RU2180914C1

RU2180914C1 - Consortium of bifidobacteria and lactobacilli used for preparing bacterial preparations, ferments for fermented-milk foodstuffs, fermented and nonfermented foodstuffs, biologically active supplements designated for correction of microflora in humans in age from 12 years and older

Info

Publication number: RU2180914C1
Application number: RU2001111551/13A
Authority: RU
Inventors: В.А. Алешкин; А.М. Амерханова
Original assignee: Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского
Priority date: 2001-04-28
Filing date: 2001-04-28
Publication date: 2002-03-27

Abstract

FIELD: biotechnology, food and medicinal industry. SUBSTANCE: consortium of bifidobacteria and lactobacilli has Bifidobacterium bifidum 791, B. bifidum LBA-3, B. longum V379M, B. longum YA-3, B. adolescentis GO-13, Lactobacillus plantarum 8-RA-3, Lactobacillus K3sh24, Lactobacillus acidophilus NK-1, GKNM MNNEM named of G.N. Gabritchevsky, N 161. The consortium has a composition that is maximally related to the natural microbiocenosis of humans in age from 12 years and older. EFFECT: expanded assortment of agents of curative-prophylaxis prescription. 3 tbl, 5 ex

Description

Изобретение относится к биотехнологии, пищевой и медицинской промышленности и может быть использовано в производстве препаратов и продуктов питания пробиотического действия, предназначенных для коррекции микрофлоры людей в возрасте от 12 лет и старше. The invention relates to biotechnology, food and medical industry and can be used in the manufacture of drugs and food products of probiotic action, designed to correct the microflora of people aged 12 years and older.

В настоящее время основным приемом коррекции нарушенного микробиоценоза человека является применение препаратов и продуктов на основе микроорганизмов - представителей нормофлоры человека и, в первую очередь, бифидобактерий и лактобацилл. Currently, the main method for correcting a disturbed human microbiocenosis is the use of drugs and products based on microorganisms - representatives of human normoflora and, first of all, bifidobacteria and lactobacilli.

В России для приготовления бактерийных препаратов и продуктов лечебно-профилактического назначения для детей используются штаммы в составе монопрепаратов: бифидобактерий (B.bifidum 1, B.bifidum 791, B.bifidum ЛВА-3, B. adolescentis MC-42) и лактобацилл (L.plantarum 8-PA-3, L.fermentum 90-TC-4). In Russia, for the preparation of bacterial preparations and therapeutic and prophylactic products for children, strains are used as part of single drugs: bifidobacteria (B. bifidum 1, B. bifidum 791, B. bifidum LVA-3, B. adolescentis MC-42) and lactobacilli (L .plantarum 8-PA-3, L.fermentum 90-TC-4).

Вместе с тем, более корректным представляется подход к бактериотерапии на основе препаратов многовидового состава. At the same time, the approach to bacteriotherapy based on multi-species preparations seems to be more correct.

Это подтверждается, прежде всего, тем, что бифидофлора, составляющая 90% от совокупности всей нормофлоры, представлена в кишечнике здорового человека сразу несколькими видами, каждый из которых имеет свои биохимические и физиологические особенности. This is confirmed, first of all, by the fact that bifidoflora, which makes up 90% of the total normoflora, is represented in the intestines of a healthy person by several species, each of which has its own biochemical and physiological characteristics.

По данным Гончаровой Г.И. (1982 г.), вид B.bifidum выявляется у здоровых людей всех возрастных групп; у детей на грудном вскармливании он является преобладающим и выделяется у 70% обследованных, до 40% - у детей 4-6 лет и до 15-20% - у взрослых. According to Goncharova G.I. (1982), the species B. bifidum is detected in healthy people of all age groups; in breast-fed children, it is predominant and stands out in 70% of the examined, up to 40% in children 4-6 years old and up to 15-20% in adults.

Вид B.longum также характерен для детей и взрослых и выделяется у 40-60% детей первого года жизни и у 70-75% детей старшего возраста и взрослых людей среднего возраста; у пожилых людей он выделяется в 30% случаев. The species B.longum is also characteristic of children and adults and is distinguished in 40-60% of children in the first year of life and in 70-75% of older children and middle-aged adults; in older people it is allocated in 30% of cases.

Вид B.adolescentis свойственен взрослым людям и детям старшего возраста и обнаруживается у них в 60-65% случаев. Этот вид становится преобладающим у пожилых людей (85%). The species B.adolescentis is characteristic of adults and older children and is found in 60-65% of cases. This species becomes predominant in older people (85%).

