 50oС. Полученную сумму гликозидов хроматографируют на алюминия оксиде III степени активности, которую берут в соотношении 30:1 к весу разделяемой суммы гликозидов. В качестве элюента используют смеси хлороформа со спиртом этиловым (92-70):(8-30) с добавлением этилацетата в количестве 1,0% от общего объема элюента. Полученные фракции элюата анализируют и те из них, которые содержат индивидуальный эрихрозид, объединяют и упаривают. Затем проводят кристаллизацию эрихрозида: полученный остаток, содержащий эрихрозид, растворяют в спирте метиловом, добавляют 30 мл спирта н-бутилового и при нагревании удаляют из раствора спирт метиловый. Раствор с выпавшими кристаллами отстаивают до полной кристаллизации эрихрозида. Полученные кристаллы отделяют, промывают спиртом н-бутиловым, перекристаллизовывают аналогичным образом и сушат. Маточные растворы, содержащие эрихрозид, объединяют, хроматографируют и кристаллизуют. Общий выход эрихрозида составляет 6,0 г.Example 2. 40 kg of the crushed grass of the lefthandica is extracted with 600 l of 96% ethyl alcohol. The resulting extract was evaporated in vacuo at 65 o C to obtain a thick extract, which was dissolved in 35 l of 25% ethyl alcohol. The resulting alcohol-water solution is purified from chlorophylls, resins and other ballast substances with xylene (3 times 5 l). The amount of glycosides (2 times 6 L) is extracted from the purified solution with chloroform, 6.5 kg of sodium chloride are added and again extracted (3 times 6 L) with ethyl chloroform-ethyl alcohol (2: 1). The alcohol-chloroform extract was dehydrated with 5.5 kg of sodium sulfate, then filtered and evaporated in vacuo at 65 ° C until the solvents were completely removed. The resulting residue was dissolved in 40% ethyl alcohol, 1.5 kg of non-activated aluminum oxide was added, stirred and filtered. The adsorbent precipitate is washed with 40% ethyl alcohol. The amount of glycosides is re-extracted from the filtrate with chloroform (2 times, 2.5 L each), 1.0 kg of sodium chloride is added and again extracted with a mixture of ethyl chloroform-alcohol (3 times 2.5 L each). The alcohol-chloroform extract is dehydrated with 0.7 kg of sodium sulfate and evaporated in vacuo at 50 o C. The resulting amount of glycosides is chromatographed on aluminum oxide III degree of activity, which is taken in a ratio of 30: 1 to the weight of the divided amount of glycosides. Mixtures of chloroform with ethyl alcohol (92-70): (8-30) with the addition of ethyl acetate in an amount of 1.0% of the total volume of eluent are used as eluent. The obtained eluate fractions are analyzed and those that contain an individual erichroside are combined and evaporated. Then, crystallization of erichroside is carried out: the resulting residue containing erichroside is dissolved in methyl alcohol, 30 ml of n-butyl alcohol is added, and when heated, methyl alcohol is removed from the solution. The solution with precipitated crystals is defended until the crystallization of erichroside is complete. The resulting crystals are separated, washed with n-butyl alcohol, recrystallized in a similar manner and dried. The mother liquors containing erichroside are combined, chromatographed and crystallized. The total yield of erichroside is 6.0 g.
