RU2123259C1

RU2123259C1 - Method of cartilage preserving

Info

Publication number: RU2123259C1
Application number: RU95101881A
Authority: RU
Inventors: С.П. Разиньков; С.З. Пискунов; А.Н. Литовка; Е.И. Лыкова
Original assignee: Курский государственный медицинский университет
Priority date: 1995-02-07
Filing date: 1995-02-07
Publication date: 1998-12-20
Also published as: RU95101881A

Abstract

FIELD: medicine, cosmetic otorhinolaryngology. SUBSTANCE: method involves transplant storage in liquid preserving solution. Transplant is taken off during operation, treated with physiological solution and placed into sterile capacity with buckwheat honey and stored at 4-5 C. Method ensures to prolong tissue preserving time in liquid medium and safe its biological plastic properties. EFFECT: simplified and safety of method. 1 cl, 1 ex, 1 tbl

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к косметической оториноларингологии. The invention relates to medicine, namely to cosmetic otorhinolaryngology.

Известен способ консервации хряща в физиологическом растворе с добавлением антибиотика. Данный раствор сохраняет морфологию микроструктуры и пластические свойства консервируемой ткани (Шаматов Н.М., Кулдишов Д.Р., Есакова Т. Д. К оценке определения жизнеспособности хряща и сухожилий в зависимости от способа консервирования методом биохемилюминесценции - Мед.журнал Узбекистана, 1975, N 7, c. 61-68). A known method of preservation of cartilage in physiological saline with the addition of an antibiotic. This solution preserves the morphology of the microstructure and the plastic properties of the preserved tissue (Shamatov N.M., Kuldishov D.R., Esakova T.D. N 7, p. 61-68).

Основной недостаток этого метода - выраженность процесса аутолиза и в связи с этим малые сроки хранения. В первые дни аутолиза появляются продукты, связанные с распадом ядерной субстанции, способные стимулировать процессы регенерации (А.А.Васильев, 1935). Скорость этих изменений зависит от количества ткани, температуры консервирования, скорости обмена вещества. В связи с этим положительное свойство всех водных растворов заключается в том, что они вымывают метаболиты, образующиеся в консервированной ткани (А.М.Килимник, 1963; А.Ф.Бродский, 1965), и автор предлагает менять раствор каждые 3-4 дня. Хрящ годен в течение 20-25 дней. Однако по данным Р.Клена замена консервирующей жидкости свежей оказывает на ткань неблагоприятное действие, ибо клеточные элементы консервируемых тканей приспосабливаются к определенным условиям (П.М.Шорлуян и др., 1974), которые обеспечивает сохраняющая их среда (значение pH, содержание сахара, солевой состав, количественные взаимоотношения ткани и консервирующей жидкости, температура консервирования). The main disadvantage of this method is the severity of the process of autolysis and, therefore, the short shelf life. In the early days of autolysis, products appear associated with the decay of nuclear substance that can stimulate regeneration processes (A.A. Vasiliev, 1935). The rate of these changes depends on the amount of tissue, the temperature of conservation, the metabolic rate. In this regard, the positive property of all aqueous solutions is that they wash out the metabolites formed in canned tissue (A.M. Kilimnik, 1963; A.F. Brodsky, 1965), and the author suggests changing the solution every 3-4 days . Cartilage is good for 20-25 days. However, according to R. Klen, replacing the preserving liquid with fresh one has an adverse effect on the tissue, because the cellular elements of the conserved tissues adapt to certain conditions (P.M.Shorluyan et al., 1974), which are ensured by their environment (pH, sugar content, salt composition, quantitative relationships of tissue and preservative fluid, preservation temperature).

Задача изобретения - продолжение срока консервирования тканей в жидкой среде, сохранив их биологические и пластические свойства. The objective of the invention is the continuation of the preservation of tissues in a liquid medium, preserving their biological and plastic properties.

Поставленная задача достигается следующим образом. Берут хрящ без надхрящницы во время операции, соблюдая все правила асептики и антисептики. Взятый хрящ помещают в стеклянную банку с медом, предварительно убирая с его поверхности остатки крови промыванием хряща в течение 10 минут в стерильном физиологическом растворе Рингер-Локка. Банку хранят в холодильнике при 4-5^oC.The task is achieved as follows. They take cartilage without perichondrium during the operation, observing all the rules of asepsis and antiseptics. The cartilage taken is placed in a glass jar of honey, previously removing blood residues from its surface by washing the cartilage for 10 minutes in a sterile physiological Ringer-Lock solution. The jar is stored in the refrigerator at 4-5 ^o C.

