RU2179392C1 - Strain of bacterium bacillus thuringiensis varietas kurstaki vkm v-2248d used for entomopathogenic preparation preparing - Google Patents
Strain of bacterium bacillus thuringiensis varietas kurstaki vkm v-2248d used for entomopathogenic preparation preparing Download PDFInfo
- Publication number
- RU2179392C1 RU2179392C1 RU2000133362/13A RU2000133362A RU2179392C1 RU 2179392 C1 RU2179392 C1 RU 2179392C1 RU 2000133362/13 A RU2000133362/13 A RU 2000133362/13A RU 2000133362 A RU2000133362 A RU 2000133362A RU 2179392 C1 RU2179392 C1 RU 2179392C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- kurstaki
- bacillus thuringiensis
- vkm
- varietas
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Использование: изобретение относится к микробиологической промышленности и касается нового штамма Bacillas thuringiensis var.kurstaki B-159/252B.t. Спорообразующие бактерии Вас. thuringiensis были выделены из природных очагов гибели насекомых более 80 лет назад и до настоящего времени являются наиболее известными во всем мире микроорганизмами, применяемыми в производстве энтомопатогенных препаратов. Usage: the invention relates to the microbiological industry and relates to a new strain of Bacillas thuringiensis var.kurstaki B-159 / 252B.t. Spore-forming bacteria you. thuringiensis were isolated from natural foci of insect death more than 80 years ago and to date are the most famous microorganisms worldwide used in the manufacture of entomopathogenic preparations.
Энтомоцидные свойства клеток Вас. thuringiensis, каждая из которых продуцирует спору и ромбовидный белковый кристалл, принадлежат исключительно эндотоксину, который является основным компонентом кристалла. Кристалл в кишечном тракте насекомого переходит в растворимое состояние, вызывает образование протоксина, который активизируется в результате реакции протеолиза. Entomocidal properties of you cells. thuringiensis, each of which produces spore and a diamond-shaped protein crystal, belongs exclusively to endotoxin, which is the main component of the crystal. The crystal in the intestinal tract of the insect passes into a soluble state, causing the formation of protoxin, which is activated as a result of the proteolysis reaction.
Промышленное производство препаратов на основе Вас. thuringiensis var. kurstaki требует их отбора по параметрам технологичности для крупномасштабного культивирования: высокая продуктивность, устойчивость к спектру производственных фагов, высокая биологическая активность. Industrial production of drugs based on you. thuringiensis var. kurstaki requires their selection in terms of manufacturability for large-scale cultivation: high productivity, resistance to the spectrum of production phages, high biological activity.
Совместить эти параметры в одном продуценте очень сложно, что затрудняет текущую селекционную работу с производственными культурами. Combining these parameters in one producer is very difficult, which complicates the current breeding work with industrial crops.
Известен импортный препарат дипел, получаемый с использованием штамма Вас. thuringiensis var. kurstaki NRRLB-18196 (а.с. СССР 1837773). Known imported drug dipel obtained using strain you. thuringiensis var. kurstaki NRRLB-18196 (A.S. USSR 1837773).
В бывшем СССР отечественный препарат лепидоцид получали с использованием штамма Вас. thuringiensis var. kurstaki Z-52 (а.с. СССР 769787)и штамма Вас. thuringiensis var. kurstaki Z-86 (а.с.СССР 1530159). In the former USSR, the domestic preparation lepidocide was obtained using the strain You. thuringiensis var. kurstaki Z-52 (AS USSR 769787) and strain you. thuringiensis var. kurstaki Z-86 (A.S.SSSR 1530159).
Целью изобретения является получение штамма Вас. thuringiensis var.kurstaki, способного обладать более высокой биологической активностью и большей устойчивостью к существующим фагам,чем известные штаммы. The aim of the invention is to obtain a strain of you. thuringiensis var.kurstaki, capable of possessing higher biological activity and greater resistance to existing phages than known strains.
Штамм депонирован в коллекции микроорганизмов Института биохимии и физиологии микроорганизмов РАН (г. Москва)под номером ВКМ В-2248Д. The strain was deposited in the collection of microorganisms of the Institute of Biochemistry and Physiology of Microorganisms of the Russian Academy of Sciences (Moscow) under the number VKM V-2248D.
Сущность изобретения: штамм бактерий Вас. thuringiensis var. kurstaki В-159/252 В. t. ВКМ В-2248Д выделен из природного материала с мест естественной гибели насекомых. The inventive strain of bacteria you. thuringiensis var. kurstaki B-159/252 V. t. VKM V-2248D is isolated from natural material from the places of natural death of insects.
