RU2089910C1 - Method of express-diagnosis of congenital infections in children - Google Patents
Method of express-diagnosis of congenital infections in children Download PDFInfo
- Publication number
- RU2089910C1 RU2089910C1 RU95106532A RU95106532A RU2089910C1 RU 2089910 C1 RU2089910 C1 RU 2089910C1 RU 95106532 A RU95106532 A RU 95106532A RU 95106532 A RU95106532 A RU 95106532A RU 2089910 C1 RU2089910 C1 RU 2089910C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- complement
- antibodies
- antigen
- serum
- rubella
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Способ относится к вирусологии, в частности к экспресс-диагностике вирусных инфекций у детей. The method relates to virology, in particular to the rapid diagnosis of viral infections in children.
Известны различные способы диагностики вирусных инфекций связанные как с выделением вирусов на различных системах (культуре ткани, куриных эмбрионах, лабораторных животных), так и по выявлению в крови больных нарастания титра антител в ходе инфекционного процесса (Общая и частная вирусология под ред. Жданова В.М. и Гайдамович С.Я. 1982, с.437-462). There are various methods for diagnosing viral infections associated with both the isolation of viruses on various systems (tissue culture, chicken embryos, laboratory animals) and the detection in the blood of patients of an increase in antibody titer during the infection process (General and private virology, edited by V. Zhdanov. M. and Gaidamovich S.Ya. 1982, p. 437-462).
Для острых вирусных инфекций характерно как выделение вирусных агентов, так и методы определения антител. Для врожденных и особенно персистирующих инфекций методы выделения вирусов чрезвычайно сложны и поэтому не приемлемы в клинической и диагностической практике. Основными направлениями диагностики врожденных инфекций цитомегалии, герпеса, краснухи, токоплазмоза являются определение антител к данным возбудителям в реакции связывания комплемента, гемагглютинации и иммунофлюоресценции (Hohne-Reich I.Doerr H.W. Die Komlementbindungreaction (KBR) in der Virusregologie: Vergleich mit moderne Immunoassays and ausgewahlten Faeebeispielen. Arzl.Lab. 1984, 30, 5-133-140). Acute viral infections are characterized by the isolation of viral agents and antibody detection methods. For congenital and especially persistent infections, virus isolation methods are extremely complex and therefore not acceptable in clinical and diagnostic practice. The main directions for the diagnosis of congenital infections of cytomegaly, herpes, rubella, tocoplasmosis are the determination of antibodies to these pathogens in the complement binding, hemagglutination and immunofluorescence reactions (Hohne-Reich I.Doerr HW Die Komlementbindungreteneheneheeheléeheenheeheeheen and Vergermogeissengegégéeissferg Vergem Arzl. Lab. 1984, 30, 5-133-140).
Недостатком данных методов является использование раститровочного способа определения концентрации антител, что снижает уровень и точность методов, а также увеличивает объем и время их проведения. Недостатков также является использование в различных диагностических лабораториях разноплановых реакций, что затрудняет трактовку результатов и возможность одновременной постановки опытов с различными антигенами в одной системе реакций. The disadvantage of these methods is the use of a raster method for determining the concentration of antibodies, which reduces the level and accuracy of the methods, and also increases the volume and time of their implementation. The disadvantages are the use of diverse reactions in various diagnostic laboratories, which complicates the interpretation of the results and the possibility of simultaneously conducting experiments with different antigens in the same reaction system.
