RU2149898C1 - Strain of bacterium vibrio cholerae 0139 serovara km 115 (i-1262), avirulent test-strain no containing operon ctx ab, for immunological and genetic investigations - Google Patents

Strain of bacterium vibrio cholerae 0139 serovara km 115 (i-1262), avirulent test-strain no containing operon ctx ab, for immunological and genetic investigations Download PDF

Info

Publication number
RU2149898C1
RU2149898C1 RU99100765A RU99100765A RU2149898C1 RU 2149898 C1 RU2149898 C1 RU 2149898C1 RU 99100765 A RU99100765 A RU 99100765A RU 99100765 A RU99100765 A RU 99100765A RU 2149898 C1 RU2149898 C1 RU 2149898C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
strain
ctx
vibrio cholerae
operon
avirulent
Prior art date
Application number
RU99100765A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
В.С. Ганин
Л.Я. Урбанович
А.С. Марамович
С.В. Балахонов
З.В. Мельникова
Original Assignee
Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока (НИПЧИ Сибири и ДВ)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока (НИПЧИ Сибири и ДВ) filed Critical Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока (НИПЧИ Сибири и ДВ)
Priority to RU99100765A priority Critical patent/RU2149898C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2149898C1 publication Critical patent/RU2149898C1/en

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

FIELD: microbiology. SUBSTANCE: invention relates to cholera microbiology and can be used in immunological and genetic investigations as avirulent test-strain 0139 serovara no containing operon ctx of AB gene that determines synthesis of choleraic enterotoxin. Strain Vibrio cholerae 0139 serovara is isolated from the natural source, namely water of Ob river. Strain is hemolytic with respect to sheep erythrocytes, it has no virulence

Description

Штамм бактерий Vibrio cholerae 0139 серовара КМ 115 (И-1262), авирулентный тест-штамм, не содержащий ctx AB оперон, для иммунологических и генетических исследований. The bacterial strain Vibrio cholerae 0139 serovar KM 115 (I-1262), an avirulent test strain that does not contain ctx AB operon, for immunological and genetic studies.

Изобретение относится к области микробиологии (в частности микробиологии холеры) и может быть использовано в иммунологических и генетических исследованиях в качестве авирулентного тест-штамма 0139 серовара, не содержащего оперон ctx AB гена, детерминирующего синтез холерного энтеротоксина. The invention relates to the field of microbiology (in particular, the microbiology of cholera) and can be used in immunological and genetic studies as an avirulent test strain 0139 of serovar that does not contain the ctx AB operon gene that determines the synthesis of cholera enterotoxin.

Известны штаммы Vibrio cholerae 0139 серовара, выделенные от людей, больных холерой (МО-45, Япония; Ар, Индия; 59-"Dinolicus" Франция; Р-16063, Ростов-на-Дону, Россия), не вызывающие гемолиз эритроцитов барана, содержащие ctx AB оперон и являющиеся высоковирулентными для человека и кроликов-сосунков. Known strains of Vibrio cholerae 0139 serovar isolated from people with cholera (MO-45, Japan; Ap, India; 59- "Dinolicus" France; P-16063, Rostov-on-Don, Russia) that do not cause sheep erythrocyte hemolysis, containing ctx AB operon and highly virulent for humans and sucker rabbits.

Наиболее близким по своему таксономическому положению является штамм Vibrio cholerae 0139 серовара Р-16063 (Россия), выделенный от больного холерой. Штамм характеризуется как высоковирулентный для кроликов-сосунков, содержащий ctx AB оперон, детерминирующий выработку холерного энтеротоксина, не обладает гемолитической способностью в отношении эритроцитов барана, является эпидемически опасным (может вызвать вспышку или эпидемию холеры). The closest in its taxonomic position is the strain Vibrio cholerae 0139 of serovar P-16063 (Russia), isolated from a patient with cholera. The strain is characterized as highly virulent for sucker rabbits, containing a ctx AB operon that determines the production of cholera enterotoxin, does not have hemolytic ability against sheep erythrocytes, is epidemiologically dangerous (it can cause an outbreak or an epidemic of cholera).

Отличительными признаками известных штаммов Vibrio cholerae 0139 серовара является выделение их от больных холерой людей, высокая вирулентность для человека и кроликов-сосунков, отрицательная гемолитическая активность в отношении эритроцитов барана, способность вырабатывать холерный энтеротоксин, продукцию которого обусловливает наличие ctx AB оперона. Distinctive features of the known serovar Vibrio cholerae 0139 strains are their isolation from human cholera patients, high virulence for humans and sucker rabbits, negative hemolytic activity against sheep erythrocytes, the ability to produce cholera enterotoxin, the production of which causes the presence of ctx AB operon.

