RU2121297C1

RU2121297C1 - Method and device for preparation of blood smears

Info

Publication number: RU2121297C1
Application number: RU97103383A
Authority: RU
Inventors: Александр Анатольевич Гусев; Геннадий Иванович Козинец; Владимир Семенович Медовый
Original assignee: Александр Анатольевич Гусев; Геннадий Иванович Козинец; Владимир Семенович Медовый
Priority date: 1997-03-03
Filing date: 1997-03-03
Publication date: 1998-11-10

Abstract

FIELD: medicine. SUBSTANCE: method consists in the following operations. End of smearing plate is passed over slide surface on which smear is applied by means of holder. Smearing plate is inserted into holder positioned on the side at fixed angle to operating surface of slide. Smearing is performed with support on edge of smearing plate and on holder. Holder in device is arranged on the side of smearing plate and is provided with groove perpendicular to side surface of holder. Smearing plate is installed in groove for setting of its slope angle to operating surface by scale. Locking of plate in position relative to holder is effected due to friction forces and resting on operating surface with its edge and on table surface, with holder. EFFECT: provision for uniformity of smear and for adjustment of smear thickness. 2 cl, 2 dwg

Description

Изобретение относится к медицине, а именно: к способам приготовления мазков крови при клинических лабораторных исследованиях. The invention relates to medicine, namely to methods for the preparation of blood smears in clinical laboratory studies.

Известно много устройств для изготовления ровных тонких мазков на поверхности стекла, позволяющих регулировать толщину получаемого мазка за счет изменения угла наклона размазывающей пластины относительно поверхности, на которую наносится мазок (т. е. предметного стекла). Все они основаны на подведении нижнего края размазывающей пластины к капле жидкости или суспензии, в результате чего последняя растекается в угле между нижним краем размазывающей пластины и предметным стеклом под действием капиллярных сил, после чего размазывающую пластину перемещают параллельно длине предметного стекла, в результате чего она увлекает за собой указанную жидкость, и образуется мазок, толщина которого определяется указанным углом и скоростью перемещения размазывающей пластины относительно предметного стекла. There are many devices for making smooth thin strokes on a glass surface, which allow you to adjust the thickness of the resulting smear by changing the angle of inclination of the smearing plate relative to the surface on which the smear is applied (i.e., a glass slide). All of them are based on bringing the lower edge of the spreading plate to a drop of liquid or suspension, as a result of which the latter spreads in the corner between the lower edge of the spreading plate and the slide under the action of capillary forces, after which the spreading plate is moved parallel to the length of the slide, as a result of which it carries away the specified liquid, and a smear is formed, the thickness of which is determined by the specified angle and the speed of movement of the smearing plate relative to the slide.

В известных способах и устройствах размазывающую пластину закрепляют симметрично относительно ее боковых граней в размазывающем узле, относительно которого перемещается предметное стекло. Такой способ и использующие его устройства обладают существенным недостатком, состоящим в том, что при наличии небольшого перекоса верхней поверхности предметного стекла относительно его нижней поверхности, лежащей на основании устройства для приготовления мазков, мазок получается неравномерной толщины по ширине мазка. При этом даже при отсутствии перекоса стекла остается необходимость очень точного выравнивания относительно положения узлов крепления размазывающей пластины, требующей микронной точности обработки деталей при изготовлении соответствующих устройств, что приводит к их высокой стоимости. В других устройствах размазывающая пластина закрепляется симметрично, но с возможностью люфта в точках закрепления, что обеспечивает хороший контакт с поверхностью предметного стекла. Недостатком такого способа является сложность конструкции размазывающего узла. In known methods and devices, the spreading plate is fixed symmetrically relative to its side faces in the spreading unit, relative to which the slide is moving. This method and the devices using it have a significant drawback, namely, that in the presence of a slight bias in the upper surface of the glass slide relative to its lower surface lying on the basis of the device for preparing smears, the smear is obtained with an uneven thickness across the width of the smear. In this case, even in the absence of glass skew, there remains the need for very precise alignment with respect to the position of the mountings of the spreading plate, which requires micron precision in the processing of parts in the manufacture of the corresponding devices, which leads to their high cost. In other devices, the spreading plate is fixed symmetrically, but with the possibility of play at the attachment points, which provides good contact with the surface of the glass slide. The disadvantage of this method is the design complexity of the spreading assembly.