Виды B.infantis и В.breve и их подвиды обнаруживаются преимущественно у детей грудного возраста. Изменение типа вскармливания ребенка, снижение общей резистентности организма, а также незрелость ферментативных процессов желудочно-кишечного тракта приводит к изменению видового состава бифидофлоры. Species B.infantis and B.breve and their subspecies are found mainly in infants. A change in the type of feeding a child, a decrease in the overall resistance of the body, as well as immaturity of the enzymatic processes of the gastrointestinal tract, leads to a change in the species composition of bifidoflora.

Представленные данные являются убедительным обоснованием необходимости создания препаратов целенаправленного назначения для определенных возрастных групп. Использование в составе лечебных препаратов и продуктов функционального питания сразу нескольких видов пробиотических микроорганизмов предположительно позволит суммировать полезные свойства, присущие отдельным штаммам, повысить биологическую активность препаратов и продуктов, будет способствовать избирательному заселению кишечника культурой того вида, который наиболее адекватен микробиоценозу конкретного индивидуума. Можно предположить, что это должно повысить эффективность коррекции микробиоценоза и, как следствие, обеспечить быстрейшее выздоровление. The data presented are a convincing justification for the need to create targeted drugs for certain age groups. The use of several types of probiotic microorganisms as part of medical preparations and functional nutrition products will presumably make it possible to summarize the beneficial properties inherent in individual strains, increase the biological activity of drugs and products, and contribute to the selective colonization of the intestine with a culture of the species that is most suitable for the microbiocenosis of a particular individual. It can be assumed that this should increase the effectiveness of the correction of microbiocenosis and, as a result, provide a quicker recovery.

Известен консорциум бифидобактерий Bifidobacterium bifidum 791, Bifidobacterium longum B379M, Bifidobacterium breve 79-119, Bifidobacterium infantis 73-15, Bifidobacterium adolescentis Г7513, предназначенный для приготовления кисломолочных, неферментированных пищевых продуктов и бактерийных препаратов (2)
Несмотря на широко представленный видовой состав бифидофлоры человека, в нем не учитываются особенности видового состава микробиоценозов разных возрастных групп людей, формирующихся в процессе онтогенеза и изменяющихся при переходе из одной возрастной группы в другую.Known consortium of bifidobacteria Bifidobacterium bifidum 791, Bifidobacterium longum B379M, Bifidobacterium breve 79-119, Bifidobacterium infantis 73-15, Bifidobacterium adolescentis G7513, intended for the preparation of fermented milk, non-fermented food products and 2 bacteria)
Despite the widely represented species composition of human bifidoflora, it does not take into account the features of the species composition of microbiocenoses of different age groups of people that form during ontogenesis and change during the transition from one age group to another.

Наиболее близким аналогом к заявленному изобретению является способ получения возрастоспецифичных бифидопрепаратов по патенту 2126043 (3). Предложены бифидосодержащие препараты для детей до 3-5 лет, детей старшего возраста и взрослых с использованием не менее трех видов бифидобактерий в определенном соотношении, соответствующем видовому составу бифидофлоры кишечника здорового человека данного возраста. В прототипе предложены определенные количественные соотношения бифидобактерий:
1) для детей в возрасте до 3-5 лет - B.longum - 38,0-52,0, B.bifidum - 30,0-42,0, B.breve или B.infantis - остальное до 100%.The closest analogue to the claimed invention is a method for producing age-specific bifid preparations according to patent 2126043 (3). Bifid-containing preparations for children under 3-5 years of age, older children and adults using at least three types of bifidobacteria in a certain ratio corresponding to the species composition of the intestinal bifidoflora of a healthy person of this age are proposed. The prototype proposed certain quantitative ratios of bifidobacteria:
1) for children under the age of 3-5 years - B.longum - 38.0-52.0, B.bifidum - 30.0-42.0, B.breve or B.infantis - the rest is up to 100%.

2) детей старшего возраста и взрослых - B.longum - 32,0-42,0, B.bifidum - 29,0-39,0, B.adolescentis - остальное. 2) older children and adults - B.longum - 32.0-42.0, B.bifidum - 29.0-39.0, B.adolescentis - the rest.

