RU2148260C1

RU2148260C1 - Method for predicting risk of second eye falling ill in the cases of endogenous uveitis

Info

Publication number: RU2148260C1
Application number: RU98118510A
Authority: RU
Inventors: О.С. Слепова; Г.Р. Каламкаров; Н.С. Славинская; Г.Н. Быковская; Валерий Никонович Кушнир; Л.А. Катаргина; Т.Ф. Шевченко; М.А. Островский
Original assignee: Слепова Ольга Семеновна; Каламкаров Григорий Рафаэлович; Славинская Надежда Семеновна; Шевченко Татьяна Федоровна; Островский Михаил Аркадьевич
Priority date: 1998-10-12
Filing date: 1998-10-12
Publication date: 2000-04-27

Abstract

FIELD: medicine. SUBSTANCE: method involves detecting antibodies to S-antigen in blood serum of a patient suffering from unilateral endogenous posterior or generalized uveitis. IgM and IgG antibodies being detected at the same time in the blood serum, twin eye falling ill risk is predicted. EFFECT: timely administered prophylaxis and therapy.

Description

Изобретение относится к медицине - офтальмологии и предназначено для прогнозирования риска вовлечения в патологический процесс второго глаза у больных эндогенными односторонними увеитами с целью профилактики развития двусторонних форм офтальмопатологии. The invention relates to medicine - ophthalmology and is intended to predict the risk of involvement in the pathological process of the second eye in patients with endogenous unilateral uveitis with the aim of preventing the development of bilateral forms of ophthalmopathology.

Как правило, вопрос о риске поражения второго глаза, рассматривается в проблеме посттравматической (или послеоперационной) симпатической офтальмии. As a rule, the question of the risk of damage to the second eye is considered in the problem of post-traumatic (or postoperative) sympathetic ophthalmia.

Аспекты, касающиеся вовлечения парного глаза в патологический процесс при эндогенных увеитах, не изучены. В то же время, анализ архивных материалов МНИИ ГБ им. Гельмгольца свидетельствует, что процесс вовлечения парного глаза имел местом у 4,5% больных; при этом увеит на втором глазу развился в сроки от 1 мес. до 9 лет после заболевания одного глаза. Aspects regarding the involvement of the paired eye in the pathological process in endogenous uveitis have not been studied. At the same time, the analysis of archival materials of the Research Institute of GB them. Helmholtz testifies that the process of involving the double eye occurred in 4.5% of patients; while uveitis in the second eye developed in a period of 1 month. up to 9 years after a single eye disease.

Имеются данные о важной роли аутоиммунных реакций, индуцированных S-аптигеном сетчатки, в частности - об образовании специфических иммунных комплексов "S-антиген-S-антитело" в патогенезе двусторонних увеоретинитов различной природы ("Исследование специфических иммунных комплексов, образованных S-антигеном сетчатки и S-антителами, при инфекционно-аллергических и посттравматических увеитах", Вестник Офтальмологии, N 1, 1991, 28-31, авторы: О.С.Слепова. М.Б.Кодзов, Г.Н.Быковская). There is evidence of the important role of autoimmune reactions induced by the retinal S-antigen, in particular, the formation of specific S-antigen-S antibody antibody complexes in the pathogenesis of bilateral uveoretinitis of various nature ("Study of specific immune complexes formed by the retina S-antigen and S-antibodies, for infectious-allergic and post-traumatic uveitis ", Vestnik Ophthalmology, N 1, 1991, 28-31, authors: O.S. Slepova. M.B.Kodzov, G.N. Bykovskaya).

Однако иммунологические критерии, позволяющие осуществлять прогнозирование риска развития двусторонних эндогенных увеитов практически отсутствуют. Вместе с тем, актуальность иммунодиагностических тестов определяются возможностью целенаправленной разработки профилактических мероприятий, направленных на предупреждение вовлечения второго глаза в патологический процесс. However, immunological criteria that allow predicting the risk of developing bilateral endogenous uveitis are practically absent. At the same time, the relevance of immunodiagnostic tests is determined by the possibility of targeted development of preventive measures aimed at preventing the involvement of the second eye in the pathological process.