В последние годы широко используются реакции иммуноферментного анализа (N go T.T. Lenhoff H.M. Enzyme-mediated Immunoassay, N, γ, 1987). Недостатками этих методов являются отсутствие стандартных диагностикумов для ряда инфекционных форм, а имеющиеся в зарубежных странах диагностикумы достаточно дороги и используются для ограниченного числа материалов. Кроме того, иммуноферментный и радиоиммунные методы имеют ограниченную чувствительность при выполнении метода без разделения компонентов реакции, что вызвано наличием неспецифических веществ в биологических пробах. Для избавления от неспецифики реакции используют дорогостоящие химические реактивы, проводят отмывку матриц, так как при недостаточной обработке выявляется большой процент ложноположительных результатов. Также следует отметить сложность и частую невоспроизводимость этих реакций, что приводит к необходимости контролировать их стандартными диагностическими методами. In recent years, enzyme-linked immunosorbent assays have been widely used (N go T.T. Lenhoff H.M. Enzyme-mediated Immunoassay, N, γ, 1987). The disadvantages of these methods are the lack of standard diagnostic kits for a number of infectious forms, and diagnostics available in foreign countries are quite expensive and are used for a limited number of materials. In addition, enzyme immunoassay and radioimmune methods have limited sensitivity when performing the method without separation of the reaction components, which is caused by the presence of nonspecific substances in biological samples. To get rid of the nonspecificity of the reaction, expensive chemical reagents are used, the matrices are washed, because with insufficient processing a large percentage of false-positive results is revealed. It should also be noted the complexity and frequent irreproducibility of these reactions, which leads to the need to control them with standard diagnostic methods.
Наиболее близким к предлагаемому изобретению является способ, заключающийся в том, что для диагностики антител к вирусу краснухи используется реакция связывания комплемента (Морган-Капнер, Дж.Паттисон. Методы клинической вирусологии. В кн. Вирусология, ред.Б.Мейхи, с.317-327, 1988). Стандартная реакция состоит из следующих этапов: титрование комплемент и гемолитической сыворотки; титрование связывающего комплемент антигена вируса краснухи с положительной контрольной сывороткой; титрование сыворотки больного (основной опыт), визуальный учет полученных результатов. Способ не отличается от стандартных реакций типа Барде-Жангу, Вассермана и других, однако способ достаточно трудоемкий, и результат зависит от очень точного подбора дозы используемого комплемента и краснушного антигена. Closest to the proposed invention is a method consisting in the fact that for the diagnosis of antibodies to rubella virus, the complement binding reaction is used (Morgan-Kapner, J. Pattison. Methods of clinical virology. In the book. Virology, ed. B. Meikhi, p. 317 -327, 1988). The standard reaction consists of the following steps: titration of complement and hemolytic serum; titration of the complement binding rubella virus antigen with a positive control serum; titration of the patient's serum (main experience), visual recording of the results. The method does not differ from standard reactions such as Barde-Zhangu, Wasserman and others, however, the method is quite time-consuming, and the result depends on a very accurate selection of the dose of the used complement and rubella antigen.
Основным недостатком данного способа является отсутствие количественного учета результатов, так как метод титрования и визуальный учет реакции не дает точную оценку полученных результатов. Кроме того, титрование сывороток в разведении с 1:10 до 1:160 или 1:640 дает достаточный процент ошибок, трудоемок особенно при массовом обследовании значительного числа материала от больных. The main disadvantage of this method is the lack of quantitative accounting of the results, since the titration method and visual accounting of the reaction does not give an accurate assessment of the results. In addition, titration of sera in a dilution from 1:10 to 1: 160 or 1: 640 gives a sufficient percentage of errors, is time-consuming especially when mass examination of a significant number of material from patients.
Устранению указанных недостатков может помочь предлагаемый способ экспресс-диагностики врожденных инфекций у детей с целью упрощения способа. The proposed method for the rapid diagnosis of congenital infections in children can help eliminate these drawbacks in order to simplify the method.
Поставленная цель достигается тем, что в известном способе с помощью ферментативного определения антигенов возбудитителя герпеса, цитомегалии, краснухи и токсоплазмоза и антител к ним предлагаются коммерческие диагностикумы для РСК соединять в равных объемах с исследуемым материалом, затем добавлять 4 дозы комплемента, а наличие антител или антигена определять по несвязанному комплементу выявляемому по каталитической активности лизированных бараньих эритроцитов. Способ по пункту 2 отличается тем, что собственный комплемент удаляется из исследуемого материала сорбцией его на нейтральный комплемент гемолизина и бараньих эритроцитов, обработанных 7,5-15%-ной перекиси водорода с последующим удалением центрифугированием. This goal is achieved by the fact that in the known method using enzymatic determination of antigens of the causative agent of herpes, cytomegaly, rubella and toxoplasmosis and antibodies to them, commercial diagnostic charts for CSC are combined in equal volumes with the test material, then add 4 doses of complement, and the presence of antibodies or antigen determine by unrelated complement detected by the catalytic activity of lysed lamb erythrocytes. The method according to paragraph 2 is characterized in that the native complement is removed from the test material by its sorption on the neutral complement of hemolysin and mutton erythrocytes treated with 7.5-15% hydrogen peroxide, followed by centrifugation.
