RU2130717C1 - Method of evaluating state of ichthyological objects - Google Patents

Method of evaluating state of ichthyological objects Download PDF

Info

Publication number
RU2130717C1
RU2130717C1 RU97114249/13A RU97114249A RU2130717C1 RU 2130717 C1 RU2130717 C1 RU 2130717C1 RU 97114249/13 A RU97114249/13 A RU 97114249/13A RU 97114249 A RU97114249 A RU 97114249A RU 2130717 C1 RU2130717 C1 RU 2130717C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
fish
solution
state
staining
blue
Prior art date
Application number
RU97114249/13A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
В.Н. Воронин
О.Н. Юнчис
Р.А. Куденцова
Ю.А. Стрелков
А.М. Лопухина
Н.Б. Чернышева
Original Assignee
Государственный научно-исследовательский институт озерного и речного рыбного хозяйства
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Государственный научно-исследовательский институт озерного и речного рыбного хозяйства filed Critical Государственный научно-исследовательский институт озерного и речного рыбного хозяйства
Priority to RU97114249/13A priority Critical patent/RU2130717C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2130717C1 publication Critical patent/RU2130717C1/en

Links

Classifications

    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02ATECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A40/00Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/80Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
    • Y02A40/81Aquaculture, e.g. of fish

Landscapes

  • Farming Of Fish And Shellfish (AREA)

Abstract

FIELD: ichthyology, in particular, express evaluation of state of fish during lifelong mass inspection. SUBSTANCE: method involves placing group of fish withdrawn from fish-rearing pond, fish tank or natural pond for inspection into preliminarily prepared solution of blue trypan dye used in concentration of 250-500 mg/l; holding fish in solution for 1.5-2.0 min; removing fish into white bottom vessel filled with pure water; performing visual evaluation of nature of skin and/or gill color; considering specimens with nonuniform and/or very intensive uniform coloring as defective and adapted for subsequent ICHTHYOLOGICAL inspection; removing remaining fish of this group into solution of blue methylene dye used in concentration of 250-500 mg/l; repeating above mentioned operations. Only one of mentioned dyes may be used for evaluating the state of group of fish. Nonuniform skin and/or gill coloring and/or most intensive uniform coloring are acquired only by specimens in unfavorable state. EFFECT: increased efficiency by obtaining precise data.

Description

Изобретение относится к рыбному хозяйству, а именно к экспресс-оценке состояния рыб при их массовом прижизненном обследовании в рыбоводных хозяйствах или естественных водоемах. The invention relates to fisheries, and in particular to an express assessment of the condition of fish during their mass in vivo examination in fish farms or natural reservoirs.

Уровень техники: Известны некоторые способы экспрессной оценки состояния рыб. Экспрессная оценка состояния рыб в результате влияния токсикантов возможна при осуществлении способа контроля воды на токсичность согласно а. с. СССР N 1140729, A 01 K 61/00, 1985. Токсичность воды определяют путем оценки состояния жаберного аппарата карповых рыб. У рыб исследуют состояние респираторных складок жаберного лепестка. Предварительно устанавливают среднее значение физиологической нормы ширины апикальных концов и при обследовании это значение сравнивают со средней шириной апикальных концов пораженных складок, и в зависимости от отклонения этого значения от физиологической нормы и процентного отношения пораженных складок к их общему числу оценивают состояние рыб, по которому судят о токсичности среды. Особенностью этого способа является то, что он позволяет оценить состояние рыб только в результате воздействия токсикантов и не является прижизненным. Непосредственное его использование для оценки состояния рыб в результате влияния на них других биотических и абиотических факторов невозможно. BACKGROUND OF THE INVENTION Certain methods for the rapid assessment of fish status are known. An express assessment of the state of fish as a result of the influence of toxicants is possible when implementing the method of controlling water for toxicity according to a. with. USSR N 1140729, A 01 K 61/00, 1985. The toxicity of water is determined by assessing the state of the branchial apparatus of carp fish. In fish, the state of the respiratory folds of the gill lobe is examined. The average value of the physiological norm of the width of the apical ends is preliminarily established, and during examination this value is compared with the average width of the apical ends of the affected folds, and depending on the deviation of this value from the physiological norm and the percentage of the affected folds to their total number, the state of the fish is evaluated, according to which toxicity of the environment. A feature of this method is that it allows you to assess the condition of fish only as a result of exposure to toxicants and is not intravital. Its direct use for assessing the state of fish as a result of the influence of other biotic and abiotic factors on them is impossible.

Известен экспресс-способ прижизненной оценки состояния рыб по величине различия температуры тела рыбы и температуры воды (А.с. СССР N1194342, A 01 K 61/00, 1985). Согласно этому способу предварительно устанавливают эталонную зависимость разности температуры тела здоровых рыб и сезонной температуры воды для условий естественного обитания. При обследовании состояния рыб измеряют температуру воды в месте обитания рыб и температуру тела исследуемых рыб и сравнивают полученный результат с эталонным для данного вида, возраста рыб и сезона года. Оценку состояния рыб производят по совпадению полученных результатов с эталоном или по его отклонению. Однако, этот способ требует применения высокоточных точечных электронных термометров и соответствующих измерительных приборов, которые достаточно дороги и не всегда доступны рыбоводным предприятиям. Недостатком способа является также то, что он применим к отдельным особям и не применим к рыбам на ранних стадиях развития, т.е. к личинкам и малькам. The express method is known for the intravital assessment of the state of fish by the difference in the temperature of the body of the fish and the temperature of the water (A.S. USSR N1194342, A 01 K 61/00, 1985). According to this method, the reference dependence of the difference in the temperature of the body of healthy fish and the seasonal temperature of the water for natural living conditions is pre-established. When examining the state of fish, the water temperature in the habitat of the fish and the body temperature of the studied fish are measured and the result obtained is compared with the reference for this species, age of the fish and season of the year. Assessment of the state of fish is made by the coincidence of the obtained results with the standard or by its deviation. However, this method requires the use of high-precision point electronic thermometers and appropriate measuring instruments, which are quite expensive and not always available to fish farms. The disadvantage of this method is that it is applicable to individual individuals and is not applicable to fish in the early stages of development, i.e. to larvae and fry.

