RU2144292C1 - Method of producing preparation used for control of plant sicknesses - Google Patents
Method of producing preparation used for control of plant sicknesses Download PDFInfo
- Publication number
- RU2144292C1 RU2144292C1 RU98113215/13A RU98113215A RU2144292C1 RU 2144292 C1 RU2144292 C1 RU 2144292C1 RU 98113215/13 A RU98113215/13 A RU 98113215/13A RU 98113215 A RU98113215 A RU 98113215A RU 2144292 C1 RU2144292 C1 RU 2144292C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- producer
- antibiotic
- preparation
- lysine
- seed
- Prior art date
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к производству препарата для борьбы с бактериальными и грибковыми болезнями растений. The invention relates to the microbiological industry, in particular to the production of a drug for combating bacterial and fungal diseases of plants.
Одним из микробиологических препаратов, применяемых для борьбы с болезнями растений, является фитобактериомицин, который в качестве действующего начала содержит комплекс стрептотрициновых антибиотиков с преобладанием в нем стрептотрицинов С и D (Мельникова Е.А., Макарова Г.Я., Кругляк Е. Б. Антибактериальная активность и токсичность антибиотика фитобактериомицина и входящих в него стрептотрицинов // Физиологически активные вещества.- Киев, 1980.- N 12, стр. 93-96). One of the microbiological preparations used to combat plant diseases is phytobacteriomycin, which contains a complex of streptotricin antibiotics with the prevalence of streptocycins C and D as its active principle (Melnikova E.A., Makarova G.Ya., Kruglyak E. B. Antibacterial activity and toxicity of the antibiotic phytobacteriomycin and streptotricins included in it // Physiologically active substances. - Kiev, 1980.- N 12, p. 93-96).
Известен способ получения препарата фитолавин, содержащего в своем составе фитобактериомицин, Фитолавин применяют для борьбы с бактериальными и грибковыми заболеваниями растений: корневыми гнилями злаковых, бактериозами овощных культур и др. (Гаврилина Г.В., Лободюк В.Д., Периханова А.Г., Попков Г. П. , Софиенко И.А., Шепетуха И.М., Эстеркес Е.В. Результаты изучения фитолавина // Сб. научных трудов. Препараты микробиологического синтеза - сельскому хозяйству.- М" 1981, стр. 25-30). There is a method of producing a phytolavin preparation containing phytobacteriomycin, Phytolavin is used to combat bacterial and fungal diseases of plants: root rot of cereals, bacterioses of vegetable crops, etc. (Gavrilina G.V., Lobodyuk V.D., Perikhanova A.G. ., Popkov G.P., Sofienko I.A., Shepetukha I.M., Esterkes E.V. Results of the study of phytolavine // Collection of scientific works. Preparations of microbiological synthesis for agriculture. - M "1981, p. 25 -thirty).
Для получения фитолавина используют культуру Streptomyces lavendulae штамм 12-10 ВНИИбакпрепарат. Выращивание культуры ведут глубинным способом на жидкой питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли; после окончания ферментации культуральную жидкость концентрируют в вакууме, высушивают на распылительной сушилке и получают продукт, содержащий 100000 ед. антибиотика в г. To obtain phytolavin, a culture of Streptomyces lavendulae strain 12-10 of the All-Russian Research Institute of Drugs is used. Cultivation is conducted in a deep way on a liquid nutrient medium containing sources of carbon, nitrogen and mineral salts; after fermentation, the culture fluid is concentrated in vacuo, dried on a spray dryer and get a product containing 100,000 units antibiotic in
Антибиотический комплекс содержит стрептотрицина С - 17-27%; стрептотрицина D-45-55%. The antibiotic complex contains streptotricin C - 17-27%; streptotricin D-45-55%.
Недостатком такого способа получения фитолавина является низкое содержание антибиотика в готовом продукте и невысокий его выход на конечной стадии производства. The disadvantage of this method of producing phytolavin is the low antibiotic content in the finished product and its low yield at the final stage of production.