Штамм характеризуется повышенной биологической активностью и большей устойчивостью к производственным фагам. The strain is characterized by increased biological activity and greater resistance to production phages.
Полученный штамм обладает следующими свойствами. The resulting strain has the following properties.
Морфолого-культуральные. Morphological and cultural.
Аэроб. Граммположителен. Вегетативные клетки - крупные палочки с закругленными концами, расположенные одиночно, парами или цепочками. Размер клеток-(1,7-1,9)•(3,5-6,9) мкм. Aerobe. Gram-positive. Vegetative cells - large sticks with rounded ends, located singly, in pairs or chains. The cell size is (1.7-1.9) • (3.5-6.9) microns.
Морфологической особенностью является наличие в одной споре двух белковых патогенных для насекомых параспоральных включений - кристалл-токсинов ромбовидной и квадратной формы с четкими гранями. A morphological feature is the presence in the spore of two protein parasporal inclusions pathogenic for insects — diamond-shaped and square-shaped crystal toxins with clear edges.
Температура выращивания 30oС.The temperature of the cultivation is 30 o C.
На мясопептонном бульоне образует гладкую сплошную пленку через 48-72 часа. Рост умеренный. On meat and peptone broth forms a smooth continuous film after 48-72 hours. Growth is moderate.
На ломтиках картофеля образует крупные плоские колонии с шероховатой матовой поверхностью. Рост обильный. Пигмент не образует. On slices of potato forms large flat colonies with a rough matte surface. Growth is plentiful. The pigment does not form.
На молочном агаре образует крупные, с шероховатой поверхностью колонии белого цвета, вокруг которых образуется зона просветления. Рост обильный. On milk agar forms large, with a rough surface, white colonies, around which an enlightenment zone forms. Growth is plentiful.
На пептоно-кукурузном агаре образует крупные, плоские с шероховатой матовой поверхностью колонии с ветвистым краем. Рост обильный. On peptone-corn agar forms large colonies with a branched edge, large, flat with a rough matte surface. Growth is plentiful.
На кровяном агаре образует крупные с ветвистым краем колонии белого цвета. Поверхность колонии шероховатая, маслянистая. Рост обильный. On blood agar forms large colonies with a branching edge of white color. The surface of the colony is rough, oily. Growth is plentiful.
Культура на твердых средах растет 24 -48 часов. Culture on solid media grows 24 to 48 hours.
Физиолого-биохимические. Physiological and biochemical.
Использует глюкозу, мальтозу, кукурузный и картофельный крахмал, соевую и кукурузную муку, кукурузный экстракт. It uses glucose, maltose, corn and potato starch, soy and corn flour, corn extract.
Отношение к источникам углерода. Relation to carbon sources.
Не использует лактозу, глицерин, сахарозу, ксилозу, маннозу. Does not use lactose, glycerin, sucrose, xylose, mannose.
Отношение к источникам азота. Attitude to nitrogen sources.
Органические источники азота, используемые данными микроорганизмами: пептоны, мясные, рыбные и растительные экстракты, соевая, кукурузная и рыбокостная мука, автолизаты дрожжей и казеина, гидролизаты из кукурузной и соевой муки, кормовые дрожжи. Organic nitrogen sources used by these microorganisms: peptones, meat, fish and plant extracts, soy, corn and fish and bone meal, autolysates of yeast and casein, hydrolysates from corn and soy flour, fodder yeast.
Усваивает аммонийные и нитратные формы азота. Absorbs ammonium and nitrate forms of nitrogen.
Хранение культуры
Культура хорошо хранится в холодильнике при температуре +4-6oС на косяках со средой "Б", для длительного хранения помещается под слой стерильного вазелинового масла или лиофильно высушивается.Culture preservation
The culture is well stored in the refrigerator at a temperature of + 4-6 o C on the jambs with medium "B", for long-term storage is placed under a layer of sterile liquid paraffin or freeze-dried.
Размножается на агаризованной среде МПА при температуре 28-30oС. Оценка свойств культуры проводится после ее культивирования на круговой качалке 200 об/мин на стерильной питательной среде следующего состава в %:
Дрожжи кормовые - 2,8
Мука кукурузная - 2,0
Мука соевая - 0,8
Натрий хлористый - 0,1
Калий сернокислый - 0,1
Хлористый кальций - 0,1
Аммоний фосфорно- кислый однозамещенный - 0,2
рН среды - 6,8-7,2
в качалочных колбах с объемом среды 15 мл,
Температура культивирования 28-30oС.Propagated on agar medium MPA at a temperature of 28-30 o C. Assessment of the properties of the culture is carried out after cultivation on a circular rocking chair 200 rpm on a sterile nutrient medium of the following composition in%:
Feed Yeast - 2.8
Corn flour - 2.0
Soya flour - 0.8
Sodium chloride - 0.1
Potassium sulfate - 0.1
Calcium Chloride - 0.1
Ammonium phosphoric monosubstituted - 0.2
pH of the medium - 6.8-7.2
in rocking flasks with a medium volume of 15 ml,
The cultivation temperature of 28-30 o C.
