RU2174259C1 - Способ моделирования острого панкреатита - Google Patents
Способ моделирования острого панкреатитаInfo
- Publication number
- RU2174259C1 RU2174259C1 RU2000110841A RU2000110841A RU2174259C1 RU 2174259 C1 RU2174259 C1 RU 2174259C1 RU 2000110841 A RU2000110841 A RU 2000110841A RU 2000110841 A RU2000110841 A RU 2000110841A RU 2174259 C1 RU2174259 C1 RU 2174259C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- pancreatic
- duct
- experimental
- modeling
- mixture
- Prior art date
Links
- 206010033647 Pancreatitis acute Diseases 0.000 title claims abstract description 12
- 201000003229 acute pancreatitis Diseases 0.000 title claims abstract description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 19
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 claims abstract description 16
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 claims abstract description 16
- 229960001322 trypsin Drugs 0.000 claims abstract description 16
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 claims abstract description 16
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 11
- 210000004907 Glands Anatomy 0.000 claims description 12
- 230000037396 body weight Effects 0.000 claims description 6
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 claims description 4
- 230000001052 transient Effects 0.000 claims description 4
- 210000000277 Pancreatic Ducts Anatomy 0.000 abstract description 13
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 5
- 230000004090 etiopathogenesis Effects 0.000 abstract description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 22
- 230000000254 damaging Effects 0.000 description 20
- 210000000496 Pancreas Anatomy 0.000 description 19
- 210000001198 Duodenum Anatomy 0.000 description 12
- 230000000414 obstructive Effects 0.000 description 11
- 230000001154 acute Effects 0.000 description 10
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 description 10
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 10
- 210000000056 organs Anatomy 0.000 description 9
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 9
- VZJVWSHVAAUDKD-UHFFFAOYSA-N Potassium permanganate Chemical compound [K+].[O-][Mn](=O)(=O)=O VZJVWSHVAAUDKD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000001066 destructive Effects 0.000 description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 6
- 230000002255 enzymatic Effects 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- QCHFTSOMWOSFHM-WPRPVWTQSA-N Pilopine HS Chemical compound C1OC(=O)[C@@H](CC)[C@H]1CC1=CN=CN1C QCHFTSOMWOSFHM-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 5
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 5
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 5
- 230000000877 morphologic Effects 0.000 description 5
- 229960001416 pilocarpine Drugs 0.000 description 5
- 230000000472 traumatic Effects 0.000 description 5
- 210000000683 Abdominal Cavity Anatomy 0.000 description 4
- 210000004369 Blood Anatomy 0.000 description 4
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 4
- 210000001819 Pancreatic Juice Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 230000001965 increased Effects 0.000 description 4
- 210000004923 pancreatic tissues Anatomy 0.000 description 4
- 210000001519 tissues Anatomy 0.000 description 4
- PUDHBTGHUJUUFI-UHFFFAOYSA-N 10-(4-aminobutyl)-N-(1-amino-3-hydroxy-1-oxobutan-2-yl)-19-[(2-amino-3-naphthalen-2-ylpropanoyl)amino]-16-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-13-(1H-indol-3-ylmethyl)-6,9,12,15,18-pentaoxo-7-propan-2-yl-1,2-dithia-5,8,11,14,17-pentazacycloicosane-4-carboxamide Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(N)CC=2C=C3C=CC=CC3=CC=2)CSSCC(C(=O)NC(C(C)O)C(N)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)NC(=O)C1CC1=CC=C(O)C=C1 PUDHBTGHUJUUFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 3
- 210000000941 Bile Anatomy 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 210000000232 Gallbladder Anatomy 0.000 description 3
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 3
- 206010058096 Pancreatic necrosis Diseases 0.000 description 3
- 206010034674 Peritonitis Diseases 0.000 description 3
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 3
- 230000022534 cell killing Effects 0.000 description 3
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 3
- 230000002497 edematous Effects 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 238000002350 laparotomy Methods 0.000 description 3
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 3
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 3
- 230000001717 pathogenic Effects 0.000 description 3
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 3
- 230000003248 secreting Effects 0.000 description 3
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 3
- 235000019749 Dry matter Nutrition 0.000 description 2
- 229940110715 ENZYMES FOR TREATMENT OF WOUNDS AND ULCERS Drugs 0.000 description 2
- 210000000936 Intestines Anatomy 0.000 description 2
- 208000008466 Metabolic Disease Diseases 0.000 description 2
- 206010033645 Pancreatitis Diseases 0.000 description 2
- 108010087230 Sincalide Proteins 0.000 description 2
- AWLILQARPMWUHA-UHFFFAOYSA-M Sodium thiopental Chemical compound [Na+].CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC([S-])=NC1=O AWLILQARPMWUHA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229960000340 Thiopental Sodium Drugs 0.000 description 2
- 238000010609 cell counting kit-8 assay Methods 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 229940020899 hematological Enzymes Drugs 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000002458 infectious Effects 0.000 description 2
- 230000002757 inflammatory Effects 0.000 description 2
- 230000000622 irritating Effects 0.000 description 2
- 230000000302 ischemic Effects 0.000 description 2
- 238000004088 simulation Methods 0.000 description 2
- 239000000021 stimulant Substances 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating Effects 0.000 description 2
- 230000002522 swelling Effects 0.000 description 2
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N (3S)-3-amino-4-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[2-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-amino-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-carboxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-4-methylsulfanyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-4-methyls Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 1
