RU2132878C1 - Method of gluconic acid salts and citric acid producing - Google Patents

Method of gluconic acid salts and citric acid producing Download PDF

Info

Publication number
RU2132878C1
RU2132878C1 RU98100487A RU98100487A RU2132878C1 RU 2132878 C1 RU2132878 C1 RU 2132878C1 RU 98100487 A RU98100487 A RU 98100487A RU 98100487 A RU98100487 A RU 98100487A RU 2132878 C1 RU2132878 C1 RU 2132878C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
citric acid
salts
separated
aeration
fermentation
Prior art date
Application number
RU98100487A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Е.В. Карпун
Н.Н. Кутина
А.Т. Кирсанов
Л.А. Горбач
С.И. Чумаков
С.Р. Ветерханов
Original Assignee
Карпун Екатерина Васильевна
Кутина Наталья Николаевна
Кирсанов Анатолий Тимофеевич
Горбач Леонид Афанасьевич
Чумаков Сергей Иванович
Ветерханов Супьян Рашитович
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Карпун Екатерина Васильевна, Кутина Наталья Николаевна, Кирсанов Анатолий Тимофеевич, Горбач Леонид Афанасьевич, Чумаков Сергей Иванович, Ветерханов Супьян Рашитович filed Critical Карпун Екатерина Васильевна
Priority to RU98100487A priority Critical patent/RU2132878C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2132878C1 publication Critical patent/RU2132878C1/en

Links

Images

Landscapes

  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

FIELD: biotechnology. SUBSTANCE: invention proposes a method of fermentation using possibilities of usual industrial strain-producers of citric acid to obtain two products by a single technological cycle. Gluconic acid salts and citric acid (as pure form or as salts), either one or another product are obtained depending on industry requirement. Method is based on fermentation of fungus Aspergillus niger in the presence of a single growth substance, carbohydrate source and mineral salt. After removal of product the process is carried out using another source of carbohydrate and mineral salt and conditions of process are changed also (pH value of medium, aeration regime). EFFECT: broadened assortment of production using the culture-producer Aspergillus niger. 7 cl, 1 tbl, 3 dwg

Description

Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к способу получения солей глюконовой кислоты (глюконатов) и лимонной кислоты. The invention relates to the microbiological industry, and in particular to a method for producing salts of gluconic acid (gluconates) and citric acid.

Производство солей глюконовой кислоты и лимонной кислоты основано на ферментации углеводсодержащих сред различными штаммами плесневых грибов в аэробных условиях, при определенной температуре, регламентированном составе среды и подавлении развития посторонней микрофлоры. The production of gluconic acid and citric acid salts is based on the fermentation of carbohydrate-containing media by various strains of molds under aerobic conditions, at a certain temperature, the regulated composition of the medium and the suppression of the development of extraneous microflora.

Известен способ получения глюконата натрия, предусматривающий ферментацию глюкозы плесневым грибом Asp. niger в присутствии кукурузного экстракта как ростового вещества и источника марганца, pH около 6 и аэрации среды около 0,5 объема воздуха на один объем среды в мин [1]. Ферментация продолжается 22 ч, биомассу гриба повторно не применяют и резервы Asp. niger остаются неиспользованными. Кроме того, условия биосинтеза исключают получение в практически значимых количествах лимонной кислоты. A known method of producing sodium gluconate, providing for the fermentation of glucose by mold Asp. niger in the presence of corn extract as a growth substance and a source of manganese, pH about 6 and aeration of the medium about 0.5 volume of air per medium volume per minute [1]. Fermentation lasts 22 hours, the fungal biomass is not reused, and Asp reserves. niger remain unused. In addition, the biosynthesis conditions preclude the production of practically significant amounts of citric acid.

Известен также способ получения лимонной кислоты, заключающийся в ферментации Asp. niger сахарных или мелассных сред в присутствии минеральных солей, содержащих цинк, pH ниже 3, аэрации в соотношении около 0,5 объема воздуха на 1 объем среды в мин [2]. Указанный способ не позволяет получать соли глюконовой кислоты. There is also known a method for producing citric acid, which consists in the fermentation of Asp. niger sugar or molasses media in the presence of mineral salts containing zinc, pH below 3, aeration in the ratio of about 0.5 air volume per 1 medium volume per minute [2]. The specified method does not allow to obtain gluconic acid salts.

Наиболее близким по технической сущности является способ, заключающийся в выращивании посевного материала из спор Asp. niger, в присутствии минеральных солей и кукурузного экстракта, содержащих марганец, и последующей ферментации глюкозы до солей глюконовой кислоты при pH от 6 до 7, аэрации менее 0,5 объема воздуха на 1 объем среды в мин [3]. The closest in technical essence is the method, which consists in growing seed from spores Asp. niger, in the presence of mineral salts and a corn extract containing manganese, and subsequent fermentation of glucose to gluconic acid salts at a pH of 6 to 7, aeration of less than 0.5 air volume per volume of medium per minute [3].

При замене марганца на цинк, введении мелассной или сахарной среды, усилении аэрации, pH ниже 3 та же культура продуцирует лимонную кислоту [3]. When replacing manganese with zinc, introducing molasses or sugar medium, enhancing aeration, pH below 3, the same culture produces citric acid [3].

Недостатком указанного способа является то, что указанные продукты биосинтеза получают в течение разных технологических циклов, на разных заводах, с использованием различных штаммов Asp. niger. При этом каждое из указанных производств ориентировано на выпуск монопродукта. The disadvantage of this method is that these biosynthesis products are obtained during different technological cycles, in different plants, using different strains of Asp. niger. Moreover, each of these industries is focused on the production of a single product.

Целью изобретения является создание гибкого способа ферментации, использующего возможности рядовых промышленных штаммов-продуцентов лимонной кислоты, для получения в течение одного технологического цикла, с использованием одного штамма и одного и того же технологического оборудования как солей глюконовой кислоты, так и лимонной кислоты в чистом виде или в виде солей, либо того или иного продукта в зависимости от потребностей производства. The aim of the invention is to provide a flexible method of fermentation, using the capabilities of ordinary industrial strains of producers of citric acid, to obtain during one technological cycle, using one strain and the same technological equipment as salts of gluconic acid and citric acid in pure form or in the form of salts, or of a product, depending on the needs of production.

Поставленная цель достигается тем, что в начале процесса создают условия для биосинтеза солей глюконовой кислоты: в посевную среду вводят кукурузный экстракт и минеральные соли, содержащие марганец, ферментацию ведут на глюкозе или глюкозосодержащем сиропе в режиме периодической, непрерывной или отъемно-доливной ферментации при поддержании pH от 5 до 7 и аэрации, не превышающей 0,5 объема воздуха на 1 объем питательной среды в мин. This goal is achieved by the fact that at the beginning of the process create conditions for the biosynthesis of gluconic acid salts: corn extract and mineral salts containing manganese are introduced into the inoculum, fermentation is carried out on glucose or glucose-containing syrup in the mode of periodic, continuous or detachable-refill fermentation while maintaining the pH from 5 to 7 and aeration not exceeding 0.5 volume of air per 1 volume of nutrient medium in min.

