RU2163141C1 - Method of preparing brucellosis antigen for rose bengal specimen - Google Patents
Method of preparing brucellosis antigen for rose bengal specimen Download PDFInfo
- Publication number
- RU2163141C1 RU2163141C1 RU2000119188A RU2000119188A RU2163141C1 RU 2163141 C1 RU2163141 C1 RU 2163141C1 RU 2000119188 A RU2000119188 A RU 2000119188A RU 2000119188 A RU2000119188 A RU 2000119188A RU 2163141 C1 RU2163141 C1 RU 2163141C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cultivation
- brucellosis
- rose bengal
- nutrient medium
- hours
- Prior art date
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано при промышленном производстве антигена для диагностики бруцеллеза. The invention relates to biotechnology and can be used in the industrial production of antigen for the diagnosis of brucellosis.
Известен способ промышленного получения бруцеллезного антигена для реакции агглютинации (РА), реакции связывания комплемента (РСК) и реакции длительного связывания комплемента (РДСК) путем получения посевного материала штамма Brucella abortus 19 на плотной питательной среде, глубинного производственного культивирования в биореакторах в течение 24 ч в жидкой питательной среде, содержащей перевар Хоттингера, глицерин, глюкозу, NaCl, дрожжевой экстракт и воду с дальнейшей очисткой и концентрированием культуры на ультрафильтрационных колонках, отмывкой и ресуспендированием микробных клеток 0,5%-ным фенолизированным физиологическим раствором (RU 2085212 C, опубл. 27.07.97). A known method of industrial production of brucellosis antigen for the agglutination reaction (RA), complement fixation reaction (RAC) and long-term complement fixation reaction (RDSK) by obtaining seed of Brucella abortus 19 strain on a solid nutrient medium, deep production cultivation in bioreactors for 24 hours liquid nutrient medium containing Hottinger's digest, glycerin, glucose, NaCl, yeast extract and water with further purification and concentration of the culture on ultrafiltration columns, washing Coy and resuspension of microbial cells with 0.5% saline fenolizirovannym (RU 2085212 C, publ. 07.27.97).
Однако используемая питательная среда и режимы глубинного культивирования не являются оптимальными для активного накопления бруцелл - концентрация микробных клеток на конец культивирования (24 ч) составляет 35 - 45 млрд. м.к./см3, операция получения посевного материала на плотной питательной среде трудоемка, а концентрирование проводится в два приема, что усложняет производство.However, the nutrient medium used and the regimes of deep cultivation are not optimal for the active accumulation of brucella - the concentration of microbial cells at the end of cultivation (24 hours) is 35 - 45 billion m.k./cm 3 , the operation of obtaining seed on a dense nutrient medium is laborious, and concentration is carried out in two stages, which complicates the production.
Наиболее близким аналогом по решаемой задаче является способ получения бруцеллезного цветного антигена для роз бенгал пробы (РБП), заключающийся в том, что чистую культуру штамма Brucella abortus 19 выращивают в течение трех суток в четвертях на плотной питательной среде - печеночно-мартеновском агаре с добавлением перевара Хоттингера. Выросшую культуру бруцелл смывают стерильным 0,5%-ным фенолизированным физиологическим раствором и инактивируют в водяной бане при 80oC в течение 1 ч. Суспензию инактивированных клеток окрашивают 1%-ным водным раствором краски бенгальской розовой и ресуспендируют в буферном разбавителе, включающем едкий натр, фенолизированный физиологический раствор и молочную кислоту ("Ветеринарные препараты". Справочник, под ред. Д.Ф.Осидзе, М., Колос, 1981, с. 185 -188).The closest analogue to the problem being solved is a method for producing brucellosis color antigen for roses Bengal samples (RBP), which consists in the fact that a pure culture of the strain Brucella abortus 19 is grown for three days in quarters on a dense nutrient medium - hepatic-open-hearth agar with the addition of a digest Hottinger. The grown brucella culture is washed off with sterile 0.5% phenolized saline and inactivated in a water bath at 80 ° C for 1 hour. The suspension of inactivated cells is stained with a 1% aqueous solution of Bengal pink paint and resuspended in a buffer diluent including sodium hydroxide , phenolized saline solution and lactic acid ("Veterinary preparations". Handbook, edited by D. F. Ozidze, M., Kolos, 1981, p. 185 -188).