- 229940035674 ANESTHETICS Drugs 0.000 description 1
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 1
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 1
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 1
- 210000001367 Arteries Anatomy 0.000 description 1
- 241001415326 Aythya americana Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102100013472 CCK Human genes 0.000 description 1
- 108010010737 Ceruletide Proteins 0.000 description 1
- 108010048926 Cholecystokinin Proteins 0.000 description 1
- 229940107137 Cholecystokinin Drugs 0.000 description 1
- 206010067410 Endotoxaemia Diseases 0.000 description 1
- 229940088598 Enzyme Drugs 0.000 description 1
- 210000000416 Exudates and Transudates Anatomy 0.000 description 1
- 210000001105 Femoral Artery Anatomy 0.000 description 1
- 210000003191 Femoral Vein Anatomy 0.000 description 1
- 210000003736 Gastrointestinal Contents Anatomy 0.000 description 1
- 206010018987 Haemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 231100000601 Intoxication Toxicity 0.000 description 1
- 206010061255 Ischaemia Diseases 0.000 description 1
- OWMZNFCDEHGFEP-NFBCVYDUSA-N L-Histidyl-L-seryl-L-a-aspartylglycyl-L-threonyl-L-phenylalanyl-L-threonyl-L-seryl-L-a-glutamyl-L-leucyl-L-seryl-L-arginyl-L-leucyl-L-arginyl-L-a-glutamylglycyl -L-alanyl-L-arginyl-L-leucyl-L-glutaminyl-L-arginyl-L-leucyl-L-leucyl-L-glutaminylglycyl-L-leu Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(N)=O)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 OWMZNFCDEHGFEP-NFBCVYDUSA-N 0.000 description 1
- 210000000265 Leukocytes Anatomy 0.000 description 1
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 1
- 102000001621 Mucoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010093825 Mucoproteins Proteins 0.000 description 1
- 210000002445 Nipples Anatomy 0.000 description 1
- 206010033625 Pancreatic haemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 102000035443 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005771 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 208000005374 Poisoning Diseases 0.000 description 1
- 229940024999 Proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 1
- 102100001186 SCT Human genes 0.000 description 1
- 229960002101 Secretin Drugs 0.000 description 1
- 108010086019 Secretin Proteins 0.000 description 1
- 208000005392 Spasm Diseases 0.000 description 1
- 206010041925 Staphylococcal infection Diseases 0.000 description 1
- 241000779819 Syncarpia glomulifera Species 0.000 description 1
- 206010043431 Thinking abnormal Diseases 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 231100000765 Toxin Toxicity 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 229940036248 Turpentine Drugs 0.000 description 1
- 210000003462 Veins Anatomy 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000016571 aggressive behavior Effects 0.000 description 1
- 230000000172 allergic Effects 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 1
- 230000003444 anaesthetic Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 238000005842 biochemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000024881 catalytic activity Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular Effects 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 230000004059 degradation Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001784 detoxification Methods 0.000 description 1
- 201000009910 diseases by infectious agent Diseases 0.000 description 1
- 230000002183 duodenal Effects 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 239000003193 general anesthetic agent Substances 0.000 description 1
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 1
- 230000002706 hydrostatic Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000000266 injurious Effects 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal Effects 0.000 description 1
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 description 1
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible Effects 0.000 description 1
- 102000004882 lipase Human genes 0.000 description 1
- 108090001060 lipase Proteins 0.000 description 1
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 1
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 235000020938 metabolic status Nutrition 0.000 description 1
- 230000029052 metamorphosis Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000004089 microcirculation Effects 0.000 description 1
- 230000004660 morphological change Effects 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogens Species 0.000 description 1
- 230000001575 pathological Effects 0.000 description 1
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 1
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 239000001739 pinus spp. Substances 0.000 description 1
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 1
- 239000004800 polyvinyl chloride Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000000601 reactogenic Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 229950002350 secretin human Drugs 0.000 description 1
- 230000000192 social effect Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002588 toxic Effects 0.000 description 1
- 231100000563 toxic property Toxicity 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Abstract
Изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальной хирургии, и может быть использовано при изучении патогенеза острого панкреатита и разработке способов лечения и диагностики данного заболевания. В проток поджелудочной железы вводят катетер. Осуществляют введение в проток смеси аутожелчи и раствора трипсина в равных соотношениях. Смесь вводят в количестве 0,3-0,5 мл/кг массы тела. При этом используют трипсин в концентрации 0,4-0,7 мг/кг. Введение осуществляют под давлением 1360 Па. Затем транзиторно отжимают катетер на срок в 30-40 мин. Способ позволяет повысить соответствие экспериментальной модели заболевания основным звеньям этиопатогенеза и клиническим особенностям течения острого панкреатита и, следовательно, повысить качество и достоверность научных исследований.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для воспроизведения модели острого панкреатита с целью изучения его патогенеза и разработки способов лечения и диагностики данного заболевания в экспериментальных условиях.
