RU2102870C1 - Способ выращивания растений in vitro - Google Patents
Способ выращивания растений in vitro Download PDFInfo
- Publication number
- RU2102870C1 RU2102870C1 RU94043416A RU94043416A RU2102870C1 RU 2102870 C1 RU2102870 C1 RU 2102870C1 RU 94043416 A RU94043416 A RU 94043416A RU 94043416 A RU94043416 A RU 94043416A RU 2102870 C1 RU2102870 C1 RU 2102870C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- nutrient medium
- tmtd
- vitro
- combination
- plants
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 12
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 title claims description 9
- 238000012258 culturing Methods 0.000 title 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims abstract description 15
- 239000011707 mineral Substances 0.000 claims abstract description 7
- 229960000988 nystatin Drugs 0.000 claims abstract description 7
- VQOXZBDYSJBXMA-NQTDYLQESA-N nystatin A1 Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1/C=C/C=C/C=C/C=C/CC/C=C/C=C/[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 VQOXZBDYSJBXMA-NQTDYLQESA-N 0.000 claims abstract description 7
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 claims abstract description 6
- 229960001506 brilliant green Drugs 0.000 claims abstract description 5
- HXCILVUBKWANLN-UHFFFAOYSA-N brilliant green cation Chemical compound C1=CC(N(CC)CC)=CC=C1C(C=1C=CC=CC=1)=C1C=CC(=[N+](CC)CC)C=C1 HXCILVUBKWANLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims abstract 3
- KUAZQDVKQLNFPE-UHFFFAOYSA-N thiram Chemical compound CN(C)C(=S)SSC(=S)N(C)C KUAZQDVKQLNFPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 239000003630 growth substance Substances 0.000 claims description 5
- 239000010451 perlite Substances 0.000 claims description 4
- 235000019362 perlite Nutrition 0.000 claims description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims 1
- CXKWCBBOMKCUKX-UHFFFAOYSA-M methylene blue Chemical compound [Cl-].C1=CC(N(C)C)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 CXKWCBBOMKCUKX-UHFFFAOYSA-M 0.000 abstract description 4
- 229960000907 methylthioninium chloride Drugs 0.000 abstract description 4
- REQPQFUJGGOFQL-UHFFFAOYSA-N dimethylcarbamothioyl n,n-dimethylcarbamodithioate Chemical compound CN(C)C(=S)SC(=S)N(C)C REQPQFUJGGOFQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 2
- RIOXQFHNBCKOKP-UHFFFAOYSA-N benomyl Chemical compound C1=CC=C2N(C(=O)NCCCC)C(NC(=O)OC)=NC2=C1 RIOXQFHNBCKOKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 229960002447 thiram Drugs 0.000 description 14
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 13
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 5
- 208000012868 Overgrowth Diseases 0.000 description 4
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 4
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 4
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 3
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 3
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- 241000206672 Gelidium Species 0.000 description 2
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 2
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 2
- 238000001354 calcination Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 1
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 1
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 1
- 241000228168 Penicillium sp. Species 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000002353 algacidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 230000002262 irrigation Effects 0.000 description 1
- 238000003973 irrigation Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 239000006259 organic additive Substances 0.000 description 1
- 230000008121 plant development Effects 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Pretreatment Of Seeds And Plants (AREA)
- Cultivation Of Plants (AREA)
Abstract
Использование: сельское хозяйство и биотехнология. Сущность изобретения: питательная среда содержит минеральные соли и регуляторы роста, при этом в агаризованную питательную среду вводят дополнительно тетраметилтиурамсульфид (ТМТД) в количестве 25-100 мг/л или 25-100 мг/л ТМТД и 1-20 мг/л фундазола, или 25-100 мг/л ТМТД и 1-20 мг/л фундазола в сочетании с 2,5-50 мг/л метиленового синего и 1-10 мг/л бриллиантового зеленого, а в питательную среду с твердым носителем вводят дополнительно 20-100 мг/л ТМТД или 25-100 мг/л нистатина. 2 табл.
Description
Изобретение относится к области сельского хозяйства и биотехнологии, в частности к способам микроклонального размножения растений и безвирусному семеноводству.
Известен способ микроклонального размножения и выращивания растений in vitro путем посадки микрочеренков на питательную среду, содержащую элементы минерального питания по Мурасиге-Скугу и регуляторы роста.
Недостатком указанного способа является частое "зарастание" питательной среды микроорганизмами-контаминантами при нарушении условий стерильности. Размножение микроорганизмов приводит к накоплению токсических веществ и вследствие этого гибели части растений и, следовательно, возрастанию затрат для получения необходимого их количества, и(или) для поддержания более высокого уровня стерильности.
Цель изобретения - подавление роста микроорганизмов-контаминантов, упрощение способа и снижение затрат при выращивании растений in vitro.
Предлагаемый способ выращивания растений in vitro заключается в следующем.