Пример 3. 40 кг измельченной травы желтушника левкойного экстрагируют 600 л 96% спирта этилового. Полученный экстракт упаривают в вакууме при 80oС до получения густого экстракта, который растворяют в 20 л 40% спирта этилового. Полученный спирто-водный раствор очищают от хлорофиллов, смол и других балластных веществ толуолом (3 раза по 5 л). Из очищенного раствора хлороформом экстрагируют сумму гликозидов (2 раза по 4,5 л) и добавляют 6,0 кг натрия хлорида и снова экстрагируют (3 раза по 4,5 л) смесью хлороформ-спирт этиловый (2: 1). Спирто-хлороформный экстракт обезвоживают 5 кг натрия сульфата, затем фильтруют и упаривают в вакууме при 80oС до полного удаления растворителей. Полученный остаток растворяют в 40% спирте этиловом, добавляют 1,5 кг алюминия оксида неактивированного, перемешивают и фильтруют. Осадок адсорбента промывают 40% спиртом этиловым. Из фильтрата повторно экстрагируют сумму гликозидов хлороформом (2 раза по 2,5 л), добавляют 1,0 кг натрия хлорида и снова экстрагируют смесью хлороформ-спирт этиловый (3 раза по 2,5 л). Спирто-хлороформный экстракт обезвоживают 0,7 кг натрия сульфата и упаривают в вакууме при 80oС. Полученную сумму гликозидов хроматографируют на алюминия оксиде III степени активности, который берут в соотношении 30:1 к весу разделяемой суммы гликозидов. В качестве элюента используют смеси хлороформа со спиртом этиловым (92-70):(8-30) с добавлением этилацетата в количестве 2,0% от общего объема элюента. Полученные фракции элюата анализируют и те из них, которые содержат индивидуальный эрихрозид, объединяют и упаривают. Затем проводят кристаллизацию эрихрозида: полученный остаток, содержащий эрихрозид, растворяют в спирте метиловом, добавляют 30 мл спирта н-бутилового и при нагревании удаляют из раствора спирт метиловый. Раствор с выпавшими кристаллами отстаивают до полной кристаллизации эрихрозида. Полученные кристаллы отделяют, промывают спиртом н-бутиловым, перекристаллизовывают аналогичным образом и сушат. Маточные растворы, содержащие эрихрозид, объединяют, хроматографируют и кристаллизуют. Общий выход эрихрозида составляет 6,3 г.Example 3. 40 kg of the crushed grass of the lefthandica is extracted with 600 l of 96% ethyl alcohol. The extract obtained is evaporated in vacuo at 80 o C to obtain a thick extract, which is dissolved in 20 l of 40% ethyl alcohol. The resulting alcohol-water solution is purified from chlorophylls, resins and other ballast substances with toluene (3 times 5 l). The amount of glycosides (2 times 4.5 L) is extracted from the purified solution with chloroform and 6.0 kg of sodium chloride are added and extracted again (3 times 4.5 L) with ethyl chloroform-ethyl alcohol (2: 1). The alcohol-chloroform extract was dehydrated with 5 kg of sodium sulfate, then filtered and evaporated in vacuo at 80 ° C. until the solvents were completely removed. The resulting residue was dissolved in 40% ethyl alcohol, 1.5 kg of non-activated aluminum oxide was added, stirred and filtered. The adsorbent precipitate is washed with 40% ethyl alcohol. The amount of glycosides is re-extracted from the filtrate with chloroform (2 times, 2.5 L each), 1.0 kg of sodium chloride is added and again extracted with a mixture of ethyl chloroform-alcohol (3 times 2.5 L each). The alcohol-chloroform extract is dehydrated with 0.7 kg of sodium sulfate and evaporated in vacuo at 80 o C. The resulting amount of glycosides is chromatographed on aluminum oxide of the III degree of activity, which is taken in a ratio of 30: 1 to the weight of the divided amount of glycosides. A mixture of chloroform with ethyl alcohol (92-70) :( 8-30) with the addition of ethyl acetate in an amount of 2.0% of the total volume of eluent is used as an eluent. The obtained eluate fractions are analyzed and those that contain an individual erichroside are combined and evaporated. Then, crystallization of erichroside is carried out: the resulting residue containing erichroside is dissolved in methyl alcohol, 30 ml of n-butyl alcohol is added, and when heated, methyl alcohol is removed from the solution. The solution with precipitated crystals is defended until the crystallization of erichroside is complete. The resulting crystals are separated, washed with n-butyl alcohol, recrystallized in a similar manner and dried. The mother liquors containing erichroside are combined, chromatographed and crystallized. The total yield of erichroside is 6.3 g.
