RU2092167C1

RU2092167C1 - Method of treatment of intestine bacteriosis

Info

Publication number: RU2092167C1
Application number: RU95102604A
Authority: RU
Inventors: А.П. Хачатрян; Н.Н. Чернова; О.Н. Марцинкевич; Т.И. Дмитриева
Original assignee: Хачатрян Ашот Папикович
Priority date: 1995-02-22
Filing date: 1995-02-22
Publication date: 1997-10-10
Also published as: RU95102604A

Abstract

FIELD: medicine, gastroenterology. SUBSTANCE: method is based on the separate implantation of intestine normal microflora at logarithmic growth phase to its different regions: lactobacilli - to an ascending region, bifidumbacteria - to transverse region, and coli bacteria - to descending region of large intestine. EFFECT: decreased treatment period, enhanced effectiveness of treatment. 2 cl, 6 dwg

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии и может быть использовано для лечения дисбактериоза кишечника. The invention relates to medicine, namely to gastroenterology and can be used to treat intestinal dysbiosis.

Существует способ лечения дисбактериоза путем восстановления нормального кишечного биоценоза с помощью препаратов, изготовленных из микроорганизмов, являющихся представителями нормальной микрофлоры кишечника человека: колибактерин, бифидумбактерин, лактобактерин, бификол (Красноговец В.Н. Дисбактериоз кишечника. -М.Медицина, 1989, с.186-187). Способ осуществляется следующим образом: лиофилизированные, сухие препараты разбавляются 1-2 мл теплой воды и принимаются во внутрь через рот от 1 до 5 доз, от 2 до 10 раз в сутки в зависимости от тяжести заболевания, в течение длительного периода от 1 до 6 мес. There is a method of treating dysbacteriosis by restoring normal intestinal biocenosis using drugs made from microorganisms that are representatives of the normal microflora of the human intestine: colibacterin, bifidumbacterin, lactobacterin, bificol (Krasnogovets V.N. Dysbacteriosis of the intestine. -M.Meditsina, 1989, p. 186 -187). The method is as follows: lyophilized, dry preparations are diluted with 1-2 ml of warm water and taken orally by mouth from 1 to 5 doses, from 2 to 10 times a day, depending on the severity of the disease, for a long period from 1 to 6 months .

Указанный способ лечения обладает рядом недостатков. Основные из них - снижение эффективности и удлинение сроков лечения. Проходя через желудочно-кишечный тракт, бактерии подвергаются воздействию различных неблагоприятных для них факторов (желудочный сок, желчь, панкреатический и дуоденальный сок, тонкокишечные ферменты), под действием которых они частично погибают, а у оставшейся части снижаются антагонистические свойства, что удлиняет сроки лечения и снижает его эффективность. The specified method of treatment has several disadvantages. The main ones are a decrease in effectiveness and prolongation of treatment time. Passing through the gastrointestinal tract, bacteria are exposed to various factors unfavorable for them (gastric juice, bile, pancreatic and duodenal juice, small intestinal enzymes), under the influence of which they partially die, and the remaining part decreases antagonistic properties, which lengthens the treatment time and reduces its effectiveness.

За прототип принят способ лечения дисбактериоза путем введения в прямую кишку с помощью клизмы живых кишечных палочек (Блохина И.Н. Дрофейчук В.Г. Дисбактериозы. Л. Медицина, 1979, с.87). Способ осуществляется следующим образом: предварительно делают очистительную клизму и с помощью груши культуру вводят в прямую кишку. Процедуру повторяют 8-10 раз. The prototype adopted a method of treating dysbiosis by introducing into the rectum using an enema of live Escherichia coli (Blokhina I.N. Drofeichuk V.G. Dysbacteriosis. L. Medicine, 1979, p. 87). The method is as follows: pre-do a cleansing enema and using a pear culture is introduced into the rectum. The procedure is repeated 8-10 times.

Недостатком существующего способа является то, что культура вводится в нисходящие отделы прямой кишки, что не позволяет достаточной фиксации бактерий на слизистой и приводит к быстрой элиминации их из кишки с каловыми массами. Поэтому требуются многократные введения культуры, что удлиняет сроки лечения. The disadvantage of the existing method is that the culture is introduced into the descending sections of the rectum, which does not allow sufficient fixation of bacteria on the mucosa and leads to their rapid elimination from the intestine with feces. Therefore, multiple introductions of culture are required, which lengthens the treatment time.