Недостатком вышеуказанного способа является то, что, эти композиции составлены без учета постоянного симбиоза бифидобактерий с другими представителями нормофлоры, в особенности, с лактобациллами, т.к. именно этот симбиоз является доминирующим в микробиоценозе кишечника. Лактобациллы активно поглощают кислород, образуют углекислый газ, это способствует поддержанию анаэробных условий и высокого парциального давления, что положительно сказывается на развитии бифидофлоры. The disadvantage of the above method is that, these compositions are made without taking into account the constant symbiosis of bifidobacteria with other representatives of normoflora, especially with lactobacilli, because it is this symbiosis that dominates the intestinal microbiocenosis. Lactobacilli actively absorb oxygen, form carbon dioxide, this helps maintain anaerobic conditions and high partial pressure, which positively affects the development of bifidoflora.

Другим недостатком данного изобретения является то, что помимо предложенного принципа рецептуростроения, он не содержит конкретных рекомендаций по штаммовому составу препаратов. Следует иметь в виду, что каждому штамму присущи конкретные свойства, продукция определенных метаболитов, оказывающих на микробиоценоз целенаправленный эффект. В связи с этим конструирование препаратов пробиотического действия должно проводиться на широком спектре определенных штаммов, на основе углубленного изучения их биологических и биохимических свойств. Полноценный препарат может быть создан только с учетом индивидуальных особенностей входящих в него штаммов. Another disadvantage of this invention is that in addition to the proposed principle of formulation, it does not contain specific recommendations on the strain composition of the preparations. It should be borne in mind that each strain has specific properties, the production of certain metabolites that have a targeted effect on microbiocenosis. In this regard, the construction of probiotic preparations should be carried out on a wide range of specific strains, based on an in-depth study of their biological and biochemical properties. A full-fledged drug can only be created taking into account the individual characteristics of the strains included in it.

Вместе с тем, маловероятно, что при прохождении желудочно-кишечного тракта соотношения, приведенные в данном изобретении, сохранятся. Учитывая различия в биохимических свойствах штаммов, входящих в состав препаратов, при равных стартовых условиях преимущество будет за штаммами, обладающими наибольшим сродством к микробиоценозу конкретного индивидуума. However, it is unlikely that with the passage of the gastrointestinal tract, the ratios given in this invention will remain. Given the differences in the biochemical properties of the strains that make up the preparations, under equal starting conditions, the strains with the highest affinity for the microbiocenosis of a particular individual will have an advantage.

Задачей настоящего изобретения является создание симбиотического сообщества доминантных микроорганизмов, которые предопределяют функции микрофлоры и максимально приближены к естественному микробиоценозу людей в возрасте от 12-ти лет и старше. The objective of the present invention is to create a symbiotic community of dominant microorganisms that predetermine the functions of microflora and are as close as possible to the natural microbiocenosis of people aged 12 years and older.

Данная задача была решена путем получения консорциума бифидобактерий и лактобацилл Bifidobacterium bifidum 791, B.bifidum ЛВА-3, B.longum B379M, B. longum Я-3, B.adolescentis Г7513, B.adolescentis ГО-13, Lactobacillus plantarum 8-PA-3, Lactobacillus acidophilus К3ш24, Lactobacillus acidophilus NK-1, ГКНМ МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского, 161, используемый для приготовления бактериальных препаратов, заквасок для кисломолочных продуктов, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, биологически активных добавок, предназначенных для коррекции микрофлоры людей в возрасте от 12 лет и старше. This problem was solved by obtaining a consortium of bifidobacteria and lactobacilli Bifidobacterium bifidum 791, B. bifidum LVA-3, B. longum B379M, B. longum I-3, B.adolescentis G7513, B.adolescentis GO-13, Lactobacillus plantarum 8-PA -3, Lactobacillus acidophilus K3sh24, Lactobacillus acidophilus NK-1, GKNM MNIIEM im. G.N. Gabričevskogo, 161, used for the preparation of bacterial preparations, starter cultures for fermented milk products, fermented and non-fermented food products, biologically active additives intended for the correction of microflora of people aged 12 years and older.

В состав консорциума входят следующие штаммы:
1. Штамм B.bifidum 791 выделен из кишечника здорового грудного ребенка, депонирован в ВНИИгенетика в ЦМПМ В-3300.The consortium includes the following strains:
1. The strain B. bifidum 791 was isolated from the intestines of a healthy infant, was deposited at the All-Russian Research Institute of Genetics in CMPM B-3300.