По заявляемому способу получают сердечный гликозид - эрихрозид (3β-O-β-D-дигитоксопиранозил-4'-О-β-D-ксилопиранозил-5,14-ди-окси-19-оксо-5β, 14β-кард-20(22)-енолид), который применяется при острой и хронической недостаточности кровообращения II и III степени, при ишемической болезни сердца. Взаимосвязь и последовательность технологических операций заявляемого способа, подбор режимов и параметров полностью обеспечивают выполнение поставленной в изобретении задачи. Использование 96% спирта этилового в качестве экстрагента при экстракции биологически активных веществ из травы желтушника левкойного обусловлено физико-химическими свойствами выделяемого индивидуального вещества эрихрозида. Выбранный экстрагент обладает селективной способностью в отношении этого вещества, и в то же время инактивирует ферменты, содержащиеся наряду с сердечными гликозидами в растительном сырье, тем самым исключая их гидролитическое расщепление. Кроме того, 96% спирт этиловый обладает высокой растворяющей способностью в отношении сердечных гликозидов, в том числе эрихрозида. Упаривание спиртового экстракта до густого проводят с целью подготовки проэкстрагированной смеси биологически активных соединений для дальнейшей очистки их от балластных веществ. Растворение густого экстракта в спирте этиловом концентрацией от 10 до 40% обусловлено условиями последующей очистки толуолом или ксилолом. According to the claimed method receive cardiac glycoside - erichroside (3β-O-β-D-digitoxopyranosyl-4'-O-β-D-xylopyranosyl-5,14-di-hydroxy-19-oxo-5β, 14β-card-20 ( 22) -enolide), which is used in acute and chronic circulatory failure of the II and III degree, with coronary heart disease. The relationship and the sequence of technological operations of the proposed method, the selection of modes and parameters fully ensure the achievement of the objectives of the invention. The use of 96% ethyl alcohol as an extractant in the extraction of biologically active substances from the herb of the lefthandica is due to the physicochemical properties of the isolated individual substance of erichroside. The selected extractant has a selective ability for this substance, and at the same time inactivates the enzymes contained along with cardiac glycosides in plant materials, thereby eliminating their hydrolytic cleavage. In addition, 96% ethyl alcohol has a high dissolving ability against cardiac glycosides, including erichroside. Evaporation of the alcoholic extract to thick is carried out in order to prepare a pro-extracted mixture of biologically active compounds for further purification of them from ballast substances. The dissolution of the thick extract in alcohol with an ethyl concentration of 10 to 40% is due to the conditions of the subsequent purification with toluene or xylene.
Проведены исследования зависимости выхода эрихрозида от условий проведения стадии очистки от хлорофиллов, смол и других балластных веществ по заявляемому способу. Данные представлены в таблице 1. Studies have been conducted on the dependence of the yield of erichroside on the conditions of the stage of purification from chlorophylls, resins and other ballast substances by the present method. The data are presented in table 1.
Результаты исследований, представленные в таблице 1, свидетельствуют о том, что при осуществлении стадии очистки от балластных веществ в соответствии с заявляемым способом выход целевого продукта зависит от концентрации спирта этилового. Таким образом, использование спирта этилового 10-40% в качестве растворителя густого экстракта и обработка полученного раствора толуолом или ксилолом приводит к значительному повышению выхода целевого продукта. Применение спирта этилового в концентрации больше заявляемых значений (40%) приводит к переходу его в толуол или ксилол вместе с биологически активными веществами, что значительно снижает выход целевого продукта. При использовании спирта этилового в концентрации меньше заявляемых значений (10%) значительно снижается выход эрихрозида из-за его плохой растворимости в водных растворах. The research results presented in table 1 indicate that, when carrying out the stage of cleaning from ballast substances in accordance with the claimed method, the yield of the target product depends on the concentration of ethyl alcohol. Thus, the use of ethyl alcohol of 10-40% as a solvent of the thick extract and the treatment of the resulting solution with toluene or xylene leads to a significant increase in the yield of the target product. The use of ethyl alcohol in a concentration higher than the declared values (40%) leads to its transition to toluene or xylene along with biologically active substances, which significantly reduces the yield of the target product. When using ethyl alcohol in a concentration less than the declared values (10%), the yield of erichroside is significantly reduced due to its poor solubility in aqueous solutions.
На стадиях первой и повторной экстракции суммы гликозидов из водно-спиртовых растворов используют вначале двукратную экстракцию хлороформом с целью максимального извлечения из водно-спиртового раствора спирта этилового, содержащего сумму гликозидов. Дальнейшая экстракция с использованием в качестве экстрагента хлороформно-спиртовой смеси с предварительным высаливанием натрия хлоридом способствует повышению выхода суммы гликозидов. Обезвоживание хлороформно-спиртовых экстрактов натрия сульфатом предохраняет лабильный эрихрозид (имеющий в своем составе 2-дезоксисахара, способные гидролизоваться при нагревании) от разложения при последующем упаривании полученных экстрактов в вакууме. At the stages of the first and repeated extraction of the sum of glycosides from aqueous-alcoholic solutions, first double extraction with chloroform is used to maximize the extraction of ethyl alcohol containing the total glycosides from the aqueous-alcoholic solution. Further extraction using a chloroform-alcohol mixture as an extractant with preliminary salting out of sodium chloride helps to increase the yield of the sum of glycosides. The dehydration of chloroform-alcohol extracts of sodium with sulfate prevents labile erichroside (containing 2-deoxysaccharides that can hydrolyze when heated) from decomposition during subsequent evaporation of the obtained extracts in vacuo.