Существуют способы симметричного закрепления размазывающей пластины с приложением прижимающей силы с одной боковой стороны размазывающей пластины. Недостатком их является невозможность менять угол наклона размазывающей пластины. There are methods for symmetrically fixing the spreading plate with a clamping force on one side of the spreading plate. Their disadvantage is the inability to change the angle of the spreading plate.

В патенте США 4407843 описано устройство для закрепления размазывающей пластины только с одного ее бокового края с возможностью менять угол наклона в процессе движения размазывающей пластины с целью компенсировать уменьшение объема размазываемой крови в процессе размазывания путем изменения угла наклона по определенному закону в процессе перемещения размазывающей пластины относительно предметного стекла. При этом считается, что равномерность толщины мазка обеспечивается за счет изменения угла наклона размазывающей пластины или за счет изменения скорости перемещения размазывающей пластины. Недостатком такого подхода является то, что здесь под равномерностью понимается только равномерность плотности распределения форменных элементов по поверхности мазка и не учитывается толщина слоя плазмы, покрывающей форменные элементы крови. Оказывается, что недостаточная толщина слоя плазмы приводит к деформации клеточных элементов в процессе подготовки мазка, в частности, к исчезновению пэлора у эритроцитов. Перемещение размазывающей пластины с переменной скоростью осуществляется шаговым двигателем, управляемым от компьютера по заранее заданной программе, что не позволяет достаточно гибко подстраиваться к разной вязкости крови у разных пациентов. US Pat. No. 4,407,843 describes a device for fixing a spreading plate from only one of its lateral edges with the ability to change the angle of inclination during movement of the spreading plate in order to compensate for the decrease in the volume of spreading blood during spreading by changing the angle of inclination according to a certain law in the process of moving the spreading plate relative to the subject glass. It is believed that the uniformity of the thickness of the smear is provided by changing the angle of inclination of the smearing plate or by changing the speed of movement of the smearing plate. The disadvantage of this approach is that here, uniformity is understood only as uniformity of the distribution density of the formed elements over the surface of the smear and the thickness of the plasma layer covering the formed blood elements is not taken into account. It turns out that insufficient thickness of the plasma layer leads to deformation of cellular elements during the preparation of the smear, in particular, to the disappearance of pelor in red blood cells. Moving the spreading plate with variable speed is carried out by a stepper motor controlled from a computer according to a predetermined program, which does not allow flexible adjustment to different blood viscosities in different patients.

В заявке Франции 2504267 описан способ обеспечения хорошего контакта размазывающей пластины с поверхностью предметного стекла за счет использования фаски на нижнем крае размазывающей пластины. Он состоит в проведении концом размазывающей пластины по поверхности предметного стекла, на которую наносится мазок, при помощи держателя, перемещаемого вдоль предметного стекла так, что плоскость размазывающей пластины перемещается параллельно самой себе, а конец размазывающей пластины находится в контакте с указанной поверхностью по всей ширине мазка. Недостатком этого способа является невозможность менять угол наклона размазывающей пластины и получать очень острые углы, необходимые для изготовления тонких мазков типа монослоя. French application 2504267 describes a method for ensuring good contact between the smearing plate and the surface of a glass slide by using a chamfer at the lower edge of the smearing plate. It consists in holding the end of the spreading plate on the surface of the slide, on which the smear is applied, with the help of a holder moving along the slide so that the plane of the spreading plate moves parallel to itself, and the end of the spreading plate is in contact with the specified surface over the entire width of the smear . The disadvantage of this method is the inability to change the angle of inclination of the smearing plate and to obtain very sharp angles necessary for the manufacture of thin strokes such as a monolayer.

Технический результат, получаемый от использования изобретения, заключается в обеспечении равномерности приготавливаемых мазков по ширине мазка с возможностью регулировать толщину получающегося мазка путем использования простого и дешевого устройства приготовления мазков. При осуществлении предлагаемого способа приготовления мазков получающиеся мазки должны иметь равномерную толщину по ширине мазка, которая должна регулироваться простым изменением конфигурации устройства. The technical result obtained from the use of the invention is to ensure uniformity of the prepared strokes across the width of the smear with the ability to adjust the thickness of the resulting smear by using a simple and cheap device for preparing smears. When implementing the proposed method for the preparation of smears, the resulting strokes should have a uniform thickness across the width of the smear, which should be regulated by a simple change in the configuration of the device.