Кроме того, при введении живой культуры не учитывается активность роста бактерий, что снижает эффективность лечения. In addition, the introduction of a live culture does not take into account the activity of bacterial growth, which reduces the effectiveness of treatment.

Целью изобретения является разработка способа, позволяющего снизить сроки и повысить эффективность лечения дисбактериоза кишечника. The aim of the invention is to develop a method to reduce the time and increase the effectiveness of the treatment of intestinal dysbiosis.

Это достигается путем раздельной имплантации препаратов из живых микроорганизмов нормальной микрофлоры кишечника в логарифмической фазе роста с помощью колоноскопа (в восходящий отдел толстой кишки лактобактерий, в поперечный отдел бифидумбактерий, в нисходящий отдел толстой кишки - колибактерий). Причем логарифмически активная фаза роста микробов находится в пределах от 26 до 38 ч от начала культивирования. This is achieved by separate implantation of preparations from living microorganisms of normal intestinal microflora in the logarithmic phase of growth using a colonoscope (in the ascending part of the colon of lactobacilli, in the transverse part of bifidumbacteria, in the descending part of the colon - colibacteria). Moreover, the logarithmically active phase of the growth of microbes is in the range from 26 to 38 hours from the start of cultivation.

Проведенные бактериальные посевы мазков, взятых у 110 пациентов из различных отделов толстой кишки, показали, что в количественном отношении в восходящем отделе толстой кишки преобладают лактобактерии, в поперечном отделе бидумбактерии, в нисходящем отделе колибактерии. Поэтому имплантация микроорганизмов нормальной микрофлоры кишечника в различные отделы толстой кишки по предлагаемому техническому решению позволяет создать оптимальные, "комфортные" условия для быстрого роста и размножения того или иного вида микроорганизма, что исключает присущие традиционным методам недостатки - гибель бактерий под влиянием желудочного сока, желчи и т.д. быструю элиминацию их из кишечника и сокращает сроки лечения. Bacterial inoculation of smears taken from 110 patients from various parts of the colon showed that quantitatively, in the ascending part of the colon, lactobacilli predominate, in the transverse part of bidumbacterium, in the descending part of colibacterium. Therefore, the implantation of microorganisms of normal intestinal microflora into various parts of the colon according to the proposed technical solution allows you to create optimal, "comfortable" conditions for the rapid growth and reproduction of a particular type of microorganism, which eliminates the inherent disadvantages of traditional methods - the death of bacteria under the influence of gastric juice, bile and etc. their rapid elimination from the intestines and reduces treatment time.

Помимо этого, в известных методах лечения используются лиофилизированные формы бактериальных препаратов или живые культуры, при которых не учитывается их активность. In addition, in the known methods of treatment, lyophilized forms of bacterial preparations or live cultures are used, in which their activity is not taken into account.

В то же время известно, что при культивации бактерии проходят несколько фаз своего развития: I фаза начальная -(лаг)фаза, при которой происходит адаптация к условиям культивирования и увеличение количества клеток; II фаза
экспоненциальная (лог)фаза, при которой происходит размножение и рост бактерий; III фаза стационарная фаза, торможение роста и размножения; IV фаза фаза отмирания (Шлегель Г. Общая микробиология. М. Мир, 1972, с.180-185).At the same time, it is known that during cultivation, bacteria undergo several phases of their development: phase I initial - (lag) phase, in which adaptation to the conditions of cultivation occurs and the number of cells increases; II phase
exponential (log) phase, in which the reproduction and growth of bacteria occurs; III phase stationary phase, inhibition of growth and reproduction; IV phase phase of death (Schlegel G. General Microbiology. M. Mir, 1972, S. 180-185).