Посадка микрочеренков в стерильных условиях производится на питательную среду, содержащую минеральные соли, сахарозу, агар-агар и регуляторы роста, в состав которой дополнительно вводят 25-100 мг/л тетраметилтиурамдисульфида (ТМТД) или ТМТД (25-100 мг/л) и фундазол в количестве 1-20 мг/л или ТМТД(25-100 мг/л) и фундазол (1-20 мг/л) в сочетании с метиленовым синим 2,5-50 мг/л и бриллиантовым зеленым - 1- 10 мг/л. Предлагаемый способ отличается от известного способа выращивания in vitro тем, что в состав питательной среды дополнительно вводят соединения, обладающие биоцидной активностью против наиболее часто встречающихся в практике микроразмножения растений видов микроорганизмов грибной и бактериальной природы: ТМТД или ТМТД в сочетании с фундазолом или ТМТД в сочетании с фундазолом, метиленовым синим и бриллиантовым зеленым. В результате применения данного способа гибель растений вследствие "зарастания" питательной среды микроорганизмами-контаминантами снижается в 2 и более раз. Соответственно снижаются затраты, необходимые для выращивания дополнительного числа растений. При поддержании коллекций сортов и форм in vitro иногда возникает ситуация "зарастания" всех пробирок данного сорта с угрозой его потери. В случае контаминации чувствительными микроорганизмами черенкование инфицированных растений на предложенную среду позволяет сохранить коллекционный образец.
Посадка микрочеренков в стерильных или нестерильных условиях производится на стерилизованный прокаливанием перлитовый песок, пропитанный жидкой минеральной питательной средой без органических добавок, в состав которой дополнительно вводят 20-100 мг/л тетраметилтиурамдисульфида (ТМТД) или 25-100 мг/л нистатина. Применение компонентов с альгицидной активностью - ТМТД или нистатина - устраняет зарастание микроводорослями, выделяющими токсичные для растений соединения, при выращивании в нестерильных условиях или при случайном нарушении стерильности. Это позволяет также последнее микрочеренкование перед высадкой в теплицу проводить в нестерильных условиях, что позволяет упростить способ выращивания за счет более удобных манипуляций с черенками в нестерильных условиях и уменьшить необходимые площади по сравнению с пробирочной культурой.
Пример 1. Биоцидные компоненты в указанных табл. 1 и 2 концентрациях были добавлены к питательной среде для микрочеренкования, содержащей минеральные соли по Мурасиге-Скугу и регуляторы роста, а также 7 г/л агар-агара и 20 г/л сахарозы, перед ее стерилизацией автоклавированием (120oC, 20 мин). Черенки растений картофеля, поддерживавшихся in vitro в стерильной культуре, с одним-двумя междоузлиями высаживали в пробирки с питательной средой и выращивали 3-4 нед при температуре 20oC и освещенности 5000 лк. Учитывали число случайных зарастаний грибной и бактериальной инфекцией. Как видно из табл. 1, суммарное зарастание контаминантами грибной природы снижается в два и более раз при введении в состав среды ТМТД и фундазола. При этом зарастание Penicillium sp. подавляется полностью (в контроле 1.3%), а рост бактерий изменяется незначительно (табл. 2). Введение в состав среды метиленового синего и бриллиантового зеленого является эффективным в качестве антибактериального средства (табл. 2).
Пример 2. Черенки растений картофеля, поддерживавшихся in vitro в стерильной культуре, с одним-двумя междоузлиями нестерильно высаживали на перлитовый субстрат, стерилизованный прокаливанием 2 ч при 170oC и помещенный в чашки Петри, пропитанный питательной средой, содержащей раствор Кноппа или минеральные соли по Мурасиге-Скугу с добавлением регуляторов роста, а также биоцидных компонентов: 25 мг/л ТМТД или 25 мг/л нистатина. По мере подсыхания субстрата проводили полив дистиллированной водой (примерно, 1 раз в неделю). Через две недели в контрольном варианте (без добавления ТМТД или нистатина) отмечено зарастание микроводорослями, в вариантах с добавлением ТМТД и нистатина зарастание отсутствует, вес надземной части растения составляет 100-180% от контроля. Через 1 мес после посадки в контрольном варианте отмечено бурное развитие микроводорослей на поверхности перлита, растения угнетены, отдельные растения погибли, в опытных вариантах небольшой рост водорослей в местах полива, развитие растений нормальное.