Сравнение предлагаемого способа с прототипом позволило установить соответствие критериев изобретения "новизна", так как хрящ, хранящийся в стеклянной банке с медом, находится в физиологических условиях, так как многие микроэлементы находятся в меде в такой же концентрации и в таком соотношении друг с другом, как и в крови человека (Н.П.Иойриш, 1976) (таб.1). Кроме того, не требуется смена консерванта. Comparison of the proposed method with the prototype allowed us to establish compliance with the criteria of the invention of "novelty", since the cartilage stored in a glass jar with honey is in physiological conditions, since many trace elements are in honey in the same concentration and in the same ratio to each other as and in human blood (N.P. Ioyrish, 1976) (tab. 1). In addition, no preservative change is required.

Если сравнивать минеральный состав плазмы крови и меда, то различия обнаруживаются несущественные. Именно это сходство роднит мед с живым организмом. В меде имеются белковые вещества и ряд витаминов. Это в основном витамины группы B (B₁, B₂, B₃ и B₆ - понтатеновая кислота) и C, PP, K, E, каротин - провитамин A. В нем также обнаружены гистамин и ацетилхолин. Эти жизненно важные вещества постоянно вырабатываются в здоровом организме.If we compare the mineral composition of blood plasma and honey, then the differences are found to be insignificant. It is this similarity that makes honey akin to a living organism. In honey, there are protein substances and a number of vitamins. These are mainly B vitamins (B ₁ , B ₂ , B ₃ and B ₆ - pontatenic acid) and C, PP, K, E, carotene - provitamin A. It also contains histamine and acetylcholine. These vital substances are constantly produced in a healthy body.

Натуральный пчелиный мед обладает сильными противомикробными свойствами, порой даже более сильными, чем антибиотики. 9 - 10%-ный Раствор меда убивает многих микробов через 24 - 48 часов. В меде имеются антибиотики - фитонциды, тормозящие размножение гноеродных бактерий, в частности стрептококков и стафилококков, а также некоторых простейших - возбудителей трихомонадных заболеваний. Natural bee honey has strong antimicrobial properties, sometimes even stronger than antibiotics. A 9 - 10% Honey Solution kills many germs in 24 to 48 hours. In honey, there are antibiotics - phytoncides, which inhibit the reproduction of pyogenic bacteria, in particular streptococci and staphylococci, as well as some protozoa - causative agents of trichomonas diseases.

Способ осуществляется следующим образом. The method is as follows.

I Этап. I Stage.

Вначале готовится стеклянная банка, которая предварительно стерилизуется в сухожаровом шкафу при температуре 120^oC.First, a glass jar is prepared, which is pre-sterilized in a dry oven at a temperature of 120 ^o C.

II Этап. II Stage.

В качестве консервирующего материала используется гречишный мед. По своему качественному составу аминокислот и витаминов отличается большой активностью ферментов каталазы, диастазы, инвертазы. Мед слегка подогревается на водяной бане до температуры 37^o - 39^oC и заливается в стерильную посуду, чтобы было равномерное заполнение банки и не образовывалось воздушных полостей.Buckwheat honey is used as a preservative material. In its qualitative composition of amino acids and vitamins, it is characterized by the high activity of the enzymes catalase, diastase, invertase. Honey is slightly heated in a water bath to a temperature of 37 ^o - 39 ^o C and poured into sterile dishes so that the jar is evenly filled and no air cavities are formed.

III Этап. Stage III.