Предлагаемый способ базируется на установленном нами патологическом значении накопления в сыворотке крови пациентов с двусторонними увеоретинитами антител к S-антигену сетчатки одновременно двух классов - иммуноглобулинов М (IgM) и иммуноглобулинов G (IgG), тогда как при односторонних процессах в большинстве случаев антитела к S-антигену не выявляются, или обнаруживаются антитела лишь одного класса - как правило IgG. The proposed method is based on the pathological value of the accumulation in the blood serum of patients with bilateral uveoretinitis of antibodies to the retinal S-antigen of two classes at the same time - immunoglobulins M (IgM) and immunoglobulins G (IgG), whereas in unilateral processes, in most cases, antibodies to S- antigen is not detected, or antibodies of only one class are detected - usually IgG.

Были исследованы 97 проб сывороток крови, полученные от больных с односторонними (n=55) и двусторонними (n=42) увеитами в период активности заболевания (n= 38 и n=34 - соответственно при односторонних и двусторонних процессах; всего n=72) и в стадии ремиссии (n=17 и n=8 соответственно; всего n=25). We studied 97 blood serum samples obtained from patients with unilateral (n = 55) and bilateral (n = 42) uveitis during the period of disease activity (n = 38 and n = 34, respectively, in unilateral and bilateral processes; total n = 72) and in remission (n = 17 and n = 8, respectively; total n = 25).

Среди наблюдавшихся больных клинический диагноз переднего увеита был поставлен у 22 человек (18 односторонний; 4 - двусторонний); увеиты с поражением заднего отдела глаза имели место у 75 человек (37 - односторонние; 38 - двусторонние). Among the observed patients, a clinical diagnosis of anterior uveitis was made in 22 people (18 unilateral; 4 - bilateral); uveitis with damage to the posterior part of the eye occurred in 75 people (37 - unilateral; 38 - bilateral).

Анализ результатов иммунологического исследования показал, что при передних увеитах, независимо от активности заболевания и поражения одного или обоих глаз, S-антитела (только IgG класса) выявлялись лишь в единичных случаях (не чаще чем у 4,5% - в целом; 6,3% - в период обострения увеита). У пациентов с поражением заднего отдела глаза (задние, периферические и генерализованные увеиты) S-антитела обнаруживались значительно чаще: в целом по группе в 28% случаев (p < 0,05 по сравнению с передними процессами). An analysis of the results of an immunological study showed that with anterior uveitis, regardless of the activity of the disease and damage to one or both eyes, S-antibodies (only IgG class) were detected only in isolated cases (not more often than 4.5% in general; 6, 3% - during an exacerbation of uveitis). In patients with damage to the posterior part of the eye (posterior, peripheral and generalized uveitis), S-antibodies were detected much more often: in the group as a whole in 28% of cases (p <0.05 compared with the anterior processes).

Дифференцированный анализ характера иммунного ответа на S-антиген у больных с поражением заднего отдела глаза показал, что S-антитела обнаруживаются преимущественно при двусторонних процессах (44,7% - в целом: IgG и/или IgM), при односторонних процессах они выявляются значительно реже (10,8%; P < 0,01; причем только IgG класса). A differentiated analysis of the nature of the immune response to S-antigen in patients with damage to the posterior part of the eye showed that S-antibodies are detected mainly in bilateral processes (44.7% in general: IgG and / or IgM), in unilateral processes they are detected much less frequently (10.8%; P <0.01; with only IgG class).

Наиболее значительна разница между группами больных с односторонними и двусторонними увеоретинитами наблюдалась по показателям одновременного обнаружения S-антител обоих классов (IgG и IgM): практически ни у одного из обследованных больных с односторонними процессами, как активными (n=25), так и неактивными (n= 12), - по сравнению с 21% при двусторонних увеитах (P < 0,02). У последних этот патогенетически неблагоприятный признак чаще выявлялся в период активности заболевания (23%), чем в стадии ремиссии (14%). В тех случаях, когда обнаруживалось селективное накопление какого-либо одного класса S-антител (IgG - всего в 16% сывороток, или IgM - всего в 3% сывороток) тенденция в целом сохранялась, но статистически достоверной разницы между группами двусторонних и односторонних заболеваний глаза выявить не удалось. The most significant difference between the groups of patients with unilateral and bilateral uveoretinitis was observed in terms of the simultaneous detection of S-antibodies of both classes (IgG and IgM): almost none of the examined patients with unilateral processes, both active (n = 25) and inactive ( n = 12), - compared with 21% for bilateral uveitis (P <0.02). In the latter, this pathogenetically unfavorable sign was more often detected during the period of activity of the disease (23%) than in remission (14%). In cases where selective accumulation of any one class of S antibodies was detected (IgG in only 16% of sera, or IgM in only 3% of sera), the trend generally remained, but there was a statistically significant difference between the groups of bilateral and unilateral eye diseases failed to identify.