В ихтиологии и рыбоводстве известно применение органических красителей, где они, в основном, используются для мечения рыб или их лечения. Они широко применяются в медико-биологических исследованиях. В частности, раствор метиленового синего в зависимости от концентрации и экспозиции используют для выявления нервной системы в целостном организме, при изучении изолированных тонких тканевых мембран и пленок, клеток в культуре тканей, одноклеточных организмов (см. Г.И.Роскин "Микроскопическая техника", изд. Советская наука", М. , 1946, стр. 22 и 44). Метиленовый синий используют также для витальной окраски мелких гидробионтов: личинок саламандры и тритона, кладоцеры (там же стр. 51). В микроскопической технике применяют также трипановый синий (там же стр. 38). Трипановый синий используют в цитологии для разделения клеток на живые и мертвые (см. книгу "Трансформация биологических тканей, стерилизованных и консервированных формалином". Республиканский сборник научных работ по проблеме "Травматология и ортопедия", вып. V, Л., 1980, стр. 29). Известен способ оценки состояния ихтиологических объектов путем их окраски и последующего анализа сорбции красителя этими объектами, используемый для диагностики выживания эмбрионов рыб по количеству связанных яйцами органических красителей. В качестве красителей применяют метилоранж и пиронин Ж. Окрашивание производят на стадиях середины гаструляции и сформирования хвостовой почки (В.Н.Жуковский, Ю.Д.Коновалов "Интенсивность сорбции красителей яйцами карповых рыб как показатель жизнеспособности эмбрионов". Гидробиологический журнал, том XII, N 5, Киев, изд. "Наукова думка", 1986, стр. 45-49). При осуществлении этого способа производят окраску яиц, экстрагирование адсорбированных ими красок и исследование их максимума спектра поглощения. Затем проводят статистическую обработку результатов и по усредненным данным количества связанного яйцами красителя (в микрограммах краски на 100 мг икры) оценивают выживаемость эмбрионов. Этот способ достаточно трудоемок, требует использования спектрометрических приборов и привлечения высококвалифицированных специалистов. Он не позволяет оценить прижизненное состояние исследуемых объектов, так как оценку жизнеспособности производят не по живым эмбрионам, а по их подобным в пробе, и не применим для прижизненной оценки состояния целостного организма рыбы. In ichthyology and fish farming, the use of organic dyes is known, where they are mainly used for tagging fish or treating them. They are widely used in biomedical research. In particular, a methylene blue solution, depending on concentration and exposure, is used to detect the nervous system in the whole organism, when studying isolated thin tissue membranes and films, cells in tissue culture, unicellular organisms (see G.I. Roskin "Microscopic Technique", Sovetskaya Nauka, Moscow, 1946, pp. 22 and 44). Methylene blue is also used for vital staining of small hydrobionts: salamander and newt larvae, cladocera (ibid., p. 51). Trypan blue is also used in microscopic techniques ( there w e p. 38) Trypan blue is used in cytology to separate cells into living and dead cells (see the book "Transformation of Biological Tissues Sterilized and Preserved with Formalin." Republican Collection of Scientific Works on the Problem of Traumatology and Orthopedics, vol. V, L ., 1980, p. 29) A known method for assessing the state of ichthyological objects by staining them and subsequent analysis of the dye sorption by these objects is used to diagnose the survival of fish embryos by the number of organic dyes bound by eggs. Methyl orange and pyronin are used as dyes. Staining is performed at the stages of the middle of gastrulation and the formation of a tail kidney (V.N. Zhukovsky, Yu.D. N 5, Kiev, publishing house "Naukova Dumka", 1986, pp. 45-49). When implementing this method, eggs are dyed, the paints adsorbed by them are extracted and their maximum absorption spectrum is studied. Then the results are statistically processed and, according to the averaged data, the amount of dye bound by the eggs (in micrograms of paint per 100 mg of eggs), the survival of the embryos is estimated. This method is quite time-consuming, requires the use of spectrometric instruments and the involvement of highly qualified specialists. It does not allow assessing the intravital state of the studied objects, since the viability is assessed not by living embryos, but by their similar ones in the sample, and is not applicable for the intravital assessment of the state of the whole fish organism.

Из доступных заявителю источников информации не выявлено способов прижизненной экспрессной оценки состояния целостного организма рыбы с помощью органических красителей. From the sources of information available to the applicant, no methods were found for intravital rapid rapid assessment of the state of the whole organism of fish using organic dyes.

Наиболее близким к настоящему изобретению является способ оценки состояния ихтиологических объектов путем их окраски и последующей визуальной оценки характера окрашивания ("Способ прогнозирования выхода жизнестойкого потомства из инкубированной икры на ранних стадиях эмбриогенеза" согласно а.с. СССР N 1223866, A 01 K 61/00, 1986). По этому способу отбирают пробу икры на стадии крупноклеточной бластулы, окрашивают ее водным раствором смеси красителей - тетранитротетразолевого синего и феназинметасульфата в количестве 40-50 и 10-14 мг/л раствора. Икру выдерживают в растворе в течение суток и затем производят визуальную оценку интенсивности окрашивания икринок, а о проценте выхода жизнеспособных икринок судят по доле икринок, неокрашенных и имеющих точечную окраску в области бластодиска. Closest to the present invention is a method for assessing the state of ichthyological objects by staining them and subsequent visual assessment of the nature of staining ("A method for predicting the release of viable offspring from incubated eggs in the early stages of embryogenesis" according to AS USSR N 1223866, A 01 K 61/00 , 1986). In this method, a caviar sample is taken at the stage of a large-cell blastula, stained with an aqueous solution of a mixture of dyes - tetranitrotetrazole blue and phenazine metasulfate in an amount of 40-50 and 10-14 mg / l of solution. The eggs are kept in solution for 24 hours and then a visual assessment is made of the intensity of staining of eggs, and the percentage of viable eggs is judged by the percentage of eggs that are unpainted and have a spot color in the blastodisc region.

Недостатками способа являются его значительная продолжительность - целые сутки, косвенность оценки - не по состоянию объекта, а по пробе себе подобных, то есть по не живым эмбрионам, а по им подобным в пробе, и невозможность его применения для прижизненной оценки целостного организма. The disadvantages of the method are its significant duration - a whole day, the indirectness of the assessment - not by the state of the object, but by the sample of their own kind, that is, by non-living embryos, but by their similar ones in the sample, and the impossibility of its use for intravital evaluation of the whole organism.

Задачей изобретения является создание способа экспрессной прижизненной оценки состояния рыб при их массовом обследовании в рыбоводных хозяйствах, не требующем специального оборудования, доступного рядовому рыбоводу для отбора неблагополучных особей и их последующего ихтиопатологического исследования специалистами. The objective of the invention is to provide a method for rapid in-line assessment of the state of fish during their mass examination in fish farms, which does not require special equipment available to an ordinary fish farmer for the selection of dysfunctional individuals and their subsequent ichthyopathological examination by specialists.

Сущность изобретения: Приготовляют водные растворы органических красителей - трипанового синего и метиленового синего в концентрациях 250-500 мг/л. Раствор трипанового синего наливают в емкость небольшим слоем так, чтобы он только покрывал спины исследуемых рыб, группу которых помещают в эту емкость. После экспозиции в растворе в течение 1,5-2,0 минут рыб перемещают в емкость, имеющую белое дно с чистой водой, и производят визуальную оценку однородности окраски поверхности рыб и/или окраски жабр. Особей, на коже и/или жабрах которых появлялись синие пятна и/или зоны окраски, считают неблагополучными и отбирают для последующего ихтиопатологического исследования. Остальных рыб перемещают в емкость с раствором метиленового синего, выдерживают с такой же экспозицией, после чего перемещают в емкость с белым дном, заполненную чистой водой. Производят осмотр характера окраски кожи и жабр рыб и рыб с признаками неравномерного и/или более интенсивного окрашивания относят к неблагополучным и отбирают для последующего ихтиопатологического исследования. The essence of the invention: Prepare aqueous solutions of organic dyes - trypan blue and methylene blue in concentrations of 250-500 mg / L. The trypan blue solution is poured into the container in a small layer so that it only covers the backs of the fish under study, a group of which are placed in this container. After exposure in the solution for 1.5-2.0 minutes, the fish are transferred to a container having a white bottom with clean water, and a visual assessment is made of the uniformity of the color of the surface of the fish and / or the color of the gills. Individuals on whose skin and / or gills appeared blue spots and / or color zones are considered dysfunctional and selected for subsequent ichthyopathological examination. The remaining fish are transferred to a container with a solution of methylene blue, kept with the same exposure, and then transferred to a container with a white bottom, filled with clean water. The nature of the coloration of the skin and gills of fish and fish with signs of uneven and / or more intense staining is examined, classified as dysfunctional and selected for subsequent ichthyopathological examination.