Определение уровня антител производят на основе реакции связывания комплемента в сыворотке больного, соединяя ее в разведении 1:10 с равным объемом стандартного производственного или экспериментального антигена с добавлением 4 гемолизирующих доз комплемента. После одночасового контакта при 37oС на 10 мин. Пробы после этого центрифугируют 1-2 мин при 3000 об/мин и надосадочную жидкость сливают в специальные пробирки для аппарата Abbott, в которых проводят ферментативное определение вышедшего из разрушенных эритроцитов гемоглобина с помощью реактива 3%-ной перекиси водорода и 0,4%-ного раствора ортофенилендиамина, с остановкой реакции 1N H2SO4 и учетом интенсивности окраски на аппарате Abbott или спектрофотометре любого класса при длине волны 492 н/м.The level of antibodies is determined based on the complement binding reaction in the patient’s serum, combining it at a dilution of 1:10 with an equal volume of a standard production or experimental antigen with the addition of 4 hemolizing doses of complement. After one-hour contact at 37 o C for 10 minutes After that, the samples are centrifuged for 1-2 min at 3000 rpm and the supernatant is poured into special tubes for the Abbott apparatus, in which enzymatic determination of hemoglobin released from the destroyed red blood cells is carried out using a reagent of 3% hydrogen peroxide and 0.4% a solution of orthophenylenediamine, with the reaction stopping 1N H 2 SO 4 and taking into account the color intensity on an Abbott apparatus or spectrophotometer of any class at a wavelength of 492 n / m.
Отличительной особенностью данного способа является достижение цели тем, что удаление комплемента в испытуемых сыворотках достигается не прогреванием, где частично может разрушаться структура антител, а с помощью специально приготовленной смеси бараньих эритроцитов, обработанных перекисью водорода и 8-16 доз антибараньей гемолитической сыворотки, что дает возможность удалять комплемент в испытуемой сыворотке без температурного воздействия на присутствующие в ней антитела к врожденной инфекции. A distinctive feature of this method is the achievement of the goal in that the removal of complement in the test sera is achieved not by heating, where the antibody structure can partially be destroyed, but by using a specially prepared mixture of lamb erythrocytes treated with hydrogen peroxide and 8-16 doses of anti-mutant hemolytic serum, which makes it possible remove complement in the test serum without temperature exposure to the antibodies to congenital infection present in it.
Способ осуществляется следующим образом. Предварительно готовят специальные бараньи эритроциты, обработанные перекисью водорода. Для этого к 20 мл 1,5%-ного раствора эритроцитов в мединалово-вероналовом буфере (МВБ) добавляют равный объем 15%-ного раствора перекиси водорода в МВБ. Смесь выдерживают 10 мин при 37oС, затем центрифугируют при 3000 об/мин в течение 2-4 мин и осадок взвешивают в исходном (20 мл) объеме МВБ. Далее к 0,5 мл испытуемой сыворотки добавляют 0,5 мл смеси приготовленных эритроцитов с равным объемом 8-16 гемолизирующих доз гемолитической сыворотки (по 0,25 мл каждого ингредиента). Сыворотку с добавленной смесью выдерживают 12-15 мин при 37oС, затем центрифугируют 2-4 мин при 3000 об/мин, надосадок, не содержащий комплемента, отсасывают (сыворотка при этом считается разведенной 1:2).The method is as follows. Special mutton erythrocytes treated with hydrogen peroxide are preliminarily prepared. To do this, to 20 ml of a 1.5% solution of red blood cells in a medinal-veronal buffer (MVB) add an equal volume of a 15% solution of hydrogen peroxide in MVB. The mixture is kept for 10 minutes at 37 ° C. , then centrifuged at 3000 rpm for 2-4 minutes, and the precipitate is weighed in the initial (20 ml) volume of MBP. Then, 0.5 ml of a mixture of prepared red blood cells with an equal volume of 8-16 hemolytic doses of hemolytic serum (0.25 ml of each ingredient) is added to 0.5 ml of the test serum. The whey with the added mixture is kept for 12-15 minutes at 37 o C, then centrifuged for 2-4 minutes at 3000 rpm, the complement containing no complement is sucked off (the serum is considered diluted 1: 2).