Очистку водно-спиртового раствора суммы гликозидов от полифенольных и белковых соединений осуществляют неактивированным алюминия оксидом. Purification of a water-alcohol solution of the sum of glycosides from polyphenolic and protein compounds is carried out with inactive aluminum oxide.
Для получения индивидуального эрихрозида из выделенной суммы гликозидов в заявляемом способе используют адсорбционную хроматографию с применением в качестве адсорбента алюминия оксид III степени активности. Экспериментально установлено, что малоактивный алюминия оксид (V и IV степени активности) не позволяет качественно разделить сумму гликозидов (эрихрозид при этом получается загрязненным побочным гликозидом глюкодигифукозидом), а расход адсорбента значительно увеличивается. Высокоактивный (II и III степени активности) алюминия оксид прочно адсорбирует эрихрозид, что затрудняет его последующую десорбцию и приводит к значительным потерям последнего. Таким образом, активность применяемого для хроматографирования адсорбента алюминия оксида оказывает существенное влияние на выход целевого продукта. Для предотвращения потерь целевого продукта на этой стадии в заявляемом способе в состав элюента вводят этилацетат в количестве 0,5-2,0% от общего объема элюента. To obtain an individual erichroside from the selected amount of glycosides in the present method, adsorption chromatography using aluminum oxide of the III degree of activity is used as an adsorbent. It has been experimentally established that low-activity aluminum oxide (V and IV degrees of activity) does not allow a qualitative separation of the sum of glycosides (erichroside is thus obtained by contaminated by secondary glycoside glucodigifucoside), and the adsorbent consumption is significantly increased. Highly active (II and III degree of activity) aluminum oxide strongly adsorbs erichroside, which complicates its subsequent desorption and leads to significant losses of the latter. Thus, the activity of the aluminum oxide adsorbent used for chromatography has a significant effect on the yield of the target product. To prevent loss of the target product at this stage in the inventive method, ethyl acetate is introduced into the composition of the eluent in an amount of 0.5-2.0% of the total volume of the eluent.
Для получения объективных данных о потерях целевого продукта при адсорбционном хроматографировании на алюминия оксиде был осуществлен эксперимент в условиях заявляемого способа: 0,05 г гликозида растворяют в элюентах различных составов, перемешивают в шуттель-аппарате с 2 г алюминия оксида III степени активности в течение 1 ч. Раствор отфильтровывают, осадок промывают 10 мл того же элюента и анализируют содержание эрихрозида в фильтрате. Результаты эксперимента приведены в таблице 2. To obtain objective data on the loss of the target product during adsorption chromatography on aluminum oxide, an experiment was carried out under the conditions of the proposed method: 0.05 g of glycoside was dissolved in eluents of various compositions, mixed in a shunt machine with 2 g of aluminum oxide of III degree of activity for 1 h The solution is filtered off, the precipitate is washed with 10 ml of the same eluent and the content of erichroside in the filtrate is analyzed. The experimental results are shown in table 2.
Данные, представленные в таблице 2, свидетельствуют, что при хроматографировании эрихрозида на алюминия оксиде с применением в качестве элюента смеси хлороформа со спиртом потери могут составлять до 40% за счет необратимой сорбции. Добавка же ацетилацетата в количестве 0,5-2,0% от общего объема элюента "подавляет" необратимую сорбцию, в результате чего выход эрихрозида значительно повышается. The data presented in table 2 indicate that when chromatography of erichroside on aluminum oxide using a mixture of chloroform with alcohol as an eluent, the loss can be up to 40% due to irreversible sorption. The addition of acetylacetate in an amount of 0.5-2.0% of the total eluent volume “suppresses” irreversible sorption, as a result of which the yield of erichroside is significantly increased.