В последнее время для производства фитолавина предлагается использовать другой вид микроорганизма, а именно Streptomyces griseus, в частности штамм S. griseus-420, в связи с его высокой продуктивностью, обеспечивающей больший выход с единицы производственного объема. Recently, it is proposed to use another type of microorganism for the production of phytolavin, namely Streptomyces griseus, in particular the S. griseus-420 strain, due to its high productivity, which provides a greater yield from a unit of production volume.
При использовании культуры S. griseus штамм 420 получают препарат фитолавин-300, содержащий 300000 ед./г. Антибиотический комплекс препарата содержит стрептотрицина С - 22% и стрептотрицина D - 54%. Производственные испытания фитолавина-300 показали его высокую эффективность в борьбе с болезнями растений (Быкова Г. А., Белых Е.Б., Строева И.А., Новикова И.И. Активность фитолавина, полученного на основе двух штаммов продуцентов // Защита растений от вредителей и болезней в условиях экологизации сельскохозяйственного производства. - С-Пб., 1992, стр. 66-70). When using a culture of S. griseus strain 420, a phytolavin-300 preparation containing 300,000 units / g is obtained. The antibiotic complex of the drug contains streptotricin C - 22% and streptotricin D - 54%. Production tests of phytolavin-300 showed its high efficiency in the fight against plant diseases (Bykova G.A., Belykh E.B., Stroeva I.A., Novikova I.I. Activity of phytolavin obtained on the basis of two strains of producers // Protection plants from pests and diseases in the conditions of greening agricultural production. - S-Pb., 1992, p. 66-70).
Однако на практике оказалось, что не каждый клон S. griseus-420 способен продуцировать стрептотрициновый комплекс, идентичный фитобактериомицину, т. е. продуцировать в основном стрептотрицины С и D. В ряде случаев появлялись клоны, синтезирующие в основном стрептотрицин F, обладающий низкой антибактериальной и антигрибковой активностью. However, in practice, it turned out that not every clone of S. griseus-420 is capable of producing a streptotricin complex identical to phytobacteriomycin, i.e., producing mainly streptotricins C and D. In some cases, clones appeared that synthesized mainly streptotricin F, which has low antibacterial and antifungal activity.
Предлагаемое изобретение представляет собой способ получения препарата для борьбы с болезнями растений - фитолавина-300 с необходимым компонентным составом стрептотрицинового комплекса и высоким выходом целевого продукта. The present invention is a method for producing a drug for controlling plant diseases - phytolavin-300 with the necessary component composition of the streptotricin complex and a high yield of the target product.
Такой результат достигается путем отбора на стадии подготовки посевного материала штамма Streptomyces griseus-420 клонов, образующих в основном стрептотрицины С и D, а также путем оптимизации условий ферментации отобранных клонов, способствующих образованию стрептотрицинового комплекса необходимого состава, что достигается с помощью внесения в ферментационную среду лизина в количестве 0,01-0,2%. This result is achieved by selecting, at the seed preparation stage, the Streptomyces griseus-420 strain of clones that form mainly streptotricins C and D, as well as by optimizing the fermentation conditions of the selected clones that contribute to the formation of the required streptotricin complex, which is achieved by introducing lysine into the fermentation medium in an amount of 0.01-0.2%.