Однако известный способ изготовления не технологичен: культивирование ведется на дорогостоящей, сложной в изготовлении плотной питательной среде; время культивирования составляет 72 ч; требует использования большого количества стеклянной посуды; площадей и оборудования; не исключает опасности возможного контакта персонала с возбудителем бруцелл. Кроме того, по существующей технологии в антиген могут попадать белки питательной среды, что сказывается на появлении неспецифических реакций при постановке РА. However, the known manufacturing method is not technological: cultivation is carried out on an expensive, difficult to manufacture dense nutrient medium; cultivation time is 72 hours; requires the use of a large amount of glassware; space and equipment; does not exclude the danger of possible personnel contact with the brucella pathogen. In addition, according to existing technology, proteins of the nutrient medium can enter the antigen, which affects the appearance of nonspecific reactions during the formulation of RA.
Задачей изобретения является разработка промышленной технологии получения бруцеллезного антигена для роз бенгал пробы с более высокими качественными характеристиками. The objective of the invention is the development of industrial technology for brucellosis antigen for roses Bengal samples with higher quality characteristics.
Технический результат изобретения заключается в упрощении способа на всех стадиях технологического процесса: получения посевного материала, производственного культивирования, очистки и концентрирования, инактивации, окрашивания, снижения производственных потерь, себестоимости антигена, контакта персонала с возбудителем бруцеллеза, а также повышении специфичности, чувствительности и стандартности получаемого диагностикума. The technical result of the invention is to simplify the method at all stages of the technological process: obtaining seed, industrial cultivation, cleaning and concentration, inactivation, staining, reducing production losses, cost of antigen, personnel contact with the causative agent of brucellosis, as well as increasing the specificity, sensitivity and standardness of the resulting diagnosticum.
Сущность изобретения заключается в следующем: при изготовлении бруцеллезного антигена для роз бенгал пробы получают посевной материал штамма Brucella abortus 19 и осуществляют производственное культивирование в жидкой питательной среде следующего состава (об.%):
Перевар Хоттингера - 20 - 25
Глицерин - 1 - 2
Глюкоза - 1 - 1,5
NaCl - 0,5
Дрожжевой аутолизат нативный с сухим остатком 15-17% - 3,0-3,5
Вода водопроводная - до 100,
культивирование проводят в глубинных условиях в течение 19-21 ч с регуляцией уровня парциального давления растворенного в культуральной жидкости кислорода на протяжении всего процесса культивирования: после внесения посевного материала с 1 по 6 ч культивирования устанавливают уровень 20 - 25 pO2, с 6 по 16-18 ч - 40-45 pO2 и затем с 16-18 по 19-21 ч - 30-35 pO2, выросшие бактериальные клетки отделяют и концентрируют ультрафильтрацией на волокнах с пределом задержания 15-50 кД, инактивируют нагреванием, окрашивают роз-бенгалом, ресуспендируют в буферном разбавителе и стандартизируют целевой продукт.The essence of the invention is as follows: in the manufacture of brucellosis antigen for roses, bengal samples receive seed material of strain Brucella abortus 19 and carry out industrial cultivation in a liquid nutrient medium of the following composition (vol.%):
Hottinger Brew - 20 - 25
Glycerin - 1 - 2
Glucose - 1 - 1.5
NaCl - 0.5
Native yeast autolysate with a dry residue of 15-17% - 3.0-3.5
Tap water - up to 100,
cultivation is carried out in deep conditions for 19-21 hours with regulation of the partial pressure level of oxygen dissolved in the culture fluid throughout the entire cultivation process: after the inoculation of seeds from 1 to 6 hours of cultivation, the level is set to 20 - 25 pO2, from 6 to 16-18 h - 40-45 pO2 and then from 16-18 to 19-21 h - 30-35 pO2, the grown bacterial cells are separated and concentrated by ultrafiltration on fibers with a retention limit of 15-50 kDa, inactivated by heating, stained with rose bengal, resuspended in buffer diluent and standardize the target product.