После наработки достаточного количества глюконата и окончании утилизации последней порции сахара около 9 частей ферментированного раствора вместе с биомассой вытесняют из реактора на стадию выделения и очистки глюконата, а к оставшейся культуре добавляют около 9 частей мелассного или сахарного сиропа, содержащего соли цинка, аэрацию увеличивают до значений, превышающих 0,5 объема воздуха на 1 объем среды в мин. После окончания утилизации сахара процесс прекращают и выделяют лимонную кислоту в чистом виде или в виде солей. After a sufficient amount of gluconate has been accumulated and the last portion of sugar has been disposed of, about 9 parts of the fermented solution together with the biomass are displaced from the reactor to the stage of gluconate separation and purification, and about 9 parts of molasses or sugar syrup containing zinc salts are added to the remaining culture, and aeration is increased to values exceeding 0.5 volume of air per 1 volume of medium per min. After the utilization of sugar, the process is stopped and citric acid is isolated in pure form or in the form of salts.

Для выделения и очистки глюконата отъемы и основной ферментированный раствор после первой фазы биосинтеза нагревают до 60-80oC, выдерживают 30 мин, доводят pH до 6,5-7,2. Биомассу отделяют, фильтрат обрабатывают активированным углем, фильтруют. Очищенный раствор упаривают в вакууме, медленно охлаждают. Выделившиеся кристаллы соли отделяют и сушат. Получают глюконаты реактивной, пищевой или фармакопейной чистоты с выходом по сахару на ферментации от 85 до 95%.To isolate and purify gluconate, weaning and the main fermented solution after the first phase of biosynthesis are heated to 60-80 o C, incubated for 30 minutes, adjusted pH to 6.5-7.2. The biomass is separated, the filtrate is treated with activated carbon, filtered. The purified solution is evaporated in vacuo, slowly cooled. The precipitated salt crystals are separated and dried. Get gluconates reactive, food or pharmacopoeial purity with a yield of sugar on fermentation from 85 to 95%.

Для выделения и очистки лимонной кислоты и ее солей после завершения второй фазы биосинтеза ферментированный раствор нагревают до 60-80oC и выдерживают 30 мин, осадок отделяют, фильтрат осветляют активированным углем. Очищенный раствор лимонной кислоты упаривают до содержания 700 - 800 г/л, постепенно охлаждают до 5-10oC. Выделившиеся кристаллы отделяют и сушат. Получают лимонную кислоту реактивной, пищевой или фармакопейной чистоты с выходом по сахару 80-90%.To isolate and purify citric acid and its salts after completion of the second phase of biosynthesis, the fermented solution is heated to 60-80 o C and incubated for 30 minutes, the precipitate is separated, the filtrate is clarified with activated carbon. The purified citric acid solution is evaporated to a content of 700-800 g / l, gradually cooled to 5-10 o C. The separated crystals are separated and dried. Citric acid of reactive, food or pharmacopoeial purity is obtained with a sugar yield of 80-90%.

При получении водорастворимых солей лимонной кислоты перед отделением осадка биомассы ферментированный раствор нейтрализуют соответствующим щелочным агентом до pH 6,5 -7,2, обрабатывают активированным углем, фильтруют, фильтрат упаривают в вакууме и кристаллизуют соль лимонной кислоты при постепенном охлаждении. Кристаллы отделяют и сушат. When preparing water-soluble salts of citric acid, before separating the biomass sediment, the fermented solution is neutralized with a suitable alkaline agent to a pH of 6.5 -7.2, treated with activated carbon, filtered, the filtrate is evaporated in vacuo and the citric acid salt crystallizes with gradual cooling. The crystals are separated and dried.

Труднорастворимые соли выделяют после отделения биомассы непосредственно при доведении pH ферментированного раствора до оптимальных значений и введении осадителя, осадок соли отделяют и промывают на фильтре до отрицательной реакции на сульфаты и хлориды, сушат. Получают соли лимонной кислоты реактивной, фармакопейной или пищевой чистоты. Sparingly soluble salts are isolated after separation of the biomass directly when the pH of the fermented solution is adjusted to the optimum values and a precipitant is added, the salt precipitate is separated and washed on the filter until it reacts negatively to sulfates and chlorides, and dried. Reactive, pharmacopoeial or food grade citric acid salts are obtained.

Предлагаемый способ реализован на полупромышленной установке следующим образом. The proposed method is implemented on a semi-industrial installation as follows.

В реактор объемом 100 л, снабженный мешалкой и системой подачи стерильного воздуха, вводят: 300 г глюкозы, 90 г кукурузного экстракта, 14 г сульфата магния, 4 г сульфата марганца, 15 г однозамещенного фосфата калия, 30 г диаммонийфосфата и 10 л артезианской воды. Доводят pH фосфорной кислотой до величин от 5 до 6. Стерилизуют при 125oC 30 мин, охлаждают до 36-38oC и засевают взвесью 0,5 г спор Asp. niger штамма Л 4.In a 100-liter reactor equipped with a stirrer and a sterile air supply system, 300 g of glucose, 90 g of corn extract, 14 g of magnesium sulfate, 4 g of manganese sulfate, 15 g of monosubstituted potassium phosphate, 30 g of diammonium phosphate and 10 l of artesian water are introduced. The pH was adjusted with phosphoric acid to 5 to 6. Sterilized at 125 ° C for 30 minutes, cooled to 36-38 ° C and inoculated with a suspension of 0.5 g of Asp spores. niger strain L 4.

Подращивание посевного материала ведут в течение 24 ч при 37-38oC, аэрации 0,1 - 0,5 объема воздуха на 1 объем среды в мин. Стерильно вводят 80 л сиропа глюкозы с содержанием 100-350 г/л. Биосинтез глюконата ведут при 34 - 36oC, аэрации около 0,1 объема воздуха на 1 объем среды в мин, поддерживая pH от 6 до 6,5 мелом, известью, раствором щелочи, соды, поташа или другим нейтрализующим агентом в зависимости от желаемого продукта реакции.Cultivation of seed is carried out for 24 hours at 37-38 o C, aeration of 0.1 - 0.5 volume of air per 1 volume of medium in min. Sterilized 80 l of glucose syrup with a content of 100-350 g / l. Gluconate biosynthesis is carried out at 34 - 36 o C, aeration of about 0.1 air volume per 1 volume of medium per min, maintaining the pH from 6 to 6.5 with chalk, lime, a solution of alkali, soda, potash or other neutralizing agent, depending on the desired reaction product.