Способ может быть осуществлен также при использовании только одного из указанных красителей при осуществлении описанных выше действий. The method can also be carried out using only one of these dyes in the implementation of the above actions.

Технический результат при использовании изобретения заключается в том, что неравномерность окраски кожи и/или жабр и/или повышенную равномерную окраску приобретают только особи, находящиеся в неблагополучном состоянии. В частном случае при использовании только трипанового синего технический результат заключается в том, что неравномерную (пятнистую) окраску приобретают особи, имеющие некротические участки кожи и/или жабр. Неблагополучие состояния рыбы, не имеющей таких повреждений, в этом случае не выявляется. В частном случае при использовании только метиленового синего технический результат заключается в том, что неравномерную окраску и/или высокую интенсивность окраски приобретают все особи, неблагополучное состояние которых вызвано различными причинами, при этом пятнистая окраска не дает четкой дифференцировки между некротическим и паранекротическим состоянием. The technical result when using the invention is that the uneven color of the skin and / or gills and / or increased uniform color acquire only individuals in poor condition. In the particular case when using only trypan blue, the technical result is that uneven (spotted) color is acquired by individuals having necrotic areas of the skin and / or gills. The poor state of the fish that does not have such damage is not detected in this case. In the particular case when using only methylene blue, the technical result is that uneven color and / or high color intensity is acquired by all individuals whose unsatisfactory state is caused by various reasons, while the spotty color does not clearly differentiate between the necrotic and paranecrotic state.

Отличительные признаки заявляемого способа от прототипа:
- оценку состояния рыбы производят непосредственно на целостном организме по характеру окраски самой исследуемой особи;
- одновременно обследованию подвергают группу рыб;
- исследуемые рыбы могут быть любого возраста, от личинки до производителей;
- в качестве красителей используют трипановый синий и/или метиленовый синий;
- оценку состояния рыб производят прижизненно;
- продолжительность экспозиции рыб в растворе красителя составляет 1,5-2 минуты;
- концентрация красителей 250-500 мг/л;
- визуальную оценку характера окраски производят в чистой воде в емкости с белым дном;
- к неблагополучным относят особей с неравномерной окраской и/или наиболее интенсивной равномерной окраской;
- неблагополучных особей отбирают для последующего ихтиопатологического исследования.
Distinctive features of the proposed method from the prototype:
- assessment of the condition of the fish is carried out directly on the whole organism by the nature of the color of the studied individual;
- at the same time, a group of fish is examined;
- investigated fish can be of any age, from larva to producers;
- trypan blue and / or methylene blue are used as dyes;
- assessment of the condition of fish is performed in vivo;
- the duration of exposure of fish in a dye solution is 1.5-2 minutes;
- concentration of dyes 250-500 mg / l;
- a visual assessment of the nature of the color produced in pure water in a container with a white bottom;
- individuals with uneven coloration and / or the most intense uniform coloration are classified as dysfunctional;
- dysfunctional individuals are selected for subsequent ichthyopathological research.

Сущность способа поясняется примерами его осуществления. The essence of the method is illustrated by examples of its implementation.

Пример 1. Оценка состояния рыб при высоких (летних) температурах. Example 1. Assessment of the condition of fish at high (summer) temperatures.

1.1. Работу проводили на Волгореченском рыбоводном предприятии, выращивающем карпа в садках при температуре 18-22oC. Предварительно приготовили растворы трипанового синего (далее обозначенного как ТС) и метиленового синего (далее обозначенного как МС) с концентрацией 250 мг/л. Каждый из растворов вылили в отдельные различно помеченные тазы и приготовили таз с белым дном и чистой водой, помещенный в хорошо освещенное место. Для выравнивания температуры растворов красителей с температурой воды в садках тазы с красителями поместили на поверхность воды садка. Для предупреждения асфиксии рыб и лучшей аэрации количество раствора брали таким, чтобы он только покрывал спинные плавники рыб. Так как на хозяйстве была отмечена гибель рыб, то сачком из садка отловили 5 ослабленных и 15 внешне здоровых рыб и перенесли в таз с ТС, выдержали в нем 2 минуты, затем раствор через сачок слили в пустую емкость, а оставшихся в сачке рыб перенесли в таз с чистой водой, в котором произвели осмотр окраски поверхности тела и, осторожно приподняв жаберные крышки, осмотрели окраску жабр. У 7 особей, включая 5 ослабленных, на коже в районе жаберных крышек и их жабрах проявились зоны или пятна темно-синей окраски. Этих рыб отобрали для последующего ихтиопатологического исследования, а остальных перенесли в таз с раствором МС. Затем, как описано выше, после выдерживания в красителе в течение 2 мин рыб перенесли в таз с белым дном с чистой водой и, вновь производя осмотр, выявили 3 особи, выделяющихся среди остальных более интенсивной синей окраской поверхности головы и жабр. Этих рыб отобрали для последующего исследования, а остальных выпустили в исходный садок. За время опытов гибели рыб не было.1.1. The work was carried out at the Volgorechensk fish farm that grows carp in cages at a temperature of 18-22 o C. Previously prepared solutions of trypan blue (hereinafter referred to as TS) and methylene blue (hereinafter referred to as MS) with a concentration of 250 mg / l. Each of the solutions was poured into separate differently marked basins and a basin with a white bottom and clear water was prepared, placed in a well-lit place. To equalize the temperature of the dye solutions with the temperature of the water in the cages, basins with dyes were placed on the surface of the water of the cage. To prevent fish asphyxiation and better aeration, the amount of solution was taken so that it only covered the dorsal fins of the fish. Since the death of fish was noted on the farm, 5 weakened and 15 apparently healthy fish were caught with a net from the cage and transferred to a basin with a vehicle, kept in it for 2 minutes, then the solution was drained through the net into an empty container, and the remaining fish in the net were transferred to a basin with clean water, in which they examined the color of the surface of the body and, carefully lifting the gill covers, examined the color of the gills. In 7 individuals, including 5 weakened ones, zones or spots of dark blue color appeared on the skin in the region of gill covers and their gills. These fish were selected for subsequent ichthyopathological examination, and the rest were transferred to the pelvis with a solution of MS. Then, as described above, after keeping in the dye for 2 minutes, the fish were transferred to a white-bottomed basin with clean water and, again inspecting, 3 individuals were identified that stood out among the others with a more intense blue color of the surface of the head and gills. These fish were selected for further research, and the rest were released into the original cage. During the experiments, the death of fish was not.

Последующее ихтиопатологическое исследование 7 рыб, окрашенных ТС, который избирательно окрашивает только мертвую ткань, и 3-х рыб, более интенсивно окрашенных МС, не выявило наличия у них патогенных паразитов и микроорганизмов на жабрах. При осмотре внутренних органов, окрашенных обоими красителями рыб, были отмечены побледнение печени и увеличение почек в сравнении с неокрашенными рыбами. Было сделано предположение о кормовом токсикозе, что было в дальнейшем подтверждено прекращением гибели рыб после введения запрета на использование корма, после применения которого возникло заболевание. Subsequent ichthyopathological examination of 7 fish stained with TS, which selectively stains only dead tissue, and 3 fish more stained with MS, did not reveal the presence of pathogenic parasites and microorganisms in the gills. When examining the internal organs stained with both fish dyes, liver pallor and an increase in kidneys were noted in comparison with unpainted fish. An assumption was made of feed toxicosis, which was further confirmed by the cessation of fish death after the ban on the use of feed, after the application of which the disease arose.