Целью изобретения является штамм Vibrio cholerae 0139 серовара, гемолитический в отношении эритроцитов барана, авирулентный (Vct-) для кроликов-сосунков, не продуцирующий холерный энтеротоксин вследствие отсутствия у него ctx AB оперона.The aim of the invention is a strain of Vibrio cholerae 0139 serovar, hemolytic against sheep erythrocytes, avirulent (Vct - ) for sucker rabbits, not producing cholera enterotoxin due to the lack of ctx AB operon.

Штамм Vibrio cholerae 0139 серовара КМ 115 (И-1262) выделен из природного источника, а именно из р. Обь, может быть использован: 1. Как авирулентный (Vct-) тест-штамм при дифференциации вирулентных штаммов 0139 серовара путем внутрикишечного заражения кроликов-сосунков. 2. Как контрольный тест-штамм при определении наличия ctx AB оперона у штаммов аналогичного серовара, выделенных из различных источников. 3. В иммунологических и генетических исследованиях, в частности, как компонент при разработке живой холерной вакцины.Strain Vibrio cholerae 0139 serovar KM 115 (I-1262) isolated from a natural source, namely from the river. Ob can be used: 1. As an avirulent (Vct - ) test strain in the differentiation of virulent 0139 serovar strains by means of intra-intestinal infection of sucker rabbits. 2. As a control test strain when determining the presence of ctx AB operon in strains of a similar serovar isolated from various sources. 3. In immunological and genetic studies, in particular, as a component in the development of a live cholera vaccine.

Выделенный штамм Vibrio cholerae 0139 серовара КМ 115 (И-1262) депонирован в Государственной коллекции бактериальных возбудителей I=II групп патогенности при Российском научно-исследовательском институте "Микроб" под N КМ 115 (И-1262). The isolated strain of Vibrio cholerae 0139 of serovar KM 115 (I-1262) was deposited in the State collection of bacterial pathogens of I = II pathogenicity groups at the Russian Microbi Research Institute under N KM 115 (I-1262).

Штамм Vibrio cholerae 0139 серовара N КМ 115 (И-1262) характеризуется следующими признаками. The strain Vibrio cholerae 0139 of the serovar N KM 115 (I-1262) is characterized by the following features.

Культурально-морфологические признаки
Грамотрицательные полиморфные палочки, подвижны, с одним полярно расположенным жгутиком, образуют капсулу. На агаре Мартена и Хоттингера (pH 7,6) через 18 часов роста при 37oC формируют полупрозрачные колонии голубовато-серого цвета до 2 мм в диаметр с ровным краем (S-форма); в бульоне и 1% пептонной воде - равномерное помутнение с нежной пленкой на поверхности.
Cultural and morphological features
Gram-negative polymorphic rods, motile, with one polar flagellum, form a capsule. On agar Martin and Hottinger (pH 7.6) after 18 hours of growth at 37 ° C., translucent colonies of bluish-gray color up to 2 mm in diameter with a smooth edge (S-shape) are formed; in broth and 1% peptone water - uniform turbidity with a delicate film on the surface.

Физиолого-биохимические признаки
Аэроб. Оптимальная температура роста 37oC. Оптимум pH 7,6-8,2. Продуцирует индофенолоксидазу, относится к 1 группе Хейберга, окисляет и ферментирует глюкозу до кислоты без газа, декарбоксилирует лизин и орнитин, не обладает дигидролазой аргинина, обусловливает гемолиз эритроцитов барана в пробе Грейга, не лизируется холерными "С", "Эльтор", "ХДФ-3,4,5", "ДДФ", "ТЭПВ" фагами, растет на среде с полимиксином (30 мкг/мл).
Physiological and biochemical characteristics
Aerobe. The optimum growth temperature is 37 o C. The optimum pH is 7.6-8.2. It produces indophenol oxidase, belongs to the 1 group of Heiberg, oxidizes and ferments glucose to acid without gas, decarboxylates lysine and ornithine, does not have arginine dihydrolase, causes hemolysis of sheep erythrocytes in the Greig test, is not lysed by cholera "C", "Eltor-," X 3,4,5 "," DDF "," TEPV "phages, grows on a medium with polymyxin (30 μg / ml).