Обобщение полученных данных позволило заключить, что примерно у трети больных с поражением заднего отрезка глаза имеет место гуморальный иммунный ответ на S-антиген сетчатки. При этом патогенетически неблагоприятное значение, связанное с развитием двусторонних процессов, имеет преимущественно одновременное накопление антител IgG и IgM класса. Этот показатель может служить прогностическим критерием повышенного риска билатеризации офтальмопатологии; при этом наиболее информативно обследование больных в период активности увеита. A generalization of the obtained data allowed us to conclude that approximately one third of patients with damage to the posterior segment of the eye have a humoral immune response to the retinal S-antigen. Moreover, pathogenetically unfavorable value associated with the development of bilateral processes is predominantly associated with the accumulation of IgG and IgM class antibodies. This indicator can serve as a prognostic criterion for an increased risk of ophthalmopathology bilaterization; while the most informative examination of patients during the period of uveitis activity.

Предлагаемый критерий иммунологического прогнозирования эффективен как при динамическом наблюдении, так и при однократном обследовании больных эндогенными задними или генерализованными увеитами. The proposed criterion for immunological prognosis is effective both in dynamic observation and in a single examination of patients with endogenous posterior or generalized uveitis.

Способ осуществляется следующим образом. The method is as follows.

Забор венозной крови и получение сыворотки проводится общепринятыми методами. Достаточное количество сыворотки - 10 мкл. Наличие антител к S-антигену сетчатки определяют в пробах сыворотки, разведенной фосфатно-солевым буфером (pH 7,2) в соотношении 1:100. Используют твердофазный ИФА (иммуноферментный анализ). Исследуемые и контрольные (проба, полученная из пула сывороток от практически здоровых лиц) образцы сыворотки крови вносят в лунки планшета для ИФА, на которых предварительно иммобилизуют белок, выделенный из бычьей сетчатки (S-антиген, м.м. 48 кДа), с последующим внесением мышиных моноклональных антител против IgG или IgМ человека, конъюгированных с ферментной меткой (пероксидаза хрена). Количество связавшейся с носителем ферментной метки прямо пропорционально содержанию антител в пробе, что регистрируется на спектрофотометре вертикального сканирования при длине волны 492 после добавления фермент-специфического субстратного раствора (хромоген-ортофенилендиамин - ОФД) и "стоп-реагента" (1N H₂SO₄).Venous blood sampling and serum production are carried out by generally accepted methods. A sufficient amount of serum is 10 μl. The presence of antibodies to the retinal S-antigen is determined in serum samples diluted with phosphate-buffered saline (pH 7.2) in a ratio of 1: 100. Use solid-phase ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay). The studied and control (a sample obtained from a pool of sera from practically healthy individuals) blood serum samples are added to the wells of an ELISA plate on which protein isolated from bovine retina is immobilized previously (S-antigen, m.m. 48 kDa), followed by the introduction of murine monoclonal antibodies against human IgG or IgM conjugated to an enzyme label (horseradish peroxidase). The amount of enzyme label bound to the carrier is directly proportional to the content of antibodies in the sample, which is recorded on a vertical scanning spectrophotometer at a wavelength of 492 after adding an enzyme-specific substrate solution (chromogen-orthophenylenediamine - CRF) and a stop reagent (1N H ₂ SO ₄ ) .

Если в сыворотке крови больного с односторонним задним или генерализованным увеитом выявляют одновременно оба класса антител к S-антигену (IgG и IgM), прогнозируют риск заболевания парного глаза. Выявление антител только IgG или IgМ-класса является показанием для периодического иммунологического обследования больных с хроническим увеитом с целью выявления возможного усиления гуморальных аутоиммунных реакций. Отсутствие сывороточных антител к S-антигену сетчатки снижает вероятность, но не позволяет полностью исключить возможность вовлечения парного глаза в патологический процесс. If both classes of antibodies to the S antigen (IgG and IgM) are detected simultaneously in the blood serum of a patient with unilateral posterior or generalized uveitis, the risk of pair eye disease is predicted. Detection of antibodies of only IgG or IgM class is an indication for the periodic immunological examination of patients with chronic uveitis in order to identify a possible increase in humoral autoimmune reactions. The absence of serum antibodies to the retinal S-antigen reduces the likelihood, but does not completely exclude the possibility of the pair eye involvement in the pathological process.