После окончания утилизации глюкозы ферментацию ведут непрерывным или отъемно-доливным методом, руководствуясь результатами анализа остаточного сахара и глюконата и поддерживая pH соответствующими нейтрализующими агентами. После окончания утилизации последней порции сахара вытесняют на стадию выделения и очистки глюконата 75-80 л ферментированного раствора, взамен вводят 20 л стерильного сахарного раствора, содержащего 60 г/л сахарозы или 120 г/л мелассы, 2,5 г сульфата цинка, 15 г сульфата магния, 15 г однозамещенного фосфата калия, 15 г диаммонийфосфата. При аэрации 7 л/мин и температуре 36 - 37oC выдерживают 3 ч, после чего вводят 60 л стерильного раствора сахарозы или мелассы с концентрацией по сахару около 250 г/л. Постепенно в течение 24 ч увеличивают аэрацию до 45-50 л/мин. При такой аэрации и перемешивании сахароза утилизируется за 72 - 120 ч.After glucose utilization is completed, fermentation is carried out by a continuous or detachable-refill method, guided by the results of the analysis of residual sugar and gluconate and maintaining the pH with appropriate neutralizing agents. After utilization of the last portion of sugar, 75-80 l of the fermented solution is displaced to the stage of separation and purification of gluconate, 20 l of a sterile sugar solution containing 60 g / l of sucrose or 120 g / l of molasses, 2.5 g of zinc sulfate, 15 g are introduced magnesium sulfate, 15 g of monosubstituted potassium phosphate, 15 g of diammonium phosphate. With aeration of 7 l / min and a temperature of 36 - 37 o C, they stand for 3 hours, after which 60 l of a sterile solution of sucrose or molasses is introduced with a sugar concentration of about 250 g / l. Gradually, over the course of 24 hours, aeration is increased to 45-50 l / min. With such aeration and stirring, sucrose is utilized in 72 - 120 hours.

Пример 1
Получение глюконата и цитрата кальция (здесь и далее цитраты-соли лимонной кислоты) В реактор объемом 100 л загружают 300 г глюкозы, 90 г кукурузного экстракта, 14 г сульфата магния, 4 г сульфата марганца, 15 г однозамещенного фосфата калия, 30 г диаммонийфосфата и 10 л артезианской воды. Доводят до pH 5,3 фосфорной кислотой. Стерилизуют 30 мин при 125oC, охлаждают до 38oC и засевают взвесью 0,5 г спор Asp.niger штамма Л 4.
Example 1
Preparation of gluconate and calcium citrate (hereinafter citrate-salts of citric acid) 300 g of glucose, 90 g of corn extract, 14 g of magnesium sulfate, 4 g of manganese sulfate, 15 g of monosubstituted potassium phosphate, 30 g of diammonium phosphate are loaded into a 100 liter reactor 10 liters of artesian water. Adjust to pH 5.3 with phosphoric acid. Sterilized for 30 minutes at 125 ° C., cooled to 38 ° C. and inoculated with a suspension of 0.5 g of Asp.niger strain L 4 spores.

Подращивают посевной материал в течение 24 ч при следующем режиме аэрации:
- до 3 ч - 1,7 л/мин при работе мешалки 1 мин в течение каждого часа;
- с 3 до 6 ч - 3,5 л/мин, мешалку включают на постоянную работу;
- с 6 до 12 ч - 5 л/мин;
- с 12 до 24 ч - 7 л/мин.
Grow seed for 24 hours in the following aeration mode:
- up to 3 hours - 1.7 l / min during the operation of the mixer for 1 min for each hour;
- from 3 to 6 hours - 3.5 l / min, the mixer is switched on for continuous operation;
- from 6 to 12 hours - 5 l / min;
- from 12 to 24 hours - 7 l / min.

Стерильно вводят 80 л сиропа, содержащего 140 г/л глюкозы и 200 г негашеной извести. На весь период биосинтеза устанавливают аэрацию 7 л/мин, что соответствует соотношению 0,08 объема воздуха на 1 объем среды в мин, и поддерживают в течение всего биосинтеза температуру 35oC. Через каждые 3 ч отбирают пробу на анализ и при pH ниже 5,5 добавляют 200 г извести. При остаточной глюкозе 11 г/л пробы на анализ отбирают каждый час и при концентрации глюкозы 2,3 г/л первую фазу синтеза прекращают. Для этого 80 л ферментированного раствора вытесняют стерильным воздухом на стадию выделения и очистки глюконата кальция. Взамен вводят 20 л стерильного сахарного сиропа, содержащего 600 г сахарозы, 1200 г мелассы, 2,5 г сульфата цинка, 15 г сульфата магния, 15 г однозамещенного фосфата калия, 30 г диаммонийфосфата, 19 л артезианской воды. При аэрации 7 л/мин и перемешивании выдерживают 3 ч, после чего вводят еще 60 л сиропа, содержащего 250 г/л сахарозы. Увеличивают аэрацию в течение 6 ч до 20 л/мин через 12 ч - до 45 л/мин и ведут так далее биосинтез, поддерживая температуру 35oC, до 168 ч от начала посевной стадии и достижения концентрации сахарозы 4 г/л. Содержимое реактора нагревают до 80oC, выдерживают в течение 30 мин и передают раствор на стадию выделения.80 l of syrup containing 140 g / l glucose and 200 g of quicklime are sterilized. For the entire biosynthesis period, aeration of 7 l / min is established, which corresponds to a ratio of 0.08 air volumes per 1 medium volume per minute, and the temperature is maintained at 35 o C. throughout the entire biosynthesis. A sample is taken for analysis every 3 hours and at a pH below 5 5 add 200 g of lime. With a residual glucose of 11 g / L, samples are taken for analysis every hour and at a glucose concentration of 2.3 g / L, the first phase of the synthesis is stopped. For this, 80 l of the fermented solution is displaced with sterile air to the stage of separation and purification of calcium gluconate. Instead, 20 l of sterile sugar syrup containing 600 g of sucrose, 1200 g of molasses, 2.5 g of zinc sulfate, 15 g of magnesium sulfate, 15 g of monosubstituted potassium phosphate, 30 g of diammonium phosphate, 19 l of artesian water are injected. With aeration of 7 l / min and stirring, they stand for 3 hours, after which another 60 l of syrup containing 250 g / l of sucrose is introduced. Increase aeration over 6 hours to 20 l / min after 12 hours to 45 l / min and continue biosynthesis, maintaining a temperature of 35 o C, up to 168 hours from the beginning of the sowing stage and achieve a sucrose concentration of 4 g / l. The contents of the reactor are heated to 80 o C, incubated for 30 minutes and transfer the solution to the stage of selection.