Штамм Vibrio cholerae КМ 115 (И-1262) агглютинируется в развернутой реакции агглютинации сывороткой против штаммов 0139 серовара до диагностического титра и не агглютинируется холерными диагностическими "O-", "Инаба-" "Огава-", "RO-" сыворотками. The strain Vibrio cholerae KM 115 (I-1262) is agglutinated in the unfolded agglutination test with serum against 0139 serovar strains to a diagnostic titer and is not agglutinated with cholera diagnostic O-, Inaba-, Ogawa-, RO- sera.

Особые свойства штамма
Штамм Vibrio cholerae КМ 115 (И-1262) не содержит ctx AB оперона, детерминирующего выработку холерного энтеротоксина, вызывает гемолиз эритроцитов барана в пробе Грейга, является авирулентным для кроликов-сосунков при внутрикишечном их заражении. Сущность изобретения поясняется следующими конкретными примерами использования штамма Vibrio cholerae КМ 115 (И-1262).
The special properties of the strain
The strain Vibrio cholerae KM 115 (I-1262) does not contain ctx AB operon, which determines the production of cholera enterotoxin, causes hemolysis of sheep erythrocytes in the Greig test, and is avirulent for sucker rabbits during their intestinal infection. The invention is illustrated by the following specific examples of the use of strain Vibrio cholerae KM 115 (I-1262).

Пример 1. Штамм Vibrio cholerae КМ 115 (И-1262), выделенный из р. Обь, при внутрикишечном заражении кроликов-сосунков в дозах 105, 107, 109 КОЕ/мл не вызывает их гибели, что говорит о неспособности штамма продуцировать холерный токсин. Заражение крольчат референтными (высоковирулентными для людей) штаммами 0139 серовара (МО - 45, Япония; Ар-2, Индия; 59 - "Donolicus", Франция; Р-16063, Ростов-на-Дону) вызывало их гибель при внутрикишечном заражении в дозе 105 КОЕ/мл с выраженным (на вскрытии) холерогенным симптомокомплексом и видимыми макроскопическими изменениями внутренних органов, что подтверждает способность этих штаммов вырабатывать холерный энтеротоксин.Example 1. The strain Vibrio cholerae KM 115 (I-1262), isolated from the river. Ob, when the intestinal infection of sucker rabbits at doses of 10 5 , 10 7 , 10 9 CFU / ml does not cause their death, which indicates the inability of the strain to produce cholera toxin. Infection of rabbits with reference (highly virulent for humans) strains of 0139 serovar (MO - 45, Japan; Ap-2, India; 59 - "Donolicus", France; P-16063, Rostov-on-Don) caused their death in case of intestinal infection in a dose 10 5 CFU / ml with a pronounced (at autopsy) cholerogenic symptom complex and visible macroscopic changes in internal organs, which confirms the ability of these strains to produce cholera enterotoxin.

Пример 2. Штамм КМ 115 (И-1262), выделенный из р. Обь, не содержит ctx AB оперона, отвечающего за выработку холерного энтеротоксина. При постановке полимеразно-цепной реакции (ПЦР) были использованы олигонуклеотидные праймеры, синтезированные на основе нуклеотидных последовательностей ctx AB оперона, представленных в базе данных Gen Bank EMBL. Специфичный продукт амплификации в реакции ПЦР со штаммом КМ 115 (И-1262) не образовывался, что подтверждает отсутствие у него гена токсинообразования, содержащего ctx AB оперон. Референтные (контрольные) штаммы 0139 серовара обусловливали в реакции ПЦР наличие специфичного продукта амплификации, что доказывает их способность вырабатывать холерный энтеротоксин, продукция которого не возможна без присутствия в геноме ctx AB оперона. Example 2. Strain KM 115 (I-1262) isolated from the river. Ob does not contain ctx AB operon, which is responsible for the production of cholera enterotoxin. In the formulation of the polymerase chain reaction (PCR), we used oligonucleotide primers synthesized based on the nucleotide sequences of the ctx AB operon presented in the Gen Bank EMBL database. A specific amplification product in the PCR reaction with strain KM 115 (I-1262) was not formed, which confirms the absence of a toxin gene containing ctx AB operon. The reference (control) strains of 0139 serovar determined the presence of a specific amplification product in the PCR reaction, which proves their ability to produce cholera enterotoxin, the production of which is not possible without the presence of an operon in the ctx AB genome.

Преимущества штамма Vibrio cholerae КМ 115 (И-1262), вызывающего гемолиз эритроцитов барана, авирулентного для кроликов-сосунков, не содержащего в геноме ctx AB оперон, выделенного из природного источника - р. Обь, по сравнению с его аналогами следуют из приведенных выше примеров. Advantages of the strain Vibrio cholerae KM 115 (I-1262), causing hemolysis of sheep erythrocytes, avirulent for sucker rabbits, not containing an operon isolated from a natural source in the ctx AB genome - p. Ob, in comparison with its analogues follow from the above examples.