1.2. В условиях лотковой базы Черепетского тепловодного хозяйства при температуре воды 22-25oC, соблюдая порядок действий, указанных в п.1.1, сачком произвольно отловили 30 мальков карпа и последовательно обработали их в растворах красителей концентрацией 250 мг/л при экспозиции 2 мин. При окраске в первом красителе - ТС, на теле 2-х рыб отметили наличие округлых зон с темно-синей окраской. После отбора окрашенных рыб, остальных рыб поместили в раствор МС, в котором все мальки приобрели одинаковую и ровную голубую окраску, что позволило заключить о их нормальном состоянии, что было подтверждено и результатами последующего ихтиопатологического исследования. Наличие у 2-х рыб зон некроза, выявленных посредством окраски в ТС, напоминало укус паразитического рачка аргулюса, который свободно плавая в воде, периодически нападает на рыб и сосет у них кровь. Наличие рачков в лотках хозяйства было подтверждено последующим специальным обследованием. Гибели рыб после обработки обоими красителями не было.1.2. In the conditions of the tray base of the Cherepetsk warm-water economy at a water temperature of 22-25 o C, following the procedure specified in clause 1.1, 30 fry of carp were randomly caught with a net and sequentially processed in dye solutions with a concentration of 250 mg / l at an exposure of 2 min. When stained in the first dye - TS, the presence of rounded zones with a dark blue color was noted on the body of 2 fish. After selection of the colored fish, the remaining fish were placed in a MS solution in which all fry acquired the same and even blue color, which allowed us to conclude that they were in a normal state, which was confirmed by the results of a subsequent ichthyopathological study. The presence of necrosis zones in 2 fish, revealed by staining in the TS, resembled a bite of the parasitic crustacean of the argumentus, which freely floating in the water periodically attacks fish and sucks their blood. The presence of crustaceans in the stalls of the farm was confirmed by a subsequent special examination. There were no fish deaths after treatment with both dyes.

1.3. Мальков карпа в количестве 50 шт, отловленных из пруда Волгореченского р/х летом при температуре воды 18-22oC, обработали растворами красителей в точном соответствии с действиями, изложенными в п .1.1. В растворе ТС у 5-и рыб интенсивно окрасились в синий цвет кайма жаберной крышки и большие участки мягких тканей жабр. При окраске в растворе MС оставшихся 45 рыб отмечено появление у всех особей одинакового по интенсивности легкого голубого окрашивания тела и жабр. При паразитологическом обследовании у первых 5-и рыб отмечено массовое поражение жабр моногенетическими червями - дактилогирусами, что и привело к некротическому распаду зараженных участков жабр. У рыб, равномерно окрашенных МС, дактилогирусы или отсутствовали, или были единичны. Заявленный способ в данном случае не только позволил выявить больных рыб, но и определить порог патогенного воздействия паразитов в зависимости от их количества.1.3. 50 fry fry caught from the Volgorechensky pond in summer at a water temperature of 18-22 o C were treated with dye solutions in exact accordance with the steps outlined in clause 1.1. In TS solution, 5 fish intensively turned blue the border of the gill cover and large areas of soft tissue of the gills. When the remaining 45 fish were stained in MC solution, the appearance of light blue staining of the body and gills of the same intensity in all individuals was noted. A parasitological examination of the first 5 fish showed a massive lesion of the gills by monogenetic worms - dactylogiruses, which led to necrotic decay of the infected sections of the gills. In fish uniformly stained with MS, dactylogiruses were either absent or single. The claimed method in this case not only made it possible to identify diseased fish, but also to determine the threshold for the pathogenic effects of parasites, depending on their number.

1.4. После облова прудов мальки карпа навеской 0,5-2,0 г были помещены в садки с температурой воды 20-25oC для дальнейшего выращивания. На второй день после перевозки отмечено появление отдельных рыб, медленно плавающих у поверхности воды. Соблюдая порядок действий и условия, указанные в п .1.1, произвольно отловили сачком 50 рыб и обработали их в красителях. После пребывания в растворе ТС у 3-х рыб интенсивно окрасились отдельные участки тела, в первую очередь головы и хвостового стебля, а после окраски в МС было выявлено еще 6 рыб, имеющих более интенсивную синюю окраску в сравнении с другими рыбами, которые были выпущены обратно в садок. Последующее ихтиопатологическое обследование отобранных рыб не выявило у них паразитов и серьезных патологических изменений во внутренних органах. Появление на теле рыб омертвевших участков (окраска ТС) и зон кожи в состоянии паранекроза или с повышенным слизеотделением (окраска МС) были объяснены как возможное следствие повышенной травматизации рыб в ходе облова и перевозки из прудов в садки.1.4. After fishing ponds, fry of carp were weighed 0.5-2.0 g were placed in cages with a water temperature of 20-25 o C for further cultivation. On the second day after transportation, the appearance of individual fish was observed, slowly swimming at the surface of the water. Following the procedure and conditions specified in clause 1.1, we randomly caught 50 fish in a net and processed them in dyes. After staying in the TS solution, 3 fish intensively stained individual parts of the body, primarily the head and tail stem, and after staining in MS, another 6 fish were revealed that had a more intense blue color compared to other fish that were released back to the cage. Subsequent ichthyopathological examination of the selected fish did not reveal parasites and serious pathological changes in the internal organs. The appearance of dead sites on the fish body (TS coloration) and skin zones in the state of paranecrosis or with increased mucus secretion (MS coloration) were explained as a possible consequence of increased trauma to the fish during fishing and transport from ponds to cages.

1.5. Мальки форели выращивались в Волгореченском рыбхозе в лотках в условиях искусственного подогрева воды (t - 17-18oC). После появления единичного отхода 30 мальков произвольно отловили сачком и обработали в растворах красителей аналогично с действиями, изложенными в опыте 1.1. После обработки в первом красителе были отобраны 2 рыбы, имеющие обширные синие зоны в районах анального и спинного плавников. Среди остальных рыб, обработанных в растворе МС, у 3-х рыб отмечено более сильное окрашивание как всего тела, так и отдельных его частей. Ихтиопатологические и микроскопические исследования отобранных 5-и рыб позволили заключить о начале вспышки инфекционного заболевания - флексибактериоза, для которого характерно поражение кожных покровов, сопровождающееся их некрозом. Гибели мальков форели в ходе обработок в красителях не было.1.5. Trout fry were grown in Volgorechensk fish farm in trays under conditions of artificial heating of water (t - 17-18 o C). After the appearance of a single waste, 30 fry were arbitrarily caught by a net and processed in dye solutions similarly to the steps described in experiment 1.1. After processing, in the first dye, 2 fish were selected, having extensive blue zones in the areas of the anal and dorsal fins. Among the rest of the fish treated in the MS solution, 3 fish showed a stronger staining of both the whole body and its individual parts. Ichthyopathological and microscopic studies of the selected 5 fish made it possible to conclude the onset of an outbreak of an infectious disease - flexibacteriosis, which is characterized by damage to the skin, accompanied by necrosis. There was no death of trout fry during dye treatments.