Выделение глюконата кальция
Ферментированный раствор с первой фазы биосинтеза нагревают до 80oC и выдерживают 30 мин. Известью доводят pH до 6,5, нагревают 30 мин и фильтруют на нутч-фильтре от биомассы и осадка. Осадок промывают 20 л горячей обессоленной воды, присоединяя промывные воды к фильтрату. Осветляют фильтрат 800 г активированного угля, уголь отделяют на нутч-фильтре и промывают 10 л горячей обессоленной воды. Фильтрат и промывные воды упаривают в вакууме до концентрации глюконата кальция 210 г/л. Кристаллизуют в течение 24 ч при постепенном охлаждении до 20oC. Выпавшие кристаллы отделяют на центрифуге и сушат при 50oC. Получают 6842,5 г субстанции инъекционного глюконата кальция. Выход по сахару на ферментации 85%, на выделении 59,55%.
Isolation of Calcium Gluconate
The fermented solution from the first phase of biosynthesis is heated to 80 o C and incubated for 30 minutes Lime was adjusted to pH 6.5, heated for 30 minutes and filtered on a suction filter to remove biomass and sediment. The precipitate is washed with 20 l of hot demineralized water, adding wash water to the filtrate. The filtrate is clarified with 800 g of activated carbon, the charcoal is separated on a suction filter and washed with 10 l of hot demineralized water. The filtrate and washings were evaporated in vacuo to a calcium gluconate concentration of 210 g / l. Crystallized for 24 hours with gradual cooling to 20 ° C. The precipitated crystals were separated in a centrifuge and dried at 50 ° C. 6842.5 g of injectable calcium gluconate substance were obtained. The sugar yield on fermentation is 85%, and 59.55% is isolated.

Выделение цитрата кальция
Содержимое реактора со второй фазы процесса фильтруют от биомассы на нутч-фильтре. Осветляют фильтрат 800 г активированного угля. Уголь отфильтровывают и промывают 10 л обессоленной воды. Промывные воды и фильтрат нейтрализуют известью до pH 6,8, выдерживают 2 ч при 80oC, фильтруют на нутч-фильтре. Промывают горячей обессоленной водой осадок цитрата кальция на фильтре до отрицательной реакции промывных вод на сульфаты и хлориды. Осадок сушат при 60oC. Получают 16820 г цитрата кальция тетрагидрата реактивной чистоты с выходом по сахару на выделении 103,8%. Выход лимонной кислоты по сахару на ферментации 85%.
Calcium Citrate Release
The contents of the reactor from the second phase of the process are filtered from biomass on a suction filter. The filtrate is clarified with 800 g of activated carbon. The coal is filtered off and washed with 10 l of demineralized water. Wash water and the filtrate are neutralized with lime to a pH of 6.8, incubated for 2 hours at 80 o C, filtered on a suction filter. Washed with hot demineralized water the precipitate of calcium citrate on the filter until the washings react negatively to sulfates and chlorides. The precipitate is dried at 60 o C. Receive 16820 g of calcium citrate tetrahydrate reactive purity with a yield of sugar on the allocation of 103.8%. The sugar yield of citric acid in fermentation is 85%.

Пример 2
Получение глюконата кальция и лимонной кислоты
В реактор объемом 100 л загружают 300 г глюкозы, 90 г кукурузного экстракта, 14 г сульфата магния, 4 г сульфата марганца, 15 г двузамещенного фосфата калия, 30 г диаммонийфосфата и 10 л артезианской воды. Доводят pH до 5,0 фосфорной кислотой. Стерилизуют 30 мин при 125oC, охлаждают до 38oС и засевают взвесью 0,5 г спор Asp.niger штамма Л4.
Example 2
Obtaining calcium gluconate and citric acid
300 g of glucose, 90 g of corn extract, 14 g of magnesium sulfate, 4 g of manganese sulfate, 15 g of disubstituted potassium phosphate, 30 g of diammonium phosphate and 10 l of artesian water are loaded into a 100 l reactor. The pH was adjusted to 5.0 with phosphoric acid. They are sterilized for 30 minutes at 125 ° C, cooled to 38 ° C and inoculated with a suspension of 0.5 g of Asp.niger strain L4 spores.

Подращивают посевной материал в течение 24 ч при следующем режиме аэрации:
- до 3 ч -1,7 л/мин, при работе мешалки 1 мин в течение каждого часа;
- с 3 до 6 ч - 3,5 л/мин, мешалку включают на постоянную работу;
- с 6 до 12 ч - 5 л/мин;
- с 12 до 24 ч - 7 л/мин.
Grow seed for 24 hours in the following aeration mode:
- up to 3 hours -1.7 l / min, during operation of the mixer 1 minute for each hour;
- from 3 to 6 hours - 3.5 l / min, the mixer is switched on for continuous operation;
- from 6 to 12 hours - 5 l / min;
- from 12 to 24 hours - 7 l / min.

Стерильно вводят 80 л сиропа с содержанием глюкозы 140 г/л и 200 г негашеной извести. На весь период биосинтеза устанавливают аэрацию 7 л/мин и поддерживают температуру 35oC. Через каждые 3 ч отбирают пробы на анализ и при pH ниже 5,5 добавляют 200 г негашеной извести. При остаточной глюкозе 3 г/л процесс переводят в режим отъемов и доливов. Для этого 10 л ферментированного раствора вытесняют на стадию выделения и вводят взамен 19 л стерильного глюкозного сиропа с концентрацией глюкозы 100 г/л. Через 3 ч, когда концентрация остаточной глюкозы становится 2,5 г/л, вновь делают отъем 10 л ферментированного раствора и долив 10 л сиропа глюкозы, одновременно вводят по 200 г негашеной извести. Таким образом ведут процесс до 75 ч от начала посевной стадии, введя в общей сложности 80 л сиропа и сделав отъем 80 л ферментированного раствора. После этого 80 л ферментированного раствора вытесняют стерильным воздухом на стадию выделения и вводят взамен 20 л сахарного раствора, содержащего: 600 г сахарозы, 1200 г мелассы, 2,5 г сульфата цинка, 15 г сульфата магния, 15 г однозамещенного фосфата калия, 30 г диаммонийфосфата, 19 л артезианской воды. Выдерживают 3 ч при аэрации 7 л/мин, после чего вводят еще 60 л сахарного сиропа, содержащего 250 г/л сахарозы. Увеличивают аэрацию до 20 л/мин в течение 6 ч, затем после 12 ч до 45 л/мин и продолжают в этом режиме процесс, поддерживая температуру 35oC, до 219 ч с момента начала выращивания. При концентрации остаточного сахара 3,2 г/л содержимое реактора нагревают до 60oC, выдерживают в течение 30 мин и передают на выделение.80 l of syrup with a glucose content of 140 g / l and 200 g of quicklime are sterilized. For the entire biosynthesis period, aeration of 7 l / min is established and the temperature is maintained at 35 ° C. Every 3 hours samples are taken for analysis and 200 g quicklime is added at a pH below 5.5. With residual glucose of 3 g / l, the process is transferred to the mode of weaning and topping up. For this, 10 l of the fermented solution is displaced to the isolation step and 19 l of sterile glucose syrup with a glucose concentration of 100 g / l is introduced instead. After 3 hours, when the concentration of residual glucose becomes 2.5 g / l, 10 l of the fermented solution are again weaned and topped up with 10 l of glucose syrup, 200 g of quicklime are simultaneously introduced. Thus, the process is conducted up to 75 hours from the beginning of the sowing stage, introducing a total of 80 l of syrup and weaning 80 l of the fermented solution. After that, 80 l of the fermented solution is displaced with sterile air to the isolation stage and 20 l of sugar solution is introduced instead, containing: 600 g of sucrose, 1200 g of molasses, 2.5 g of zinc sulfate, 15 g of magnesium sulfate, 15 g of monosubstituted potassium phosphate, 30 g diammonium phosphate, 19 l of artesian water. Withstand 3 hours with aeration of 7 l / min, after which another 60 l of sugar syrup containing 250 g / l of sucrose is introduced. Increase aeration to 20 l / min for 6 hours, then after 12 hours to 45 l / min and continue in this mode the process, maintaining the temperature of 35 o C, up to 219 hours from the start of cultivation. At a concentration of residual sugar of 3.2 g / l, the contents of the reactor are heated to 60 o C, incubated for 30 minutes and transferred to selection.