Острый панкреатит (ОП) остается одной из сложных и наименее изученных медицинских проблем, что подтверждается неуклонным ростом заболеваемости, увеличением числа деструктивных форм, крайне неудовлетворительными результатами лечения этой тяжелой патологии. Во-многом это обусловлено отсутствием универсальной экспериментальной модели заболевания, позволяющей исследовать в эксперименте закономерности развития острого воспаления поджелудочной железы (ПЖ) в условиях, максимально приближенных к клиническим.
В настоящее время известно множество способов моделирования острого панкреатита в эксперименте, однако лишь небольшая часть из них отвечает современным представлениям о его патогенезе, наиболее важными моментами которого являются значительное повышение гидростатического давления в протоковой системе ПЖ, связанное с внутрипротоковым рефлюксом желчи и/или кишечного содержимого, наличие препятствия для оттока панкреатического сока в результате отека, спазма большого дуоденального соска, обтурации его конкрементами, инородными телами, осаждением в магистральных протоках слизисто-белковых преципитатов, а также с гиперстимуляцией ПЖ и высокой секреторной активностью органа. Большинство предложенных моделей ОП основаны на, так называемом, каналикулярно-гипертензионном механизме индукции заболевания [Лопухин Ю.М. Экспериментальная хирургия. - М: Медицина, 1971; Шалимов С.А. и соавт. Руководство по экспериментальной хирургии. - М: Медицина, 1989]. Основными условиями воспроизведения ОП по данному механизму являются введение в протоковую систему веществ, способствующих изменению химических свойств панкреатического сока в сторону приобретения им повреждающих свойств, создание повышенного внутрипротокового давления, что достигается инфузией в протоковую систему жидкости в объеме, превышающем ее вместимость, а также моделирование застоя секрета путем перевязки выводного протока железы. Несмотря на патогенетическую оправданность каналикулярно-гипертензионных моделей, большинство из них не отражают перечисленного выше комплекса условий, необходимых для воспроизведения модели ОП, близкой к клиническому течению заболевания, а применяемые средства достижения внутрипротоковой гипертензии и нарушения оттока панкреатического сока зачастую не соответствуют анатомо-функциональным условиям возникновения ОП. Кроме того, большая вариабельность в выборе исследователями компонентов внутрипротоковой агрессии, отсутствие дифференцированного подхода к определению необходимого объема повреждающей смеси, концентрации в ней тех или иных веществ, а также уровня внутрипротокового давления, достигаемого в момент введения раздражителя, приводит к существенным различиям в выраженности экспериментального ОП, тяжести нарушений морфофункционального статуса ПЖ и системных метаболических расстройств, что при, казалось бы, одинаковых условиях проведения эксперимента существенно затрудняет интерпретацию получаемых сведений, резко снижает их достоверность и препятствует унификации того или иного метода моделирования ОП в экспериментальной практике. Широкое распространение получили травматические модели ОП, создаваемые введением различных химических веществ непосредственно в ткань ПЖ с последующей перевязкой главного выводного протока железы или без таковой. При этом в качестве повреждающего агента чаще всего используются желчь, протеолитические ферменты, скипидар, различные кислоты, соли, масла, тритон Х-100 и др. [Гульянц Э.С. и соавт. А.с. СССР N 1327152. Изобретения, открытия. - 1987, Бюл. N 28, - с.211; Лопухин Ю.М. Экспериментальная хирургия. - М: Медицина, 1971]. Однако травматические модели позволяют создать лишь более или менее ограниченные очаги острого некроза ткани железы в месте введения повреждающего агента, выраженность которого в значительной мере зависит от раздражающих и токсических свойств инъецируемого вещества. Данные модели не соответствуют представлениям о патогенезе ОП, при их использовании не учитываются важные патологические процессы, предшествующие деструктивным изменениям, а степень вовлеченности органа не соизмерима с истинной распространенностью процесса в клинике и имеет четкий локальный характер. Инфекционные методы моделирования ОП основаны на введении в проток или ткань ПЖ взвеси патогенных бактерий, смеси стафилококкового токсина и лецитовителлазы, инфицировании полости желчного пузыря и двенадцатиперстной кишки условно-патогенными микроорганизмами [Лопухин Ю.М. Экспериментальная хирургия. - М: Медицина, 1971; Трояшкин А.А. Стафилококковая инфекция. - Л., 1972]. Результатом использования этих моделей является острый гнойный панкреатит, который в естественных условиях в подавляющем большинстве случаев представляет собой вторичный процесс, являющийся следствием асептичного воспалительно-деструктивного процесса в органе, фактор которого в инфекционных моделях не учитывается. Сосудистые модели ОП, основанные на эмболизации, лигировании, окклюзии экстра- и интраорганных сосудов ПЖ [Лопухин Ю.