RU214011U1 - Vertical prolamin electrophoresis device with external cooling circuit - Google Patents
Vertical prolamin electrophoresis device with external cooling circuit Download PDFInfo
- Publication number
- RU214011U1 RU214011U1 RU2022108272U RU2022108272U RU214011U1 RU 214011 U1 RU214011 U1 RU 214011U1 RU 2022108272 U RU2022108272 U RU 2022108272U RU 2022108272 U RU2022108272 U RU 2022108272U RU 214011 U1 RU214011 U1 RU 214011U1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- chamber
- electrophoresis
- vertical
- cooling circuit
- external cooling
- Prior art date
Links
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 title claims abstract description 75
- 238000001816 cooling Methods 0.000 title claims abstract description 40
- 101700077116 AVE3 Proteins 0.000 title description 10
- 101700006934 AVEA Proteins 0.000 title description 10
- 101700044096 AVEE Proteins 0.000 title description 10
- 101700047979 AVEF Proteins 0.000 title description 10
- 101700064290 GDA0 Proteins 0.000 title description 10
- 101700058641 GDA2 Proteins 0.000 title description 10
- 101700033989 GDA3 Proteins 0.000 title description 10
- 101700012011 GDA4 Proteins 0.000 title description 10
- 101700031401 GDA5 Proteins 0.000 title description 10
- 101700036788 GDA6 Proteins 0.000 title description 10
- 101700014913 GDA7 Proteins 0.000 title description 10
- 101700083010 GDA8 Proteins 0.000 title description 10
- 101700061165 GDA9 Proteins 0.000 title description 10
- 101700085810 gda1 Proteins 0.000 title description 10
- 108060006613 prolamin family Proteins 0.000 claims abstract description 15
- 239000011521 glass Substances 0.000 abstract description 22
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 abstract description 16
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 16
- 238000000926 separation method Methods 0.000 abstract description 12
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M buffer Substances [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 abstract description 9
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 abstract description 9
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 abstract description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 15
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 5
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 5
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 5
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 5
- 210000001520 Comb Anatomy 0.000 description 4
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 3
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 239000002826 coolant Substances 0.000 description 2
- 230000005684 electric field Effects 0.000 description 2
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 2
- 229920002521 Macromolecule Polymers 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating Effects 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000005611 electricity Effects 0.000 description 1
- 230000002068 genetic Effects 0.000 description 1
- 230000017525 heat dissipation Effects 0.000 description 1
- 230000002045 lasting Effects 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000001681 protective Effects 0.000 description 1
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 229960005486 vaccines Drugs 0.000 description 1
- -1 vaccines Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Abstract
Полезная модель направлена на повышение точности электрофоретического разделения проламинов путем обеспечения продолжительное время стабильной постоянной температуры охлаждения камеры вертикального электрофореза во время работы.The utility model is aimed at improving the accuracy of the electrophoretic separation of prolamins by providing a long time stable constant cooling temperature of the vertical electrophoresis chamber during operation.
Указанный технический результат достигают тем, что устройство для вертикального электрофореза проламинов с внешним охлаждающим контуром, содержащее камеру для проведения вертикального электрофореза, холодильную камеру (внешний охлаждающий контур), отличается тем, что камера для проведения вертикального электрофореза помещена во холодильную камеру (внешний охлаждающий контур) и подключена к источнику переменного тока через разъемы, установленные в холодильной камере, который позволяет, за счет обеспечения продолжительного времени стабильной постоянной температуры охлаждения камеры для вертикального электрофореза, получать контрастные изображения зон анализируемых белков, минимизируя вероятность получения искаженных электрофореграмм, приводящих к погрешностям при расшифровке и не корректным результатам.The specified technical result is achieved in that the device for vertical electrophoresis of prolamins with an external cooling circuit, containing a chamber for conducting vertical electrophoresis, a refrigerating chamber (external cooling circuit), is characterized in that the chamber for conducting vertical electrophoresis is placed in a refrigerating chamber (external cooling circuit) and is connected to an alternating current source through connectors installed in the refrigerating chamber, which allows, by providing a long time of a stable constant temperature for cooling the chamber for vertical electrophoresis, to obtain contrast images of the analyzed protein zones, minimizing the likelihood of obtaining distorted electrophoregrams, leading to errors in decoding and incorrect results.