Выделение глюконата кальция
Для выделения глюконата кальция ферментированный раствор с первой фазы биосинтеза нагревают до 65oC и выдерживают в течение 30 мин. Доводят известью до pH 6,7, фильтруют от осадка на нутч-фильтре, осадок промывают 50 л горячей обессоленной воды. Промывные воды и фильтрат осветляют 2000 г активированного угля, уголь промывают 10 л обессоленной воды. Промывные воды и фильтрат упаривают в вакууме до концентрации глюконата кальция 210 г/л. Кристаллизуют в течение 24 ч, охлаждая до 20oC. Кристаллы отделяют на центрифуге и сушат при 50oC. Получают 11700 г субстанции инъекционного глюконата кальция. Выход по сахару на ферментации 89%, на выделении 60%.
Isolation of Calcium Gluconate
To isolate calcium gluconate, the fermented solution from the first phase of biosynthesis is heated to 65 o C and incubated for 30 minutes Lime was adjusted to pH 6.7, filtered from the precipitate on a suction filter, the precipitate was washed with 50 l of hot demineralized water. Wash water and the filtrate clarify 2000 g of activated carbon, coal is washed with 10 l of demineralized water. Wash water and the filtrate are evaporated in vacuo to a concentration of calcium gluconate 210 g / L. Crystallized for 24 h, cooling to 20 o C. the Crystals are separated in a centrifuge and dried at 50 o C. Receive 11,700 g of substance injectable calcium gluconate. Sugar yield on fermentation 89%, on the allocation of 60%.

Выделение лимонной кислоты
Ферментированный раствор со второй фазы биосинтеза фильтруют на нутч-фильтре, промывают водой, добавляют 800 г активированного угля и фильтруют. Промывают осадок 5 л обессоленной воды. Фильтрат и промывные воды упаривают в вакууме до содержания лимонной кислоты 800 г/л. Кристаллизуют при охлаждении до 5oC в течение 8 ч. Кристаллы отделяют на центрифуге и сушат при 50oC. Получают 10530 г реактивной лимонной кислоты с выходом по сахару на ферментации 85,2%, на выделении 65%.
Isolation of Citric Acid
The fermented solution from the second phase of biosynthesis is filtered on a suction filter, washed with water, 800 g of activated carbon are added and filtered. The precipitate is washed with 5 l of demineralized water. The filtrate and washings were evaporated in vacuo to a citric acid content of 800 g / l. Crystallized upon cooling to 5 ° C. for 8 hours. The crystals were separated in a centrifuge and dried at 50 ° C. 10,530 g of reactive citric acid were obtained with a yield of 85.2% in sugar on fermentation, 65% being isolated.

Пример 3
Получение глюконата и цитрата натрия В реактор объемом 100 л загружают 300 г глюкозы, 90 г кукурузного экстракта, 14 г сульфата магния, 4 г сульфата марганца 15 г однозамещенного фосфата калия, 30 г диаммонийфосфата и 10 л артезианской воды. Доводят до pH 5,2 фосфорной кислотой. Стерилизуют 30 мин при 125oC, охлаждают до 38oC и засевают взвесью 0,5 г спор Asp.niger штамма Л4. Подращивают посевной материал в течение 24 ч при следующем режиме аэрации:
- до 3 ч - 1,7 л/мин, мешалку включают на 1 мин в течение каждого часа;
- с 3 до 6 ч -3,5 л/мин, мешалку включают на постоянную работу;
- с 6 до 12 ч - 5 л/мин;
- с 12 до 24 ч - 7 л/мин.
Example 3
Preparation of Gluconate and Sodium Citrate 300 g of glucose, 90 g of corn extract, 14 g of magnesium sulfate, 4 g of manganese sulfate, 15 g of monosubstituted potassium phosphate, 30 g of diammonium phosphate and 10 l of artesian water are charged into a 100 liter reactor. Adjust to pH 5.2 with phosphoric acid. They are sterilized for 30 minutes at 125 ° C, cooled to 38 ° C and inoculated with a suspension of 0.5 g of Asp.niger strain L4 spores. Grow seed for 24 hours in the following aeration mode:
- up to 3 hours - 1.7 l / min, the stirrer is turned on for 1 min for every hour;
- from 3 to 6 hours -3.5 l / min, the mixer is switched on for continuous operation;
- from 6 to 12 hours - 5 l / min;
- from 12 to 24 hours - 7 l / min.