Экспериментально установленными являются условия кристаллизации и перекристаллизации, при которых концентрат эрихрозида, полученный после хроматографирования, растворяют в спирте метиловом, добавляют спирт н-бутиловый, затем отгоняют метанол и кристаллизуют эрихрозид из спирта н-бутилового. В этих условиях выделяемый гликозид не подвергается аутооксидации кислородом воздуха, процесс кристаллизации происходит быстро и в полном объеме с высоким качеством целевого продукта. Проведенные исследования по подбору условий кристаллизации эрихрозида показали, что большинство растворителей, таких как спирты метиловый, пропиловый, изопропйловый, изобутиловый, а также диоксан, хлороформ, вода и их смеси оказались непригодными, так как кристаллизация эрихрозида проходила неэффективно и с низким выходом целевого продукта. Несколько лучшие результаты были получены при использовании смесей ацетон-вода и ацетон-диэтиловый эфир. Однако и от этих смесей пришлось отказаться, так как в них наблюдалась достаточно быстрая аутооксидация гликозида. В среде этих растворителей, а также в среде галоидпроизводных (хлороформ, дихлорэтан, четыреххлористый углерод) происходит окисление альдегидной группы эрихрозида кислородом воздуха с образованием эрихрозид-19-карбоновой кислоты, которая имеет очень слабую кардиотоническую активность и ее присутствие отрицательно влияет на качество целевого продукта. The crystallization and recrystallization conditions are experimentally established under which the erichroside concentrate obtained after chromatography is dissolved in methyl alcohol, n-butyl alcohol is added, then methanol is distilled off and erichroside is crystallized from n-butyl alcohol. Under these conditions, the released glycoside is not subjected to autooxidation by atmospheric oxygen; the crystallization process occurs quickly and in full with the high quality of the target product. Studies on the selection of crystallization conditions for erichroside showed that most solvents, such as methyl, propyl, isopropyl, isobutyl alcohols, as well as dioxane, chloroform, water and their mixtures were unsuitable, since crystallization of erichroside was ineffective and with a low yield of the target product. Somewhat better results were obtained using acetone-water and acetone-diethyl ether mixtures. However, these mixtures had to be abandoned, since a rather rapid glycoside autooxidation was observed in them. In the environment of these solvents, as well as in the environment of halide derivatives (chloroform, dichloroethane, carbon tetrachloride), the aldehyde group of the erichroside is oxidized with atmospheric oxygen to form erichroside-19-carboxylic acid, which has a very weak cardiotonic activity and its presence negatively affects the quality of the target product.
Сравнительный анализ технологических стадий способа-прототипа и заявляемого способа приведен в таблице 3. A comparative analysis of the technological stages of the prototype method and the proposed method are shown in table 3.
При получении эрихрозида по способу-прототипу в процессе эксперимента выяснилось, что выход целевого продукта значительно снижается, а продолжительность проведения технологического цикла возрастает. Upon receipt of erichroside by the prototype method during the experiment, it turned out that the yield of the target product is significantly reduced, and the duration of the process cycle increases.
ЛИТЕРАТУРА
1. Авторское свидетельство СССР 1469611, кл. А 61 К 35/78. Опубл. 30.03.89. Офиц. бюл. "Открытия. Изобретения", 1989, 12.LITERATURE
1. Copyright certificate of the USSR 1469611, cl. A 61
2. Авторское свидетельство СССР 1172560, кл. А 61 К 35/78. Опубл. 15.08.85. Офиц. бюл. "Открытия. Изобретения", 1985, 30. 2. USSR copyright certificate 1172560, cl. A 61
3. Авторское свидетельство СССР 1600041, кл. А 61 К 31/70, 35/78. Опубл. 15.10.90. Офиц. Бюл. "Открытия. Изобретения", 1990, 38. 3. Copyright certificate of the USSR 1600041, cl. A 61 K 31/70, 35/78. Publ. 10/15/90. Officer Bull. "Discoveries. Inventions", 1990, 38.
4. Авторское свидетельство СССР 464314, кл. А 61 К 27/14. Опубл. 25.03.75. Офиц. бюл. "Открытия, изобретения, пром. образцы, товарные знаки", 1975, 11. 4. Copyright certificate of the USSR 464314, cl. A 61 K 27/14. Publ. 03/25/75. Officer bull. "Discoveries, inventions, industrial designs, trademarks", 1975, 11.