Приготовленную таким образом сыворотку, разведенную 1:10, соединяют в объеме 0,05 мл с равным объемом антигена (краснухи, герпеса, цитомегалии, токсоплазмоза и др.), добавляют 0,1 мл раствора комплемента (сыворотка морской свинки, содержащая комплемент в дозе 2 ГД для используемой гемолитической системы). После добавления комплемента пробы выдерживают 60 мин при 37oС, затем добавляют гемолитическую систему в объеме 0,2 мл, состоящую из 0,1 мл 0,7% нативных бараньих эритроцитов и 0,1 мл гемолитической сыворотки, содержащей 8 ГД, разведенной на МВБ. Контролями к данному опыту являются аналогичное разведение (1: 10) испытуемой сыворотки без добавления антигена (замена его на МВБ), контроль, где антиген присутствует без сыворотки (в аналогичном разведении), и контроль комплемента, где сыворотка и антиген заменены МВБ. Во все контроли также добавляют гемолитическую систему. Добавочно ставится дополнительный контроль комплемента, где его концентрация в 1,5 раза выше, чем в основном опыте 3 ГД в объеме 0,15 мл. Пробы и контроли ставят в термостат или водяную баню при 37oС на 10-12 мин, до времени полного гемолиза в дополнительном контроле комплемента с увеличенной его дозой. Затем пробы центрифугируют при 3000 об/мин 2-4 мин до оседания эритроцитов и надосадок сливают в специальные пробирки.Serum thus prepared, diluted 1:10, is combined in a volume of 0.05 ml with an equal volume of antigen (rubella, herpes, cytomegaly, toxoplasmosis, etc.), 0.1 ml of complement solution (guinea pig serum containing complement in a dose of 2 HD for the hemolytic system used). After the complement was added, the samples were kept for 60 min at 37 ° C, then a hemolytic system was added in a volume of 0.2 ml, consisting of 0.1 ml of 0.7% native sheep erythrocytes and 0.1 ml of hemolytic serum containing 8 HD diluted in MVB. The controls for this experiment are the similar dilution (1: 10) of the test serum without adding antigen (replacing it with MBP), the control where antigen is present without serum (in the same dilution), and the complement control, where serum and antigen are replaced by MBP. A hemolytic system is also added to all controls. In addition, additional complement control is placed, where its concentration is 1.5 times higher than in the main experiment of 3 HD in a volume of 0.15 ml. Samples and controls are placed in a thermostat or water bath at 37 o C for 10-12 minutes, until complete hemolysis in the additional complement control with an increased dose. Then the samples are centrifuged at 3000 rpm for 2-4 minutes until the erythrocytes settle and the supernatant is poured into special tubes.
Следующий этап способа количественный учет визуально нерегистрируемого гемолиза. Для этого в пробирки с надосадком добавляют 0,5 мл раствора, состоящего из равного количества 3%-ной перекиси водорода и 0,4%-ного раствора ортофенилендиамина в МВБ. Появляющееся через 2-3 мин окрашивание усиливают и фиксируют 1,0 мл 1N H2SО4 в дистиллированной воде. Интенсивность полученного розово-коричневого окрашивания измеряют спектрофотометрически при длине волны 492 н/м или на различных аппаратах для иммуноферментного анализа (Abbott, Diaplus и др. ) или на стандартных спектрофотометрах типа СФ-4, СФ-4С, СФ-16, СФ-26 или других марок.Наличие антител считают при 50- и более процентном снижении показателей экстинции в сравнении с контролем исследуемой сыворотки без антигена, или антигена без сыворотки (от меньшего показателя из этих двух контролей). Если необходимо определение титра антител, предварительно титруют сыворотку с известным исходным титром и расчет титра испытуемой сыворотки проводят по сравнению с показателем экстинции этой сыворотки и контрольной (иммунной) в соответствующем разведении 1:10.The next step of the method is the quantitative accounting of visually unregistered hemolysis. For this, 0.5 ml of a solution consisting of an equal amount of 3% hydrogen peroxide and a 0.4% solution of orthophenylenediamine in the MBE is added to test tubes with a supernatant. The staining that appears after 2-3 minutes is enhanced and fixed with 1.0 ml of 1N H 2 SO 4 in distilled water. The intensity of the obtained pink-brown staining is measured spectrophotometrically at a wavelength of 492 n / m or on various enzyme-linked immunosorbent assays (Abbott, Diaplus, etc.) or on standard spectrophotometers such as SF-4, SF-4C, SF-16, SF-26 or other brands. The presence of antibodies is considered at a 50% or more decrease in extinction compared with the control of the test serum without antigen, or antigen without serum (from the smaller indicator of these two controls). If it is necessary to determine the titer of antibodies, pre-titrate the serum with a known initial titer and the calculation of the titer of the test serum is carried out in comparison with the extinction of this serum and the control (immune) in an appropriate dilution of 1:10.