Устройство для вертикального электрофореза проламинов с внешним охлаждающим контуром работает следующим образом. К камере для вертикального электрофореза винтовыми прижимами крепятся стекла, между которыми заливается полиакриламидный гель. После полимеризации геля камера для электрофореза заполняется верхним буфером и помещается в холодильную камеру. С помощью комплекта проводов камера для электрофореза подключается к разъемам, расположенным в холодильной камере. Наружные провода от разъемов подключаются к источнику постоянного тока. По окончании электрофореза устройство обесточивается, наружные провода отсоединяются от источника постоянного тока, внутренние - от разъемов и камеры для электрофореза. Камера для электрофореза извлекается из холодильной камеры и разбирается.
Description
Полезная модель относится к области эксплуатации или уходе за электролизерами, в частности к приспособлениям для вертикального электрофореза белков в полиакриламидном геле, и может быть использована при проведении генетических исследований для разделения белков по фракциям.The utility model relates to the operation or maintenance of electrolyzers, in particular to devices for vertical protein electrophoresis in a polyacrylamide gel, and can be used in genetic studies to separate proteins into fractions.
Электрофорез - метод разделения заряженных частиц под влиянием электрического поля, основанный на различии их подвижности в растворе или в поддерживающих средах. Для электрофоретического разделения белков наиболее широко применяются вертикальные пластины полиакриламидного геля. Критическим фактором при проведении электрофореза является температура, оказывающая существенное влияние на подвижность белков. При повышении температуры на 1°С (с 17 до 18°С) скорость перемещения белков увеличивается более чем на 20% [1], в результате чего происходит искажение белковых компонентов на электрофореграмме и результаты не соответствуют действительности. Поэтому без подержания постоянной температуры в ходе проведения электрофоретического разделения белков не возможно получение корректных результатов исследования.Electrophoresis is a method of separation of charged particles under the influence of an electric field, based on the difference in their mobility in solution or in supporting media. For the electrophoretic separation of proteins, vertical plates of polyacrylamide gel are most widely used. A critical factor in electrophoresis is temperature, which has a significant effect on the mobility of proteins. With an increase in temperature by 1°C (from 17 to 18°C), the rate of protein movement increases by more than 20% [1], resulting in a distortion of the protein components on the electrophoregram and the results do not correspond to reality. Therefore, without maintaining a constant temperature during the electrophoretic separation of proteins, it is not possible to obtain correct research results.
Наиболее распространена классификация белков семян, основанная на их различной растворимости. Согласно этой классификации, выделяют четыре типа белков: а) альбумины, растворимые в воде; б) глобулины, растворимые в разбавленных растворах солей; в) проламины, растворимые в водно-спиртовых растворах; г) глютенины, растворимые в кислых или щелочных растворах [3].The most common classification of seed proteins is based on their different solubility. According to this classification, four types of proteins are distinguished: a) water-soluble albumins; b) globulins, soluble in dilute salt solutions; c) prolamins, soluble in water-alcohol solutions; d) glutenins soluble in acidic or alkaline solutions [3].
В зависимости от структуры, размера и молекулярной массы белковых молекул, время электрофоретического разделения и необходимое напряжение электрического поля варьируют. Для электрофореза альбуминов и глобулинов в среднем требуется 1,3-4,0 часа при напряжении до 350 Вольт. Электрофорез проламинов протекает при постоянном напряжении 500 Вольт, время электрофореза проламинов составляет 4,5-7,0 часов. В связи с длительностью проведения анализа и высоким электрическим напряжением, необходимым для его проведения, электрофорез проламинов сопровождается значительным нагревом полиакриламидного геля, соприкасающихся с ним стекол и буферного раствора. В ходе нагрева происходит неравномерное расширение стекол, что нередко вызывает их термическое разрушение. При выполнении электрофореза белков даже кратковременный нагрев геля выше 20°С приводит к искажению зон анализируемых белковых компонентов и получению не корректных результатов исследования.Depending on the structure, size and molecular weight of protein molecules, the time of electrophoretic separation and the required electric field strength vary. For electrophoresis of albumins and globulins, an average of 1.3-4.0 hours is required at a voltage of up to 350 volts. Prolamin electrophoresis proceeds at a constant voltage of 500 volts, the prolamin electrophoresis time is 4.5-7.0 hours. Due to the duration of the analysis and the high electrical voltage required for its implementation, prolamin electrophoresis is accompanied by significant heating of the polyacrylamide gel, the glasses in contact with it, and the buffer solution. During heating, uneven expansion of the glass occurs, which often causes their thermal destruction. When performing protein electrophoresis, even short-term heating of the gel above 20°C leads to distortion of the zones of the analyzed protein components and obtaining incorrect results of the study.
