ISDISD
0000
оabout
О) -I Изобретение относитс к области микробиологической промышленности и представл ет собой новый штамм бак терий, которьй может быть использова дл производства препарата, примен е мого дл борьбы с кровососущими кома рами. Известно, что одним из средств уничтожени личинок комаров вл ютс бактеригзльньш препараты, производств которых осуществл етс на основе куль туры Bacillus thuringiensis. Культуры бактерий, примен емые дл производства препаратов, должны обладать значительной патогенностью в отношении личинок комаров, фагоустой чивостью, высокой продуктивностью и способностью использовать в качестве компонентов питательной среды сырьевые продукты, примен емые дл крупнотоннажного производства энтомопато генных препаратов. В насто щее врем при производстве препаратов дл борьбы с комарами используетс шт. ONR-60 A/W НО/ССВС 1897 Вас. thuringiensis, позвол ющий получить препараты высокого качества . Недостатком штамма вл етс то, что дл культивировани его примен етс среда, содержаща дорогосто щие и дефицитные компоненты (пшенична мука, глюкоза, дрожжевой экстракт), мало пригодные в услови х крупнотоннажного производства. Кроме того,при выращивании на пшеничной среде шт. ONR-60A про вл ет более нИзкую патогенность дл личинок комаров.по срав нению с вьщеленным штаммом 393. Целью изобретени вл етс получе ние штамма бактерий Bacillus thuringiensis , обладающего высокой антомоцидной активностью. Дл достижени цели предлагаетс штамм Bacillus thuringiensis Н 14 ВТЗ-393в-2547 (Коллекци ВНИИ генетики и селекции промъшшенных микроорганизмов) дл изготовлени энтомопатогенного препарата против кровососущих комаров. Штамм имеет следующие морфологическую и физиологическую характеристики . I , Крупные споровые палочки с закруг ленными концами, расположенные одиночно , парами или цепочками. На м сопентонном агаре величина вегетативных клеток в экспоненциальной фазе развити равна (3,5-5,0)х X (1,2-1,5) мкм. Перитрихи. Грампо06Л ложительры. В стационарной фазе образуют овальные споры величиной (1,4-2,2) X (1-1,1) мкм в энтомоцидные кристаллы неправильно-округлой формы с нечеткими кра ми, диаметр которых находитс в пределах 0,3 1 ,1 мкм. По Н-антигену штамм Н 14NBTS-393 относитс к 14 серотипу. Не продуцирует термостальный -экзотоксин. М Сопептонный агар. На 3 сутки роста образует колонии до 0,1-0,2 см в диаметре, плоские с приподн тым центром, ровными или волнистыми кра ми , серовато-белого цвета. Пигмент не вьщел ет. Органическа среда дл поддержи- . вающей селекции и размножени маточных культур - сухой питательный агар (СПА). На 3-5 сутки роста колонии округлой формы, плоские, матовые,белого цвета. Край колоний волнистьш или радиально-изрезанный. Диаметр колоний 0,3-0,4 см. Рост обильный. Пигйент не образует. М сопептонный бульон. Помутнение слабое, гомогенное, затем просветление с образованием вуали через 48 ч. Осадок волокнистьй при встр хивании. На 7-8 сутки образование кольцеобразной пленки. Картофель ломтиками. Рост обильный . Культура слизиста , блест ща , затем суха . Пигмент бледно-розоватого цвета. Субстрат не окрашивает. Лакмусовое молоко. Пептонизаци с подщелачиванием на поверхности (24 ч), затем подкисление и редукци молока. Коагул ци на 3-4 сутки с частичным перевариванием. Переваривание интенсивное на 6-8 сутки. Коагулированна сыворотка не окрашена. Желточна среда. Образует розовый пигмент. , Агар-казеин. Рост обильный. Культура матова , через 24 ч роста вызы|Вает гидролиз казеина, сухаЯ, белого цвета. Просветление полное, ореол вокруг колоний 2-3 мм. Агар-желатина. Рост скудный. На 1-3 сутки умеренное послойное разжижение желатины, на 5-е сутки - полное. Отношение к углеводам. Усваивает без вьщелени газа глюкозу, маннозу, мальтозу, глицерин. Слабо усваивает сахарозу, эскулин. Не усваивает