1.6. Среди молоди осетровых, содержавшихся в сходных с молодью форели условиях (опыт 1.5), но при более высоких температурах (22-25oC), был отмечен незначительный отход. Осетровых обрабатывали красителями в порядке и режиме, аналогичном с опытом 1.1. Из 30 рыб, 5 из которых были явно ослабленные, после обработки в ТС были выявлены 6 рыб, имеющих на поверхности тела зоны с интенсивно синей окраской. Остальные 24 рыбы окрасились в растворе МС равномерно и однородно в слабо-голубой цвет. По ряду признаков заболевание молоди осетровых также было определено как флексибактериоз. Успешно проведенное лечение с применением антибактериального препарата фуразолидона подтвердило правильность постановки этого диагноза. В ходе обработки молоди осетровых в растворах красителей гибели рыб не было.1.6. Among sturgeon juveniles kept in conditions similar to trout juveniles (experiment 1.5), but at higher temperatures (22-25 o C), a slight departure was noted. Sturgeons were treated with dyes in the manner and mode similar to experiment 1.1. Of the 30 fish, 5 of which were clearly weakened, after treatment in the TS, 6 fish were identified with zones with intensely blue color on the surface of the body. The remaining 24 fish stained uniformly and uniformly in a slightly blue color in the MS solution. According to a number of signs, the disease of juvenile sturgeons was also defined as flexibacteriosis. Successful treatment with the use of the antibacterial drug furazolidone confirmed the correctness of this diagnosis. During the processing of juvenile sturgeon in dye solutions, there were no fish deaths.

1.7. Молодь аквариумных рыб - меченосцев, через два дня после помещения в аквариум, заполненный чистой водой, с температурой воды 22oC выглядела угнетенной. После обработки 5 рыб в растворе ТС при концентрации 500 мг/л и экспозиции 1,5 мин. у всех меченосцев интенсивно окрасились плавники, особенно хвостовые. При помещении других 5 рыб в раствор МС при концентрации 250 мг/л и экспозиции 2 минуты характер окрашивания был сходен с первым красителем. При микроскопировании окрашенных плавников отмечен некроз и распад их мягких тканей при отсутствии паразитов. Диагноз - плавниковая гниль. Гибели больных меченосцев в ходе обработки в обоих красителях не было.1.7. Juvenile aquarium fish - swordsmen, two days after being placed in an aquarium filled with clean water, with a water temperature of 22 o C, looked oppressed. After processing 5 fish in a TS solution at a concentration of 500 mg / l and an exposure of 1.5 minutes all swordsmen fins intensely stained, especially the tail fins. When 5 other fish were placed in the MS solution at a concentration of 250 mg / L and exposure for 2 minutes, the character of staining was similar to the first dye. Microscopic examination of stained fins revealed necrosis and decay of their soft tissues in the absence of parasites. The diagnosis is fin rot. There were no deaths of sick sword-bearers during processing in both dyes.

1.8. В ходе ихтиопатологического обследования рыб в Черепетском рыбхозе в июне у части годовиков канального сомика, содержащегося в садках, были обнаружены поверхностные язвы красного цвета. Гибели рыб при этом не наблюдалось. Специально отловленных 10 рыб с язвами поместили по 5 рыб отдельно в каждый раствор красителя концентрацией 250 мг/л и экспозицией 2 мин. В результате ни в растворе ТС, ни в растворе МС окрашивания язв не произошло. Рыбы с язвами были активны, а на вскрытии их внутренние органы не имели отклонений от нормы. Учитывая это, было предположено, что язвы имеют зимнее происхождение, покрыты живой грануляционной тканью, а сами рыбы находятся в процессе выздоровления. Отклонений от нормального состояния у сомиков в процессе окрашивания не было. 1.8. During an ichthyopathological examination of fish at the Cherepetsky fish farm in June, surface ulcers of a red color were found in some yearlings of channel catfish contained in cages. Death of fish was not observed. Specially caught 10 fish with ulcers were placed 5 fish separately in each dye solution with a concentration of 250 mg / l and an exposure of 2 minutes. As a result, no staining of ulcers occurred in the TS solution or in the MS solution. Fish with ulcers were active, and at autopsy their internal organs had no deviations from the norm. Given this, it was suggested that the ulcers are of winter origin, covered with living granulation tissue, and the fish themselves are in the process of recovery. There were no deviations from the normal state in catfish during the staining process.

Пример 2. Оценка состояния рыб при низких (зимних) температурах. Example 2. Assessment of the condition of fish at low (winter) temperatures.

2.1. Перед началом работы температуру растворов красителей уравнивали с температурой воды из рыбоводных емкостей в порядке, согласно опыту 1.1., но при концентрации обоих красителей 500 мг/л. Экспозиция в красителях - 2 мин. Молодь форели, содержавшуюся в лотках при температуре 6-7oC обрабатывали в растворах ТС и МС в последовательности, описанной выше (опыт 1.1). В процессе окраски 30 мальков форели в первом красителе были выявлены 2 рыбы с темно-синими пятнами на боку, а в ходе выдерживания остальных рыб в МС у 6-и окраска тела и плавников имела более интенсивную синюю окраску, чем у других мальков. Гибели рыб при обработке в обоих красителях не отмечено. При последующем ихтиопатологическом и микробиологическом исследованиях отобранных рыб было установлено инфекционное заболевание.2.1. Before starting work, the temperature of the dye solutions was equalized with the temperature of the water from the fish tanks in the order, according to experiment 1.1., But at a concentration of both dyes of 500 mg / l. Exposure in dyes - 2 min. Trout juveniles contained in trays at a temperature of 6-7 ° C were treated in TS and MS solutions in the sequence described above (experiment 1.1). In the process of coloring 30 trout fry in the first dye, 2 fish with dark blue spots on their sides were detected, and during the remaining fish in the MC, the 6 color of the body and fins had a more intense blue color than other fry. The death of fish during processing in both dyes was not noted. Subsequent ichthyopathological and microbiological studies of selected fish revealed an infectious disease.

2.2. Годовиков карпа, зимующих в садках при постоянных колебаниях температуры в пределах 2-9oC в зависимости от режима работы ГРЭС, обрабатывали красителями концентрацией 500 мг/л с экспозицией 2 мин по ранее приведенной последовательности действий (опыт 1.1). Из 25 рыб, обработанных в растворе ТС, ни у одной особи окрашивания тела не произошло. После выдерживания этих же рыб в растворе МС, у 8-и годовиков окраска тела и жабр была более интенсивной, чем у остальных особей. В ходе проведенного сравнительного ихтиопатологического исследования как сильно, так и слабо окрашенных рыб, у рыб первой группы обнаружены более толстые наложения слизи с массой эктопаразитических простейших в сравнении со второй, слабо окрашенной группой рыб, у которых слой слизи и число простейших были незначительные. Гибели карпов в ходе обработки в красителях не было.2.2. Yearlings of carp wintering in cages with constant temperature fluctuations within 2-9 o C depending on the state of the art of the state district power station, were treated with dyes with a concentration of 500 mg / l with an exposure of 2 min according to the previously given sequence of actions (experiment 1.1). Of the 25 fish treated in TS, none of the individuals stained the body. After keeping the same fish in the MS solution, the 8 year olds had more intense coloration of the body and gills than the rest of the individuals. In the course of a comparative ichthyopathological study of both strongly and slightly colored fish, thicker mucus deposits with a mass of ectoparasitic protozoa were found in the fish of the first group in comparison with the second, weakly colored group of fish, in which the mucus layer and the number of protozoa were insignificant. The death of carps during processing in dyes was not.