В связи с вышеизложенным, разработка устройства для вертикального электрофореза проламинов с внешним охлаждающим контуром позволяющего, благодаря более эффективному охлаждению поддерживать продолжительное время постоянный температурный режим для полиакриламидного геля, и как следствие получать корректные электрофореграммы, является актуальной.In connection with the foregoing, the development of a device for vertical prolamin electrophoresis with an external cooling circuit that allows, due to more efficient cooling, to maintain a constant temperature regime for polyacrylamide gel for a long time, and as a result to obtain correct electrophoregrams, is relevant.
Известен аналог «Камера для вертикального электрофореза PROTEAN II xi» фирмы Bio-Rad [6], предназначенная для вертикального электрофореза большого формата такими методами, как SDS-PAGE, нативный электрофорез и электрофорез в агарозном геле. Установка состоит из центральной охлаждающей сердцевины с прокладками, нижней буферной камеры, крышки с кабелями, двух комплектов стеклянных пластин, многослойных зажимов и верхней буферной заслонки.Known analogue "Chamber for vertical electrophoresis PROTEAN II xi" company Bio-Rad [6], designed for vertical electrophoresis of large format by methods such as SDS-PAGE, native electrophoresis and electrophoresis in agarose gel. The unit consists of a central cooling core with gaskets, a bottom buffer chamber, a cover with cables, two sets of glass plates, sandwich clamps and an upper buffer damper.
Теплоотведение в данном устройстве обеспечивается за счет центральной охлаждающей сердцевины, которая может быть подключена к системе холодного водоснабжения или охлаждающей рециркуляторной ванне, либо заполнена охлаждающей жидкостью.Heat dissipation in this device is provided by a central cooling core, which can be connected to a cold water supply system or a cooling recirculation bath, or filled with coolant.
При проведении электрофореза альбуминов и глобулинов, занимающем 1,3-4,0 часа, устройство обеспечивает необходимый теплоотвод и стабильность температурного режима. Однако, для проведения электрофореза проламинов, необходимо от 4,5 до 7,0 часов. Использования холодной водопроводной воды или охлаждающей жидкости недостаточно для поддержания стабильности температурного режима в течение такого длительного времени. В результате происходит нагрев полиакриламидного геля выше 30°С, а также нагрев стекол и буфера в нижней буферной камере. Это приводит к искажению зон белковых компонентов, а также может привести к термическому разрушению стекол.During electrophoresis of albumins and globulins, which takes 1.3-4.0 hours, the device provides the necessary heat removal and temperature stability. However, prolamin electrophoresis requires 4.5 to 7.0 hours. Using cold tap water or coolant is not enough to keep the temperature stable for such a long time. As a result, the polyacrylamide gel is heated above 30°C, as well as the glass and buffer in the lower buffer chamber are heated. This leads to distortion of the zones of protein components and can also lead to thermal destruction of glasses.
Известен аналог установка для вертикального электрофореза «OmniPAGE maxi» производства ООО НПФ «Биотехнологии» [4], предназначенная для разделения с высокой разрешающей способностью при использовании SDS-, нативного, градиентного и двумерного разделения белков. Установка состоит из модуля omniPAGE maxi, стекол с прикрепленными спейсерами, хладопакета, пробной пластины.Known analogue installation for vertical electrophoresis "OmniPAGE maxi" manufactured by LLC NPF "Biotechnology" [4], designed for separation with high resolution using SDS-, native, gradient and two-dimensional separation of proteins. The setup consists of an omniPAGE maxi module, glasses with attached spacers, a cold pack, and a trial plate.
Охлаждение устройства обеспечивается за счет помещения хладопакета в буферный раствор. Данной системы охлаждения достаточно для обеспечения стабильности условий электрофореза альбуминов и глобулинов, продолжающегося 1,3-4,0 часа.Cooling of the device is provided by placing a cold pack in a buffer solution. This cooling system is sufficient to ensure the stability of the conditions for electrophoresis of albumins and globulins, lasting 1.3-4.0 hours.
Недостатком аналога является то, что за время проведения электрофореза проламинов (от 4,5 до 7,0 часов) хладопакеты нагреваются и требуют неоднократной замены в течение одного анализа. Установка сконструирована таким образом, что для замены хладопакета необходимо отключить прибор от электрического тока. Это приводит к кратковременному нарушению стабильности условий проведения электрофореза и происходит искажение получаемых белковых спектров.The disadvantage of the analogue is that during the electrophoresis of prolamins (from 4.5 to 7.0 hours), the cold packs heat up and require repeated replacement during one analysis. The installation is designed in such a way that in order to replace the cold pack, it is necessary to disconnect the device from the electric current. This leads to a short-term violation of the stability of the electrophoresis conditions and the resulting protein spectra are distorted.