2. Штамм B.bifidum ЛВА-3 выделен из кишечника здорового взрослого человека, депонирован в ВНИИгенетика в ЦМПМ В-3299. 2. The strain B. bifidum LVA-3 was isolated from the intestines of a healthy adult, deposited at the All-Russian Research Institute of Genetics in CMPM B-3299.

3. Штамм B.longum B379M выделен из кишечника здорового взрослого человека, депонирован в ВНИИгенетика в ЦМПМ В-2000. 3. The strain B.longum B379M was isolated from the intestines of a healthy adult, deposited at the All-Russian Research Institute of Genetics in CMPM B-2000.

4. Штамм B.longum Я-3 выделен из содержимого кишечника здорового взрослого человека, депонирован в ВНИИгенетика в ЦКПМ 3301. 4. The strain B.longum I-3 is isolated from the contents of the intestines of a healthy adult, deposited at the All-Russian Research Institute of Genetics in TsKPM 3301.

5. Штамм B.adolescentis Г7513 выделен из содержимого кишечника здорового взрослого человека, депонирован в ГКНМ МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского 158. 5. The strain B.adolescentis G7513 isolated from the intestines of a healthy adult, deposited in GKNM MNIIEM them. G.N. Gabrichevsky 158.

6. Штамм B.adolescentis ГО-13 выделен из содержимого кишечника здорового взрослого человека, депонирован в ВНИИгенетика в ЦМПМ В3298. 6. The strain B.adolescentis GO-13 was isolated from the contents of the intestines of a healthy adult, deposited at the All-Russian Research Institute of Genetics at TsMPM B3298.

7. Штамм L.plantarum 8-PA-3, растительного происхождения, депонирован в ГИСК им.Тарасевича. 7. The strain L.plantarum 8-PA-3, of plant origin, was deposited in the GISK named after Tarasevich.

8. Штамм L.acidophilus К3ш24 выделен из содержимого кишечника здорового человека, депонирован во ВНИИгенетика ЦМПМ ЦМПМ В-31-90. 8. The strain L.acidophilus K3sh24 was isolated from the intestines of a healthy person, deposited at the All-Russian Research Institute of Genetics TsMPM TsMPM B-31-90.

9. Штамм L.acidophilus NK-1 выделен из содержимого кишечника здорового человека, депонирован в ВНИМИ ЦЛМ 22/10. 9. The strain L.acidophilus NK-1 isolated from the contents of the intestines of a healthy person, deposited in VNIM CLM 22/10.

Консорциум получен путем двукратного раздельного и последующего совместного культивирования входящих в него штаммов на питательных средах до накопления биомассы совокупной микрофлоры до lg 8-9. The consortium was obtained by twofold separate and subsequent co-cultivation of the strains included in it on nutrient media until the accumulation of biomass of the total microflora to lg 8-9.

Использование в составе лечебных препаратов и продуктов функционального питания симбиотической ассоциации микроорганизмов, моделирующей микробиоценоз людей в возрасте от 12 лет и старше, подтвердило наше предположение, что одновременное использование нескольких видов пробиотических микроорганизмов приводит не только к суммированию полезных свойств, но и к сверхсуммарному эффекту, это позволяет повысить биологическую активность препаратов и продуктов, приготовленных на его основе и способствует избирательному заселению биотопа теми видами, которые наиболее адекватны микрофлоре конкретного индивидуума. Это обеспечивает более эффективную коррекцию микрофлоры человека, повышение иммунного статуса и, как следствие, быстрейшее выздоровление его. The use of a symbiotic association of microorganisms as part of medical preparations and functional nutrition products, simulating the microbiocenosis of people aged 12 years and older, confirmed our assumption that the simultaneous use of several types of probiotic microorganisms leads not only to a summation of beneficial properties, but also to an overwhelming effect, this allows you to increase the biological activity of drugs and products prepared on its basis and contributes to the selective population of biotope those and species that are most adequate to the microflora of a particular individual. This provides a more effective correction of human microflora, increasing the immune status and, as a result, its quickest recovery.