2.3. В условиях, описанных в примере 2.2., провели обработку рыб красителями концентрацией 200 мг/л при экспозиции 2 мин. Для этого сачком отловили 5 карпов, плавающих у поверхности воды и явно истощенных, и 5 карпов из толщи воды, имеющих внешне здоровый вид. Объединенную партию рыб в количестве 10 экз. обработали красителями, соблюдая порядок действий, указанных выше (опыт 1.1.). В результате как в ТС так и в МС четкого окрашивания рыб не было выявлено. После переноса рыб в лабораторию и повышения температуры до 16oC провели повторную обработку рыб с той же концентрацией красителей. В результате в растворе ТС окрашивания рыб не произошло, а в растворе МС 5 истощенных рыб покрасились более интенсивно, чем внешне здоровые. При паразитологическом исследовании у интенсивно окрашенных рыб выявлено большое количество эктопаразитических простейших. У внешне здоровых рыб число паразитов было единичным. Таким образом, показано, что на интенсивность окрашивания рыб температура воды оказывает прямое влияние.2.3. Under the conditions described in example 2.2., Fish were treated with dyes at a concentration of 200 mg / l at an exposure of 2 minutes. For this purpose, 5 carps floating near the surface of the water and obviously depleted, and 5 carps from the water column, which have an apparently healthy appearance, were caught with a net. A combined batch of fish in the amount of 10 copies. treated with dyes, following the procedure described above (experiment 1.1.). As a result, both in the TS and in the MS, no clear staining of the fish was revealed. After transferring the fish to the laboratory and raising the temperature to 16 o C, the fish were re-treated with the same concentration of dyes. As a result, fish staining did not occur in the TS solution, and in the MS solution 5 depleted fish became more intensely colored than apparently healthy ones. A parasitological study of intensely colored fish revealed a large number of ectoparasitic protozoa. In apparently healthy fish, the number of parasites was single. Thus, it was shown that the temperature of the water has a direct effect on the intensity of fish coloring.

2.4. Сеголетков карпа в количестве 10 экз. отловили зимой из пруда при температуре воды 1-2oC и обработали последовательно, соблюдая порядок действий, описанный в опыте 1.1 в растворах двух красителей концентрацией 500 мг/л при экспозиции 1 мин в каждом из них. Соответственно раствор красителей был также охлажден до температуры около 1-2oC. После окраски в растворе ТС признаков окрашивания тела рыб не было установлено, а после окраски в растворе МС окраска тела всех рыб была очень слабой, что не позволило провести отбор рыб для дальнейшего исследования. После переноса рыб в теплое помещение и доведения температуры воды до 15oC процедура окрашивания была повторена с той же концентрацией красителей (500 мг/л) и с экспозицией 2 мин. После обработки в растворе ТС зон окрашивания на рыбах не обнаружили, а после окраски в растворе МС было выявлено 3 рыбы с более интенсивным окрашиванием тела, чем у остальных 7. После последующего ихтиопатологического исследования на теле более окрашенных рыб было обнаружено значительно большое количество эктопаразитических инфузорий - родов триходина и хилодонелла, чем у менее окрашенных особей. Повышенная окрашиваемость поверхности тела у трех отобранных рыб очевидно связана с большим количеством слизи на теле более сильно зараженных рыб.2.4. Carrot yearlings in an amount of 10 specimens. were caught in the winter from a pond at a water temperature of 1-2 o C and processed sequentially, following the procedure described in experiment 1.1 in solutions of two dyes with a concentration of 500 mg / l at an exposure of 1 min in each of them. Accordingly, the dye solution was also cooled to a temperature of about 1-2 o C. After staining in the TS solution, no signs of staining of the fish body were found, and after staining in the MS solution, the color of the body of all fish was very weak, which did not allow the selection of fish for further research. After transferring the fish to a warm room and adjusting the water temperature to 15 o C, the staining procedure was repeated with the same dye concentration (500 mg / l) and with an exposure of 2 minutes. After treatment in the TS solution, no staining zones were found in the fish, and after staining in the MS solution, 3 fish with more intense body staining were detected than in the rest 7. After a subsequent ichthyopathological study on the body of more colored fish, a significantly large number of ectoparasitic ciliates were found - genera of trichodin and chylodonella than in less colored individuals. The increased staining of the body surface in the three selected fish is obviously associated with a large amount of mucus on the body of more heavily infected fish.

Пример 3. Оценка состояния рыб при выбранных концентрациях красителей и запредельной длительности экспозиции. Example 3. Assessment of the condition of fish at selected concentrations of dyes and prohibitive duration of exposure.

3.1. Внешне здоровых сеголетков карпа в количестве 10 шт содержали в аквариуме при температуре 18-20oC. У 5-и рыб подрезали кончики хвостового и анального плавников, остальные 5 рыб использовали как контроль. Сразу после этой операции всех рыб поместили в одну емкость с раствором ТС концентрацией 250 мг/л на 10 мин. В ходе последующего просмотра всех 10 рыб как на их теле, так и плавниках следов окрашивания обнаружено не было. При повторении этой процедуры на следующий день у опытных рыб края подрезанных плавников окрасились в синий цвет, у контрольных рыб тело и плавники не окрасились. Факт окрашивания может быть объяснен частичным некротическим разрушением тканей на месте ампутации. В течение последующих трех дней гибели опытных и контрольных рыб не наблюдали.3.1. Outwardly healthy carp yearlings in the amount of 10 pcs were kept in the aquarium at a temperature of 18-20 o C. In 5 fish, the tips of the caudal and anal fins were cut, the remaining 5 fish were used as a control. Immediately after this operation, all fish were placed in the same container with a TS solution with a concentration of 250 mg / l for 10 min. During the subsequent viewing of all 10 fish, both on their body and fins, no traces of staining were found. When repeating this procedure the next day, in experimental fish, the edges of the cut fins turned blue, in the control fish, the body and fins were not painted. The fact of staining can be explained by partial necrotic tissue destruction at the site of amputation. Over the next three days, the death of experimental and control fish was not observed.

3.2. В ходе возникшего при температуре воды 7-9oC инфекционного заболевания молодь форели помещали последовательно в растворы ТС и МС концентрацией 500 мг/л при экспозициях 2 мин и 10 мин. При 2-минутной экспозиции, в первом красителе у 3-х из 20 исследованных рыб были выявлены зоны интенсивного окрашивания. Во втором красителе у 5-и из 17 оставшихся рыб были выявлены локальная или сплошная легкая синяя окраска тела в сравнении с голубой у других особей. В другой партии из 24 отловленных рыб, помещенных в раствор первого красителя на 10 минут, у 2-х рыб на теле были обнаружены темно-синие зоны, а у остальных рыб слегка окрасились кончики плавников. При помещении этих рыб (за исключением 2-х с локальной окраской) в раствор МС на 10 минут у большинства рыб тело и плавники окрасились в синий цвет. На этом фоне выделение рыб с более интенсивной окраской тела было затруднено. Таким образом, при повышенной - 10-минутной экспозиции при использовании ТС произошло дополнительное окрашивание других тканей (плавников), а при использовании МС более интенсивное окрашивание тела всех рыб затрудняло дифференцировку особей по степени окрашивания. Гибели рыб после 10 минут экспозиции в красителях не было.3.2. In the course of an infectious disease that occurred at a water temperature of 7–9 o C, juvenile trout were placed sequentially in TS and MS solutions with a concentration of 500 mg / L at exposures of 2 min and 10 min. At a 2-minute exposure, in the first dye, 3 of the 20 fish studied showed zones of intense staining. In the second dye, 5 of the 17 remaining fish showed a local or continuous light blue body color in comparison with blue in other individuals. In another batch of 24 captured fish, placed in a solution of the first dye for 10 minutes, dark blue zones were found on 2 fish on the body, and the tips of the fins were slightly colored on the remaining fish. When these fish were placed (with the exception of 2 with local coloration) in the MS solution for 10 minutes in most fish, the body and fins turned blue. Against this background, the selection of fish with a more intense body color was difficult. Thus, with increased - 10-minute exposure when using TS, additional staining of other tissues (fins) occurred, and when using MS, more intense staining of the body of all fish made it difficult to differentiate individuals by degree of staining. The death of fish after 10 minutes of exposure in the dyes was not.