М. Экспериментальная хирургия. - М. : Медицина, 1971; Саркисов Д.С., Ремезов П.И. Моделирование болезней человека в эксперименте. - М.: Медгиз, 1960; Шалимов С.А. и соавт. Руководство по экспериментальной хирургии. - М.: Медицина, 1989], сложны, и научная ценность их невелика, так как они могут быть практически сопоставимы только с ишемическими панкреонекрозами, которые составляют не более 0,5% от всех деструктивных панкреатитов в клинике. Целесообразность использования с целью моделирования ОП аллергических моделей [Чаплинский В.В., Гнатышак А.И. Острый панкреатит. - М.: Медицина, 1972; Шалимов С.А. и соавт. Руководство по экспериментальной хирургии. - М.: Медицина, 1989] в связи с их чрезвычайной трудоемкостью и отдаленностью от истинного этиопатогенеза заболевания в настоящее время подвергнуто глубокому сомнению. В зарубежной практике широкое распространение получили методы моделирования ОП, основанные на введении животным сверхмаксимальных доз экзогенных стимуляторов секреции ПЖ (синтетического холецистокинина - ХЦК-8 (ССК-8), его структурного аналога - церулеина, секретина и др.) [Czako L. et al. Pancreas. 1997. - Vol. 15. - N 1. - P. 83-90; Warzecha et al. J. Physiol. Pharmacol. - 1997. - Vol.48. - N 1. - P. 43-58] . Однако данные способы отражают лишь степень напряженности стимулирующих панкреатическую секрецию влияний, которые при ОП выявляются наряду или возникают в результате ряда известных внутриорганных структурно-функциональных расстройств. Помимо этого практическое использование данных моделей ввиду высокой стоимости экзогенных стимуляторов панкреатической секреции экономически не выгодно.
Актуальным представляется разработка и внедрение в практику экспериментальной хирургии базирующегося на современных данных об этиопатогенезе, учитывающего его ведущие стороны и, тем самым, адаптированного к клинике способа моделирования ОП, способного оптимизировать экспериментальные исследования в области ургентной панкреатологии.
В качестве аналога взят способ моделирования ОП, предложенный С. А. Шалимовым и соавт. [С.А. Шалимов, А.П. Радзиховский, Л.В. Кейсевич. Руководство по экспериментальной хирургии. М: Медицина. 1989. С. 192-193]. Способ относится к каналикулярно-гипертензионным моделям и заключается в следующем. У наркотизированного животного производят срединную лапаротомию, в рану извлекают двенадцатиперстную кишку с прилегающей к ней средней долей ПЖ, между которыми выделяют и берут на держалки главный выводной проток железы, специальной иглой пунктируют двенадцатиперстную кишку, после чего иглу вводят в отверстие выводного протока, фиксируя ее в протоке лигатурой. Вслед за этим медленно заполняют протоковую систему 2-4 мл 1% раствора перманганата калия, удаляют иглу и перевязывают главный выводной проток. Через 10-20 мин возникает острый отек ПЖ, выраженность которого зависит от количества введенного в протоки раствора перманганата калия.
Недостатки:
а) В качестве повреждающего агента используют неестественное для биологических объектов химическое вещество (перманганат калия), поэтому воздействие им на протоковую систему и тканевые структуры ПЖ вряд ли можно считать патогенетически оправданным, и патологические изменения, возникающие при введении в протоковую систему перманганата калия, обусловлены его неспецифическими агрессивными свойствами.
а) В качестве повреждающего агента используют неестественное для биологических объектов химическое вещество (перманганат калия), поэтому воздействие им на протоковую систему и тканевые структуры ПЖ вряд ли можно считать патогенетически оправданным, и патологические изменения, возникающие при введении в протоковую систему перманганата калия, обусловлены его неспецифическими агрессивными свойствами.
б) Способ не предполагает индивидуализированного подхода к выбору количества вводимого в протоки ПЖ повреждающего раствора в зависимости от конституциональных особенностей подопытного животного, что существенно снижает достоверность получаемых в ходе эксперимента результатов.
в) При введении повреждающего раствора в протоковую систему ПЖ не производится регистрация внутрипротокового давления, что чревато получением статистически недостоверных и противоположных результатов.
г) Перевязка главного выводного протока после введения в него повреждающего раствора нецелесообразна, так как создаваемое при этом препятствие для пассажа секрета в двенадцатиперстную кишку является постоянным, что несопоставимо с клиническими фактами.
д) Способ позволяет получить изолированную модель отечной либо деструктивной (при введении больших количеств повреждающей смеси) форм ОП, что не соответствует динамике течения ОП в клинике, где данные формы заболевания строго взаимосвязаны и являются стадиями единого процесса.