Техническим результатом заявленного изобретения является получение консорциума, предназначенного для коррекции микрофлоры кишечника, слизистых, открытых полостей, кожных покровов людей в возрасте от 12 лет и старше, обладающего иммунокоррегирующим действием и обеспечивающего более высокую защитную, иммунотропную, метаболическую и пищеварительную функции за счет синергизма действия входящих в него бифидобактерий и лактобацилл, стимулирующего рост нормальной микрофлоры, что позволяет использовать его для производства высокоэффективных бактериальных препаратов, биологически активных добавок к пище, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, заквасок для приготовления кисломолочных продуктов, что позволит расширить арсенал технических средств лечебно-профилактического назначения. The technical result of the claimed invention is to obtain a consortium designed to correct the intestinal microflora, mucous membranes, open cavities, skin of people aged 12 years and older, having immunocorrective action and providing higher protective, immunotropic, metabolic and digestive functions due to synergies of incoming it contains bifidobacteria and lactobacilli, stimulating the growth of normal microflora, which allows it to be used for the production of highly effective GOVERNMENTAL bacterial preparations of biologically active additives to food, fermented and non-fermented foods, starters for the preparation of dairy products, which will expand arsenal of technical means and prophylactic treatment.

Бактерийные препараты на основе консорциума могут быть как в жидком, так и в сухом виде (порошки, таблетки, капсулы, суппозитории, мази, гранулы, кремы, свечи). Биологически активные добавки могут найти широкое применение как в пищевой промышленности при производстве пищевых продуктов питания, так и в косметической промышленности при производстве косметической продукции, при этом БАД может быть в жидком виде, а также в виде порошков, таблеток, гранул, капсул, мазей и кремов. Закваски могут быть как в жидком, так и в сухом виде - порошкообразном, таблетированном, гранулированном. Bacterial preparations based on the consortium can be either in liquid or in dry form (powders, tablets, capsules, suppositories, ointments, granules, creams, suppositories). Biologically active additives can be widely used both in the food industry in the production of food products and in the cosmetic industry in the manufacture of cosmetic products, while dietary supplements can be in liquid form, as well as in the form of powders, tablets, granules, capsules, ointments and creams. Sourdough can be both in liquid and in dry form - powdered, tableted, granular.

Использование консорциума при производстве ферментированных и неферментированных пищевых продуктов позволит расширить ассортимент пищевых продуктов, обладающих лечебно-профилактическим действием, таких как квас, соки, нектары, овощные и фруктовые пюре, детское питание, что одновременно упростит способ введения в организм человека пробиотика. The use of the consortium in the production of fermented and non-fermented food products will expand the range of food products with therapeutic and prophylactic effects, such as kvass, juices, nectars, fruit and vegetable purees, baby food, which will simultaneously simplify the method of introducing probiotic into the human body.

Культурально-морфологические признаки консорциума. Cultural and morphological signs of the consortium.

Клетки штаммов бифидобактерий, выращенных в ферментере, представляют собой равномерно окрашенные грамположительные палочки, расположенные цепочками или скоплениями, строгие анаэробы. Cells of strains of bifidobacteria grown in a fermenter are uniformly stained gram-positive bacilli located in chains or clusters, strict anaerobes.

Клетки штаммов лактобацилл представляют собой грамположительные палочки, расположенные поодиночке или цепочками из 2-4 или более клеток, микроаэрофилы. Cells of lactobacilli strains are gram-positive rods located singly or in chains of 2-4 or more cells, microaerophiles.

Физиолого-биохимические признаки микроорганизмов, входящих в консорциум. Physiological and biochemical signs of microorganisms included in the consortium.

Для бифидобактерий оптимальная температура выращивания составляет 37,5-38^oС, рН питательных сред 7,2-7,4. Каталазу не образуют, желатин не разжижают. Сбраживают глюкозу с образованием кислоты без образования газа, закисляя среду выращивания до рН 4,1-3,9. Видовая принадлежность каждого из штаммов определена в соответствии с их ферментативной активностью.For bifidobacteria, the optimal growing temperature is 37.5-38 ^o C, the pH of the nutrient medium is 7.2-7.4. Catalase is not formed, gelatin is not liquefied. Glucose is fermented to form acid without gas formation, acidifying the growth medium to a pH of 4.1-3.9. The species affiliation of each of the strains is determined in accordance with their enzymatic activity.

Для лактобацилл оптимальная температура выращивания составляет 37,5-38^oС, рН питательных сред 7,2-7,5.For lactobacilli, the optimal growth temperature is 37.5-38 ^o C, the pH of the nutrient medium is 7.2-7.5.

Штамм L.plantarum 8-PA-3 ферментирует глюкозу с образованием кислоты без газа, разлагает рамнозу, сахарозу, галактозу, целлобиозу, слабо ферментирует сорбит, мальтозу, лактозу, салицин и маннит. The strain L.plantarum 8-PA-3 ferments glucose to produce acid without gas, decomposes rhamnose, sucrose, galactose, cellobiose, weakly ferments sorbitol, maltose, lactose, salicin and mannitol.