Claims (1)
- Способ выращивания растений in vitro, включающий микрочеренкование и посадку микрочеренков на питательную среду, содержащую минеральные соли и регуляторы роста, отличающийся тем, что посадку микрочеренков осуществляют на агаризованную питательную среду с сахарозой или на питательную среду с твердым носителем, в качестве которого используют перлит, при этом в агаризованную питательную среду вводят дополнительно ТМТД в количестве 25 100 мг/л, или 25 100 мг/л ТМТД и 1 20 мг/л фундазола, или 25 100 мг/л ТМТД и 1 20 мг/л фундазола в сочетании с 2,5 50,0 мг/л метиленового синего и 1 10 мг/л бриллиантового зеленого, а в питательную среду с твердым носителем вводят дополнительно 20 100 мг/л ТМТД или 25 100 мг/л нистатина.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU94043416A RU2102870C1 (ru) | 1994-12-08 | 1994-12-08 | Способ выращивания растений in vitro |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU94043416A RU2102870C1 (ru) | 1994-12-08 | 1994-12-08 | Способ выращивания растений in vitro |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU94043416A RU94043416A (ru) | 1996-11-10 |
| RU2102870C1 true RU2102870C1 (ru) | 1998-01-27 |
Family
ID=20163052
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU94043416A RU2102870C1 (ru) | 1994-12-08 | 1994-12-08 | Способ выращивания растений in vitro |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2102870C1 (ru) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2181942C2 (ru) * | 1999-09-20 | 2002-05-10 | Малое научно-производственное предприятие "Биоклон" Пермской государственной сельскохозяйственной академии имени академика Д.Н. Прянишникова | Способ микроклонального размножения картофеля |
| RU2277773C2 (ru) * | 2004-07-13 | 2006-06-20 | Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московская сельскохозяйственная академия им. К.А. Тимирязева" | Способ размножения растений in vitro |
| RU2557387C1 (ru) * | 2014-06-16 | 2015-07-20 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский институт садоводства и виноградарства | СПОСОБ КЛОНАЛЬНОГО МИКРОРАЗМНОЖЕНИЯ И ОЗДОРОВЛЕНИЯ ПОДВОЕВ ЯБЛОНИ in vitro С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ АНТИБИОТИКА ГРИЗЕОФУЛЬВИН |
-
1994
- 1994-12-08 RU RU94043416A patent/RU2102870C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Трофимец Л.Н. и др. Безвирусное семеноводство картофеля (рекомендации). - М.: Агропромиздат, 1990, с.15. * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2181942C2 (ru) * | 1999-09-20 | 2002-05-10 | Малое научно-производственное предприятие "Биоклон" Пермской государственной сельскохозяйственной академии имени академика Д.Н. Прянишникова | Способ микроклонального размножения картофеля |
| RU2277773C2 (ru) * | 2004-07-13 | 2006-06-20 | Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московская сельскохозяйственная академия им. К.А. Тимирязева" | Способ размножения растений in vitro |
| RU2557387C1 (ru) * | 2014-06-16 | 2015-07-20 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский институт садоводства и виноградарства | СПОСОБ КЛОНАЛЬНОГО МИКРОРАЗМНОЖЕНИЯ И ОЗДОРОВЛЕНИЯ ПОДВОЕВ ЯБЛОНИ in vitro С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ АНТИБИОТИКА ГРИЗЕОФУЛЬВИН |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU94043416A (ru) | 1996-11-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Bonner | The role of toxic substances in the interactions of higher plants | |
| KR960014735B1 (ko) | 식물 성장 조절 방법 | |
| CN1040458C (zh) | 在泡囊状丛枝状菌根真菌存在下刺激植物生长的方法 | |
| CN107646684B (zh) | 一种竹叶兰的培育方法及其应用 | |
| EP0254419B1 (en) | An agent for preventing plant virus diseases | |
| RU2099947C1 (ru) | Биопрепарат фитоспорин для защиты растений от болезней | |
| Carlile et al. | Microbial activity in growing media-a brief review | |
| WO2018012815A1 (ko) | 바실러스 아밀로리쿼파시엔스를 이용한 식물의 생육촉진용 조성물 및 그 용도 | |
| RU2102870C1 (ru) | Способ выращивания растений in vitro | |
| Waechter-Kristensen et al. | Management of microbial factors in the rhizosphere and nutrient solution of hydroponically grown tomato | |
| Reuther | Propagation of disease-free Pelargonium cultivars by tissue culture | |
| CN110301441B (zh) | 氯喹防治根结线虫的新用途 | |
| CN109486728B (zh) | 一种蒙氏假单胞菌及其应用 | |
| JP2614913B2 (ja) | シュードモナス属細菌ｐ―４菌株、土壌病害防除剤及び土壌病害防除方法 | |
| CN102647910A (zh) | 植物培育剂，植物病害抗性诱导剂，及植物病害控制方法 | |
| JPH07255305A (ja) | 植物組織又は幼植物体の培養方法 | |
| RU2318376C1 (ru) | Способ адаптации растений к нестерильным условиям | |
| RU2061374C1 (ru) | Фунгицид и бактерицид | |
| RU2783192C1 (ru) | Способ адаптации микроклонов стевии Stevia rebaudiana Bertoni к условиям ex vitro | |
| CN110835655A (zh) | 朱槿木尔坦棉花曲叶病毒病防治方法 | |
| JPH07163334A (ja) | 蛍光性細菌の活性維持法及び保存法並びにこの培養物からなる微生物資材 | |
| RU2773675C1 (ru) | Способ получения репродукционного материала | |
| JPH0452732B2 (ru) | ||
| CN110393154B (zh) | 一种鲜食型甘薯脱毒组培苗培养方法 | |
| KR100283424B1 (ko) | 탈지면을 이용한 백합의 조직배양법 |