Предлагаемый способ осуществляется следующим образом:
В культуру S. griseus 420 на скошенном агаре добавляют дистиллированную воду и производят смыв спорового материала с косяка. Полученную после фильтрования через стеклянный фильтр N4 чистую суспензию единичных спор высевают на чашки Петри с глюкозо- картофельной агаризованной средой и растирают ее по чашке. После культивирования при 28±1oC в течение 12 дней проводят пересев 100 колоний с чашек Петри на скошенный глюкозо-картофельный агар и выращивают при 28±1oC в течение 10 дней, после чего культуру проверяют на продуктивность. Для этого из каждой скошенной культуры берут по кусочку агаровой среды со спорами и вносят в качалочные колбы, емкостью 750 мл, со средой следующего состава (%): мука кукурузная - 4,0; KH2PO4 - 0,03; (NH4)SO4 - 0,06; NH4NO3 - 0,7; NaCI - 0,2; MgSO4 - 0,05, CaCO3 - 0,5; вода водопроводная -до 100 (приведены усредненные значения концентраций, которые для каждого отдельного компонента могут изменяться в интервале ±15%). Значение pH до стерилизации - 6,6-7,2. Выращивание ведут на качалке с числом оборотов 220 в мин и выращивают инокулят при температуре 28±1oC в течение 24-30 час. Затем инокулят из каждой колбы в количестве 5% переносят в колбы с ферментационной средой следующего состава (%): кукурузная мука - 3-5; меласса - 1,5-2,0; лизин - 0,01-0,2; (NH4)2SO4 или NH4NO3 - 0,6-0,7; KH2PO4 - 0,01-0,09; NaCI -0,05- 0,25; MgSO4 - 0,005-0,05; CaCO3 - 0,5-1,5; пропинол - 0,1-0,5; вода водопроводная. Выращивание ведут на качалке при температуре 28±1oC в течение 72 часов. Определение уровня антибиотикообразования и компонентный состав антибиотического комплекса проводят следующим образом: пробы культуральной жидкости из каждой колбы в количестве 20-25 мл подкисляют разбавленной соляной кислотой до pH 4,5 и, после выдерживания в течение 30 мин фильтруют через бумажный фильтр. В фильтратах определяют содержание антибиотика микробиологическим методом с использованием в качестве тест-культуры Вас. subtilis 6633 (ГФ XI, вып.2).The proposed method is as follows:
Distilled water is added to the S. griseus 420 culture on mown agar and the spore material is flushed from the jamb. The pure suspension of single spores obtained after filtering through a N4 glass filter is plated on Petri dishes with glucose-potato agar medium and triturated in a cup. After cultivation at 28 ± 1 o C for 12 days, 100 colonies from Petri dishes are reseeded on beveled glucose-potato agar and grown at 28 ± 1 o C for 10 days, after which the culture is checked for productivity. To do this, take a piece of agar medium with spores from each mowed culture and add it to rocking flasks, with a capacity of 750 ml, with medium of the following composition (%): corn flour - 4.0; KH 2 PO 4 - 0.03; (NH 4 ) SO 4 - 0.06; NH 4 NO 3 - 0.7; NaCl - 0.2; MgSO 4 - 0.05; CaCO 3 - 0.5; tap water - up to 100 (average values of concentrations are given, which for each individual component can vary in the range of ± 15%). The pH value before sterilization is 6.6-7.2. Cultivation is carried out on a shaker with a speed of 220 rpm and the inoculum is grown at a temperature of 28 ± 1 o C for 24-30 hours. Then the inoculum from each flask in an amount of 5% is transferred to flasks with a fermentation medium of the following composition (%): corn flour - 3-5; molasses - 1.5-2.0; lysine - 0.01-0.2; (NH 4 ) 2 SO 4 or NH 4 NO 3 0.6-0.7; KH 2 PO 4 0.01-0.09; NaCl-0.05-0.25; MgSO 4 - 0.005-0.05; CaCO 3 - 0.5-1.5; propinol - 0.1-0.5; tap water. Cultivation is carried out on a rocking chair at a temperature of 28 ± 1 o C for 72 hours. The determination of the level of antibiotic formation and the component composition of the antibiotic complex is carried out as follows: samples of the culture fluid from each flask in an amount of 20-25 ml are acidified with dilute hydrochloric acid to a pH of 4.5 and, after standing for 30 minutes, filtered through a paper filter. In the filtrates, the antibiotic content is determined by the microbiological method using you as a test culture. subtilis 6633 (GF XI, issue 2).
Компонентный состав антибиотической фракции определяют с помощью тонкослойной хроматографии на пластинках с силикагелем 60. В качестве подвижной фазы используют раствор следующего состава: ацетат натрия - 123,03 г, хлорид натрия -58,44 г, спирт бутиловый третичный - 100 мл, вода дистиллированная - до 1000 мл. The component composition of the antibiotic fraction is determined by thin-layer chromatography on silica gel 60 plates. A solution of the following composition is used as the mobile phase: sodium acetate - 123.03 g, sodium chloride -58.44 g, butyl tertiary alcohol - 100 ml, distilled water - up to 1000 ml.