Штаммы L. acidophilus К3ш24 и L.acidophilus NK-1 не образует газа, продуцирует каталазу, сбраживает глюкозу, лактозу, галактозу, маннозу и декстрозу. The strains of L. acidophilus K3sh24 and L.acidophilus NK-1 do not form gas, produces catalase, ferments glucose, lactose, galactose, mannose and dextrose.

Консорциум активно размножается на средах разного состава, принятых в производстве, к концу экспоненциальной фазы культивирования достигая в 1 мл lg 8,9-9.3; сквашивает молоко с высокой концентрацией бифидобактерий и лактобацилл, что является основным показателем возможности его использования в технологическом процессе производства кисломолочных продуктов (табл.1). The consortium actively propagates on media of different compositions accepted in production, reaching the end of the exponential phase of cultivation, reaching 1 ml of lg 8.9-9.3; fermented milk with a high concentration of bifidobacteria and lactobacilli, which is the main indicator of the possibility of its use in the technological process for the production of fermented milk products (Table 1).

Улучшение массообменных характеристик при культивировании в ферментере: периодическое барботирование азотом, перемешивание со скоростью 300 об/мин, углеводная подпитка, автоматическая регуляция значения рН - позволяют сократить экспоненциальную фазу роста до 6-8 ч. Improvement of mass transfer characteristics during cultivation in a fermenter: periodic nitrogen sparging, stirring at a speed of 300 rpm, carbohydrate recharge, automatic regulation of the pH value - reduce the exponential growth phase to 6-8 hours.

Продуцируя органические кислоты, перекись водорода, антибиотикоподобные вещества, консорциум ингибирует рост патогенных и условно-патогенных микроорганизмов (табл.2). By producing organic acids, hydrogen peroxide, and antibiotic-like substances, the consortium inhibits the growth of pathogenic and opportunistic microorganisms (Table 2).

Как видно из таблицы 2, антагонистическое действие консорциума in vitro проявляется значительно более активно, чем в монопрепаратах. As can be seen from table 2, the antagonistic effect of the consortium in vitro manifests itself much more actively than in single products.

Подтверждением лабораторных исследований препаратов явились клинические испытания лиофилизированного препарата, приготовленного на основе консорциума. Целью испытаний было показать переносимость и клиническую эффективность, обусловленную корригирующим воздействием препарата на микрофлору кишечника, и сопоставлению его эффективности с коммерческими препаратами. Clinical trials of a lyophilized preparation prepared on the basis of a consortium were confirmation of laboratory studies of drugs. The purpose of the tests was to show tolerability and clinical effectiveness due to the corrective effect of the drug on the intestinal microflora, and a comparison of its effectiveness with commercial drugs.

Под наблюдением находилось 54 больных с дисбактериозом кишечника: детей в возрасте от 12 лет и взрослых; из них 18 человек принимали коммерческий бифидумбактерин, 16 человек - коммерческий лактобактерин и 20 больных лечились препаратом на основе предлагаемого консорциума. Переносимость всех препаратов была хорошей, не обнаружена отрицательная динамика в показателях периферической крови, анализы мочи также оставались нормальными. Under observation were 54 patients with intestinal dysbiosis: children aged 12 years and adults; of these, 18 people took commercial bifidumbacterin, 16 people took commercial lactobacterin, and 20 patients were treated with the drug on the basis of the proposed consortium. Tolerability of all drugs was good, no negative dynamics in peripheral blood indices were detected, urine tests also remained normal.

Сравнительное изучение микробиоценоза кишечника детей, получавших коммерческие монопрепараты (бифидумбактерин и лактобактерин) и препарат на основе консорциума показало, что при лечении последним микрофлора кишечника приходит в норму эффективней и в более ранние сроки (табл.3). A comparative study of the intestinal microbiocenosis of children who received commercial monopreparations (bifidumbacterin and lactobacterin) and a drug based on the consortium showed that when the latter is treated with the latter, the intestinal microflora returns to normal more efficiently at an earlier date (Table 3).

Как видно из таблицы 3, после 30-дневного курса приема всех препаратов происходило повышение содержания бифидобактерий и лактобацилл; причем, значительно более эффективно после приема консорциума. As can be seen from table 3, after a 30-day course of taking all drugs there was an increase in the content of bifidobacteria and lactobacilli; moreover, it is much more effective after taking the consortium.