Длительность ферментации 48 часов до высыпания спор на 70-90%. The duration of fermentation is 48 hours before spore rash by 70-90%.
Сравнительные характеристики штамма Вас. thuringiensis var. kurstaki B-159/252B. t. и производственного штамма Z-52 и Z-86 при культивировании на ферментационной производственной среде при производстве лепидоцида приведены в таблице (данные 5 опытов в 3-х повторностях)
Таким образом, представленные данные показывают, что штамм В-159 существенно превышает по биологической активности производственный штамм Z-52, сравним с ним по продуктивности и обладает устойчивостью к большему числу производственных фагов.Comparative characteristics of the strain you. thuringiensis var. kurstaki B-159 / 252B. t. and production strain Z-52 and Z-86 when cultured on a fermentation production medium in the production of lepidocide are shown in the table (data of 5 experiments in 3 replicates)
Thus, the data presented show that strain B-159 significantly exceeds the production strain Z-52 in biological activity, is comparable in productivity and is resistant to a larger number of production phages.
Пример. В 5-параллельных опытах проведено культивирование штаммов В-159/252В. t, / Z-52 и Z-82 в качалочных колбах емкостью 750 мл с 30 мл дрожжеполисахаридной питательной среды. Example. In 5-parallel experiments, cultivation of strains B-159 / 252B was carried out. t, / Z-52 and Z-82 in rocking flasks with a capacity of 750 ml with 30 ml of yeast polysaccharide nutrient medium.
Количество посевного материала - 0,1% к объему питательной среды. Время ферментации на качалке с числом оборотов 200 об/мин при температуре 30+1oС - 48 часов. По окончании ферментации проведен анализ культуральной жидкости.The amount of seed - 0.1% of the volume of the nutrient medium. The fermentation time on a rocking chair with a speed of 200 rpm at a temperature of 30 + 1 o C - 48 hours. After fermentation, an analysis of the culture fluid.
Культура штамма B-159/252B.t. развивалась синхронно, освобождение спор и кристаллов происходило на 40-48 часов роста. Кристаллы крупные, хорошо видимые при окраске фуксином. Биологические пробы проведены на гусеницах непарного шелкопряда 2 возраста при свободном поглощении корма гусеницами. Отношение к фагам определялось методом скот-теста. The culture of strain B-159 / 252B.t. developed synchronously, the release of spores and crystals occurred at 40-48 hours of growth. The crystals are large, clearly visible when stained with fuchsin. Biological tests were carried out on caterpillars of unpaired silkworms of 2 age with free absorption of feed by caterpillars. The relation to phages was determined by the cattle test method.
Практическое использование штамма в производстве лепидоцида позволит сократить производственные потери от фаговых (трапных) операций и повысит качество выпускаемой продукции по уровню биологической активности. The practical use of the strain in the production of lepidocide will reduce production losses from phage (gangway) operations and will improve the quality of products in terms of biological activity.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000133362/13A RU2179392C1 (en) | 2000-12-27 | 2000-12-27 | Strain of bacterium bacillus thuringiensis varietas kurstaki vkm v-2248d used for entomopathogenic preparation preparing |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000133362/13A RU2179392C1 (en) | 2000-12-27 | 2000-12-27 | Strain of bacterium bacillus thuringiensis varietas kurstaki vkm v-2248d used for entomopathogenic preparation preparing |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2179392C1 true RU2179392C1 (en) | 2002-02-20 |
Family
ID=20244265
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2000133362/13A RU2179392C1 (en) | 2000-12-27 | 2000-12-27 | Strain of bacterium bacillus thuringiensis varietas kurstaki vkm v-2248d used for entomopathogenic preparation preparing |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2179392C1 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| MD4304C1 (en) * | 2013-08-13 | 2015-04-30 | Институт Зоологии Академии Наук Молдовы | Strain of Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki bacteria - bioinsecticide for the control of Lymantria genus lepidopterans |
| CN115851533A (en) * | 2022-12-05 | 2023-03-28 | 众乐(潍坊)生物科技有限公司 | Bacillus thuringiensis and application thereof in inhibition of livestock and poultry feed mould |
-
2000