Известен аналог холодильник фармацевтический двухкамерный ХФД-280 «Pozis», производства компании Pozis [5], предназначенный для хранения лекарственных препаратов, вакцин, реагентов и биологических образцов при температуре от +2°С до +15°С в помещениях клиник, больниц, аптек и лабораторий. Устройство состоит из двух холодильных камер, объемом не менее 140 дм3, 2 компрессоров, 6 полок, 4 сосудов, дверей из тонированного стекла, электронных контроллеров EV3B22 для регулировки температурного режима.Known analog refrigerator two-chamber pharmaceutical HFD-280 "Pozis", manufactured by Pozis [5], designed for storage of medicines, vaccines, reagents and biological samples at temperatures from +2°C to +15°C in the premises of clinics, hospitals, pharmacies and laboratories. The device consists of two refrigerating chambers with a volume of at least 140 dm 3 , 2 compressors, 6 shelves, 4 vessels, tinted glass doors, EV3B22 electronic controllers for temperature control.
Недостатком данного прибора является отсутствие устройства с функцией вертикального электрофореза и разъемов внутри для подключения дополнительных устройств к источнику переменного тока камеры в холодильной камере.The disadvantage of this device is the absence of a device with the function of vertical electrophoresis and connectors inside for connecting additional devices to the AC power source of the chamber in the refrigerator compartment.
В качестве прототипа нами выбрана камера для вертикального электрофореза «VE-20», производства ООО «Helicon» [2], предназначенная для нативного и SDS-разделения белков и нуклеиновых кислот. Устройство состоит из камеры с защитной крышкой и комплектом проводов, двух комбинированных наборов стекол, винтовых зажимов, набора спейсеров и гребенок.As a prototype, we chose the VE-20 vertical electrophoresis chamber, manufactured by Helicon LLC [2], designed for native and SDS separation of proteins and nucleic acids. The device consists of a camera with a protective cover and a set of wires, two combined sets of glasses, screw clamps, a set of spacers and combs.
Устройство работает следующим образом. К камере с помощью винтовых прижимов крепятся стекла в следующей очередности: камера - стекло с вырезом - спейсеры - стекло без выреза. Между стеклами камеры заливается полиакриламидный гель. Лунки для занесения раствора белков формируются с помощью гребенок. После полимеризации геля, камера заполняется верхним буфером - 1100 мл, устанавливается в подставку с нижним буфером - 420 мл, закрывается крышкой с проводами и подключается к источнику постоянного тока. Охлаждение устройства осуществляется за счет рассеивания тепла в атмосферу.The device works as follows. Glasses are attached to the camera with screw clamps in the following order: camera - glass with a cutout - spacers - glass without a cutout. Polyacrylamide gel is poured between the chamber glasses. Wells for adding a solution of proteins are formed using combs. After polymerization of the gel, the chamber is filled with an upper buffer - 1100 ml, placed in a stand with a lower buffer - 420 ml, closed with a lid with wires and connected to a direct current source. Cooling of the device is carried out by dissipating heat into the atmosphere.
Электрофорез альбуминов и глобулинов длится от 1,3 до 4,0 часов. Системы охлаждения данного устройства достаточно, чтобы обеспечить стабильность температурных условий в течение этого времени. Недостатком данного прибора является низкая эффективность системы охлаждения при электрофорезе проламинов, занимающем от 4,5 до 7,0 часов. В этом случае не обеспечивается стабильное и постоянное во времени охлаждение, из-за чего полиакриламидный гель и верхний буфер значительно нагреваются. В результате происходит искажение зон белковых компонентов, а так же термическое разрушение стекол.Electrophoresis of albumins and globulins lasts from 1.3 to 4.0 hours. The cooling system of this device is sufficient to ensure the stability of the temperature conditions during this time. The disadvantage of this device is the low efficiency of the cooling system during prolamin electrophoresis, which takes from 4.5 to 7.0 hours. In this case, stable and constant cooling over time is not ensured, due to which the polyacrylamide gel and the upper buffer become significantly heated. As a result, the zones of protein components are distorted, as well as thermal destruction of glasses.
Задачей технического решения является повышение точности электрофоретического разделения проламинов, путем обеспечения продолжительное время стабильной постоянной температуры охлаждения камеры вертикального электрофореза во время работы.The objective of the technical solution is to increase the accuracy of the electrophoretic separation of prolamins by providing a long-term stable constant cooling temperature of the vertical electrophoresis chamber during operation.