Способность консорциума активно наращивать биомассу в питательных средах, сквашивать молоко в короткие сроки, проявлять большую специфическую (антагонистическую) активность in vitro, более высокую клиническую эффективность по сравнению с монопрепаратами делает возможным его использование в приготовлении бактерийных препаратов, биологически активных добавок, заквасок для кисломолочных продуктов, в составе неферментированных пищевых продуктов, косметических средств. The ability of the consortium to actively increase biomass in nutrient media, to ferment milk in a short time, to exhibit greater specific (antagonistic) activity in vitro, higher clinical efficacy in comparison with monopreparations makes it possible to use it in the preparation of bacterial preparations, biologically active additives, ferments for fermented milk products , in the composition of unfermented food products, cosmetics.

Пример 1. Получение консорциума
1-й пассаж.Example 1. Obtaining a consortium
1st passage

Лиофилизированные штаммы B.bifidum 791, B.bifidum ЛВА-3, B.longum B379M, B. longum Я-3, B.adolescentis Г7513, B.adolescentis ГО-13, L.plantarum 8-PA-3, L. acidophilus К3ш24, L.acidophilus NK-1 в количестве 0,1 г сухой биомассы (1 доза) вносят каждый отдельно в среду выращивания и титруют методом десятикратных разведений до 10^-7-8. Выращивают 48-72 ч при 37,5-38^oС.Lyophilized strains of B. bifidum 791, B. bifidum LVA-3, B. longum B379M, B. longum I-3, B. adolescentis G7513, B. adolescentis GO-13, L.plantarum 8-PA-3, L. acidophilus K3sh24, L.acidophilus NK-1 in an amount of 0.1 g of dry biomass (1 dose) is introduced individually into the growing medium and titrated by ten-fold dilutions to 10 ^-7-8 . Grow 48-72 hours at 37.5-38 ^o C.

2-й пассаж. 2nd passage

Выросшую культуру каждого из штаммов в объеме 5-10% вносят в среду выращивания и раздельно культивируют в течение 16-18 часов при 37,5-38^oС.The grown culture of each of the strains in a volume of 5-10% contribute to the growing medium and separately cultivated for 16-18 hours at 37.5-38 ^o C.

Затем биомассу каждого из штаммов смешивают в следующем соотношении: 10 частей совокупной биомассы бифидобактерий (в равных долях каждого из штаммов) и 1 часть лактобацилл. Then the biomass of each of the strains is mixed in the following ratio: 10 parts of the total biomass of bifidobacteria (in equal shares of each of the strains) and 1 part of lactobacilli.

Полученную совокупную биомассу в объеме 5-10% вносят в среду выращивания и культивируют при 37,5-38^oС, регулируя процесс, в течение 6-8 часов в ферментере. Полученный консорциум используют в жидком виде. Содержание пробиотических микроорганизмов в полученной биомассе симбиотической ассоциации составляет lq 8-9 в 1 мл.The resulting total biomass in the amount of 5-10% is introduced into the growing medium and cultivated at 37.5-38 ^o C, regulating the process, for 6-8 hours in a fermenter. The resulting consortium is used in liquid form. The content of probiotic microorganisms in the resulting biomass of the symbiotic association is lq 8-9 in 1 ml.

Пример 2. Получение лиофилизированного бактерийного препарата. Example 2. Obtaining a lyophilized bacterial preparation.

К консорциуму, приготовленному по примеру 1, добавляют защитную среду высушивания (сахароза 80% и желатин 8% в объеме 10-12%) и разливают по 5 мл в пенициллиновые флаконы, замораживают при -40-45^oС и лиофильно высушивают. Полученный препарат содержит в 1 г сухой биомассы не менее 10⁹ живых клеток пробиотических микроорганизмов.A protective drying medium (sucrose 80% and gelatin 8% in a volume of 10-12%) is added to the consortium prepared according to Example 1 and poured into 5 ml penicillin vials, frozen at -40-45 ^o C and freeze-dried. The resulting preparation contains in 1 g of dry biomass at least 10 ⁹ living cells of probiotic microorganisms.

Пример 3. Использование консорциума в качестве закваски для приготовления продукта лечебно-функционального питания для людей в возрасте от 12 лет и старше. Example 3. The use of the consortium as a starter for the preparation of a product of therapeutic and functional nutrition for people aged 12 years and older.