Усовершенствование производственной питательной среды, используемой при изготовлении единого бруцеллезного антигена, и режимов глубинного культивирования обеспечивает увеличение накопления микробных клеток до 55-65 млрд. м. к. /см3 и сокращает время культивирования до 19-21 ч. Полученная культура бруцелл обладает наиболее полноценными антигенными свойствами, что приводит к получению биологически активного и специфичного диагностикума. Применение для ультрафильтрации волокон с пределом задержания 15-50 кД обеспечивает эффективное концентрирование бактериальной суспензии в одну стадию и исключает операцию отмывки микробных клеток от остатков питательной среды.Improvement of the production nutrient medium used in the manufacture of a single brucellosis antigen and deep cultivation regimes provides an increase in the accumulation of microbial cells to 55-65 billion cubic meters / cm 3 and reduces the cultivation time to 19-21 hours. The resulting brucella culture has the most complete antigenic properties, which leads to biologically active and specific diagnosticum. Application for ultrafiltration of fibers with a retention limit of 15-50 kD ensures effective concentration of the bacterial suspension in one stage and eliminates the operation of washing microbial cells from the remains of the nutrient medium.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами. The invention is illustrated by the following examples.
Пример 1. Для получения посевного материала и производственного культивирования бруцелл используют оптимизированную питательную среду на основе перевара Хоттингера, приготовленную по следующей прописи (об.%): перевар Хоттингера - 25, глицерин - 2, глюкоза - 1,5, NaCl - 0,5, дрожжевой аутолизат нативный - 3,4, водопроводная вода до 100,0. Example 1. To obtain seed and industrial cultivation of brucella, an optimized nutrient medium is used based on the Hottinger digest prepared according to the following recipe (vol.%): Hottinger digest - 25, glycerin - 2, glucose - 1.5, NaCl - 0.5 , native yeast autolysate - 3.4, tap water up to 100.0.
В готовой питательной среде содержание аминного азота составляет 150-160 мг %, pH среды 6,8-7,1. Среду стерилизуют фильтрацией через пластины типа СФ. In the finished nutrient medium, the content of amine nitrogen is 150-160 mg%, the pH of the medium is 6.8-7.1. The medium is sterilized by filtration through SF type plates.
Для получения посевного материала чистую культуру штамма Brucella abortus 19 засевают в микроферментер с оптимизированной питательной средой и культивируют 24-26 ч до накопления 35-45 млрд. м.к./см3. Бактериальную суспензию сливают в стерильные бутыли и хранят в холодильнике до 5 недель.To obtain seed, a pure culture of the strain Brucella abortus 19 is seeded in microfermenter with an optimized nutrient medium and cultivated for 24-26 hours until an accumulation of 35-45 billion cubic meters / cm 3 . The bacterial suspension is poured into sterile bottles and stored in the refrigerator for up to 5 weeks.
Производственное культивирование проводят глубинным методом в биореакторе в питательной среде того же состава. Засев осуществляют полученной бактериальной суспензией с концентрацией 1,5 млрд. м.к./см3. При культивировании концентрацию водородных ионов (pH) поддерживают в пределах 6,8-7,1. Уровень парциального давления растворенного в культуральной жидкости кислорода с 1 по 6 ч культивирования составляет 20-25 pO2; с 6 по 18 ч - 40-45 рO2 и с 18 по 21 ч - 30-35 рO2. По окончании культивирования бактериальную суспензию Brucella abortus шт. 19 с концентрацией 65 млрд. м.к./см2 концентрируют в 10-11 раз ультрафильтрацией на волокнах ВЛУ-15-50 ПА с пределом задержания 15-50 кД. К концентрату в биореакторе добавляют 1% фенолизированный физиологический раствор и ресуспендируют до концентрации 180 - 220 млрд. м. к. /см2. Инактивацию бактериальной суспензии проводят в биореакторе при температуре 80oC в течение 60 мин при постоянном перемешивании.Production cultivation is carried out by the in-depth method in a bioreactor in a nutrient medium of the same composition. Inoculation is carried out with the obtained bacterial suspension with a concentration of 1.5 billion m.k. / cm 3 . During cultivation, the concentration of hydrogen ions (pH) is maintained in the range of 6.8-7.1. The level of partial pressure of oxygen dissolved in the culture fluid from 1 to 6 hours of cultivation is 20-25 pO2; from 6 to 18 hours - 40-45 pO2 and from 18 to 21 hours - 30-35 pO2. At the end of the cultivation, the bacterial suspension of Brucella abortus pcs. 19 with a concentration of 65 billion cubic meters / cm 2 are concentrated 10-11 times by ultrafiltration on VLU-15-50 PA fibers with a retention limit of 15-50 kD. A 1% phenolized physiological solution is added to the concentrate in the bioreactor and resuspended to a concentration of 180 - 220 billion cubic meters / cm 2 . Inactivation of the bacterial suspension is carried out in a bioreactor at a temperature of 80 o C for 60 minutes with constant stirring.