Хроматографию проводят восходящим способом. По окончании хроматографирования пластинку высушивают на воздухе. Далее хроматограмму равномерно опрыскивают 0,2% раствором нингидрина в ацетоне. Пластинку прогревают в сушильном шкафу при 105oC в течение 5 мин. Компоненты стрептотрицинового комплекса проявляются в виде фиолетовых пятен на розовом фоне. Хроматографирование испытуемых образцов нативного раствора ведут в сравнении со стандартным образцом чистого фитобактериомицина, содержащим (в %):
стрептотрицин В - 2,0
стрептотрицин С - 20,0
стрептотрицин D - 50,0
стрептотрицин E - 13,0
стрептотрицин F - 15,0
По результатам хроматографирования отбирают клоны, образующие антибиотический комплекс, соответствующий стандартному образцу фитобактериомицина и используют их для наработки посевного материала на скошенном агаре. Из 100 проверенных клонов только 15% образуют антибиотический комплекс необходимого состава.Chromatography is carried out in an ascending manner. After chromatography, the plate is dried in air. Next, the chromatogram is uniformly sprayed with a 0.2% solution of ninhydrin in acetone. The plate is heated in an oven at 105 ° C. for 5 minutes. The components of the streptotricin complex appear as purple spots on a pink background. Chromatography of the test samples of the native solution is carried out in comparison with a standard sample of pure phytobacteriomycin containing (in%):
streptotricin B - 2.0
streptotricin C - 20.0
streptotricin D - 50.0
streptotricin E - 13.0
streptotricin F - 15.0
According to the results of chromatography, clones are selected that form an antibiotic complex corresponding to a standard phytobacteriomycin sample and are used to produce seed on mown agar. Of the 100 tested clones, only 15% form an antibiotic complex of the required composition.
Продуктивность отобранных клонов по антибиотикообразованию составляют 20000-36000 ед./мл. The productivity of the selected clones for antibiotic formation is 20,000-36,000 units / ml.
Приготовленный посевной материал используют для производства препарата. Для чего вначале на качалке выращивают посевной материал в маточных колбах на среде следующего состава, %:
мука кукурузная - 4,0
KH2PO4 - 0,03
(NH4)2SO4 - 0,06
NH4NO3 - 0,7
NaCI - 0,2
MgSO4 - 0,05
CaCO3 - 0,5
вода (водопроводная) - до 100
pH - 6,6-7,2
Через 24-36 часов роста при температуре 28±1oC на качалке с 200-220 об/мин получают стандартный вегетативный посевной материал.The prepared seed is used to produce the preparation. Why first, on a rocking chair, seed is grown in fallopian flasks in an environment of the following composition,%:
corn flour - 4.0
KH 2 PO 4 - 0.03
(NH 4 ) 2 SO 4 - 0.06
NH 4 NO 3 - 0.7
NaCI - 0.2
MgSO 4 - 0.05
CaCO 3 - 0.5
water (tap) - up to 100
pH - 6.6-7.2
After 24-36 hours of growth at a temperature of 28 ± 1 o C on a rocking chair with 200-220 rpm receive a standard vegetative seed.