Указанный технический результат достигается за счет того, что мазок изготавливают с помощью размазывающей пластины, проводят концом размазывающей пластины по рабочей поверхности предметного стекла, плоскость размазывающей пластины перемещается параллельно самой себе, а ее конец находится в контакте с рабочей поверхностью. Согласно изобретению размазывающую пластину устанавливают в расположенном сбоку держателе под фиксированным углом к рабочей поверхности предметного стекла и осуществляют размазывание капли крови с опорой на ребро размазывающей пластины и держатель. В устройстве технический результат достигается за счет того, что размывающая пластина закреплена в держателе с возможностью перемещения вдоль рабочей поверхности предметного стекла, держатель расположен сбоку от размазывающей пластины и снабжен пазом, перпендикулярным боковой поверхности держателя, а размазывающая пластина размещена в пазу с возможностью установки по шкале угла ее наклона к рабочей поверхности, фиксации положения относительно держателя за счет сил трения и упора на рабочую поверхность своим ребром, а держателем - на поверхность стола. The specified technical result is achieved due to the fact that the smear is made using a smearing plate, carried out with the end of the smearing plate on the working surface of the glass slide, the plane of the smearing plate moves parallel to itself, and its end is in contact with the working surface. According to the invention, a spreading plate is mounted in a lateral holder at a fixed angle to the working surface of the slide and a blood drop is smeared with support on the edge of the spreading plate and holder. In the device, the technical result is achieved due to the fact that the erosion plate is fixed in the holder with the possibility of movement along the working surface of the slide, the holder is located on the side of the smearing plate and provided with a groove perpendicular to the side surface of the holder, and the smearing plate is placed in the groove with the possibility of installation on a scale the angle of its inclination to the working surface, fixing the position relative to the holder due to friction and focusing on the working surface with its edge, and the holder on table surface.

Описанный способ можно применять для изготовления цитологических мазков, используя в качестве размазываемой суспензии - суспензию биологических клеток. К таким суспензиям относятся кровь, суспензия красного костного мозга, ликвор и др. Экспериментально нами было установлено, что за счет использования малого угла наклона нижней грани размазывающей пластины относительно поверхности, на которую наносится мазок, можно получать высококачественные мазки в виде монослоя, в которых биологические клетки расположены на некоторых расстояниях друг от друга, не соприкасаются и не налегают друг на друга, причем обеспечивается покрытие клеток межклеточной жидкостью, что исключает деформацию клеток крови в процессе высыхания мазка. Это свойство получаемых мазков очень важно для цитоморфометрических и цитофотометрических исследований. Этот же способ может применяться для нанесения фотоэмульсий на плоскую поверхность и во многих других случаях, когда требуется получить ровный тонкий слой какого-либо вещества на плоской поверхности. The described method can be used for the manufacture of cytological smears using a suspension of biological cells as a smeared suspension. Such suspensions include blood, a suspension of red bone marrow, cerebrospinal fluid, etc. We have experimentally found that by using a small angle of inclination of the lower edge of the smearing plate relative to the surface on which the smear is applied, it is possible to obtain high-quality smears in the form of a monolayer in which biological the cells are located at some distances from each other, do not touch and do not overlap, and the cells are covered with intercellular fluid, which eliminates the deformation of cells blood in the process of drying the smear. This property of the obtained smears is very important for cytomorphometric and cytophotometric studies. The same method can be used for applying emulsions on a flat surface and in many other cases when you want to get an even thin layer of any substance on a flat surface.

На чертеже фиг. 1 представлено устройство для приготовления мазков крови, на фиг. 2 отображены последовательные операции методики приготовления мазка. In the drawing of FIG. 1 shows a device for preparing blood smears, FIG. 2 shows the sequential operations of the smear preparation technique.

Устройство для приготовления мазков крови фиг. 1 представляет собой размазывающую пластину 1, рабочий конец которой 2 зашлифован специальным образом, с градуировкой 3 и держатель размазывающей пластины 4. Перемещая размазывающую пластину в пазу держателя, можно изменять угол наклона размазывающей пластины относительно поверхности, на которую наносится мазок, и, соответственно, регулировать толщину мазка. Чем меньше угол наклона, тем тоньше мазок. Вторым параметром, с помощью которого можно изменять толщину мазка, является скорость перемещения устройства: чем медленнее перемещение, тем тоньше мазок. The device for preparing blood smears of FIG. 1 is a spreading plate 1, the working end of which 2 is sanded in a special way, with a graduation of 3 and the spreading plate holder 4. By moving the spreading plate into the groove of the holder, you can change the angle of inclination of the spreading plate relative to the surface on which the smear is applied, and, accordingly, adjust smear thickness. The smaller the angle, the thinner the stroke. The second parameter with which you can change the thickness of the stroke is the speed of movement of the device: the slower the movement, the thinner the stroke.