Прогностическое значение предлагаемого способа подтверждается следующими клиническими примерами:
Клинический пример 1.The prognostic value of the proposed method is confirmed by the following clinical examples:
Clinical example 1.

Больной M., мужчина, возраст 40 лет. Patient M., male, age 40 years.

При первом обращении в институт поставлен клинический диагноз: нейрохориоретинит правого глаза, активная стадия, левый глаз - без признаков офтальмопатологии. At the first visit to the institute, a clinical diagnosis was made: neurochorioretinitis of the right eye, active stage, left eye - without signs of ophthalmopathology.

При исследовании сыворотки крови в ИФА были выявлены антитела к S-антигену сетчатки обоих классов (IgG и IgM), что явилось основанием предположить риск вовлечения в патологический процесс левого глаза. In the study of blood serum in ELISA, antibodies to the retinal S-antigen of both classes (IgG and IgM) were detected, which was the basis to assume the risk of involvement in the pathological process of the left eye.

Иммунологические обследования в динамике были проведены через один и два месяца - показатели S-антител при повторном обследовании - практически без изменений. Через 3 месяца после первого обращения у больного были выявлены изменения на глазном дне левого глаза, диагноз - очаговый хориоретинит. На протяжении последующих двух лет больной находится под наблюдением по поводу хроническою вялотекущего правого глаза и хориоретинита левого глаза. Immunological examinations in dynamics were carried out after one and two months - the S-antibodies during repeated examination were practically unchanged. 3 months after the first treatment, the patient revealed changes in the fundus of the left eye, the diagnosis of focal chorioretinitis. Over the next two years, the patient is under observation for chronic sluggish right eye and left eye chorioretinitis.

Таким образом, обнаружение у больного с односторонним воспалительным заболеванием заднею отдела глаза сочетанного накопления в сыворотке крови антител классов IgG и IgM к S-антигену сетчатки позволило осуществить прогнозирование вовлечения в патологический процесс второго глаза за 3 месяца до появления первых клинических симптомов его поражения. Thus, the detection in a patient with unilateral inflammatory disease of the posterior part of the eye of the combined accumulation of antibodies of the IgG and IgM classes to the retinal S antigen in the blood serum made it possible to predict the involvement of the second eye in the pathological process 3 months before the first clinical symptoms of its damage appear.

Клинический пример 2. Clinical example 2.

Больной Д., ребенок, возраст - 14 лет. Patient D., child, age - 14 years.

При первом обращении в институт установлен диагноз: периферический увеит левого глаза; правый глаз - без патологии. At the first visit to the institute the diagnosis was established: peripheral uveitis of the left eye; the right eye - without pathology.

В дальнейшем больной наблюдался на протяжении 4-х лет; клинический диагноз без изменений. При иммунологическом исследовании в динамике (n=3) в течение двух лет с интервалами 1,5 года и 3 месяца антитела к S-антигену сетчатки IgM класса практически не определялись; IgG антитела были обнаружены однократно; при повторном обследовании - не выявлялись. In the future, the patient was observed for 4 years; clinical diagnosis unchanged. During an immunological study in dynamics (n = 3) for two years at intervals of 1.5 years and 3 months, antibodies to the retinal S-antigen of the IgM class were practically not determined; IgG antibodies were detected once; upon re-examination, they were not detected.

Таким образом, у больного с вялотекущим периферическим увеитом без признаков сочетанного накопления антител IgG и IgM к S-аг сетчатки вовлечения в патологический процесс второго глаза не наблюдалось. Thus, in a patient with sluggish peripheral uveitis without signs of combined accumulation of IgG and IgM antibodies to S-ag of the retina, involvement in the pathological process of the second eye was not observed.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет прогнозировать риск поражения второго глаза у больных с односторонними задними (генерализованными) увеитами, что ранее не проводилось; это может явиться основанием для своевременного проведения профилактических лечебных мер. Thus, the proposed method allows to predict the risk of damage to the second eye in patients with unilateral posterior (generalized) uveitis, which has not been previously done; this may be the basis for the timely implementation of preventive treatment measures.

Claims

A method for predicting the risk of second eye disease in patients with unilateral endogenous posterior and generalized uveitis, including the detection of antibodies to the retinal S-antigen in the blood serum using an enzyme-linked immunosorbent assay and if antibodies of the IgM and IgG classes to the S antigen are detected at the same time, the risk of second eyes.