Поставленная задача решается благодаря тому, что «Устройство для вертикального электрофореза проламинов с внешним охлаждающим контуром» содержащее камеру для проведения вертикального электрофореза, холодильную камеру (внешний охлаждающий контур), отличается тем, что камера для проведения вертикального электрофореза помещена во холодильную камеру (внешний охлаждающий контур) и подключена к источнику переменного тока через разъемы, установленные в холодильной камере.The problem is solved due to the fact that the "Device for vertical prolamin electrophoresis with an external cooling circuit" containing a chamber for vertical electrophoresis, a cooling chamber (external cooling circuit), differs in that the chamber for vertical electrophoresis is placed in a refrigerator chamber (external cooling circuit). ) and is connected to AC power through the connectors installed in the refrigerator compartment.
Между совокупностью существенных признаков заявляемого объекта и достигаемым техническим результатом существует причинно-следственная связь, а именно помещение камеры для вертикального электрофореза в холодильную камеру (внешний охлаждающий контур) и подключение к источнику переменного тока через разъемы, установленные в холодильной камере обеспечивает продолжительное время стабильную постоянную температуру охлаждения камеры вертикального электрофореза во время работы.There is a cause-and-effect relationship between the set of essential features of the claimed object and the achieved technical result, namely, placing the chamber for vertical electrophoresis in a refrigerating chamber (external cooling circuit) and connecting to an alternating current source through connectors installed in the refrigerating chamber ensures a stable constant temperature for a long time cooling the vertical electrophoresis chamber during operation.
Техническое решение позволяет, за счет обеспечения продолжительного времени стабильной постоянной температуры охлаждения камеры для вертикального электрофореза, получать контрастные изображения зон анализируемых белков, минимизируя вероятность получения искаженных электрофореграмм, приводящих к погрешностям при расшифровке и не корректным результатам.The technical solution makes it possible, by providing a stable constant temperature for cooling the chamber for vertical electrophoresis for a long time, to obtain contrast images of the zones of the analyzed proteins, minimizing the likelihood of obtaining distorted electrophoregrams, leading to errors in interpretation and incorrect results.
Техническая сущность предложенного технического решения поясняется чертежом, на котором:The technical essence of the proposed technical solution is illustrated by a drawing, in which:
Фиг. 1. Внешний вид прямо устройства для вертикального электрофореза проламинов с внешним охлаждающим контуром.Fig. 1. External view of a vertical prolamin electrophoresis device with an external cooling circuit.
Фиг. 2. Внешний вид сбоку устройства для вертикального электрофореза проламинов с внешним охлаждающим контуром.Fig. Fig. 2. Side view of the device for vertical electrophoresis of prolamins with an external cooling circuit.
Фиг. 3. Внешний вид сверху устройства для вертикального электрофореза проламинов с внешним охлаждающим контуром.Fig. Fig. 3. Top view of the device for vertical electrophoresis of prolamins with an external cooling circuit.
Предложенное устройство для вертикального электрофореза проламинов с внешним охлаждающим контуром состоит из: камеры для вертикального электрофореза (1) с винтовыми прижимами (2); набора проводов (3) для подключения камеры для электрофореза к разъемам (4) в холодильной камере (5); наружных проводов (6) для подключения устройства к источнику постоянного тока.The proposed device for vertical electrophoresis of prolamins with an external cooling circuit consists of: a chamber for vertical electrophoresis (1) with screw clamps (2); a set of wires (3) for connecting the electrophoresis chamber to the connectors (4) in the refrigerator compartment (5); external wires (6) for connecting the device to a DC source.
Описанное выше техническое решение «Устройство для вертикального электрофореза проламинов с внешним охлаждающим контуром» работает следующим образом.The technical solution described above "Device for vertical prolamin electrophoresis with an external cooling circuit" works as follows.
К камере для вертикального электрофореза с помощью винтовых прижимов с обеих сторон крепятся стекла. Между стекол собранной камеры заливают полиакриламидный гель и помещают гребенки. После полимеризации геля камера для вертикального электрофореза заполняется верхним буфером, гребенки удаляют и заносят в сформированные лунки раствор белка. Камера для электрофореза с занесенными образцами помещается в холодильную камеру. С помощью комплекта проводов камера для электрофореза подключается к разъемам, расположенным в холодильной камере. Наружные провода от разъемов подключаются к источнику постоянного тока. Электрофоретическое разделение проламинов продолжается в течение 4,5-7,0 часов при постоянном напряжении 500 Вольт.Glasses are attached to the chamber for vertical electrophoresis using screw clamps on both sides. Polyacrylamide gel is poured between the glasses of the assembled chamber and combs are placed. After polymerization of the gel, the chamber for vertical electrophoresis is filled with the upper buffer, the combs are removed and the protein solution is added to the formed wells. The electrophoresis chamber with the loaded samples is placed in a cold chamber. Using a set of wires, the electrophoresis chamber is connected to the connectors located in the refrigerator compartment. The outer wires from the connectors are connected to a DC source. Electrophoretic separation of prolamins continues for 4.5-7.0 hours at a constant voltage of 500 volts.