Стерильно вводят 80 л сиропа, содержащего 300 г/л глюкозы. На весь период биосинтеза устанавливают аэрацию 7 л/мин. pH поддерживают равным 6,5 25% раствором NaOH. Через каждые 3 ч отбирают пробы на анализ, определяют остаточную глюкозу, pH, концентрацию глюконата натрия. Если pH становится ниже 6,5, добавляют 200 г 25% раствора NaOH. При достижении содержания глюкозы 2,3 г/л 80 л ферментированного раствора вытесняют на стадию выделения. Взамен вводят 20 л стерильного сахарного сиропа, содержащего 600 г сахарозы, 1200 г мелассы, 2,5 г сульфата цинка, 15 г сульфата магния, 15 г однозамещенного фосфата калия, 30 г диаммонийфосфата, 19 л артезианской воды. При аэрации 7 л/мин и перемешивании выдерживают 3 ч, после чего вводят еще 60 л сахарного сиропа с концентрацией 250 г/л. Увеличивают аэрацию в течение 6 ч до 20 л/мин, после 12 ч - до 45 л/мин и ведут так далее биосинтез, поддерживая температуру 35oC, до 184 ч от начала посевной стадии и остаточного сахара 3,2 г/л. После этого содержимое реактора нагревают до 75oC, выдерживают в течение 30 мин и передают на стадию выделения.80 l of syrup containing 300 g / l glucose are sterilely administered. For the entire period of biosynthesis, aeration of 7 l / min is established. The pH is maintained at 6.5 with a 25% NaOH solution. Every 3 hours, samples are taken for analysis, residual glucose, pH, and the concentration of sodium gluconate are determined. If the pH drops below 6.5, add 200 g of a 25% NaOH solution. Upon reaching a glucose content of 2.3 g / l, 80 l of the fermented solution is displaced to the isolation step. Instead, 20 l of sterile sugar syrup containing 600 g of sucrose, 1200 g of molasses, 2.5 g of zinc sulfate, 15 g of magnesium sulfate, 15 g of monosubstituted potassium phosphate, 30 g of diammonium phosphate, 19 l of artesian water are injected. With aeration of 7 l / min and stirring, they stand for 3 hours, after which another 60 l of sugar syrup with a concentration of 250 g / l are introduced. Increase aeration over 6 hours to 20 l / min, after 12 hours - up to 45 l / min and continue biosynthesis, maintaining a temperature of 35 o C, up to 184 hours from the start of the sowing stage and residual sugar of 3.2 g / l. After that, the contents of the reactor are heated to 75 o C, incubated for 30 minutes and transferred to the stage of selection.

Выделение глюконата натрия
Ферментированный раствор с первой фазы биосинтеза нагревают до 60oC, выдерживают 30 мин, фильтруют от биомассы на нутч-фильтре, доводят pH раствором NaOH до 7,2, осветляют 800 г активированного угля, снова фильтруют на нутч-фильтре, промывают 5 л обессоленной воды. Фильтрат и промывные воды упаривают в вакууме до содержания глюконата натрия 470 г/л. Кристаллизуют в течение 8 ч при охлаждении до 5oC. Получают 14587 г глюконата натрия реактивной чистоты с выходом по сахару на ферментации 86,5%, на выделении 60%.
Isolation of Sodium Gluconate
The fermented solution from the first phase of biosynthesis is heated to 60 ° C, held for 30 minutes, filtered from biomass on a suction filter, adjusted to pH 7.2 with NaOH, clarified with 800 g of activated carbon, filtered again on a suction filter, washed with 5 l of demineralized water. The filtrate and washings were evaporated in vacuo to a sodium gluconate content of 470 g / l. Crystallized for 8 hours upon cooling to 5 ° C. 14587 g of reactive purity sodium gluconate were obtained with a yield of 86.5% in sugar on fermentation, 60% in isolation.

Выделение цитрата натрия
Содержимое реактора со второй фазы биосинтеза фильтруют на нутч-фильтре от биомассы, доводят pH до 6,9 раствором NaOH и осветляют 800 г активированного угля. Уголь отделяют на нутч- фильтре, промывают 5 л обессоленной воды. Промывные воды и фильтрат упаривают в вакууме до содержания цитрата натрия 420 г/л, кристаллизуют в течение 6 ч при охлаждении до 5oC. Кристаллы отделяют на центрифуге, сушат при 60oC.
Isolation of sodium citrate
The contents of the reactor from the second phase of biosynthesis are filtered on a suction filter from biomass, the pH is adjusted to 6.9 with a NaOH solution, and 800 g of activated carbon are clarified. Coal is separated on a suction filter, washed with 5 l of demineralized water. The washings and the filtrate are evaporated in vacuo to a sodium citrate content of 420 g / l, crystallized for 6 hours while cooling to 5 ° C. The crystals are separated in a centrifuge, dried at 60 ° C.

Получают 10600 г цитрата натрия реактивной чистоты с выходом по сахару на ферментации 85,2%, на выделении 65,4%. Receive 10,600 g of sodium citrate of reactive purity with a yield of sugar on the fermentation of 85.2%, on the allocation of 65.4%.

Количественные данные по приведенным примерам, а также сравнительные характеристики с известным способом приведены в таблице. Quantitative data on the above examples, as well as comparative characteristics with a known method are shown in the table.

Технико-экономическая эффективность заявляемого способа
Специалистам известно [4], что Asp.niger можно эксплуатировать с высокой эффективностью в течение 10-12 суток. Максимальной продуктивности культура достигает на 3-8 сутки.
Technical and economic effectiveness of the proposed method
Specialists know [4] that Asp.niger can be operated with high efficiency for 10-12 days. The maximum productivity of the culture reaches 3-8 days.

Фиг. 1 иллюстрирует этот факт зависимостями: изменения суммарной кислотности (1), массовой концентрации лимонной кислоты (2), концентрации сахара (3) от времени ферментации. FIG. 1 illustrates this fact by the dependencies: changes in total acidity (1), mass concentration of citric acid (2), sugar concentration (3) versus fermentation time.

В связи с этим заявляемый способ сочетает в себе наращивание эффективности биомассы до 2-4 суток в период биосинтеза глюконатов и высокоактивный синтез лимонной кислоты с 3 по 8 сутки. In this regard, the claimed method combines increasing the efficiency of biomass up to 2-4 days during the biosynthesis of gluconates and highly active synthesis of citric acid from 3 to 8 days.

Это помимо экономии спорового материала (согласно данным табл. расход спор на кг товарного продукта в 2-3,5 раза ниже по заявляемому способу). This is in addition to saving spore material (according to the table. Spore consumption per kg of commercial product is 2-3.5 times lower according to the claimed method).

Кроме того, необходимо принять во внимание снижение по заявляемому способу в 2-3,5 раза доли непродуктивной посевной стадии процесса, что влечет за собой экономию энергоресурсов, сырья и материалов. In addition, it is necessary to take into account the reduction by the present method of 2-3.5 times the proportion of the unproductive sowing stage of the process, which entails the saving of energy resources, raw materials and materials.

Несмотря на богатый потенциал культуры, крупные микробиологические предприятия-производители глюконатов или лимонной кислоты ориентированы на монопродукт и страдают от неравномерного сбыта продукции. Заводы лимонной кислоты имеют максимальный сбыт в летний период. Производство глюконатов меньше по объемам выпускаемой продукции, из-за чего себестоимость производства высокая. Despite the rich potential of culture, large microbiological enterprises producing gluconates or citric acid are oriented toward a single product and suffer from uneven marketing of products. Citric acid plants have maximum sales in the summer. Gluconate production is less in terms of output, which is why production costs are high.