После охлаждения бактериальной суспензии берут пробу и определяют необходимое количество краски бенгальской розовой. Объем краски закачивают в биореактор, перемешивают и выдерживают при комнатной температуре до следующего дня. After cooling the bacterial suspension, a sample is taken and the required amount of Bengal pink paint is determined. The volume of paint is pumped into the bioreactor, mixed and kept at room temperature until the next day.
Окрашенную суспензию бруцелл из биореактора подают на центрифугу ОТР 101 К, отделяют бакмассу от краски, фенолизированного физиологического раствора и остатков питательной среды и ресуспендируют ее буферным разбавителем при перемешивании в течение 1 часа. The colored suspension of brucella from the bioreactor is fed to an OTP 101 K centrifuge, the back mass is separated from the paint, phenolized physiological saline and residues of the nutrient medium and resuspended by a buffer diluent with stirring for 1 hour.
Полученный антиген стандартизируют по активности с национальной агглютинирующей бруцеллезной сывороткой, содержащей в 1 мл 1000 международных единиц (ME) антител. Разводят буферным разбавителем до концентрации 90-95 млрд. м.к./см3 и расфасовывают.The resulting antigen is standardized by activity with national agglutinating brucellosis serum containing 1 ml of 1000 international units (ME) of antibodies. Diluted with a buffer diluent to a concentration of 90-95 billion m.k./cm 3 and packaged.
Пример 2. Антиген изготовляют аналогично примеру 1, но для получения посевного материала и производственного культивирования бруцелл используют оптимизированную питательную среду на основе перевара Хоттингера, приготовленную по следующей прописи (об.%): перевар Хоттингера - 20, глицерин - 1, глюкоза - 1,0, NaCl - 0,5, дрожжевой аутолизат нативный - 3,0, водопроводная вода до 100,0. Example 2. The antigen is produced analogously to example 1, but to obtain seed and industrial cultivation of brucella, an optimized nutrient medium based on the Hottinger digest is used, prepared according to the following recipe (vol.%): Hottinger digest - 20, glycerin - 1, glucose - 1, 0, NaCl - 0.5, native yeast autolysate - 3.0, tap water up to 100.0.
При производственном культивировании засев осуществляют бактериальной суспензией с концентрацией 3 млрд. м.к./см3. Уровень парциального давления растворенного в культуральной жидкости кислорода с 1 по 6 ч культивирования поддерживают в режиме 20 - 25 рO2; с 6 по 16 ч - 40-45 рO2 и с 16 по 19 ч - 30-35 рO2. По окончании культивирования получают бактериальную суспензию Brucella abortus шт. 19 с концентрацией 55 млрд. м.к./см3. Далее технологический процесс проводят аналогично примеру 1.During industrial cultivation, inoculation is carried out with a bacterial suspension with a concentration of 3 billion m.k./cm 3 . The level of partial pressure of oxygen dissolved in the culture fluid from 1 to 6 hours of cultivation is maintained in the regime of 20-25 pO2; from 6 to 16 hours - 40-45 pO2 and from 16 to 19 hours - 30-35 pO2. At the end of cultivation receive a bacterial suspension of Brucella abortus pcs. 19 with a concentration of 55 billion cubic meters / cm 3 . Next, the process is carried out analogously to example 1.
Пример 3. Активность и специфичность полученного по примерам 1 и 2 антигена устанавливают при его титровании в РА с национальной бруцеллезной агглютинирующей сывороткой против Brucella abortus, содержащей в 1 мл 1000 ME антител в сравнении с известным антигеном для РБП, содержащем 115 млрд. м.к. /см3.Example 3. The activity and specificity of the antigen obtained in examples 1 and 2 was established by titration in RA with a national brucella agglutinating serum against Brucella abortus containing 1 ml of 1000 ME antibodies in comparison with the known antigen for RBP containing 115 billion m . / cm 3 .