После окончания электрофореза, устройство обесточивается, наружные провода отсоединяются от источника постоянного тока, внутренние - от разъемов и камеры для электрофореза. Камера для вертикального электрофореза извлекается из холодильной камеры и разбирается.After the end of electrophoresis, the device is de-energized, the outer wires are disconnected from the DC source, the inner wires are disconnected from the connectors and the electrophoresis chamber. The chamber for vertical electrophoresis is removed from the cold store and disassembled.
Технико-экономическое обоснование: При существующей технологии вертикального электрофореза проламинов в камерах с атмосферным охлаждением выход не корректных для расшифровки электрофореграмм составляет 60%, а в 20% случаев происходит термическое разрушение стекол. Поэтому экономическое обоснование предусматривает оценку ущерба в виде перерасхода реагентов; стоимости стекол; рабочего времени и потребляемой электрической энергии. С переходом на предлагаемую технологию, доля испорченных электрофореграмм составила 5% при отсутствии термически разрушенных стекол.Feasibility study: With the existing technology of vertical electrophoresis of prolamins in chambers with atmospheric cooling, the yield of electrophoregrams that are not correct for interpretation is 60%, and in 20% of cases, thermal destruction of glasses occurs. Therefore, the economic justification provides for the assessment of damage in the form of overspending of reagents; glass cost; working time and consumed electrical energy. With the transition to the proposed technology, the proportion of damaged electrophoregrams was 5% in the absence of thermally destroyed glasses.
Стоимость анализа составляет 6600 руб. и включает в себя затраты на реактивы, расходные материалы, амортизацию оборудования, электроэнергию и оплату труда.The cost of the analysis is 6600 rubles. and includes the cost of reagents, consumables, equipment depreciation, electricity and labor costs.
Стоимость дополнительного стекла для камеры - 1500 руб.The cost of additional glass for the camera is 1500 rubles.
Время проведения анализа - 1 рабочий день.Analysis time - 1 business day.
При использовании существующей технологии вертикального электрофореза проламинов в камерах с атмосферным охлаждением с учетом получения некорректных электрофореграмм в 60% случаев, за 20 рабочих дней будет выполнено 8 анализов. Потребуется приобретение 4 термически разрушенных стекол. Стоимость одного анализа в этом случае составит: (6600⋅20+1500⋅4)/8=17250 руб.Using the existing technology of vertical electrophoresis of prolamins in chambers with atmospheric cooling, taking into account the receipt of incorrect electrophoregrams in 60% of cases, 8 analyzes will be performed in 20 working days. You will need to purchase 4 thermally destroyed glasses. The cost of one analysis in this case will be: (6600⋅20+1500⋅4)/8=17250 rubles.
С переходом на предлагаемую технологию, с учетом получения некорректных электрофореграмм в 5% случаев, за 20 рабочих дней будет выполнено 19 анализов. Стоимость одного анализа составит: (6600⋅20)/19=6947,4 руб.With the transition to the proposed technology, taking into account the receipt of incorrect electrophoregrams in 5% of cases, 19 analyzes will be performed in 20 working days. The cost of one analysis will be: (6600⋅20)/19=6947.4 rubles.
Технико-экономическая эффективность при применении предлагаемого технического решения «Устройство для вертикального электрофореза проламинов с внешним охлаждающим контуром» обусловлена тем, что за счет обеспечения продолжительного времени стабильной постоянной температуры охлаждения камеры для вертикального электрофореза в 12 раз снижается риск получения некорректных электрофореграмм; не происходит термическое разрушение стекол; увеличивается производительность труда в 2,4 раза. Это снижает фактическую себестоимость электрофоретического разделения проламинов в 2,5 раза.Technical and economic efficiency in the application of the proposed technical solution "Device for vertical electrophoresis of prolamins with an external cooling circuit" is due to the fact that by providing a long time stable constant temperature for cooling the chamber for vertical electrophoresis, the risk of obtaining incorrect electrophoregrams is reduced by 12 times; thermal destruction of glasses does not occur; labor productivity increases by 2.4 times. This reduces the actual cost of electrophoretic separation of prolamins by 2.5 times.