Необходимо также учесть, что микробиологическое производство практически не может совмещать разные культуры на одних производственых площадях, так как это приводит к взаимному инфицированию. В данном случае предложение рассматривает расширение ассортимента выпускаемой продукции лишь за счет использования возможностей одной и той же культуры В осенне-зимне-весенний период заводы лимонной кислоты могут производить глюконаты и цитраты, сроки хранения которых от 3 до 10 лет, в отличие от кратковременной сохранности лимонной кислоты (срок годности пищевой лимонной кислоты моногидрата 6 месяцев). Производства глюконатов, глюконовой кислоты и глюконолактонов могут расширить ассортимент за счет выпуска лимонной кислоты и ее солей в летнее время
По заявляемому способу после окончания первой фазы биосинтеза в среде остается после подготовки к следующей фазе около 10 г/л глюконата. Этот глюконат не является побочным продуктом и отходом в синтезе лимонной кислоты, так как служит метаболитом в этом синтезе и практически полностью утилизируется к концу процесса (фиг. 2, зависимость 1; зависимости 2,3,4 отражают, соответственно, изменение концентраций щавелевой, яблочной, янтарной кислот во время биосинтеза). Содержание лимонной кислоты в сумме кислот биосинтеза составляет 96-99% [4].
It should also be taken into account that microbiological production practically cannot combine different cultures in the same production areas, as this leads to mutual infection. In this case, the proposal considers expanding the range of products only by using the capabilities of the same culture. In the autumn-winter-spring period, citric acid plants can produce gluconates and citrates, the shelf life of which is from 3 to 10 years, in contrast to the short-term preservation of citric acid. acids (shelf life of food citric acid monohydrate 6 months). The production of gluconates, gluconic acid and gluconolactones can expand the range due to the release of citric acid and its salts in the summer
According to the claimed method, after the end of the first phase of biosynthesis, about 10 g / l of gluconate remains in the medium after preparation for the next phase. This gluconate is not a by-product and waste in the synthesis of citric acid, since it serves as a metabolite in this synthesis and is almost completely utilized by the end of the process (Fig. 2, dependence 1; dependences 2,3,4 reflect, respectively, changes in the concentrations of oxalic, malic succinic acid during biosynthesis). The content of citric acid in the amount of biosynthesis acids is 96-99% [4].

В начальной стадии биосинтеза вводят соль марганца и кукурузный экстракт, так как известно [3, 5], что в концентрации от 0,0001 до 0,0004 мас.% марганец резко снижает скорость образования лимонной кислоты. При переходе ко второй фазе процесса, биосинтезу лимонной кислоты, по заявляемому способу предусмотрено разбавление за счет отъемов и доливов в 10-30 раз и приведение концентрации марганца к оптимальной для биосинтеза лимонной кислоты. In the initial stage of biosynthesis, manganese salt and corn extract are introduced, since it is known [3, 5] that in a concentration of 0.0001 to 0.0004 wt.% Manganese sharply reduces the rate of formation of citric acid. When moving to the second phase of the process, the biosynthesis of citric acid, the claimed method provides for dilution by weaning and adding 10-30 times and bringing the concentration of manganese to the optimum for the biosynthesis of citric acid.

Следует также отметить известное своеобразие глюконата кальция, позволяющее вести процесс при концентрациях его, превышающих насыщение. Это соединение трудно растворяется при 20 - 30oC, но легко образует пересыщенные растворы. Растворимость глюконата кальция при 30oC около 40 г/л [4], то есть выше этой концентрации соль должна находиться в осадке, что может создавать сложности в массообмене. Практически же этого не происходит. Фиг. 3 иллюстрирует, что при концентрации ниже 100 г/л глюконат кальция в условиях биосинтеза находится в растворе. Об этом свидетельствует равномерный, закономерный ход зависимостей 1-4 содержания препарата в культуральной жидкости от времени ферментации. Лишь после 106-110 г/л результаты анализа становятся недостоверными, что объясняется присутствием в анализируемой пробе большего или меньшего количества осадка глюконата.It should also be noted the well-known peculiarity of calcium gluconate, which allows the process to be conducted at concentrations exceeding saturation. This compound is difficult to dissolve at 20 - 30 o C, but easily forms supersaturated solutions. The solubility of calcium gluconate at 30 o C is about 40 g / l [4], that is, above this concentration, the salt must be in the sediment, which can create difficulties in mass transfer. In practice, this does not happen. FIG. 3 illustrates that at a concentration below 100 g / l, calcium gluconate is in solution under biosynthesis conditions. This is evidenced by the uniform, regular course of the dependences 1-4 of the drug content in the culture fluid from the time of fermentation. Only after 106-110 g / l the analysis results become unreliable, which is explained by the presence in the analyzed sample of a greater or lesser amount of gluconate precipitate.

Claims (7)