Этим посевным материалом в количестве 5% засевают посевные аппараты на предварительно простерилизованную питательную среду. Время выращивания - 24-36 часов. Затем полученный посевной материал передают в промышленные ферментаторы в количестве 5-10% на предварительно простерилизованную ферментационную среду следующего состава, %: кукурузная мука - 3-5; меласса -1,5-2,0; лизин -0,01- 0,2; (NH4)2SO4 или NH4NO3 - 0,6 - 0,7; KH2PO4 - 0,01 - 0,09; NaCI - 0, 05 - 0,25, MgSO4 - 0,005 - 0,05; CaCO3 -0,5-1,5; пропинол -0,1- 0,5. Процесс биосинтеза антибиотика идет 60±10 часов, при температуре 28±1oC, расходе воздуха 1,0-1,5 м3/м3• мин, при этом образуется 20000-33000 ед. /мл антибиотика. Процесс биосинтеза может осуществляться в безмешалочных ферментаторах.5% of this sowing material is seeded inoculated on pre-sterilized culture medium. Growing time is 24-36 hours. Then, the obtained seed is transferred to industrial fermenters in an amount of 5-10% for pre-sterilized fermentation medium of the following composition,%: corn flour - 3-5; molasses -1.5-2.0; lysine -0.01-0.2; (NH 4 ) 2 SO 4 or NH 4 NO 3 - 0.6 - 0.7; KH 2 PO 4 - 0.01 - 0.09; NaCI - 0.05 - 0.25; MgSO 4 - 0.005 - 0.05; CaCO 3 -0.5-1.5; propinol -0.1-0.5. The process of antibiotic biosynthesis takes 60 ± 10 hours, at a temperature of 28 ± 1 o C, air flow rate of 1.0-1.5 m 3 / m 3 • min, with the formation of 20,000-33000 units. / ml antibiotic. The biosynthesis process can be carried out in non-stirring fermenters.
Далее культуральную жидкость подкисляют до pH 5,0-5,5, упаривают на вакуум-выпарной установке до 10-12% сухих веществ, сушат на распылительной сушилке при температуре на входе 140-160oC, на выходе - 60-70oC. Стандартизуют мелом или каолином до получения препарата, содержащего 300000 ед./г, готовый препарат упаковывают в крафт-мешки по 10, 15, 20 кг. При этом потери антибиотика составляют 18±2 %.Next, the culture fluid is acidified to pH 5.0-5.5, evaporated in a vacuum evaporator to 10-12% dry matter, dried in a spray dryer at an inlet temperature of 140-160 o C, at the outlet - 60-70 o C Standardized with chalk or kaolin until a preparation containing 300,000 units / g is obtained, the finished preparation is packaged in kraft bags of 10, 15, 20 kg. In this case, the loss of antibiotic is 18 ± 2%.
Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения
Пример 1. Приготовленный вышеописанным способом посевной материал штамма Str. griseus-420 из пробирок на скошенном агаре пересеяли в маточные колбы со стерильным пеногасителем и питательной средой следующего состава, %:
мука кукурузная - 4,0
KH2PO4 - 0,03
(NH4)2SO4 - 0,6
NH4NO3 - 0,7
NaCI - 0,2
MgSO4 - 0,05
CaCO3 - 0,5
вода водопроводная - до 100
pH - 6,8-7,2
Через 24 часа роста при температуре 28±1oC на качалке с 200-220 об/мин получили стандартный посевной материал.Information confirming the possibility of carrying out the invention
Example 1. Prepared in the above manner, the seed of the strain Str. griseus-420 from tubes on mowed agar was plated into fallopian flasks with a sterile antifoam and nutrient medium of the following composition,%:
corn flour - 4.0
KH 2 PO 4 - 0.03
(NH 4 ) 2 SO 4 - 0.6
NH 4 NO 3 - 0.7
NaCI - 0.2
MgSO 4 - 0.05
CaCO 3 - 0.5
tap water - up to 100
pH - 6.8-7.2
After 24 hours of growth at a temperature of 28 ± 1 o C on a rocking chair with 200-220 rpm received standard seed.
