RU2107298C1

RU2107298C1 - Method for immunodiagnosis of preclinical stage of malignant neoplasms

Info

Publication number: RU2107298C1
Application number: RU95121213A
Authority: RU
Inventors: Владимир Михайлович Евстропов
Original assignee: "Йелстаун Корпорейшн Н.В." ("Valestown Corporation N.V.")
Priority date: 1995-12-25
Filing date: 1995-12-25
Publication date: 1998-03-20

Abstract

FIELD: biology; medicine; research of biological materials of humans and animals by immunological methods. SUBSTANCE: lymphocytes of human or animal under study are twice incubated with 4-18 weeks' interval together with autological granulocytes, lymphocytes and granulocytes being taken in ratio 0.1: 10 - 10:0.1. Patient (animal) is twice subjected to examination and if quantity of cells interacting by contact, when registered twice, shows decline by 53% and more as compared to same index for healthy persons (animals), cancer case is diagnosed. EFFECT: higher efficiency; improved economic aspect. 1 tbl

Description

Изобретение относится к биологии и медицине, точнее к исследованию биологических материалов человека и животных иммунологическими методами. The invention relates to biology and medicine, more specifically to the study of biological materials of humans and animals by immunological methods.

Известен способ формирования группы риска с заболеванием рака пищевода (Довгалюк А.З, Столяров В.И., Семилуцкая И.Б. - авт. свид. N 1805392, 1993). Недостатками данного способа являются: узкий диагностический диапазон (только рак пищевода), низкая чувствительность теста (32% при раке пищевода против 12,3% у здоровых лиц), дороговизна теста (необходимо наличие антисывороток). A known method of forming a risk group with a disease of cancer of the esophagus (Dovgalyuk A.Z., Stolyarov V.I., Semilutskaya IB - author certificate. N 1805392, 1993). The disadvantages of this method are: a narrow diagnostic range (only cancer of the esophagus), low sensitivity of the test (32% for cancer of the esophagus versus 12.3% in healthy individuals), the high cost of the test (antisera are necessary).

Цель изобретения: повышение эффективности и экономичности способа доклинической диагностики рака. The purpose of the invention: improving the efficiency and economy of the method of preclinical diagnosis of cancer.

Поставленная цель достигается следующим образом:
Из крови общепринятым методом (Д.В.Стефани, Ю.Е.Вельтищев, Клиническая иммунология детского возраста. М.: Медицина, 1977, с.257) получают лимфоциты и гранулоциты. Эти клетки в пропорции между собой от 0,1 до 10 или от 10 до 0,1 инкубируют в среде 199 в течение от 1-2 мин до 3-х ч. Клеточную суспензию, помещенную на предметное или покровное стекло фиксируют общеизвестным способом (Никитин В. М. , Справочник методов иммунологии. Кишинев Штинца, 1992. с.с. 114,129) и окрашивают по Романовскому-Гимза.The goal is achieved as follows:
Lymphocytes and granulocytes are obtained from the blood by the generally accepted method (D.V. Stefani, Yu.E. Veltishchev, Clinical Immunology of Children. M: Medicine, 1977, p. 257). These cells in a ratio of 0.1 to 10 or 10 to 0.1 are incubated in medium 199 for 1-2 minutes to 3 hours. A cell suspension placed on a slide or coverslip is fixed in a well-known manner (Nikitin V.M., Immunology Methods Handbook, Chisinau Shtinets, 1992. pp. 114.129) and stained according to Romanovsky-Giemsa.

Под микроскопом регистрируют процент лимфоцитов, присоединивших к своей поверхности гранулоциты. При снижении данного показателя более, чем на 53% от такового практически здоровых лиц, обследование повторяют с интервалом от 4 до 18 недель. В случае получения аналогичного результата при повторном обследовании делают заключение о наличии доклинической стадии рака. Under the microscope, the percentage of lymphocytes that attach granulocytes to their surface is recorded. With a decrease in this indicator by more than 53% of that of practically healthy individuals, the examination is repeated with an interval of 4 to 18 weeks. In the case of obtaining a similar result upon repeated examination, a conclusion is made about the presence of a preclinical stage of cancer.