Пример 1. Больной Ш.С. 4 мес, история болезни N 1564. Поступил в клинику ЛНИИДИ с диагнозом ОРВИ, ОТИТ, подозрение на врожденную инфекцию. При обследовании больного на наличие антител к вирусу краснухи базовым методом в реакции связывания комплемента выявлен титр антител к краснухе 1:20. При обследовании больного заявляемым способом получены следующие результаты, приведенные в табл.1. Из представленных данных очевидно, что у больного выявлены антитела к вирусу краснухи, которые при калибровочном пересчете по отношению к стандартной иммунной сыворотке к краснухе соответствует титру 1: 160. При дополнительном обследовании матери ребенка была подтверждена врожденная инфекция титр антител к краснухе в крови матери соответствовал 1:320. Example 1. Patient Sh.S. 4 months, medical history N 1564. He was admitted to the LNIIDI clinic with a diagnosis of SARS, OTIT, suspected congenital infection. When examining the patient for the presence of antibodies to rubella virus by the basic method, a titer of rubella antibodies of 1:20 was detected in the complement binding reaction. When examining a patient by the claimed method, the following results are obtained, shown in table 1. From the presented data, it is obvious that the patient showed antibodies to rubella virus, which, when calibrated against standard rubella immune serum, corresponds to a titer of 1: 160. An additional examination of the mother of the child confirmed a congenital infection, the titer of rubella antibodies in the mother's blood corresponded to 1 : 320.
Пример 2. Больная Г.Д. 3 года, обследовалась амбулаторно в ЛНИИДИ, с диагнозом хроническая сочетанная вирусно-бактериальная инфекция. При обследовании базовым методом выявлены следующие результаты, приведенные в табл.2. Example 2. Patient G. D. 3 years, was examined on an outpatient basis at LNIIDI, with a diagnosis of chronic combined viral and bacterial infection. When examining the basic method, the following results are shown, are given in table.2.
В реакции непрямой иммунофлюоресценции к токсоплазмозу выявлено слабо-положительной свечение (+). In the reaction of indirect immunofluorescence to toxoplasmosis, a slightly positive luminescence (+) was detected.
При обследовании больной предлагаемым способом выявлены следующие показатели, приведенные в табл.3. When examining a patient by the proposed method, the following indicators are identified, are given in table.3.
У больной обнаружены антитела к антигену токсоплазмоза в титре 1:320, к другим антигенам антитела не выявлены. При дополнительном обследовании матери были выявлены антитела к токсоплазмозу в титре 1:40. Окончательный вирусологический диагноз токсоплазменная инфекция. The patient found antibodies to the toxoplasmosis antigen in a titer of 1: 320, antibodies to other antigens were not detected. An additional examination of the mother revealed antibodies to toxoplasmosis in a titer of 1:40. The final virological diagnosis of toxoplasma infection.
Предлагаемый способ имеет следующие преимущества. The proposed method has the following advantages.