Предлагаемый антиген, содержащий меньшее количество клеток (90-95 млрд. м. к. /см3) дает реакцию интенсивностью в 4 креста с сывороткой в разведении 1: 10, содержащей 50 ME, 1,5-2 креста с сывороткой в разведении 1:20 (35 ME) и отрицательную реакцию с сывороткой в разведении 1:35 (28,5 ME), что свидетельствует о ее более высокой активности по сравнению с известным диагностикумомаThe proposed antigen containing a smaller number of cells (90-95 billion m. K. / cm 3 ) gives a reaction intensity of 4 crosses with serum at a dilution of 1: 10, containing 50 ME, 1.5-2 crosses with serum at a dilution of 1 : 20 (35 ME) and a negative reaction with serum at a dilution of 1:35 (28.5 ME), which indicates its higher activity compared to the known diagnosticum
Claims (1)
Перевар Хоттингера - 20 - 25
Глицерин - 1 - 2
Глюкоза - 1 - 1,5
NaCl - 0,5
Дрожжевой аутолизат нативный с сухим остатком 15 - 17% - 3,0 - 3,5
Вода водопроводная - До 100
культивирование проводят в глубинных условиях в течение 19 - 21 ч с регуляцией уровня парциального давления растворенного в культуральной жидкости кислорода на протяжении всего процесса культивирования: после внесения посевного материала с 1 по 6 ч культивирования устанавливают уровень 20 - 25 рО2, с 6 по 16 - 18 ч - 40 - 45 рО2 и затем с 16 - 18 по 19 - 21 ч - 30 - 35 рО2, а отделение и концентрирование проводят ультрафильтрацией на волокнах с пределом задержания 15 - 50 кД.A method of manufacturing a brucellosis antigen for bengal roses, comprising preparing the seed of the strain Brucella abortus 19, its production cultivation, separation and concentration of the grown bacterial cells, their inactivation by heating, staining with rose bengal, followed by resuspension in a buffer diluent and standardization of the target product, characterized in that that for the preparation of seed and industrial cultivation using a liquid nutrient medium of the following composition, vol.%:
Hottinger Brew - 20 - 25
Glycerin - 1 - 2
Glucose - 1 - 1.5
NaCl - 0.5
Native yeast autolysate with a dry residue of 15 - 17% - 3.0 - 3.5
Tap water - Up to 100
cultivation is carried out in deep conditions for 19-21 hours with the regulation of the partial pressure level of oxygen dissolved in the culture fluid throughout the cultivation process: after making the seed from 1 to 6 hours of cultivation, the level of 20-25 pO2 is set, from 6 to 16-18 h - 40 - 45 pO2 and then from 16 - 18 to 19 - 21 h - 30 - 35 pO2, and separation and concentration are carried out by ultrafiltration on fibers with a retention limit of 15 - 50 kD.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000119188A RU2163141C1 (en) | 2000-07-20 | 2000-07-20 | Method of preparing brucellosis antigen for rose bengal specimen |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000119188A RU2163141C1 (en) | 2000-07-20 | 2000-07-20 | Method of preparing brucellosis antigen for rose bengal specimen |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2163141C1 true RU2163141C1 (en) | 2001-02-20 |
Family
ID=20238072
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2000119188A RU2163141C1 (en) | 2000-07-20 | 2000-07-20 | Method of preparing brucellosis antigen for rose bengal specimen |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2163141C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2593712C2 (en) * | 2014-09-30 | 2016-08-10 | Федеральное Казенное Предприятие "Щелковский Биокомбинат" | METHOD FOR PREPARING CONCENTRATED BRUCELLA CELL CULTURE FROM Brucella abortus 19 STRAIN TO PREPARE BRUCELLOUS ANTIGENS, BRUCELLOUS ANTIGENS (THREE VERSIONS), METHOD OF MAKING BRUCELLOSIS DIAGNOSTIC SERUM AND TEST SYSTEM FOR DIAGNOSING BRUCELLOSIS IN ANIMALS (THREE VERSIONS) |
-
2000