В качестве прототипа нами взят способ экспериментального воспроизведения ОП, предложенный А. Д. Перельманом [А.с. СССР N 1105191, 1984, Бюл. N 28]. Способ заключается в следующем. После осуществления доступа в брюшную полость и выведения двенадцатиперстной кишки с поджелудочной железой в рану путем перевязывания и пересечения панкреатодуоденальных артерий и вен мобилизуют среднюю долю железы от двенадцатиперстной кишки, выделяют главный выводной проток, который лигируют толстой шелковой нитью. Далее главный выводной проток пунктируют тонкой иглой проксимальнее лигатуры и непосредственно в него вводят 0,05 - 0,1% раствор пилокарпина из расчета 0,22 - 0,29 мг/кг массы тела животного. Дополнительно осуществляют инъекции раствора пилокарпина в ткань ПЖ в указанных выше дозах.
Недостатки:
а) Рекомендуемый в данном способе доступ к главному выводному протоку ПЖ достаточно травматичен, пересечение панкреатодуоденальных сосудов неминуемо ведет к присоединению ишемического компонента.
а) Рекомендуемый в данном способе доступ к главному выводному протоку ПЖ достаточно травматичен, пересечение панкреатодуоденальных сосудов неминуемо ведет к присоединению ишемического компонента.
б) Необратимая обструкция протоковой системы ПЖ, создаваемая перевязкой главного выводного протока, патогенетически не обоснована и не позволяет проводить исследование экзосекреторной функции ПЖ в течение экспериментального ОП.
в) Введение раствора пилокарпина производится без учета объема повреждающей смеси, а также выраженности создаваемой при этом протоковой гипертензии.
г) Введение пилокарпина в ткань железы не соответствует патофизиологии ОП, так как при этом на первый план выступает травматический фактор, а не стимулирующее влияние пилокарпина на секрецию ПЖ, которое неадекватно и весьма сомнительно при внутритканевом и внутрипротоковом способе применения препарата.
Задачи изобретения:
Повышение соответствия экспериментальной модели острого панкреатита основным звеньям этиопатогенеза и клиническим особенностям течения заболевания путем:
1. Разработки максимально приближенной к клинике модели ОП, учитывающей ведущие причинно-следственные связи его развития в естественных условиях (энзимобилиопанкреатический рефлюкс, внутрипротоковая гипертензия, застой секрета).
Повышение соответствия экспериментальной модели острого панкреатита основным звеньям этиопатогенеза и клиническим особенностям течения заболевания путем:
1. Разработки максимально приближенной к клинике модели ОП, учитывающей ведущие причинно-следственные связи его развития в естественных условиях (энзимобилиопанкреатический рефлюкс, внутрипротоковая гипертензия, застой секрета).
2. Определения в острых экспериментах на животных рационального сочетания и доз естественных раздражителей для воспроизведения модели острого панкреатита с использованием внутрипротокового пути их введения.
3. Установления с учетом конституциональных и анатомо-функциональных особенностей лабораторного животного необходимого объема повреждающей смеси для получения модели заболевания с сохраненной стадийностью течения.
4. Определения оптимальной величины избыточного давления в протоковой системе ПЖ, создаваемого при введении повреждающей смеси.
5. Установления оптимального для индукции ОП в эксперименте временного диапазона протоковой обструкции.
Поставленные задачи достигаются тем, что из трансдуоденального чреспапиллярного доступа под давлением в 1360 Па в качестве повреждающего агента вводят непосредственно в протоковую систему поджелудочной железы смесь аутожелчи с трипсином в равных соотношениях и в количестве 0,3-0,5 мл/кг массы тела, при концентрации трипсина - 0,4-0,7 мг/кг, а нарушение оттока панкреатического сока обеспечивают транзиторным отжатием катетера на срок в 30-40 мин.
По отношению к прототипу заявляемый способ моделирования острого панкреатита имеет следующие отличительные признаки.
Трансдуоденальный чреспапиллярный доступ к протоковой системе ПЖ менее травматичен, исключает присоединение фактора ишемии органа, связанного с мобилизацией средней доли железы. Исключительно внутрипротоковое введение раздражающих веществ более оправдано, так как проникновение и воздействие повреждающего фактора в этом случае максимально приближено к патофизиологии ОП, и мишенью для альтерации, как и в естественных условиях, является протоковая система. Принимая во внимание, что рефлюкс желчи в протоки ПЖ и внутрипротоковая активация трипсина, запускающего каскад биохимических реакций, способствующих приобретению аутоагрессивных свойств панкреатическими энзимами, являются наиболее постоянными факторами реализации ОП в клинических условиях, использование в качестве повреждающих агентов аутожелчи и трипсина в должной мере соответствует патогенезу заболевания. Целесообразной является и предполагаемая структурой способа транзиторная обструкция протоковой системы в течение 30-40 мин после введения повреждающей смеси, так как неустранимая обструкция, практикуемая в других моделях, не соответствует типичной клинике заболевания, кроме того, обратимая обструкция протоковой системы позволяет проводить комплексное исследование экзосекреторной функции ПЖ (объем секреции, содержание в соке панкреатических ферментов, бикарбонатов, расчет их дебитов и др.) в течение эксперимента. Контроль внутрипротокового давления в момент введения повреждающей смеси является необходимым условием стандартизации эксперимента, а величина давления в 1360 Па (120 мм вод. ст.) позволяет избежать нерационального моделирования стертых и молниеносных форм заболевания. Дифференцированный подход к выбору объема вводимой повреждающей смеси, концентрации в ней реактогенных веществ в зависимости от конституциональных особенностей животного более оправдан, позволяет повысить достоверность экспериментальных исследований, снизить частоту "неудачных" экспериментов.