- 2000-12-27 RU RU2000133362/13A patent/RU2179392C1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Applied Entomelogy and Zoology. Enhancing Effect of Supernants from Various Cultures of Bacillus thuringiensis on Larvi cidal Actividal of δ - Endotoxin against the Common Cutworm, Spodopotera Litura, May 1995, vol. 30, № 2, p.369-374. Applied Entomology and Zoology. A Unique Insecticidal Activiti in Bacillus thiringiensis Growth Medium. February 1994, v ol. 29, № 1, p.39-45. * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| MD4304C1 (en) * | 2013-08-13 | 2015-04-30 | Институт Зоологии Академии Наук Молдовы | Strain of Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki bacteria - bioinsecticide for the control of Lymantria genus lepidopterans |
| CN115851533A (en) * | 2022-12-05 | 2023-03-28 | 众乐(潍坊)生物科技有限公司 | Bacillus thuringiensis and application thereof in inhibition of livestock and poultry feed mould |
| CN115851533B (en) * | 2022-12-05 | 2023-06-27 | 众乐(潍坊)生物科技有限公司 | Bacillus thuringiensis and application thereof in inhibiting livestock and poultry feed mould |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Alippi et al. | Inhibition of the growth of Paenibacillus larvae, the causal agent of American foulbrood of honeybees, by selected strains of aerobic spore-forming bacteria isolated from apiarian sources | |
| AU596125B2 (en) | Improvements in or relating to organic compounds | |
| Rojas-Avelizapa et al. | Selection and characterization of a proteo-chitinolytic strain of Bacillus thuringiensis, able to grow in shrimp waste media | |
| Abedin et al. | Antibacterial and antifungal activity of cyanobacteria and green microalgae. Evaluation of medium components by Plackett-Burman design for antimicrobial activity of Spirulina platensis | |
| JPS60156382A (en) | Novel variant btt acting on coleoptera, insecticidal preparation or toxin obtained therefrom, its production and insecticidal agent | |
| Prabakaran et al. | Development of a cost-effective medium for the large scale production of Bacillus thuringiensis var israelensis | |
| Devi et al. | Cost-effective production of Bacillus thuringiensis by solid-state fermentation | |
| Pawar et al. | Screening of terrestrial and freshwater halotolerant cyanobacteria for antifungal activities | |
| Prabakaran et al. | Coconut water as a cheap source for the production of δ endotoxin of Bacillus thuringiensis var. israelensis, a mosquito control agent | |
| Khalili Samani et al. | Bacteriocin activity of various iranian honey‐associated bacteria and development of a simple medium for enhanced bacteriocin activity | |
| Poopathi et al. | Use of feather-based culture media for the production of mosquitocidal bacteria | |
| RU2179392C1 (en) | Strain of bacterium bacillus thuringiensis varietas kurstaki vkm v-2248d used for entomopathogenic preparation preparing | |
| Prabakaran et al. | A cost-effective medium for the large-scale production of Bacillus sphaericus H5a5b (VCRC B42) for mosquito control | |
| CN108486008B (en) | Bacillus thuringiensis YN108 with high toxicity to lepidoptera pests, and culture method and application thereof | |
| RU2453595C1 (en) | Strain of bacteria bacillus thuringiensis for obtaining bio- insecticide for control of greater wax moth | |
| Azmi et al. | Toxicity of Bacillus thuringiensis biopesticide produced in shrimp pond sludge as alternative culture medium against Bactrocera dorsalis (Hendel) | |
| IQBAL | Study of enterotoxigenicity of B. cereus emetic strain by skin vasopermeability reaction in rabbits and poultry | |
| KESHAVARZI et al. | Biochemical and physical requirements of Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki for high biomass yield production | |
| Khodair et al. | Improvement of Bacillus thuringiensis bioinsecticide production by fed-batch culture on low cost effective medium | |
| KR101212020B1 (en) | Bacillus thuringiensis subsp. aizawai strain KB098 having insecticidal activity and uses thereof | |
| Grecz et al. | Inhibition of Clostridium botulinum by culture filtrates of Brevibacterium linens | |
| SU1121806A1 (en) | Bacillus thuringiensis h/14 bts-393 no.b-2547 strain for manufacturing entomopathogenic preparation against blood-sucking mosquitoes | |
| RU2807482C1 (en) | Bacterial strain bacillus thuringiensis ssp. aizawai, exhibiting insecticidal activity against pests - insects of order lepidoptera | |
| Mummigatti et al. | Bacillus thuringiensis variety tenebrionis (DSM-2803) in the control of coleopteran pests of stored wheat | |
| RU2809733C1 (en) | Strain of entomopathogenic bacteria bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 0271, promising for obtaining biological product against leaf-eating insects |