Источники информацииSources of information
1. Гааль Э. Электрофорез в разделении биологических макромолекул: пер. с англ. / Э. Гааль, Г. Медьеши, Л. Верецкеи. - М.: «Мир», 1982. - 448 с.1. Gaal E. Electrophoresis in the separation of biological macromolecules: Per. from English. / E. Gaal, G. Medjeshi, L. Vereckei. - M.: "Mir", 1982. - 448 p.
2. Камера для вертикального электрофореза VE-20 [Электронный ресурс]. - режим доступа: https://www.helicon.ru/catalog/oborudovanie/elektroforez-i-blotting/kamery-dlya-vertikalnogo-elektroforeza-ve-20/?q=ve%2020. - заглавие с экрана. - (Дата обращения 22.02.2022).2. Camera for vertical electrophoresis VE-20 [Electronic resource]. - access mode: https://www.helicon.ru/catalog/oborudovanie/elektroforez-i-blotting/kamery-dlya-vertikalnogo-elektroforeza-ve-20/?q=ve%2020. - screen title. - (Accessed 22.02.2022).
3. Поморцев А.А. Методика проведения лабораторного сортового контроля по группам сельскохозяйственных растений / А.А. Поморцев, А.М. Кудрявцев, В.В. Упельниек [и др.]; Министерство сельского хозяйства Российской Федерации. - Москва: Российский научно-исследовательский институт информации и технико-экономических исследований по инженерно-техническому обеспечению агропромышленного комплекса, 2004. - 96 с.3. Pomortsev A.A. Methodology for laboratory varietal control by groups of agricultural plants / A.A. Pomortsev, A.M. Kudryavtsev, V.V. Upelniek [and others]; Ministry of Agriculture of the Russian Federation. - Moscow: Russian Research Institute of Information and Techno-Economic Research on Engineering and Technical Support of the Agro-Industrial Complex, 2004. - 96 p.
4. Системы вертикального электрофореза [Электронный ресурс]. - режим доступа: https://www.biotechnologies.ru/catalog/Vertical.html. - заглавие с экрана. - (Дата обращения 22.02.2022).4. Systems of vertical electrophoresis [Electronic resource]. - access mode: https://www.biotechnologies.ru/catalog/Vertical.html. - screen title. - (Accessed 22.02.2022).
5. Холодильник фармацевтический ХФД-280 «POZIS» [Электронный ресурс]. - режим доступа: https://pozis.ru/katalog/meditsinskava_tekhnika/meditsinskie_kholodilniki_morozilniki/farmatsevticheskie_kholodilniki/775/?lang=ru. - заглавие с экрана. - (Дата обращения 22.02.2022).5. Pharmaceutical refrigerator HFD-280 "POZIS" [Electronic resource]. - access mode: https://pozis.ru/katalog/meditsinskava_tekhnika/meditsinskie_kholodilniki_morozilniki/farmatsevticheskie_kholodilniki/775/?lang=ru. - screen title. - (Accessed 22.02.2022).
6. PROTEAN® II xi Cell [Электронный ресурс]. - режим доступа: https://www.bio-rad.com/ru-ru/product/protean-ii-xi-cell?ID=N3F332KSY. - заглавие с экрана. - (Дата обращения 22.02.2022).6. PROTEAN® II xi Cell [Electronic resource]. - access mode: https://www.bio-rad.com/ru-ru/product/protean-ii-xi-cell?ID=N3F332KSY. - screen title. - (Accessed 22.02.2022).