3.3. Мальков форели в ходе начавшейся гибели при содержании в лотках с высокой плотностью посадки при температуре воды 17-18oC обрабатывали последовательно в растворах красителей концентрацией 250 мг/л при экспозиции 3 мин в каждом из них. Сачком отловили 10 внешне ослабленных и 10 внешне здоровых рыб и всех вместе поместили в раствор ТС, в котором к концу 3-й минуты 6 рыб перевернулись вверх брюшком. В чистой воде часть из этих рыб (2) ожили, а остальные 4 погибли. Всего после пребывания в растворе ТС у 8-и рыб (включая 4 погибших) на теле были выявлены синие пятна различной формы и размера. У остальных 12 рыб, помещенных в раствор МС, к концу 3-й минуты экспозиции наблюдались явные признаки беспокойства, но без последующей гибели мальков. При просмотре этих рыб у 2-х особей поверхность была окрашена неравномерно по сравнению с другими мальками, имеющими равномерное голубое окрашивание. Последующее ихтиопатологическое исследование неравномерно окрашенных рыб позволило диагностировать такое заболевание, как флексибактериоз, при котором поражается кожа с последующим некротическим распадом эпителиальной и подлежащих тканей. Гибель больных рыб в растворе ТС была объяснена асфикцией при условии нехватки кислорода в воде в ходе увеличенной до 3 мин экспозиции.3.3. Trout fry during the onset of death when kept in trays with a high planting density at a water temperature of 17-18 ° C were treated sequentially in dye solutions with a concentration of 250 mg / l at an exposure of 3 minutes in each of them. 10 outwardly weakened and 10 outwardly healthy fish were caught with a net and placed together in a TS solution, in which, at the end of the 3rd minute, 6 fish turned upside down. In clear water, part of these fish (2) came to life, and the remaining 4 died. In total, after staying in the TS solution in 8 fish (including 4 dead), blue spots of various shapes and sizes were revealed on the body. The remaining 12 fish placed in the MS solution showed clear signs of anxiety by the end of the 3rd minute of exposure, but without subsequent death of the fry. When viewing these fish in 2 individuals, the surface was painted unevenly compared to other fry with uniform blue staining. Subsequent ichthyopathological examination of unevenly colored fish made it possible to diagnose a disease such as flexibacteriosis, in which the skin is affected, followed by necrotic decay of the epithelial and underlying tissues. The death of diseased fish in a TS solution was explained by asphyxiation, provided that there was a lack of oxygen in the water during exposure increased to 3 min.

Пример 4. Оценка состояния рыб при выбранной экспозиции и повышенной концентрации красителей. Example 4. Assessment of the condition of fish at a selected exposure and an increased concentration of dyes.

4.1. После облова прудов мальки карпа навеской 0,5-2,0 г были помещены в садки с температурой воды 20-25oC для дальнейшего выращивания. На второй день после перевозки отмечено появление отдельных рыб, медленно плавающих у поверхности воды. Соблюдая порядок действий, указанных в опыте 1.4, но при концентрации растворов красителей 500 мг/л, произвольно отловили сачком 50 рыб и обработали их красителями. После пребывания в растворе ТС у 5-и рыб интенсивно окрасились отдельные участки тела, в первую очередь головы и хвостового стебля, в то время как у остальных рыб признаки окрашивания отсутствовали. Обработка этих 45 рыб в растворе МС позволила выявить 4 рыбы, имеющие более интенсивную окраску по сравнению с другими особями. При последующем ихтиопатологическом обследовании появление на теле омертвевших участков (окраска ТС) и интенсивной окраски всего тела как результата повышенного слизеотделения (окраска МС) связали с травматизацией рыб в ходе облова и перевозки из прудов в садки. Характер окрашивания поврежденных участков тела при использовании красителей концентрацией 500 мг/л практически не отличался от результатов при использовании концентрации 250 мг/л. Гибели рыб в ходе этого опыта не отмечали.4.1. After fishing ponds, fry of carp were weighed 0.5-2.0 g were placed in cages with a water temperature of 20-25 o C for further cultivation. On the second day after transportation, the appearance of individual fish was observed, slowly swimming at the surface of the water. Following the procedure described in experiment 1.4, but at a concentration of dye solutions of 500 mg / l, 50 fish were randomly caught with a butterfly net and treated with dyes. After staying in the TS solution in 5 fish, separate parts of the body, primarily the head and tail stem, intensely stained, while the remaining fish showed no signs of staining. Processing of these 45 fish in a solution of MS revealed 4 fish that have a more intense color compared to other individuals. During the subsequent ichthyopathological examination, the appearance of dead sites on the body (TS coloration) and intense coloration of the whole body as a result of increased mucus secretion (MS coloration) were associated with trauma to fish during fishing and transport from ponds to cages. The nature of staining of damaged areas of the body when using dyes with a concentration of 500 mg / l did not practically differ from the results when using a concentration of 250 mg / l. The death of fish during this experiment was not noted.

4.2. При аналогичных условиях, описанных в опыте 2.1, концентрацию красителей увеличили до 1000 мг/л. Результаты окрашивания молоди форели ТС были сходны с таковыми, описанными при использовании 500 мг/л (опыт 2.1), а при окрашивании МС поверхность тела всех испытуемых рыб приобрела интенсивно синий цвет, что маскировало избирательность в окрашивании между больными и здоровыми рыбами. При использовании обоих красителей гибели молоди форели не было. 4.2. Under similar conditions described in experiment 2.1, the dye concentration was increased to 1000 mg / L. The results of staining juvenile trout TS were similar to those described using 500 mg / L (experiment 2.1), and when MC was stained, the surface of the body of all test fish acquired an intense blue color, which masked the selectivity in staining between sick and healthy fish. When using both dyes, the death of juvenile trout was not.

Из приведенных примеров видно, что при концентрациях красителей ТС и МС в 250 и 500 мг/л и экспозициях в них рыб в течение 1,5-2,0 минут заявляемый способ позволяет выявить неблагополучное состояние рыб разных видов, возрастов при реальных температурах их обитания независимо от причин, вызвавших это неблагополучие. При этом способ позволяет оперативно в очень ограниченное время, исчисляемое для каждой группы рыб продолжительностью порядка 10 минут, осуществить просмотр большого количества особей, выявить рыб в неблагополучном состоянии и отобрать их для ихтиопатологичеокого исследования. В результате этого становится возможным быстрое установление причин неблагополучия и принять надлежащие профилактические, лечебные или организационные меры по их устранению. From the above examples, it can be seen that at concentrations of TS and MS dyes of 250 and 500 mg / l and fish exposures in them for 1.5-2.0 minutes, the inventive method allows to identify the poor state of fish of different species, ages at real temperatures of their habitat regardless of the reasons that caused this trouble. Moreover, the method allows you to quickly, in a very limited time, calculated for each group of fish lasting about 10 minutes, view a large number of individuals, identify the fish in an unsatisfactory condition and select them for ichthyopathological research. As a result of this, it becomes possible to quickly establish the causes of trouble and take appropriate preventive, curative or organizational measures to eliminate them.