Способ осуществляется следующим образом. После определенной подготовки кишечника больного (очистительные клизмы в течение 10 дней с подкисленными или травяными растворами) проводят колоноскопию. Скоб эндоскопа вводят поэтапно в слепую кишку. Через биопсийный канал в полость кишки проводят катетер и через него с помощью шприца имплантируют предварительно приготовленную жидкую культуру лактобактерий в количестве 20 мл в логарифмической фазе роста. Затем скоб колоноскопа, плавно вытаскивая, подводят до поперечного отдела толстой кишки, куда таким же образом имплантируют культуру бифидумбактерий в количестве 20 мл в логарифмической фазе роста. В нисходящем отделе толстой кишки проводят имплантацию культуры кишечных палочек в количестве 20 мл в логарифмической фазе роста. The method is as follows. After a certain preparation of the patient's intestines (cleansing enemas for 10 days with acidified or herbal solutions), a colonoscopy is performed. The endoscope bracket is inserted in stages into the cecum. A catheter is passed through a biopsy channel into the intestinal cavity and a pre-prepared liquid culture of lactobacilli in an amount of 20 ml is implanted using a syringe through a logarithmic growth phase. Then the staples of the colonoscope, smoothly pulling out, are brought to the transverse section of the colon, where a culture of bifidumbacteria in the amount of 20 ml is implanted in the same way in the logarithmic growth phase. In the descending section of the colon, implantation of a culture of Escherichia coli in an amount of 20 ml is carried out in the logarithmic phase of growth.

Культура кишечника микрофлоры готовится следующим образом. Из фармакологических сухих биопрепаратов бифидумбактерин, колибактерин, лактобактерин, готовится ночная культура обычным способом путем внесения в стерильных условиях препаратов в питательную среду (Методы общей бактериологии. Под ред. Герхардта Ф.-М. Мир, 1983, Т.1, гл.10, с.374-395), для коли и лактобактерий в мясную среду, для бифидумбактерий в молочную среду и культивируется в термостате в течение 26 ч при температуре 37±^oC. При этом происходит адаптация бактерий к условиям культивирования и увеличения количества клеток (I фаза, фиг. 1). Полученной ночной культурой инокулируются те же питательные среды из расчета 5% инокулянта на объем питательной среды. Засеянная среда инкубируется при 37±^oC до достижения логарифмической фазы роста бактерий (II фаза), что находится в пределах от 26 до 38 ч и соответствует максимальной скорости деления бактерий. Выделяющиеся при этом продукты метаболизма клеток начинают тормозить активное их размножение, что длится от 38 до 46 ч (III фаза). Спустя 46 ч начинается гибель клеток и уменьшение биомассы (IV фаза, фиг.1).The intestinal microflora culture is prepared as follows. From the pharmacological dry biological products bifidumbacterin, colibacterin, lactobacterin, night culture is prepared in the usual way by introducing preparations under sterile conditions into the nutrient medium (General bacteriology methods. Edited by Gerhardt F.-M. Mir, 1983, Vol. 1, Ch. 10, p. 374-395), for coli and lactobacilli in a meat environment, for bifidumbacteria in a milk environment and cultivated in a thermostat for 26 h at a temperature of 37 ± ^o C. In this case, the bacteria adapt to the conditions of cultivation and increase the number of cells (I phase , Fig. 1). The resulting culture medium is inoculated with the same culture media at the rate of 5% inoculant per volume of culture medium. The seeded medium is incubated at 37 ± ^o C until the logarithmic phase of bacterial growth (phase II) is reached, which is in the range from 26 to 38 hours and corresponds to the maximum rate of bacterial division. The products of cell metabolism that stand out in this process begin to inhibit their active reproduction, which lasts from 38 to 46 hours (phase III). After 46 hours, cell death and a decrease in biomass begin (phase IV, FIG. 1).

В 1 мл приготовленной культуры находится 10⁷ 10⁸ клеток.In 1 ml of the prepared culture there are 10 ⁷ 10 ⁸ cells.