Claims (1)
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU214011U1 true RU214011U1 (en) | 2022-10-07 |
Family
ID=
Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU337684A1 (en) * | вители Всесоюзный научно исследовательский институт продуктов брожени , Всесоюзный институт гельминтологии акад К. И. Скр бина | DEVICE FOR ELECTROPHORESIS OF BIOLOGICAL MATERIAL IN POLYACRYLAMIDE GEL | ||
| SU362235A1 (en) * | 1971-06-29 | 1972-12-13 | Специальное Конструкторское Бюро Биофизической Аппаратуры | APPARATUS FOR ELECTROPHORESIS |
| SU1146604A1 (en) * | 1983-05-12 | 1985-03-23 | Orlikov Grigorij A | Device for determination of protein fraction electrophoretic mobility |
| RU2156142C1 (en) * | 1999-04-15 | 2000-09-20 | Соболев Вадим Иванович | Device for performing electrophoresis |
| CN101328206A (en) * | 2008-02-29 | 2008-12-24 | 中国药科大学 | Non-denaturing preparative electrophoresis |
| RU123960U1 (en) * | 2012-03-21 | 2013-01-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московский государственный гуманитарный университет имени М.А. Шолохова" | DEVICE FOR VERTICAL ELECTROPHORESIS OF NUCLEIC ACIDS AND PROTEINS IN GRADIENT GELS |
| CN108794567A (en) * | 2018-06-28 | 2018-11-13 | 华兰生物工程重庆有限公司 | A kind of protein electrophorese isolation and purification method and its device |
| CN110639365A (en) * | 2019-09-12 | 2020-01-03 | 大连理工大学 | Preparative vertical flow electrophoresis system with support medium for mixed protein separation |
Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU337684A1 (en) * | вители Всесоюзный научно исследовательский институт продуктов брожени , Всесоюзный институт гельминтологии акад К. И. Скр бина | DEVICE FOR ELECTROPHORESIS OF BIOLOGICAL MATERIAL IN POLYACRYLAMIDE GEL | ||
| SU362235A1 (en) * | 1971-06-29 | 1972-12-13 | Специальное Конструкторское Бюро Биофизической Аппаратуры | APPARATUS FOR ELECTROPHORESIS |
| SU1146604A1 (en) * | 1983-05-12 | 1985-03-23 | Orlikov Grigorij A | Device for determination of protein fraction electrophoretic mobility |
| RU2156142C1 (en) * | 1999-04-15 | 2000-09-20 | Соболев Вадим Иванович | Device for performing electrophoresis |
| CN101328206A (en) * | 2008-02-29 | 2008-12-24 | 中国药科大学 | Non-denaturing preparative electrophoresis |
| RU123960U1 (en) * | 2012-03-21 | 2013-01-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московский государственный гуманитарный университет имени М.А. Шолохова" | DEVICE FOR VERTICAL ELECTROPHORESIS OF NUCLEIC ACIDS AND PROTEINS IN GRADIENT GELS |
| CN108794567A (en) * | 2018-06-28 | 2018-11-13 | 华兰生物工程重庆有限公司 | A kind of protein electrophorese isolation and purification method and its device |
| CN110639365A (en) * | 2019-09-12 | 2020-01-03 | 大连理工大学 | Preparative vertical flow electrophoresis system with support medium for mixed protein separation |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Smith et al. | Emergence of a large pore subpopulation during electroporating pulses | |
| RU214011U1 (en) | Vertical prolamin electrophoresis device with external cooling circuit | |
| EP1877764B1 (en) | Method for electrophoresis involving parallel and simultaneous separation | |
| Foret et al. | Macrofluidic device for preparative concentration based on epitachophoresis | |
| Prest et al. | Miniaturised free flow isotachophoresis of bacteria using an injection moulded separation device | |
| Breadmore et al. | High-resolution computer simulations of stacking of weak bases using a transient pH boundary in capillary electrophoresis. 1. Concept and impact of sample ionic strength | |
| Allen et al. | Column electrophoresis on the Apollo-Soyuz test project | |
| US3563880A (en) | Gel electrophoresis unit | |
| McHardy et al. | Comparing expression level‐dependent features in codon usage with protein abundance: an analysis of ‘predictive proteomics’ | |
| Chen et al. | A simple preparative free‐flow electrophoresis joined with gratis gravity: I. Gas cushion injector and self‐balance collector instead of multiple channel pump | |
| JPH04501609A (en) | Electrophoresis method and equipment | |
| CN105815232A (en) | Poultry egg warming device based on Internet of Things | |
| Asea et al. | Heat shock proteins in veterinary medicine and sciences | |
| Zilberstein et al. | SDS-PAGE focusing: preparative aspects | |
| Podwin et al. | Lab-on-chip platform as a nanosatellite payload solution for biomedical experiments in outer space | |
| CN206375885U (en) | A kind of gene detection system | |
| Raj et al. | Analysis of Joule heating in electrophoretic processes | |
| Sereika et al. | Assessing long-read sequencing with Nanopore R9, R10 and PacBio CCS to obtain high-quality metagenome assembled genomes from complex microbial communities | |
| Pagan et al. | A nonadaptive origin of a beneficial trait: in silico selection for free energy of folding leads to the neutral emergence of mutational robustness in single domain proteins | |
| Fukui et al. | 2DE for proteome analysis of human metaphase chromosomes | |
| Thanonkeo et al. | Cloning and transcriptional analysis of groES and groEL in ethanol-producing bacterium Zymomonas mobilis TISTR 548 | |
| US10564123B2 (en) | Bioreactor system and method of operating same for cellular composition identification and quantification | |
| Kłodzińska et al. | Two-dimensional gel electrophoresis (2DE) | |
| Azhari et al. | Proteomik: database dan teknologi | |
| Pore Gradient | Pore Gradient LPE Systems |