Закваску (консорциум, приготовленный по примеру 1) в объеме 5% вносят в стерильное молоко, перемешивают и культивируют 6-10 ч до образования сгустка, после чего продукт охлаждают и сливают. В результате получают лечебно-профилактический кисломолочный продукт с содержанием полезной микрофлоры не менее 10⁸ в 1 мл.Ferment (the consortium prepared according to example 1) in a volume of 5% is introduced into sterile milk, mixed and cultured for 6-10 hours until a clot forms, after which the product is cooled and drained. The result is a therapeutic and prophylactic dairy product with a beneficial microflora content of at least 10 ⁸ in 1 ml.

Пример 4. Получение жидкой биологически активной добавки к пище, предназначенной для людей от 12 лет и старше. Example 4. Obtaining a liquid biologically active food supplement intended for people from 12 years of age and older.

Консорциум, приготовленный по примеру 1, в объеме 5-10% вносят в ферментер с питательной средой следующего состава в расчете на 1 литр продукта: 5%-ный водный экстракт топинамбура, 2% эпидермата-0, 0,5% хлористого натрия, 0,1% аскорбиновой кислоты, 0,1% агар-агара и культивируют, регулируя процесс, в течение 6-8 ч при 37,5-38^oС и стерильно разливают в емкости. В результате получают биологически активную добавку к пище с общей концентрацией пробиотической микрофлоры не менее 10⁸ в 1 мл. Полученная добавка обладает выраженным иммунокоррегирующим действием.The consortium prepared according to example 1, in the amount of 5-10%, is introduced into the fermenter with a nutrient medium of the following composition per 1 liter of product: 5% aqueous Jerusalem artichoke extract, 2% epidermate-0, 0.5% sodium chloride, 0 , 1% ascorbic acid, 0.1% agar-agar and cultured, regulating the process, for 6-8 hours at 37.5-38 ^o C and sterilely poured into containers. The result is a biologically active food supplement with a total concentration of probiotic microflora of at least 10 ⁸ in 1 ml. The resulting additive has a pronounced immunocorrective effect.

Пример 5. Получение ферментированного напитка (кваса). Example 5. Obtaining a fermented drink (kvass).

Консорциум, приготовленный по примеру 1, в объеме 5% вносят в подготовленную основу для приготовления кваса (вода, сахар, мед, сусло, аскорбиновая кислота), перемешивают и культивируют 8-10 ч до получения напитка с величиной титруемой кислотности 65-85^oТ, после чего продукт охлаждают и сливают. В результате получают напиток с высокими органолептическими показателями, с содержанием в 1 мл не менее 10⁸ живых пробиотических микроорганизмов, который помимо хороших вкусовых характеристик обладает высокими лечебно-профилактическими свойствами.The consortium prepared according to example 1, in a volume of 5%, is added to the prepared base for the preparation of kvass (water, sugar, honey, wort, ascorbic acid), mixed and cultured for 8-10 hours to obtain a drink with a titratable acidity value of 65-85 ^o T after which the product is cooled and drained. The result is a drink with high organoleptic characteristics, with a content of 1 ml of at least 10 ⁸ live probiotic microorganisms, which in addition to good taste characteristics has high therapeutic and prophylactic properties.

Источники литературы
1. Гончарова Г.И. "Бифидофлора человека, ее защитная роль в организме и обоснование сфер применения препарата бифидумбактерин", диссертация д.б.н., 1982 г.Sources of literature
1. Goncharova G.I. "Human bifidoflora, its protective role in the body and the rationale for the use of the drug bifidumbacterin", thesis, Doctor of Biological Sciences, 1982

2. Патент РФ 2109054, А 23 С 9/12, А 61 К 35/74, 1997. 2. RF patent 2109054, A 23 C 9/12, A 61 K 35/74, 1997.

3. Патент РФ 2126043, А 23 С 9/12, А 61 К 35/74, 1999.1 3. RF patent 2126043, A 23 C 9/12, A 61 K 35/74, 1999.1

Claims

A consortium of bifidobacteria and lactobacilli Bifidobacterium bifidum 791, B. bifidum LVA-3, B. longum B379M, B. longum I-3, B. adolescentis G7513, B. adolescentis GO-13, Lactobacillus plantarum 8-PA-3, Lactobacillus acidophilusophis , Lactobacillus acidophilus NK-1, GKNM MNIIEM them. G. N. Gabričevskogo, 161, used for the preparation of bacterial preparations, starter cultures for fermented milk products, fermented and non-fermented food products, biologically active additives, intended for the correction of the microflora of people aged 12 years and older.