Claims (1)

Авирулентный тест-штамм бактерий Vibrio cholerae 0139 серовара КМ 115 (И-1262), не содержащий в геноме ctx АВ оперон, для иммунологических и генетических исследований. Avirulent test strain of bacteria Vibrio cholerae 0139 serovar KM 115 (I-1262), which does not contain an operon in the ctx AB genome, for immunological and genetic studies.
RU99100765A 1999-01-10 1999-01-10 Strain of bacterium vibrio cholerae 0139 serovara km 115 (i-1262), avirulent test-strain no containing operon ctx ab, for immunological and genetic investigations RU2149898C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU99100765A RU2149898C1 (en) 1999-01-10 1999-01-10 Strain of bacterium vibrio cholerae 0139 serovara km 115 (i-1262), avirulent test-strain no containing operon ctx ab, for immunological and genetic investigations

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU99100765A RU2149898C1 (en) 1999-01-10 1999-01-10 Strain of bacterium vibrio cholerae 0139 serovara km 115 (i-1262), avirulent test-strain no containing operon ctx ab, for immunological and genetic investigations

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2149898C1 true RU2149898C1 (en) 2000-05-27

Family

ID=20214667

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU99100765A RU2149898C1 (en) 1999-01-10 1999-01-10 Strain of bacterium vibrio cholerae 0139 serovara km 115 (i-1262), avirulent test-strain no containing operon ctx ab, for immunological and genetic investigations

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2149898C1 (en)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Hultgren et al. Regulation of production of type 1 pili among urinary tract isolates of Escherichia coli
Sato et al. Role of pili in the pathogenesis of Pseudomonas aeruginosa burn infection
Turnbull et al. Enterotoxin production in relation to taxonomic grouping and source of isolation of Aeromonas species
FI100945B (en) A method of preparing a Shigella vaccine strain
Corbel Microbiology of the genus Brucella
CN102238960B (en) Process for production of vaccines
Deplazes et al. Dual microsporidial infection due to Vittaforma corneae and Encephalitozoon hellem in a patient with AIDS
CN108179136B (en) Escherichia coli bacteriophage Esc-COP-9 and pathogenic escherichia coli proliferation inhibition application thereof
Germani et al. The genus Shigella
Robins-Browne et al. Pathogenicity of Yersinia kristensenii for mice
RU2149898C1 (en) Strain of bacterium vibrio cholerae 0139 serovara km 115 (i-1262), avirulent test-strain no containing operon ctx ab, for immunological and genetic investigations
CN115887631A (en) Haemophilus parasuis and streptococcus suis combined vaccine
Muralidhar Lippincott Illustrated Reviews Microbiology
Sidberry et al. Pyocin sensitivity of Neisseria gonorrhoeae and its feasibility as an epidemiological tool
Hannisch et al. Primary amebic meningoencephalitis: a review of the clinical literature
Okamoto et al. Adherence of Yersinia enterocolitica to mammalian epithelial cell lines
RU2254371C1 (en) AVIRULENT STRAIN OF BACTERIA Vibrio cholerae BIOVAR eltor, SEROVAR Ogava (ctxA-, tcpA-, toxR-, zot-), USED IN IMMUNOLOGICAL AND GENETIC INVESTIGATIONS AND EDUCATORY PROCESS
Obaid et al. Uropathogenic Escherichia coli isolates with different virulence genes content exhibit similar pathologic influence on Vero cells
RU2768008C1 (en) Virulent strain of bacteria leptospira interrogans of the icterohaemorrhagiae serogroup of the copenhageni serovar, used for experimental study of the leptospiral infection
AU2005253864B2 (en) Q fever vaccine preparation and method of producing the vaccine
RU2245363C1 (en) Avirulent strain of microorganism vibrio cholerae km 169 of serogroup o139 as producer of capsule antigen
RU2268942C1 (en) METHOD FOR INTRASPECIES DIFFERENTIATION OF Vibrio cholerae O139
Motaweq Antimicrobial susceptibility of Vibrio cholerae Isolated from Diarrheal Patients in Najaf Province
RU2268933C1 (en) STRAIN Haemophilus parasuis SK-1 AS PATHOGEN OF SWINE HEMOPHILEOUS POLYSEROSITIS FOR PREPARING DIAGNOSTIC AND VACCINE PREPARATIONS
RU2058388C1 (en) Strain of bacterium vibrio cholerae eltor jnaba used for cholera immunoprophylaxis