Таким образом, решение поставленной задачи обеспечивается основными существенными признаками заявляемого способа, а именно трансдуоденальным чреспапиллярным воспроизведением энзимобилиопанкреатического рефлюкса и транзиторной обструкцией протоковой системы ПЖ.
Заявляемое количество вводимой в протоковую систему ПЖ смеси аутожелчи с трипсином, концентрации в ней трипсина, величина давления в момент введения повреждающего агента необходимы и достаточны для воспроизведения адаптированного к клинике острого воспаления ПЖ, так как экспериментально установлено, что уменьшение их ниже заявляемого предела недостаточно для адекватного возбуждения воспалительного процесса в органе, а увеличение может привести к молниеносному течению заболевания, что малосопоставимо с типичной его клиникой. Обструкция протоковой системы на срок в 30-40 мин в абсолютном числе случаев достаточна для воспроизведения ОП, в то время как увеличение времени обструкции чревато развитием фульминантного ОП, а сокращение не гарантирует от неудачного моделирования заболевания.
Разработка модели ОП осуществлена в эксперименте на 16 беспородных собаках. Технически моделирование ОП заключалось в следующем. После наркотизации и фиксации животного в асептичных условиях производилось выделение бедренного сосудистого пучка и выполнялась катетеризация бедренной вены по методике Сельдингера для внутривенного введения анестетиков и забора проб крови для биохимического анализа в определенные сроки эксперимента. После этого выполнялась верхне-срединная лапаротомия, в правом подреберье отыскивалась двенадцатиперстная кишка и вместе с ПЖ выводилась в рану. Примерно на 1-2 см проксимальнее перехода средней (фиксированной) доли ПЖ в правую в промежутке между сосудистыми аркадами производилась поперечная дуоденотомия, на края кишки накладывались серозно-мышечные держалки, после разведения которых на задней или задне-медиальной стенке двенадцатиперстной кишки находили белесоватый панкреатический сосочек. Панкреатический сосочек канюлировали эластичным полихлорвиниловым катетером диаметром 0,5 мм, который проводили в протоковую систему ПЖ до заклинивания. Перипапиллярно накладывали слизисто-подслизистый кисетный шов, который провизорно затягивали на один узел с целью герметизации протоковой системы. Пунктировали желчный пузырь и забирали 5-10 мл аутожелчи. Согласно массе тела лабораторного животного производили расчет необходимого количества повреждающей смеси, ингредиенты которой использовали в равных объемных соотношениях (учитывая, что в 1 мл раствора трипсина 1,6 мг и более сухого вещества). Под давлением в 1360 Па (120 мм вод. ст.), величину которого контролировали путем присоединенного к шприцу посредством тройных переходников аппарата Вальдмана, в выводной проток ПЖ при постоянном подтягивании катетера с целью равномерного заполнения протоковой системы вводили смесь аутожелчи и трипсина в объеме 0,3-0,5 мл/кг массы тела животного (концентрация трипсина - 0,4-0,7 мг/кг). Далее катетер пережимали мягким зажимом на 30-40 мин, после чего временную обструкцию протоковой системы устраняли снятием зажима и перипапиллярно наложенного кисетного шва. С целью динамического исследования экзосекреции ПЖ катетер оставляли в протоковой системе и выводили путем микродуоденостомии из двенадцатиперстной кишки, просвет которой ушивали однорядным узловым серозно-мышечно-подслизистым швом.
Результаты применения заявляемого способа моделирования ОП показали его простоту, доступность и высокую результативность - острое воспаление ПЖ удалось воспроизвести во всех случаях. При этом модель заболевания в достаточной степени соответствовала клиническим метаморфозам ОП и имела четко выраженную стадийность и фазность - от острого отека ПЖ до локальных и распространенных деструктивных изменений, с характерными для каждой стадии местной симптоматикой в брюшной полости (ферментативный перитонит, бляшки стеатонекроза и др. ), изменений в экзосекреторной деятельности ПЖ (резкое увеличение секреторной активности в отечную стадию и стадию начальной деструкции и некоторое ее снижение в фазу распространенного панкреонекроза), сдвигами в метаболическом статусе животных (резкое увеличение ферментативной активности крови, существенное повышение содержания в крови маркеров поражения органов детоксикации, напряженности процессов пероксидации липидов, эндотоксикоза). Морфологические изменения в различные фазы эспериментального ОП были типичными и характеризовались резким отеком интерстициального пространства, увеличением объема экзокринной паренхимы вследствие ее отека и выраженной клеточной дистрофии смешанного генеза, лейкоцитарной инфильтрацией тканевых элементов, резкими нарушениями интраорганной микроциркуляции, проходящего этапы внутрисосудистого стаза и сладжирования форменных элементов до завершенного тромбоза. У всех животных морфологические явления, характерные для начальной (отечной) стадии ОП, к 2-3 часам с момента моделирования заболевания трансформировались в очаговый панкреонекроз, который имел тенденцию к распространению, и охватывал к 10 часу экспериментального ОП до 30 - 50% паренхимы органа. Все животные, которым было осуществлено моделирование ОП заявляемым способом, погибли на фоне нарастающих деструктивных изменений, распространенного ферментативного перитонита и присущих для данной патологии тяжелых системных метаболических расстройств спустя 10 -12 часов с момента моделирования заболевания. Отмеченные в течение эксперимента морфофункциональные нарушения были строго типичными и последовательными, что позволило получить высоко достоверные сведения.