1. Способ получения солей глюконовой кислоты и лимонной кислоты, состоящий в выращивании посевного материала из спор Aspergillus niger в присутствии ростовых веществ, источников углеводов и минеральных солей, содержащих марганец или цинк, последующей ферментации при поддержании определенного значения pH, аэрации, выделении и очистке получаемых продуктов, отличающийся тем, что в течение одного технологического цикла, с использованием одного штамма Asp. niger, одной порции спор и одного и того же технологического оборудования получают как соли глюконовой кислоты, так и лимонную кислоту в чистом виде или в виде солей, либо тот или иной продукт в зависимости от потребностей производства путем ведения ферментации в присутствии одного ростового вещества, источника углеводов и минеральной соли с переходом после отъема на другой источник углеводов и минеральную соль, изменяя при этом условия процесса, а именно pH среды и режим аэрации. 1. A method of producing salts of gluconic acid and citric acid, which consists in growing seed from Aspergillus niger spores in the presence of growth substances, sources of carbohydrates and mineral salts containing manganese or zinc, followed by fermentation while maintaining a certain pH value, aeration, isolation and purification obtained products, characterized in that during one technological cycle, using one strain Asp. niger, one portion of spores and the same technological equipment receive both gluconic acid salts, and citric acid in pure form or in the form of salts, or one or another product, depending on production needs, by fermentation in the presence of one growth substance, source carbohydrates and mineral salt with the transition after weaning to another source of carbohydrates and mineral salt, changing the process conditions, namely the pH of the medium and the aeration mode. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в начале процесса создают условия для получения солей глюконовой кислоты: в посевную среду вводят кукурузный экстракт и минеральную соль, содержащие марганец, процесс ведут на глюкозе или глюкозосодержащем сиропе в режиме периодической, непрерывной или отъемно-доливной ферментации при поддержании pH 5 - 7 и аэрации, не превышающей 0,5 объема воздуха на 1 объем питательной среды в мин. 2. The method according to claim 1, characterized in that at the beginning of the process create conditions for the preparation of gluconic acid salts: corn extract and mineral salt containing manganese are introduced into the seed medium, the process is carried out on glucose or glucose-containing syrup in a batch, continuous or detachable mode -dolving fermentation while maintaining a pH of 5 - 7 and aeration not exceeding 0.5 volume of air per 1 volume of nutrient medium in min. 3. Способ по пп.1 и 2, отличающийся тем, что после наработки достаточного количества глюконата и окончании утилизации сахара около 9 частей ферментированного раствора с биомассой вытесняют из реактора на стадию выделения и очистки глюконата, а к оставшейся части добавляют около 9 частей мелассного или сахарного раствора, содержащего соли цинка, аэрацию наращивают до значений, превышающих 0,5 объема воздуха на 1 объем среды в мин, после окончания утилизации сахара биосинтез прекращают. 3. The method according to claims 1 and 2, characterized in that after the accumulation of a sufficient amount of gluconate and the end of sugar utilization, about 9 parts of the fermented solution with biomass are displaced from the reactor to the stage of separation and purification of gluconate, and about 9 parts of molasses are added to the remaining part sugar solution containing zinc salts, aeration is increased to values exceeding 0.5 volume of air per 1 volume of medium per min, after the utilization of sugar biosynthesis is stopped. 4. Способ по пп.1 - 3, отличающийся тем, что для получения глюконатов отъемы и основной ферментированный раствор после первой фазы биосинтеза нагревают до 60 - 80oС, выдерживают 30 мин, доводят до pH 6,5 - 7,2, отделяют осадок, осветляют активированным углем, фильтруют, фильтрат упаривают в вакууме и кристаллизуют при охлаждении, кристаллы отделяют и сушат.4. The method according to claims 1 to 3, characterized in that to obtain gluconates, weeds and the main fermented solution after the first phase of biosynthesis are heated to 60 - 80 o C, incubated for 30 minutes, adjusted to pH 6.5 - 7.2, separated the precipitate was clarified with activated carbon, filtered, the filtrate was evaporated in vacuo and crystallized upon cooling, the crystals were separated and dried. 5. Способ по пп.1 - 4, отличающийся тем, что для получения лимонной кислоты ферментированный раствор после второй фазы биосинтеза нагревают до 60 - 80oС, выдерживают 30 мин, отделяют осадок, осветляют активированным углем, фильтруют, фильтрат упаривают в вакууме, кристаллизуют при охлаждении, кристаллы отделяют и сушат.5. The method according to claims 1 to 4, characterized in that to obtain citric acid, the fermented solution after the second phase of biosynthesis is heated to 60 - 80 o C, incubated for 30 minutes, the precipitate is separated, clarified with activated carbon, filtered, the filtrate is evaporated in vacuum, crystallize upon cooling, the crystals are separated and dried. 6. Способ по пп.1 - 5, отличающийся тем, что при получении водорастворимых цитратов ферментированный раствор нейтрализуют соответствующим агентом до pH 6,5 - 7,2, фильтруют, фильтрат упаривают в вакууме и кристаллизуют при охлаждении, кристаллы отделяют и сушат. 6. The method according to claims 1 to 5, characterized in that upon receipt of water-soluble citrates, the fermented solution is neutralized with an appropriate agent to a pH of 6.5 - 7.2, filtered, the filtrate is evaporated in vacuum and crystallized by cooling, the crystals are separated and dried. 7. Способ по пп.1 - 5, отличающийся тем, что для получения труднорастворимых цитратов биомассу отделяют, фильтрат доводят соответствующим агентом до оптимальных значений pH, выпавший осадок отделяют, промывают до отсутствия в промывных водах сульфатов и хлоридов и сушат. 7. The method according to claims 1 to 5, characterized in that in order to obtain sparingly soluble citrates, the biomass is separated, the filtrate is adjusted with an appropriate agent to optimal pH values, the precipitate formed is separated, washed to the absence of sulfates and chlorides in the washings and dried.
RU98100487A 1998-01-06 1998-01-06 Method of gluconic acid salts and citric acid producing RU2132878C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU98100487A RU2132878C1 (en) 1998-01-06 1998-01-06 Method of gluconic acid salts and citric acid producing

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU98100487A RU2132878C1 (en) 1998-01-06 1998-01-06 Method of gluconic acid salts and citric acid producing

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2132878C1 true RU2132878C1 (en) 1999-07-10

Family

ID=20201090

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU98100487A RU2132878C1 (en) 1998-01-06 1998-01-06 Method of gluconic acid salts and citric acid producing

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2132878C1 (en)

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
1. Воробьева Л.И. Промышленная микробиология.-М.; МГУ, с.189-230. 2. *
3. Технологическая инструкция по производству пищевой лимонной кислоты.-Л.: 1970. 4. Смирнов В.А. Пищевые кислоты.-М.: 1983, с.75-100. 5. Промышленная микробиология./Под ред. Егорова Н.С.-М., с.515. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101046905B1 (en) Method for obtaining basic amino acid hydrochloride crystals
US10590448B2 (en) Production of galacto-oligosaccharides
US5541090A (en) Process for production of L-aspartic acid
IE47250B1 (en) Process for the continuous isomerisation of sucrose to isomaltulose with the aid of micro-organisms
KR100857215B1 (en) Method for preparing highly pure gamma;-amino butyric acid using enzymic reaction
RU2132878C1 (en) Method of gluconic acid salts and citric acid producing
US2326986A (en) Process for the production of fumaric acid
FR2635334A1 (en) PROCESS FOR THE PRODUCTION OF LACTIC ACID BY FERMENTATION
US3099604A (en) Method of producing l-threonine by fermentation
US4734368A (en) Process for the bioconversion of fumarate to L-malate
US5874262A (en) Microbiological process for the preparation of (S,S)-N,N'-ethylenediaminedisuccinic acid
CN112481322A (en) High-efficiency fermentation production process of threonine
CN109852649A (en) A kind of method of bioconversion lignocellulose biomass synthesis 1,6- diphosphofructose
RU2125607C1 (en) Continuous method of producing citric acid and its salts
Kundu et al. Calcium gluconate production by a nonconventional fermentation method
US4054489A (en) Method of preparing l-glutamic acid and its sodium salt
US3206506A (en) Separation of acetylglutamine
Cochrane Commercial production of acids by fungi
JP2912728B2 (en) Method for producing kojic acid
JPS63258586A (en) Production of pyruvic acid by fermentation
EA003211B1 (en) Method of obtaining of citric acid and its salts thereof by means of periodical continuous fermentation of fungus aspergillus niger
SU859441A1 (en) Method of producing citric acid
US3121668A (en) Method for the production of 1-glutamic acid
US3369975A (en) Method for the fermentative synthesis of 5'-uridylic acid
SU1221241A1 (en) Method of producing citric acid by submerged method