Пример 1. Больная Ж. 42 лет, обратилась с жалобами на нерегулярный стул (1 раз в 2-3 дня), урчание, метеоризм, повышенное газообразование в кишечнике. Страдает более 20 лет. Сделан бак. анализ кала на дисбактериоз: кишечная палочка менее 1 млн. (в норме 300-400 млн/гр); лактобактерии роста нет (в норме 10⁸ 10⁹); бифидумбактерии роста нет (в норме 10⁷ 10¹¹). Патогенной микрофлоры не выявлено. Поставлен диагноз: дисбактериоз кишечника IV ст. Проведен курс десятидневной подготовки, заключающийся в проведении очистительных клизм со слабым раствором марганцево-кислого калия и ромашки. Проведена раздельная имплантация омнофлоры. При этом скоб эндоскопа введен в слепую кишку. Через биопсийный канал в полость кишки введен катетер, через который с помощью шприца имплантирована культура лактобактерий в количестве 20 мл в логарифмической фазе. Затем скоб эндоскопа, плавно вытаскивая, доведен до поперечного отдела толстой кишки, куда таким же образом имплантирована культура бифидумбактерий в количестве 20 мл. В нисходящем отделе толстой кишки проведена имплантация кишечных палочек (20 мл). В нисходящем отделе толстой кишки проведена имплантация кишечных палочек (20 мл). При повторном осмотре через пять дней после имплантации состояние значительно улучшилось, боли и метеоризм в кишечнике прошли. Стул был на второй день после имплантации, в последующие дни был регулярный, оформленный. Проведена бактериограмма через один месяц после имплантации: Кишечная палочка 260 млн/г, лактобактерии растут в разведении 10⁹, бифидумбактерии растут в 10¹¹.Example 1. Patient Zh. 42 years old, complained of irregular stools (1 time in 2-3 days), rumbling, flatulence, increased gas formation in the intestine. Suffers for more than 20 years. Tank made. analysis of feces for dysbiosis: E. coli less than 1 million (normal 300-400 million / g); there is no lactobacillus growth (normal 10 ⁸ 10 ⁹ ); there is no bifidumbacterium growth (normal 10 ⁷ 10 ¹¹ ). No pathogenic microflora was detected. Diagnosed with intestinal dysbiosis, Art. IV. A ten-day training course was carried out, consisting in conducting cleansing enemas with a weak solution of potassium permanganate and chamomile. Separate implantation of omnoflora was performed. In this case, the brackets of the endoscope are inserted into the cecum. A catheter was inserted into the intestinal cavity through a biopsy channel, through which a culture of lactobacilli in an amount of 20 ml was implanted using a syringe in a logarithmic phase. Then the brackets of the endoscope, smoothly pulling out, brought to the transverse section of the colon, where the culture of bifidumbacteria in the amount of 20 ml was implanted in the same way. In the descending part of the colon implantation of Escherichia coli was performed (20 ml). In the descending part of the colon implantation of Escherichia coli was performed (20 ml). When re-examined five days after implantation, the condition improved significantly, pain and flatulence in the intestines disappeared. The chair was on the second day after implantation, in the following days it was regular, decorated. A bacteriogram was carried out one month after implantation: Escherichia coli 260 million / g, lactobacilli grow at a dilution of 10 ⁹ , bifidumbacteria grow at 10 ¹¹ .

Пример 2. Больной Б. 71 года обратился с жалобами на частый, жидкий стул до 4-6 раз в сутки, сопровождающийся метеоризмом и болями в кишечнике. Страдает около 10 лет. По этому поводу находится на строгой диете. Сделана бактериограмма: кишечная палочка 24 млн/гр, лактобактерии 0, бифидумбактерии 0. После десяти- дневной подготовки (очистительные клизмы с раствором ромашки) проведена имплантация омнофлоры по вышеописанной методике. При повторном осмотре через пять дней стул был на третий день после имплантации, однократный, оформленный. Боли и метеоризм прошли. Проведена бактериограмма через один месяц: кишечная палочка 250 млн/г, лактобактерии растут в разведении 10⁹, бифидумбактерии в 10¹¹. Через две недели после имплантации больной был переведен на обычную диету.Example 2. Patient B., 71 years old, complained of frequent, loose stools up to 4-6 times a day, accompanied by flatulence and pain in the intestine. Suffers for about 10 years. On this occasion, is on a strict diet. A bacteriogram was made: E. coli 24 mln / g, lactobacillus 0, bifidumbacterium 0. After ten days of preparation (cleansing enemas with chamomile solution), omnoflora was implanted according to the method described above. When re-examined five days later, the stool was on the third day after implantation, a single, formalized. Pain and flatulence have passed. A bacteriogram was carried out after one month: E. coli 250 million / g, lactobacilli grow in a dilution of 10 ⁹ , bifidumbacteria in 10 ¹¹ . Two weeks after implantation, the patient was transferred to a normal diet.

Claims

1. A method of treating intestinal dysbiosis, based on the restoration of normal intestinal biocenosis using a live bacterial culture, characterized in that colonoscopy is carried out by implantation of intestinal microflora separately in the following sequence: lactic acid bacteria culture through the biopsy channel, then into the transverse culture section bifidumbacteria and further into the descending part of the colon - a culture of colibacteria, with up to 20 ml of liquid culture being introduced into each part of the intestine.

2. The method according to claim 1, characterized in that the intestinal microflora culture is introduced in the logarithmic phase of bacterial growth within 26 to 36 hours from the start of bacterial culture.