1. На первом этапе удаление комплемента из испытуемых сывороток осуществляется не прогреванием при 56oС 30 мин, когда происходит иногда не обнаруживаемое разрушение структур антител, особенно некоторых фракций IgJ. Этот факт очень важен при врожденных инфекциях, особенно у детей раннего возраста до года, где устойчивость антител к температурному фактору может быть снижена. Введение такого иммунного комплекса эритроциты, обработанные Н2О2 + гемолизин, в сыворотку приводит к сорбции на себя комплемента, при этом лизиса эритроцитов не происходит, и поэтому комплемент легко удаляется из сыворотки центрифугированием.1. At the first stage, the removal of complement from the test sera is carried out without heating at 56 ° C for 30 minutes, when sometimes undetectable destruction of antibody structures occurs, especially some IgJ fractions. This fact is very important in congenital infections, especially in young children up to a year, where the resistance of antibodies to the temperature factor can be reduced. The introduction of such an immune complex erythrocytes treated with H 2 O 2 + hemolysin into the serum leads to sorption of complement on itself, while red blood cell lysis does not occur, and therefore the complement is easily removed from the serum by centrifugation.
2. Постановка реакции связывания комплемента с использованием одного разведения испытуемой сыворотки и одного разведения антигена с дальнейшей количественной оценкой гемолиза облегчает массовое обследование, так как не нужно титровать сыворотки, уточняет данные испытания, исключая ошибку разведения при титровании, а также дает возможность использования в одной реакции нескольких антигенов вирусов. 2. The formulation of the complement binding reaction using one dilution of the test serum and one dilution of the antigen with further quantification of hemolysis facilitates mass screening, since it is not necessary to titrate the serum, clarifies the test data, excluding the dilution error during titration, and also makes it possible to use it in one reaction several virus antigens.
3. Способ основан на использовании минимальных доз комплемента и, что важно, субгемолитических эффектax комплемента, что повышает чувствительность метода. Эти субгемолитические эффекты комплемента невозможно определить визуально, и поэтом в предлагаемом способе использовали каталазный эффект гемоглобина. С помощью ферментного перекисного теста определяется гемоглобин по взаимодействию атомарного кислорода с ортофенилендиамином, цвет которого усиливает и закрепляется 1N H2SO4. Таким образом, уровень гемоглобина, вышедшего из гемолизированной части эритроцитов, не имеет окраски, или она очень слаба и составляет не более 0,100 ОЕ при 410 н/м. С помощью ферментного теста усиливаются числовые показатели до 0,250-0,500 ОЕ и более для 492 н/м. Этот метод позволяет выявить снижение показателя цветности под действием специфических (несколько молей) антител в иммунном комплексе с антигеном в пределах титра антител от 1:10 до 1:640, что невозможно при визуальном или прямом инструментальном выявлении гемоглобина при таких используемых дозах комплемента.3. The method is based on the use of minimal doses of complement and, importantly, subhemolytic effects of complement, which increases the sensitivity of the method. These subhemolytic effects of complement cannot be determined visually, and therefore, the catalase effect of hemoglobin was used in the proposed method. Using an enzyme peroxide test, hemoglobin is determined by the interaction of atomic oxygen with orthophenylenediamine, the color of which strengthens and is fixed by 1N H 2 SO 4 . Thus, the level of hemoglobin emerging from the hemolyzed part of the red blood cells is not colored, or it is very weak and is not more than 0.100 OU at 410 n / m. Using an enzyme test, numerical indicators are enhanced up to 0.250-0.500 OE or more for 492 n / m. This method allows to detect a decrease in the color index under the action of specific (several moles) antibodies in the immune complex with an antigen within the titer of antibodies from 1:10 to 1: 640, which is impossible with visual or direct instrumental detection of hemoglobin at such used doses of complement.
По сравнению с базовыми аналогами (иммуноферментным или радиоиммунным тестами) способ обладает равной с ИФМ чувствительностью, но обладает рядом преимуществ. Во-первых он более стабилен, не нуждается в длительных отмывках при постановке этапов исследования. Во-вторых, он универсален для различных антигенов. На последующих этапах способ может быть унифицирован с использованием стандартных общих ингредиентов (комплемент, гемолизин, перекись водорода, ортофенилдиамин Харьковского производства завода химических препаратов). И в третьих, для этого способа может быть использован любой производственный антиген возбудителя вирусных инфекций, приготовленный для РСК, РТГА, реакции нейтрализации и других реакций после соответствующей проверки. Так, в частности, был использован в таком способе стандартный антиген вируса краснухи, предназначенный для постановки РТГА, который использовали в рабочем разведении 1:8. Compared to basic analogues (enzyme immunoassay or radioimmune tests), the method has the same sensitivity as the IFM, but has several advantages. Firstly, it is more stable, does not need long-term washing when setting the stages of the study. Secondly, it is universal for various antigens. At subsequent stages, the method can be standardized using standard common ingredients (complement, hemolysin, hydrogen peroxide, orthophenyl diamine from the Kharkov production of a chemical plant). And thirdly, for this method, any production antigen of a viral infection causative agent prepared for CSC, RTGA, neutralization reaction, and other reactions after appropriate verification can be used. So, in particular, the standard rubella virus antigen intended for the production of RTGA was used in this method, which was used in a working dilution of 1: 8.