Этим посевным материалом в количестве 5% засеяли посевные аппараты на вышеописанную предварительно простерилизованную питательную среду. Время выращивания - 24 часа. Затем полученным посевным материалом засеяли промышленные ферментаторы в количестве 5% на предварительно простерилизованную ферментационную среду следующего состава: кукурузная мука - 3%, меласса - 1,5; лизин - 0,01; NH4NO3 - 0,7; NaCI - 0,2; MgSO4 - 0,05; CaCO3 - 0,5; пропинол - 0,1. Время ферментации - 50 часов при температуре 28±1oC, расходе воздуха 1,0-1,5 м3/м3•мин. Активность культуральной жидкости составила 30000 ед/мл. Содержание стрептотрицина С составило 22%, стрептотрицина D - 52%. Далее культуральную жидкость подкислили соляной кислотой до pH 5,0-5,5, упарили на вакуум-выпарной установке до 10% сухих веществ, сушили на распылительной установке при температуре воздуха на входе 150oC, на выходе - 65oC. Стандартизовали мелом, готовый препарат упаковывали в крафт-мешки по 20 кг. Потери по антибиотику составили 18±2%.5% of this seed was seeded inoculated on the previously sterilized culture medium described above. Growing time is 24 hours. Then, the obtained seed was seeded with industrial fermenters in an amount of 5% on a pre-sterilized fermentation medium of the following composition: corn flour - 3%, molasses - 1.5; lysine - 0.01; NH 4 NO 3 - 0.7; NaCl - 0.2; MgSO 4 - 0.05; CaCO 3 - 0.5; propinol - 0.1. The fermentation time is 50 hours at a temperature of 28 ± 1 o C, air flow rate of 1.0-1.5 m 3 / m 3 • min. The activity of the culture fluid was 30,000 units / ml. The content of streptotricin C was 22%, streptotricin D - 52%. Next, the culture fluid was acidified with hydrochloric acid to a pH of 5.0-5.5, evaporated in a vacuum evaporator to 10% solids, dried in a spray unit at an inlet air temperature of 150 o C, at the outlet 65 o C. Standardized with chalk , the finished product was packaged in 20 kg kraft bags. Loss of antibiotic amounted to 18 ± 2%.
Пример 2. Подготовку посевного материала и технологию биосинтеза провели как в примере 1. Время выращивания посевного материала составило 36 часов. 10% посевного материала засеяли ферментационную среду следующего состава, %: кукурузная мука -5,0; меласса - 2,0; лизин - 0,1; KH2PO4 - 0,03; NaCI - 0,2; MgSO4 - 0,05; CaCO3 - 0,5; пропинол -0,1 и вода. Время ферментации 70 часов при температуре 28±1oC. Активность культуральной жидкости 33000 ед/мл. Компонентный состав антибиотической фракции соответствовал стандартному образцу фитобактериомицина.Example 2. The preparation of seed and biosynthesis technology was carried out as in example 1. The time of cultivation of seed was 36 hours. 10% of seed seeded with a fermentation medium of the following composition,%: corn flour -5.0; molasses - 2.0; lysine - 0.1; KH 2 PO 4 - 0.03; NaCl - 0.2; MgSO 4 - 0.05; CaCO 3 - 0.5; propinol -0.1 and water. The fermentation time is 70 hours at a temperature of 28 ± 1 o C. The activity of the culture fluid is 33,000 units / ml. The component composition of the antibiotic fraction corresponded to a standard sample of phytobacteriomycin.
Далее культуральную жидкость подкислили до pH 5,5, упарили на вакуум-выпарной установке до 12% сухих веществ, сушили на распылительной сушилке при температуре воздуха 160oC на входе и 70oC на выходе. Стандартизовали каолином, готовый препарат упаковали в крафт-мешки по 20 кг. Потери по антибиотику составили 20%.Next, the culture fluid was acidified to pH 5.5, evaporated in a vacuum evaporator to 12% solids, dried in a spray dryer at an air temperature of 160 o C at the inlet and 70 o C at the outlet. Standardized with kaolin, the finished product was packaged in 20 kg kraft bags. Loss of antibiotic amounted to 20%.