Методика приготовления мазка (фиг. 2) соответствует общепринятой. Выставляют необходимый угол наклона размазывающей пластины, совместив передний край держателя 4 с соответствующим делением шкалы 3. Обезжиренное предметное стекло помещают на ровную горизонтальную поверхность. На правый конец предметного стекла наносят небольшую (4 мкл) каплю крови. Устройство берут в руку так, чтобы средний и безымянный пальцы находились на держателе 4, большой - на свободном ребре размазывающей пластины 1, а указательный - на верхней поверхности. Ставят конец размазывающей пластины на предметное стекло перед каплей крови, опираясь держателем на поверхность стола. Скользя по предметному стеклу, сдвигают размазывающую пластину так, чтобы рабочий конец размазывающей пластины коснулся капли крови, и дают ей равномерно растечься по всей ширине шлифта 2. Затем плавным скользящим движением влево делают мазок. Указательный палец при этом прижимает размазывающую пластину к предметному стеклу, а держатель опирается на стол, обеспечивая постоянный угол наклона размазывающей пластины относительно поверхности предметного стекла. The smear preparation technique (Fig. 2) corresponds to the generally accepted one. Set the required angle of inclination of the spreading plate, aligning the front edge of the holder 4 with the corresponding division of the scale 3. Fat-free glass slide is placed on a flat horizontal surface. A small (4 μl) drop of blood is applied to the right end of the slide. The device is taken into the hand so that the middle and ring fingers are on the holder 4, the large - on the free edge of the spreading plate 1, and the index - on the upper surface. Put the end of the smearing plate on a glass slide in front of a drop of blood, resting the holder on the table surface. Sliding on a glass slide, the spreading plate is moved so that the working end of the spreading plate touches a drop of blood and allow it to spread evenly over the entire width of the slice 2. Then, with a smooth sliding movement to the left, make a smear. In this case, the index finger presses the spreading plate against the glass slide, and the holder rests on the table, providing a constant angle of inclination of the spreading plate relative to the surface of the glass slide.

Апробация указанных способа и устройства показали, что предлагаемое устройство позволяет изготавливать мазки крови высокого качества, причем за счет надлежащего выбора угла наклона и скорости перемещения размазывающей пластины получают мазки крови, в которых клетки крови расположены в виде монослоя, причем слой плазмы оказывается достаточным для сохранения формы эритроцитов. Это является очень важным преимуществом предлагаемого устройства по сравнению с существующими устройствами для изготовления мазков крови, которые не обеспечивают сохранение формы эритроцитов в мазках типа монослоя. Testing of the indicated method and device showed that the proposed device allows the production of high-quality blood smears, and due to the appropriate choice of the slope angle and the speed of the smear plate, blood smears are obtained in which blood cells are in the form of a monolayer, and the plasma layer is sufficient to maintain shape red blood cells. This is a very important advantage of the proposed device compared to existing devices for the manufacture of blood smears, which do not ensure the preservation of the shape of red blood cells in smears such as a monolayer.

Claims

1. The method of preparation of blood smears using a smearing plate, which consists in holding the end of the smearing plate on the working surface of a glass slide on which the smear is applied, so that the plane of the smearing plate moves parallel to itself, and its end is in contact with the working surface, characterized in that the spreading plate is installed in the holder located on the side at a fixed angle to the working surface of the glass slide and smearing drops of cr ovi resting on the edge of the spreading plate and holder.

2. A device for the preparation of blood smears containing a spreading plate fixed in the holder with the possibility of movement along the working surface of the glass slide, characterized in that the holder is located on the side of the spreading plate and provided with a groove perpendicular to the side surface of the holder, and the spreading plate is placed in the groove with the ability to set the scale of the angle of its inclination to the working surface, fixing the position relative to the holder due to friction and focus on the working surface with your rib , and the holder - on the surface of the table.