- 2000-07-20 RU RU2000119188A patent/RU2163141C1/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования. /Под ред. М.О.Биргера. - М.: Медицина, 1982, стр.52. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2593712C2 (en) * | 2014-09-30 | 2016-08-10 | Федеральное Казенное Предприятие "Щелковский Биокомбинат" | METHOD FOR PREPARING CONCENTRATED BRUCELLA CELL CULTURE FROM Brucella abortus 19 STRAIN TO PREPARE BRUCELLOUS ANTIGENS, BRUCELLOUS ANTIGENS (THREE VERSIONS), METHOD OF MAKING BRUCELLOSIS DIAGNOSTIC SERUM AND TEST SYSTEM FOR DIAGNOSING BRUCELLOSIS IN ANIMALS (THREE VERSIONS) |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102994387A (en) | High throughput screening method of aminopeptidase and high-yield strain thereof | |
| Klieneberger-Nobel | Changes in the nuclear structure of bacteria, particularly during spore formation | |
| JPH0923785A (en) | Mass culture method for ciliata | |
| CN112391418B (en) | Industrialized fermentation production method of raspberry ketone | |
| RU2163141C1 (en) | Method of preparing brucellosis antigen for rose bengal specimen | |
| RU2361610C1 (en) | Way of reception of brucellous antigen from strain brucella abortus 19 for manufacturing of uniform brucellous antigen for aa (agglutination assay), cfr (complement fixation reaction) and lcfr (long-term complement fixation reaction), brucellous antigen for rose bengal assay (rba) and brucellous antigen for ring test (rt) with milk, way of manufacturing of brucellous diagnostic serum and diagnostic sets | |
| RU2593712C2 (en) | METHOD FOR PREPARING CONCENTRATED BRUCELLA CELL CULTURE FROM Brucella abortus 19 STRAIN TO PREPARE BRUCELLOUS ANTIGENS, BRUCELLOUS ANTIGENS (THREE VERSIONS), METHOD OF MAKING BRUCELLOSIS DIAGNOSTIC SERUM AND TEST SYSTEM FOR DIAGNOSING BRUCELLOSIS IN ANIMALS (THREE VERSIONS) | |
| Hayaishi | [14] Special techniques for bacterial enzymes. Enrichment culture and adaptive enzymes | |
| CS216173B2 (en) | Method of making the new mononuclear mycelium coriolus versicolor | |
| Mustafayeva | BRIEF HISTORICAL SUMMARY OF THE CAUSANT OF LISTERIOSIS AND ITS PROPERTIES | |
| RU2085212C1 (en) | Method of preparing the common brucellosis antigen for pa, pck and pdck | |
| RU2288002C1 (en) | Method for preparing vaccine against enterococcus infection in nutrias | |
| CN111334472A (en) | PBMC (peripheral vascular endothelial cell) in-vitro 3D collagen hydrogel culture medium and preparation method thereof | |
| CN113423815A (en) | Bacterial growth on non-animal derived media | |
| RU2791744C1 (en) | Streptococcus pneumoniae strain serotype 19a | |
| SU863639A1 (en) | Bifidobacterium adoescentis ms-42 strain employed for production of sour-milk productts and method of preparing leaven of bifidobacteria for sour-milk products | |
| CN114752542B (en) | Method for cultivating mycoplasma synoviae biofilm, application and screening method thereof | |
| CN113046394B (en) | Preparation process of tectorial membrane yeast fermentation filtrate | |
| SU1159948A1 (en) | Method of obtaining meningococcus biomass | |
| RU2784717C1 (en) | Nutritional mineral medium based on arabinogalactan for cultivation of microorganisms and method for cultivation of microorganisms strains synthesing an enzyme for arabinogalactan hydrolysis | |
| RU1549227C (en) | Method for producing a complex of lytic enzymes | |
| RU2642316C1 (en) | Method for production of vaccine against brucellosis of small cattle | |
| RU2159808C2 (en) | Strain of bacteria brucella abortus used in preparation of multispecific serum for identification of brucellae in r-form | |
| SU789116A1 (en) | Method of obtaining polyvalent agglutinating o-serum for microbiologic monitoring of brewery | |
| CN101270383A (en) | Test method for main necrosis microorganism of tomato paste |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20150721 |