Пример 3. Подготовку посевного материала и биосинтез провели, как описано в примере 1. Время выращивания посевного материала составило 30 часов. 5% посевного материала засеяли ферментационную среду следующего состава, %: кукурузная мука - 4,0, меласса - 1,8, лизин - 0,05, KH2PO4 - 0,03, NaCI - 0,2, MgSO4 - 0,05, CaCO3 - 0,5, пропинол - 0,1. Время ферментации - 60 часов при температуре 28±1oC. Активность культуральной жидкости 32000 ед./мл. По компонентному составу антибиотик соответствовал фитобактериомицину.Example 3. Preparation of seed and biosynthesis was carried out as described in example 1. The time of cultivation of seed was 30 hours. 5% of seed seeded the fermentation medium of the following composition,%: corn flour - 4.0, molasses - 1.8, lysine - 0.05, KH 2 PO 4 - 0.03, NaCI - 0.2, MgSO 4 - 0 05, CaCO 3 - 0.5, propinol - 0.1. The fermentation time is 60 hours at a temperature of 28 ± 1 o C. The activity of the culture fluid is 32,000 units / ml. According to the component composition, the antibiotic corresponded to phytobacteriomycin.
Далее культуральную жидкость подкислили до pH 5,5, упарили на вакуум-выпарной установке до 10% сухих веществ, сушили на распылительной сушилке при температуре на входе 140oC, на выходе - 60oC. Стандартизовали каолином, готовый препарат упаковывали в крафт-мешки по 20 кг. Потери по антибиотику составили 18%.Next, the culture fluid was acidified to pH 5.5, evaporated in a vacuum evaporator to 10% solids, dried in a spray dryer at an inlet temperature of 140 o C, at the outlet - 60 o C. Standardized with kaolin, the finished product was packaged in Kraft 20 kg bags. Loss of antibiotic amounted to 18%.
При использовании более обедненных ферментационных питательных сред (чем описано в примере 1) активность культуральной жидкости значительно снижается. При использовании более обогащенных ферментационных сред (чем описано в примере 2) получаются густые среды и активность культуральной жидкости также значительно снижается. When using more depleted fermentation culture media (than described in example 1), the activity of the culture fluid is significantly reduced. When using more enriched fermentation media (than described in Example 2), thick media are obtained and the activity of the culture fluid is also significantly reduced.
Как видно из приведенных примеров, с помощью данного способа получения фитовлавина можно за 60±10 часов ферментации достичь активности культуральной жидкости 30000- 33000 ед. /мл или 10000 - 11000 мкг/мл и достичь выхода антибиотика 8-9 кг/м3 культуральной жидкости.As can be seen from the above examples, using this method of producing phytovlavin, it is possible to achieve the activity of the culture fluid of 30,000-33,000 units in 60 ± 10 hours of fermentation. / ml or 10000 - 11000 μg / ml and achieve an antibiotic yield of 8-9 kg / m 3 of culture fluid.
Claims (2)
Мука кукурузная - 3 - 5
Меласса - 1,5 - 2,0
Лизин - 0,01 - 0,2
(NН4)2SO4 или NН4NО3 - 0,6 - 0,7
КН2РО4 - 0,01 - 0,09
NаCl - 0,05 - 0,25
MgSO4 - 0,005 - 0,05
СаСО3 - 0,5 - 1,5
Пропинол - 0,1 - 0,5
Вода - Остальное
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что отбор клонов при подготовке посевного материала ведут с помощью тонкослойной хроматографии.2. The method according to claim 1, characterized in that the producer is grown on a fermentation medium of the following composition,%:
Corn flour - 3 - 5
Molasses - 1.5 - 2.0
Lysine - 0.01 - 0.2
(NH 4 ) 2 SO 4 or NH 4 NO 3 - 0.6 - 0.7
KN 2 RO 4 - 0.01 - 0.09
NaCl - 0.05 - 0.25
MgSO 4 - 0.005 - 0.05
CaCO 3 - 0.5 - 1.5
Propinol - 0.1 - 0.5
Water - Else
3. The method according to claim 1, characterized in that the selection of clones in the preparation of seed is carried out using thin layer chromatography.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU98113215/13A RU2144292C1 (en) | 1998-07-17 | 1998-07-17 | Method of producing preparation used for control of plant sicknesses |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU98113215/13A RU2144292C1 (en) | 1998-07-17 | 1998-07-17 | Method of producing preparation used for control of plant sicknesses |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2144292C1 true RU2144292C1 (en) | 2000-01-20 |
Family
ID=20208256