целлобиозу , арабинозу, лактозу, сорбит.O) -I The invention relates to the field of the microbiological industry and is a new strain of bacteria that can be used to produce a drug used to combat blood-sucking comrades. It is known that one of the means for the destruction of mosquito larvae is bacterium preparations, the production of which is carried out on the basis of the culture of Bacillus thuringiensis. Bacterial cultures used for the production of drugs should have significant pathogenicity against mosquito larvae, phage resistance, high productivity and the ability to use raw materials used for large-scale production of entomopathogenic preparations as components of the nutrient medium. Nowadays, in the production of mosquito control products, pcs. ONR-60 A / W NO / SSVS 1897 Vas. thuringiensis, which allows to obtain high quality drugs. The disadvantage of the strain is that it is used in cultivation medium containing expensive and scarce components (wheat flour, glucose, yeast extract), which are not very suitable for large-scale production. In addition, when grown on wheat, the pieces. ONR-60A exhibits more LOW pathogenicity for mosquito larvae. Compared with strain 393. The aim of the invention is to obtain a strain of the bacterium Bacillus thuringiensis, which has a high antomocidal activity. To achieve the goal, the Bacillus thuringiensis H 14 VTZ-393c-2547 strain (Collection of the All-Russia Research Institute of Genetics and Selection of Industrial Microorganisms) is proposed for the preparation of an entomopathogenic drug against mosquitoes. The strain has the following morphological and physiological characteristics. I, Large spore sticks with rounded ends, located singly, in pairs or chains. On m copentone agar, the size of vegetative cells in the exponential phase of development is (3.5–5.0) x X (1.2–1.5) µm. Peritrichs Grampo 06L Falter. In the stationary phase, oval spores of (1.4–2.2) X (1–1.1) µm form into irregularly rounded entomocidal crystals with fuzzy edges, the diameter of which is in the range of 0.3 1, 1 µm. According to the H-antigen, the H 14NBTS-393 strain belongs to serotype 14. Does not produce thermal-exotoxin. M Sapepton agar. On the 3rd day of growth, it forms colonies up to 0.1-0.2 cm in diameter, flat with a high center, even or wavy edges, of grayish-white color. Pigment does not appear. Organic medium for maintenance. selection and reproduction of uterine cultures - dry nutrient agar (SPA). 3-5 days of growth colonies are round, flat, matte, white. The edge of the colony is wavy or radially rugged. The diameter of the colonies is 0.3-0.4 cm. Growth is abundant. The pigment does not form. M septonny broth. Cloudiness is weak, homogeneous, then enlightenment with the formation of a veil after 48 hours. Fiber sediment upon shaking. For 7-8 days the formation of a ring-shaped film. Potato slices. Growth is plentiful. The culture of the mucous, glistening, then dry. Pigment pale pink color. The substrate does not stain. Litmus milk. Peptonization with alkalization on the surface (24 hours), then acidification and reduction of milk. Coaguli for 3-4 days with partial digestion. Intensive digestion for 6-8 days. Coagulated serum is not colored. Yolk environment. Forms pink pigment. , Agar casein. Growth is plentiful. The culture of the mat, after 24 hours of growth, is caused by the hydrolysis of casein, dry, white. Full enlightenment, halo around colonies of 2-3 mm. Agar-gelatin. Growth is meager. For 1-3 days moderate gel-thin liquefaction, on the 5th day - complete. Attitude to carbohydrates. Absorbs glucose, mannose, maltose, glycerin without gas absorption. Poorly absorbs sucrose, esculin. Does not absorb cellobiose, arabinose, lactose, sorbitol.