Пример 1. У пациента А число лимфоцитов, взаимодействующих с аутогранулоцитами снижено (по сравнению со здоровыми лицами) при первом обследовании на 63%, при повторном - на 67%. Тщательное инструментальное и гистологическое обследование показало наличие рака желудка in situ. Example 1. In patient A, the number of lymphocytes interacting with autogranulocytes is reduced (compared with healthy individuals) at the first examination by 63%, with a second examination - by 67%. A thorough instrumental and histological examination revealed the presence of gastric cancer in situ.

Пример 2. У пациента Б число лимфоцитов, взаимодействующих с аутогранулоцитами, по сравнению со здоровыми лицами, снижено, при первом обследовании, на 59%, при повторном - на 24. Инструментальное и гистологическое обследование показало наличие эрозии шейки матки. Результат - у пациента Б отсутствует доклиническая стадия рака. Example 2. In patient B, the number of lymphocytes interacting with autogranulocytes, compared with healthy individuals, was reduced by 59% at the first examination and by 24 at the second examination. Instrumental and histological examination showed cervical erosion. The result is that patient B lacks a preclinical stage of cancer.

При помощи предлагаемого способа было обследовано 55 больных раком различных стадий заболевания. У 16 пациентов диагностирован рак молочной железы, у 15 - рак матки, у 13 - рак различных отделов желудочно-кишечного тракта (желудка или кишечника). У 11 обследуемых пациентов был поставлен диагноз: рак in situ (нулевая, доклиническая стадия рака) желудка, шейки матки. Using the proposed method, 55 cancer patients of various stages of the disease were examined. In 16 patients, breast cancer was diagnosed, in 15 - cancer of the uterus, in 13 - cancer of various sections of the gastrointestinal tract (stomach or intestines). 11 examined patients were diagnosed with cancer in situ (zero, preclinical stage of cancer) of the stomach, cervix.

Примечание: n - число обследуемых в группе. Note: n is the number of subjects in the group.

Следовательно, снижение взаимодействия лимфоцитов с аутогранулоцитами (в предлагаемом способе) на доклинической стадии рака в 6,9 раз превышает таковое у здоровых лиц, что свидетельствует о высокой специфичности метода. Двукратное обследование (с интервалом в 4-18 недель) снизило число положительных результатов у здоровых лиц до 5, а процент положительных результатов - до 5,8%. Therefore, the decrease in the interaction of lymphocytes with autogranulocytes (in the proposed method) at the preclinical stage of cancer is 6.9 times higher than that in healthy individuals, which indicates a high specificity of the method. A double examination (with an interval of 4-18 weeks) reduced the number of positive results in healthy individuals to 5, and the percentage of positive results to 5.8%.

Превышение процента положительных результатов по предлагаемому способу превысило при этом процент положительных результатов у здоровых лиц в 15,5 раз. Метод, используемый в качестве прототипа, давал положительный результат при раке в 32% и у здоровых лиц - в 12,37; превышение процента положительных результатов при раке, по сравнению с контрольной группой, составлено всего 2,5 раза. Exceeding the percentage of positive results by the proposed method exceeded the percentage of positive results in healthy individuals by 15.5 times. The method used as a prototype gave a positive result for cancer in 32% and in healthy individuals - 12.37; the excess of the percentage of positive results in cancer, compared with the control group, was only 2.5 times.

Таким образом, предлагаемый способ обладает высокой чувствительностью и специфичностью и может быть использован для доклинической диагностики рака различных локализаций. Thus, the proposed method has high sensitivity and specificity and can be used for preclinical diagnosis of cancer of various localizations.

Claims

The method of immunodiagnostics of the preclinical stage of cancer, including the study of lymphocytes, characterized in that the lymphocytes are incubated twice (with an interval of 4 to 18 weeks) with autologous granulocytes (in the proportions of 0.1: 10 - 10: 0.1) and with a subsequent double registration of a decrease in the number contacting cells at 53% or more of healthy individuals are diagnosed with cancer.