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU98113215/13A RU2144292C1 (en) | 1998-07-17 | 1998-07-17 | Method of producing preparation used for control of plant sicknesses |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2144292C1 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2445775C2 (en) * | 2010-06-21 | 2012-03-27 | Мосин Владимир Александрович | Method of producing agent for protecting agricultural crops |
| RU2771487C1 (en) * | 2021-06-23 | 2022-05-05 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Казанский государственный аграрный университет" (ФГБОУ ВО Казанский ГАУ) | Method for increasing the resistance of spring barley plants to pathogenic infection |
-
1998
- 1998-07-17 RU RU98113215/13A patent/RU2144292C1/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Физиологически активные вещества. Киев, 1980, N 12, с.93 - 96. Сборник научных трудов "Препараты микробиологического синтеза - сельскому хозяйству. - М.; 1981, с.25 - 30. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2445775C2 (en) * | 2010-06-21 | 2012-03-27 | Мосин Владимир Александрович | Method of producing agent for protecting agricultural crops |
| RU2771487C1 (en) * | 2021-06-23 | 2022-05-05 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Казанский государственный аграрный университет" (ФГБОУ ВО Казанский ГАУ) | Method for increasing the resistance of spring barley plants to pathogenic infection |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN110885776B (en) | Cellulose streptomyces fermentation extract and application thereof | |
| CN102586358B (en) | Biosynthesis method for improving yield of epothilone B | |
| CN110283856A (en) | Application of the high temperature resistant Produced from Pleurotus ostreatus in production erythrothioneine | |
| CN108220194B (en) | Streptomyces parvus with disease prevention and growth promotion functions and application thereof | |
| CN110122193A (en) | A kind of cordyceps militaris plantation method of stable high-content polysaccharide | |
| CN114276392A (en) | Zhongshengmycin F component mother medicine and preparation method thereof | |
| CN107541475B (en) | Streptomyces bulleyi and application thereof | |
| KR0140218B1 (en) | Ab-021 antibiotics and process for producing them | |
| RU2144292C1 (en) | Method of producing preparation used for control of plant sicknesses | |
| CN105296357B (en) | A method of aweto liquid fermentation mycelium production is improved by feed supplement | |
| CN105916986A (en) | Inoculum formed by inoculating microorganism, and method for producing antibiotic using same | |
| JP2787446B2 (en) | AB-006 antibiotic and method for producing the same | |
| CN107916198A (en) | It is a kind of effectively to suppress the microbial bacterial agent that native monosodium glutamate is formed in yeast | |
| EP0378921A2 (en) | Enhancement of plant metabolite production by timed elicitation | |
| WO1996034840A1 (en) | Bacterial fertilizer and production process | |
| CN109112171A (en) | A kind of preparation method of the antibacterial substance based on marine microorganism | |
| US5104855A (en) | Demethylallosamidin and a process for production thereof | |
| CN114196580A (en) | Streptomyces lavendulae Hainan variant strain and method for preparing zhongshengmycin product by using same | |
| CN105801445B (en) | A kind of nonprotein amino acid with antibacterial activity and preparation method thereof | |
| CN116606780B (en) | Pseudomonas bacteria NJAU-T129 and application thereof | |
| CN101555510B (en) | Production method of pleocidin semisolid fermentation | |
| KR20040018857A (en) | Cultural condition for the mycelial growth and the mycelium prepared therefrom | |
| RU2078138C1 (en) | Strain of bacterium arthrobacter globiformis - a producer of coproporphyrin-iii and a method of coproporphyrin-iii preparing | |
| CN1145408A (en) | Chemical residual degradation vaccine and its prodn. method | |
| CN116762825A (en) | Chrysanthemum straw fermentation product of bacillus amyloliquefaciens and application of chrysanthemum straw fermentation product in prevention and control of soil-borne bacterial wilt |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| QB4A | Licence on use of patent |
Effective date: 20051013 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20150718 |