В то же время, как сокращение, так и удлинение времени экспозиций рыб в растворах красителей, а также при запредельных значениях концентраций красителей снижается эффективность оценки состояния рыб или делает это весьма затруднительным, что лишает способ его практической универсальности. At the same time, both shortening and lengthening the time of fish exposures in dye solutions, as well as at transcendental values of dye concentrations, decreases the efficiency of assessing the state of fish or makes it very difficult, which deprives the method of its practical universality.

Набор красителей и порядок их использования подобраны таким образом, что полученные с их помощью данные дополняют друг друга. В частных случаях возможно использование каждого красителя отдельно, но при этом эффект от их использования снижается. The set of dyes and the order of their use are selected in such a way that the data obtained with their help complement each other. In special cases, it is possible to use each dye separately, but the effect of their use is reduced.

Claims (1)

Способ оценки состояния ихтиологических объектов, включающий приготовление растворов органических красителей, экспозицию в этих растворах тестируемых объектов и последующую их визуальную оценку по характеру окрашивания, отличающийся тем, что группу исследуемых рыб помещают последовательно в раствор трипанового синего и метиленового синего концентрацией 250-500 мг/л и выдерживают в растворах красителей 1,5-2 мин, при этом особей с неравномерной окраской кожного покрова, и/или жабр, и/или отличающихся по более интенсивной равномерной окраске тела и/или жабр относят к потенциально неблагополучным и отбирают для последующего ихтиопатологического исследования, при этом отбор неблагополучных особей производят в чистой воде в емкости с белым дном раздельно после экспозиции в каждом из растворов красителей. A method for assessing the state of ichthyological objects, including the preparation of solutions of organic dyes, the exposure of test objects in these solutions and their subsequent visual assessment by the nature of staining, characterized in that the group of fish studied is placed sequentially in a solution of trypan blue and methylene blue concentration of 250-500 mg / l and incubated in dye solutions for 1.5-2 minutes, while individuals with uneven coloring of the skin, and / or gills, and / or differing in a more intense uniform color e body and / or gills include potentially disadvantaged and ichthyopathological selected for subsequent studies, the selection dysfunctional individuals produce clean water at the bottom of the container with a white separately after the exposure in each of the dye solutions.
RU97114249/13A 1997-08-19 1997-08-19 Method of evaluating state of ichthyological objects RU2130717C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU97114249/13A RU2130717C1 (en) 1997-08-19 1997-08-19 Method of evaluating state of ichthyological objects

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU97114249/13A RU2130717C1 (en) 1997-08-19 1997-08-19 Method of evaluating state of ichthyological objects

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2130717C1 true RU2130717C1 (en) 1999-05-27

Family

ID=20196520

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU97114249/13A RU2130717C1 (en) 1997-08-19 1997-08-19 Method of evaluating state of ichthyological objects

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2130717C1 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2447435C2 (en) * 2010-03-04 2012-04-10 Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Петрозаводский государственный университет" Method of evaluating effect of pond aquaculture on state of aquatic ecosystem
RU2596498C1 (en) * 2015-04-14 2016-09-10 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Уральский научно-практический центр радиационной медицины" Федерального медико-биологического агентства России (ФГБУН УНПЦ РМ ФМБА России) Method of non-invasive lifetime estimation of physiological state of fish

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
3. Роскин Г.И. Микроскопическая техника. - М.: Советская наука, 1946, с.22, 44, 51, 38. 4. Трансформация биологических тканей, стерилизованных и консервированных формалином: Республиканский сборник научных работ по проблеме "Травматология и ортопедия", вып. V. - Л., 1980, с.29. 5. Жуковский В.Н. и др. Интенсивность сорбции красителей яйцами карповых рыб как показатель жизнеспособности эмбрионов - Гидробиологический журнал, т. ХП, N 5, Киев, Наукова думка, 1986, с.45-49. 6. *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2447435C2 (en) * 2010-03-04 2012-04-10 Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Петрозаводский государственный университет" Method of evaluating effect of pond aquaculture on state of aquatic ecosystem
RU2596498C1 (en) * 2015-04-14 2016-09-10 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Уральский научно-практический центр радиационной медицины" Федерального медико-биологического агентства России (ФГБУН УНПЦ РМ ФМБА России) Method of non-invasive lifetime estimation of physiological state of fish

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Chebanov et al. Sturgeon hatchery manual
Williams et al. The effects of pulse‐exposed cadmium and zinc on embryo hatchability, larval development, and survival of Australian crimson spotted rainbow fish (Melanotaenia fluviatilis)
Yagi et al. Ontogenetic phase shifts in metabolism: links to development and anti-predator adaptation
藤野和男 et al. Genetic studies on the Pacific abalone. XX. Induction of gynogenetic diploid by inhibiting second meiosis in the Pacific abalone.
Bernáth et al. The effects of different preservation methods on ide (Leuciscus idus) sperm and the longevity of sperm movement
Muslim et al. 1913 The Effect of Water Temperature on Incubation Period, Hatching Rate, Normalities of The Larvae and Survival Rate of Snakehead Fish Channa striata
Nowosad et al. Optimization of barbel (Barbus barbus L.) fertilization and effects of ovarian fluid when there are controlled conditions for gamete activations
Salsabilla et al. Prevalence and Intensity of Ectoparasites on Cultivated Catfish (Clarias sp.) in Aquaculture Ponds and Bioflocs System in Aceh Besar, Indonesia.
Koueta et al. Basic growth relations in experimental rearing of early juvenile cuttlefish Sepia officinalis L.(Mollusca: Cephalopoda)
Reichard et al. Challenges in keeping annual killifish
CN109085331B (en) Method for detecting toxicity of 2,4-dinitrotoluene
Wang et al. Embryonic and larval development in the semelparous Nereid polychaete Hediste diversicolor (OF Müller, 1776) in Norway: Challenges and perspectives
Karplus et al. Shifting the natural spring–summer breeding season of the Australian freshwater crayfish Cherax quadricarinatus into the winter by environmental manipulations
RU2130717C1 (en) Method of evaluating state of ichthyological objects
Logsdon et al. Evaluation of osmotic induction of calcein treatments for marking juvenile Walleyes
Sharma et al. Effects of temperature on early development of the New Zealand geoduck Panopea zelandica (Quoy & Gaimard, 1835)
Shaharom Fish parasites of Lake Kenyir, Peninsular Malaysia
Yanuhar et al. Identification of Plankton on Fish Pond of Oreochromis niloticus Infected by Viral Nervous Necrosis
SGG Polyhouse driven raised-temperature induces cichlid tilapia to breed during winter
RU2215290C2 (en) Method of estimating toxicity of pollutants in far east seas
NO317169B1 (en) Mixing and method of labeling fish
RU2802585C9 (en) Biological method of combating saprolegniosis of fish roe during incubation of unglued eggs
RU2802585C1 (en) Biological method of combating saprolegniosis of fish roe during incubation of unglued eggs
Dohmen et al. A proposed test method for the assessment of pesticide impact on sediment dwelling larvae of the midge Chironomus riparius
Acosta-Salmón Broodstock management and egg quality of the pearl oysters Pinctada margaritifera and Pinctada fucata

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20050820