Заявляемый способ моделирования ОП апробирован в экспериментальных работах по изучению эффективности различных способов лечения острого воспаления ПЖ в общей сложности на 37 беспородных собаках. Результаты практического применения заявляемого способа подтвердили достаточное соответствие его предъявляемым к экспериментальным моделям требованиям, а именно высокую результативность, простоту, доступность, дешевизну, этиопатогенетическую близость и адаптированность к своему клиническому прототипу.
Пример 1. Беспородному кобелю по кличке Рыжий массой 18 кг под внутримышечным обезболиванием в асептических условиях произведены выделение и катетеризация правой бедренной артерии по методу Сельдингера. Под базисным внутривенным наркозом тиопенталом-натрия (12 мг/кг) выполнена верхнесрединная лапаротомия, в рану выведена двенадцатиперстная кишка с поджелудочной железой. В проекции перехода средней доли железы в правую произведена поперечная дуоденотомия, на раневые края кишки наложены серозно-мышечные лигатурные держалки, при разведении которых на задне-медиальной стенке двенадцатиперстной кишки визуализирован панкреатический сосочек, который канюлирован эластичным катетером диаметром 0,5 мм. Катетер проведен в протоковую систему железы до заклинивания и осуществлено перипаллярное наложение слизисто-подслизистого кисетного шва, который с целью герметизации протоковой системы провизорно затянут на один узел. Произведена пункция желчного пузыря - забрано 5 мл аутожелчи. Далее под давлением в 1360 Па в протоковую систему поджелудочной железы введено 9 мл (из расчета 0,5 мл/кг массы тела) смеси аутожелчи и трипсина в равных объемных соотношениях, учитывая, что в 1 мл раствора трипсина - 1,6 мг сухого вещества. Отжатием катетера мягким зажимом воспроизведена обструкция протоковой системы органа, которая устранена через 30 минут снятием зажима и перипаллярного кисетного шва. Катетер оставлен в главном выводном протоке поджелудочной железы, выведен из двенадцатиперстной кишки посредством дуоденостомии. Просвет кишки ушит однорядным узловым серозно-мышечно-подслизистым швом. В сроки 1, 3, 5, 7, 10 часов от момента моделирования заболевания произведены интраоперационные биопсии железы с целью изучения морфологической динамики ОП. Уже через 15 минут от момента введения повреждающей смеси макроскопически отмечен острый отек поджелудочной железы и микрогеморрагии на ее поверхности. Через 30 минут в брюшной полости появлялся воспалительный транссудат, и происходило резкое повышение внутрипротокового давления (на 120% от исходного уровня), что сопровождалось значительным усилением секреторной активности поджелудочной железы (активность амилазы в соке возросла на 244%, трипсина - на 188%, липазы - на 210%, объем секреции - на 275%). Одновременно отмечено существенное повышение ферментативной активности крови. Указанные выше явления прогрессировали и к 3 часу заболевания по биохимическим и морфологическим критериям отмечена реализация деструкции ткани ПЖ (падение ферментативной активности сока при нарастании ферментативной активности крови и внутрипротокового давления, появление фокусов некроза при гистологическом исследовании), В течение эксперимента воспалительно-деструктивный процесс в ПЖ неуклонно нарастал и манифестировал к 10 часу эксперимента в распространенный панкреонекроз (по данным макроскопического и морфологического исследования деструкции были подвержены 45 - 60% паренхимы органа), повторяя, тем самым, ведущие клинические метаморфозы ОП. На фоне тяжелой эндогенной интоксикации, выраженной гиперферментемии и функциональной недостаточности внутренних органов, явлений ферментативного перитонита и жирового некроза в брюшной полости собака выведена из эксперимента болюсным внутривенным введением 1,0 г тиопентала-натрия.
Таким образом изобретение практически осуществимо и является высокоэффективным, простым и доступным способом моделирования острого панкреатита в эксперименте.
Медико-социальный эффект. Способ позволит повысить соответствие экспериментальной модели заболевания основным звеньям этиопатогенеза и клиническим особенностям течения острого панкреатита, упростить моделирование заболевания в эксперименте, существенно повысить качество и достоверность научных исследований.