5. И. Ф. Макаревич, М. Я. Тропп, Д.Г. Колесников. Химическое изучение нового сердечного гликозида желтушника левкойного. ДАН СССР, 1961, Т.136, 3. С.617. 5. I. F. Makarevich, M. Ya. Tropp, D.G. Kolesnikov. A chemical study of the new cardiac glycoside of lefthanic jaundice. DAN USSR, 1961, T.136, 3. P.617.
6. Авторское свидетельство СССР 296349, кл. А 61 К 35/78. Опубл. 07.03.72. Офиц. бюл. "Открытия, изобретения, пром. образцы, товарные знаки", 1972, 9 (прототип). 6. Copyright certificate of the USSR 296349, cl. A 61
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU99123307A RU2196600C2 (en) | 1999-11-03 | 1999-11-03 | Method of preparing glycoside eliciting cardiotonic effect |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU99123307A RU2196600C2 (en) | 1999-11-03 | 1999-11-03 | Method of preparing glycoside eliciting cardiotonic effect |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU99123307A RU99123307A (en) | 2001-10-20 |
| RU2196600C2 true RU2196600C2 (en) | 2003-01-20 |
Family
ID=20226631
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU99123307A RU2196600C2 (en) | 1999-11-03 | 1999-11-03 | Method of preparing glycoside eliciting cardiotonic effect |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2196600C2 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2483104C2 (en) * | 2010-11-09 | 2013-05-27 | Ламберов Александр Адольфович | Method of producing natural biochemical vinegar |
-
1999
- 1999-11-03 RU RU99123307A patent/RU2196600C2/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| МАШКОВСКИЙ М.Д. Лекарственные средства. - М.: Медицина, 1967, ч.1, с.345, 346. МАКАРЕВИЧ И.О. и др. Химическое изучение нового сердечного гликозида желтушника левкойного. ДАН СССР. 1961, т.136, № 3, с.617. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2483104C2 (en) * | 2010-11-09 | 2013-05-27 | Ламберов Александр Адольфович | Method of producing natural biochemical vinegar |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN110845328B (en) | Method for preparing high-purity carnosic acid from rosemary ointment byproducts | |
| EP0402925B1 (en) | A method of isolating ginkgolides from the leaves of the ginkgo tree and purifying them | |
| CN111018933A (en) | Fructus momordicae extract product and preparation method and application thereof | |
| KR20070119641A (en) | Isolation of galanthamine from biological material | |
| CN107141329B (en) | A kind of separation and refining method of plant steroid aldehyde compound | |
| RU2196600C2 (en) | Method of preparing glycoside eliciting cardiotonic effect | |
| Hou et al. | Preparative purification of corilagin from Phyllanthus by combining ionic liquid extraction, prep-HPLC, and precipitation | |
| JP2648507B2 (en) | Method for extending and / or isolating cardiotonic glycosides using non-polar adsorption resin | |
| CN1124275C (en) | Method of preparing ginkalide A and B as medicine from ginkgo leaf or its extract | |
| CN113801133A (en) | Preparation method of ginkgolide and monomer contained in ginkgolide | |
| RU2411939C1 (en) | Method for synthesis of 2,3,6,7-tetrahydroxynaphthazarin | |
| RU2123347C1 (en) | Method of lappaconitine hydrobromide preparing | |
| CN110627806A (en) | Bilobalide B compound and preparation method thereof | |
| JPH10273444A (en) | Production of ginkgo extract | |
| UA36064C2 (en) | Method for manufacturing glycoside with cardiotonic activity | |
| CN112094184A (en) | Method for extracting shikimic acid from ginkgo leaf extract chromatographic wastewater | |
| RU2157204C1 (en) | Method of preparing platyphyllinum hydrotartrate | |
| JPS6227074B2 (en) | ||
| RU2186069C1 (en) | Method of technical digoxin preparing | |
| US11518762B2 (en) | Large scale purification of castanospermine | |
| CN115089616B (en) | Fishy smell removing method for bear gall liquid | |
| RU2646794C1 (en) | Method for obtaining lappaconinity hydrobromide | |
| CN106589073A (en) | Pneumocandin B0 purification method | |
| EA015973B1 (en) | Process for the selective isolation, purification and separation of monohydroxylated 3,17-diketo-steroid compounds | |
| RU2114631C1 (en) | Method of isolation of dihydroquercitin |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20081104 |