Во время операций на носовой перегородке, когда требуется резицировать искривленный участок, хрящ удаляется, но резицируемый участок забирается без надхрящницы. По ходу забора материала соблюдают правила асептики и антисептики. Взятый хрящ очищают от остатков крови, промывая его в физиологическом растворе с добавлением антибиотика в течение 1 минуты. После этого высушивают стерильным тампоном и помещают в заранее приготовленный консервант. Сосуд закрывается стерильной пробкой и ставится в холодильник. В холодильнике поддерживается температура 4-5^oC. Срок хранения хряща достигает 60 дней.During operations on the nasal septum, when it is necessary to resect the curved area, the cartilage is removed, but the resected area is taken without perichondrium. In the course of sampling, observe the rules of asepsis and antiseptics. The taken cartilage is cleaned of blood residues, washing it in physiological saline with the addition of an antibiotic for 1 minute. Then dried with a sterile swab and placed in a pre-prepared preservative. The vessel is closed with a sterile stopper and put in the refrigerator. The refrigerator is maintained at a temperature of 4-5 ^o C. The shelf life of the cartilage reaches 60 days.

Пример конкретного выполнения. An example of a specific implementation.

Больной Д. , 20 лет, поступил в клинику ЛОР-болезней КГМУ с диагнозом: искривление носовой перегородки с резким нарушением носового дыхания. Ему произведена операция - подслизистая резекция носовой перегородки. Искривленная часть носовой перегородки резицирована. Участки хряща забраны и подготовлены по вышеописанной методике. Хрящ консервирован по двум способам. В первом случае в качестве консерванта избран физиологический раствор с антибиотиком, во втором случае гречишный мед. Patient D., 20 years old, was admitted to the clinic of ENT diseases of KSMU with a diagnosis of curvature of the nasal septum with a sharp violation of nasal breathing. He underwent an operation - submucosal resection of the nasal septum. The curved part of the nasal septum is resected. Cartilage sites were taken and prepared according to the method described above. Cartilage is preserved in two ways. In the first case, physiological saline with an antibiotic was chosen as a preservative, in the second case, buckwheat honey.

Консервированный хрящ подвергался гистологическому исследованию. Толщина срезов равнялась 10-15 мк. Окраска производилась гематоксилин-эозином. При изучении срезов хряща, фиксированного в физрастворе с добавлением антибиотика, было установлено: на 5 сутки наступает аутолиз в поверхностных участках хряща, в клетках отсутствуют ядра. В сохранившихся участках хряща клетки набухшие с выраженными дистрофическими изменениями. Результаты исследований хряща на 10 сутки показали, что нормальные структуры хряща отсутствуют на 2,3 толщины. В остальных участках определяются безъядерные, набухшие, единично сохранившиеся клетки. Через 20 суток явления аутолиза носят тотальный характер. Canned cartilage was examined histologically. The thickness of the slices was 10-15 microns. Staining was performed with hematoxylin-eosin. When studying sections of cartilage fixed in saline with the addition of an antibiotic, it was found that autolysis occurs on the 5th day in the surface portions of the cartilage, and there are no nuclei in the cells. In the preserved areas of cartilage, the cells are swollen with pronounced dystrophic changes. The results of cartilage studies on day 10 showed that normal cartilage structures are absent at 2.3 thicknesses. In the remaining areas, nuclear-free, swollen, and single-preserved cells are determined. After 20 days, the phenomena of autolysis are total.

Совершенно противоположные результаты были получены при хранении хряща того же больного в природном консерванте - пчелином меде. Проведенные гистологические исследования показали, что на протяжении 60 дней структура хряща не изменялась: клеточный состав соответствует нормальному гистологическому строению, хондроциты располагаются равномерно, обычных размеров, с сохранившимися ядрами. Quite the opposite results were obtained when storing the cartilage of the same patient in a natural preservative - bee honey. Histological studies showed that for 60 days the structure of the cartilage did not change: the cellular composition corresponds to the normal histological structure, chondrocytes are evenly distributed, of normal size, with preserved nuclei.

С применением предложенной методики изучено строение хряща у 20 больных. Using the proposed technique, the structure of cartilage was studied in 20 patients.

Таким образом, преимущества предлагаемого способа перед известным показали, что хрящ, хранившийся в меде, обнаруживает лучшую сохранность субмикроскопических структур. Thus, the advantages of the proposed method over the well-known showed that the cartilage stored in honey exhibits better preservation of submicroscopic structures.

Claims

A method of preserving cartilage in saline with the addition of an antibiotic, characterized in that the cartilage taken during surgery is treated with saline with antibiotic for 1 min, then placed in a glass container with bee buckwheat honey and stored at 4 - 5 ^o C.