Claims (1)
- Способ моделирования острого панкреатита на собаках, включающий введение катетера и химических веществ в проток железы, отличающийся тем, что в качестве химических веществ используют смесь аутожелчи и раствора трипсина в равных соотношениях и в количестве 0,3-0,5 мл/кг массы тела, при концентрации трипсина в ней 0,4-0,7 мг/кг, которую вводят в проток железы под давлением в 1360 Па, после чего осуществляют транзиторное отжатие на срок в 30-40 мин.
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2174259C1 true RU2174259C1 (ru) | 2001-09-27 |
Family
ID=
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2465655C1 (ru) * | 2011-07-26 | 2012-10-27 | Государственное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Красноярский Государственный Медицинский Университет Имени Профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого Министерства Здравоохранения И Социального Развития Российской Федерации | Способ моделирования инфицированного панкреонекроза |
RU2553940C2 (ru) * | 2013-01-10 | 2015-06-20 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Казанский национальный исследовательский технический университет им. А.Н. Туполева-КАИ" | Способ создания экспериментальной модели острого панкреатита у животного |
RU2662144C1 (ru) * | 2017-06-26 | 2018-07-23 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Ростовский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО РостГМУ Минздрава России) | Способ остановки кровотечения при оружейных ранениях паренхиматозных органов брюшной полости |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
БУЯНОВ В.М. и др. Моделирование острого панкреатита. Клиническая хирургия. 1989, № 11, с.24-26. ВЛАДИМИРОВ В.Г., СЕРГИЕНКО В.И. Острый панкреатит: экспериментально-клинические исследования. - М.: Медицина, 1986, с.59-60. КОСТЮК Г.Я. и др. Резекция поджелудочной железы при остром панкреатите в эксперименте. Клиническая хирургия, 1988, № 11, с.16 и 17. БЕЛОВА Л.А. и др. Динамика изменения протеиназно-ингибиторного баланса в плазме крови собак с экспериментальным острым панкреатитом. Патологическая физиология и экспериментальная терапия, 1991, № 1, с.52-54. САРЫПБЕКОВА С.Ш. Микроциркуляторное русло поджелудочной железы при экспериментальном остром панкреатите и в условиях его коррекции. Автореф.дисс. - Алма-Ата, 1988, с.4. * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2465655C1 (ru) * | 2011-07-26 | 2012-10-27 | Государственное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Красноярский Государственный Медицинский Университет Имени Профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого Министерства Здравоохранения И Социального Развития Российской Федерации | Способ моделирования инфицированного панкреонекроза |
RU2553940C2 (ru) * | 2013-01-10 | 2015-06-20 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Казанский национальный исследовательский технический университет им. А.Н. Туполева-КАИ" | Способ создания экспериментальной модели острого панкреатита у животного |
RU2662144C1 (ru) * | 2017-06-26 | 2018-07-23 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Ростовский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО РостГМУ Минздрава России) | Способ остановки кровотечения при оружейных ранениях паренхиматозных органов брюшной полости |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Snyder et al. | A correlative study of atheromatous embolism in human beings and experimental animals | |
Hauri | A new operative technique in vasculogenic erectile impotence | |
US20070014782A1 (en) | Systems for enlarging the diameter of an artery or vein | |
GRINDLAY et al. | Effect of occlusion of the arterial blood supply to the normal liver: an experimental study | |
Mays | Vascular occlusion | |
Byrne et al. | Advantages of surgical arteriovenous fistulas for hemodialysis | |
RU2394574C1 (ru) | Способ коррекции ишемического поражения печени | |
Danese et al. | A model of chronic postsurgical lymphedema in dogs' limbs | |
RU2174259C1 (ru) | Способ моделирования острого панкреатита | |
Jacobson et al. | The harmful effect of arterial grafting on existing collateral circulation | |
Calderon et al. | Experimental approach to the surgical creation of lymphatic-venous communications | |
Sasaki et al. | Rabbit aneurysm model mediated by the application of elastase | |
Belli et al. | Biliary complications in orthotopic liver transplantation: experience with a modified technique of duct-to-duct reconstruction | |
Dorrance | An experimental study of suture of arteries with a description of new suture | |
RU2230373C1 (ru) | Способ моделирования экспериментального острого деструктивного панкреатита у крыс | |
Learmonth | The Problems of Portal Hypertension: Post-Graduate Lecture delivered at The Royal College of Surgeons of England on 10th October, 1947 | |
Jansen et al. | Haemobilia: a report of 2 cases | |
Silber | Renal trauma: Treatment by angiographic injection of autologous clot | |
Welch et al. | Resection and grafting for chronic occlusion of the terminal aorta or iliac arteries | |
RU2134073C1 (ru) | Способ лечения тромбоза воротной вены | |
SU1079239A1 (ru) | Способ лечени цирроза печени | |
RU2180972C2 (ru) | Способ моделирования хронического панкреатита | |
RU2085123C1 (ru) | Способ реконструкции воротной вены | |
RU2615729C1 (ru) | Способ интраоперационного окончательного гемостаза на печени | |
RU2164089C2 (ru) | Способ катетеризации правой желудочно-сальниковой артерии |