Экономический расчет предлагаемого способа показал его значительную эффективность. The economic calculation of the proposed method showed its significant effectiveness.
Claims (2)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU95106532A RU2089910C1 (en) | 1995-04-24 | 1995-04-24 | Method of express-diagnosis of congenital infections in children |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU95106532A RU2089910C1 (en) | 1995-04-24 | 1995-04-24 | Method of express-diagnosis of congenital infections in children |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU95106532A RU95106532A (en) | 1997-02-27 |
| RU2089910C1 true RU2089910C1 (en) | 1997-09-10 |
Family
ID=20167126
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU95106532A RU2089910C1 (en) | 1995-04-24 | 1995-04-24 | Method of express-diagnosis of congenital infections in children |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2089910C1 (en) |
-
1995
- 1995-04-24 RU RU95106532A patent/RU2089910C1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Морган-Капнер, Дж.Паттисон. Методы клинической вирусологии. В кн. "Вирусология"./ Под ред. Б.Мейхи. - М.: 1988, с. 317-327. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU95106532A (en) | 1997-02-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4294817A (en) | Method of fluoro immunoassay | |
| CA1268419A (en) | Immunoassay for htlv-iii antigens | |
| US4960715A (en) | Diagnostic test methods | |
| Grauballe et al. | Optimized enzyme‐linked immunosorbent assay for detection of human and bovine rotavirus in stools: Comparison with electron‐microscopy, immunoelectro‐osmophoresis, and fluorescent antibody techniques | |
| US4639419A (en) | Immunological color change test involving two differently colored reagent spots | |
| Wardrop | Clinical blood typing and crossmatching | |
| RU2397178C1 (en) | Diagnostic test system in immunochip format and differential serum diagnostics of syphilis | |
| Tecles et al. | Analytical validation of commercially available methods for acute phase proteins quantification in pigs | |
| FI63493C (en) | PAIDISANDE AV HEPATITIS B YTANTIGEN GENOM LATEX AGGLUTINATION | |
| Desmyte et al. | The IgM antibody response in rubella during pregnancy | |
| Wu et al. | Validation of 2 commercial Neospora caninum antibody enzyme linked immunosorbent assays | |
| KENT et al. | Measurement of IgG in equine blood by immunoturbidimetry and latex agglutination | |
| US4814269A (en) | Diagnostic testing for antibodies against microorganisms | |
| RU2089910C1 (en) | Method of express-diagnosis of congenital infections in children | |
| Popow‐Kraupp | Enzyme‐linked immunosorbent assay (ELISA) for mumps virus antibodies | |
| US3826821A (en) | Reagents for the diagnosis of infectious mononucleosis and preparation of same | |
| EP0348159A2 (en) | Rapid stick test for detecion of antibodies in a specimen | |
| JPH02298866A (en) | Oxygen assay kit and method applicable for complete cell | |
| WO1988009933A1 (en) | Immunoassay method | |
| Duguid et al. | New technology in hospital blood banking. | |
| US3733398A (en) | Determining and reversing anticomplementary activity in complement fixation test for australia antigen | |
| RU2203499C1 (en) | Method for carrying out diagnostic reaction at brucellosis | |
| RU2800607C1 (en) | Elisa test system for the detection of antibodies to blv in blood serum and milk of cattle | |
| EP0485377A4 (en) | Solid phase immuno-assay with labelled conjugate. | |
| RU2021815C1 (en) | Method for diagnosing aleutian disease of minks |