RU2079138C1 - Method of assay of microbiological water pollution - Google Patents
Method of assay of microbiological water pollution Download PDFInfo
- Publication number
- RU2079138C1 RU2079138C1 RU9696101131A RU96101131A RU2079138C1 RU 2079138 C1 RU2079138 C1 RU 2079138C1 RU 9696101131 A RU9696101131 A RU 9696101131A RU 96101131 A RU96101131 A RU 96101131A RU 2079138 C1 RU2079138 C1 RU 2079138C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- water
- sample
- detergent
- nacl
- fluorescence intensity
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A20/00—Water conservation; Efficient water supply; Efficient water use
- Y02A20/20—Controlling water pollution; Waste water treatment
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к биологической медицине и экологии и может найти применение при оценке санитарного состояния водоемов, их пригодности для использования в качестве источника водозабора, а также для мониторинга процесса очистки питьевой воды. The invention relates to biological medicine and ecology and can find application in assessing the sanitary condition of water bodies, their suitability for use as a source of water intake, as well as for monitoring the process of drinking water purification.
Для характеристики санитарно-гигиенического состояния водоемов первостепенное значение имеет степень их микробиологической загрязнения, а также выявление в них патогенных микроорганизмов и возбудителей паразитарных заболеваний. Это обусловлено тем, что инфекционная диаррея является ведущей причиной заболеваемости населения и детской смертности. В связи с этим выявление загрязнения водных объектов микроорганизмами играет важную роль в определении степени экологического неблагополучия региона. Причем такая оценка необходима, в первую очередь, для источников водозабора, а также для контроля процесса питьевой воды. To characterize the sanitary-hygienic state of water bodies, the degree of their microbiological contamination and the detection of pathogenic microorganisms and pathogens of parasitic diseases in them are of paramount importance. This is because infectious diarrhea is the leading cause of morbidity and infant mortality. In this regard, the identification of pollution of water bodies by microorganisms plays an important role in determining the degree of ecological disadvantage of the region. Moreover, such an assessment is necessary, first of all, for sources of water intake, as well as for monitoring the process of drinking water.
Вместе с тем, нередко возникает необходимость в экспрессной оценке санитарно-гигиенического состояния водоема, главным образом, в случае чрезвычайных ситуаций и экологических бедствий. Это требует определения микробиологической загрязненности непосредственно на месте происшествия. Однако, нам не известен метод, который позволял бы в полевых условиях в течение нескольких минут дать оценку санитарного состояния водоема. At the same time, often there is a need for an express assessment of the sanitary and hygienic condition of the reservoir, mainly in case of emergency situations and environmental disasters. This requires the determination of microbiological contamination directly at the scene. However, we do not know a method that would allow in the field for several minutes to assess the sanitary condition of the reservoir.
В настоящее время, для определения основного показателя микробиологической загрязненности воды считается достаточным показать, что исследуемый образец воды содержит бактерии, известные как специфические обитатели кишечного тракта, даже если они не являются прямыми возбудителями заболеваний, а в очаге эпидемии важен контроль общей микробиологической загрязненности воды. Бактериями, чаще всего служащими индикаторами таких загрязнений, являются Escherichia coli. Большая часть известных и обычно используемых для этого методов включает посев, инкубацию при 37o или 44oC и последующий подсчет числа колоний через 24 49 ч. [1] Основным недостатком этих методов является их длительность (1 2 суток) и непригодность для экспрессной оценки санитарно-гигиенического состояния водоема в чрезвычайных ситуациях.At present, to determine the main indicator of microbiological contamination of water, it is considered sufficient to show that the studied water sample contains bacteria known as specific inhabitants of the intestinal tract, even if they are not direct causative agents of the disease, and control of the general microbiological contamination of water is important in the outbreak. The bacteria most commonly used as indicators of such contamination are Escherichia coli. Most of the known and commonly used methods for this include seeding, incubation at 37 o or 44 o C and the subsequent calculation of the number of colonies after 24 49 hours. [1] The main disadvantage of these methods is their duration (1 2 days) and unsuitability for rapid assessment sanitary and hygienic condition of the reservoir in emergency situations.
Известны методы, включающие использование флуоресцентной индикации для определения β -D-галактозидазы фермента E.coli, который гидролизует 4-метилумбеллиферил b -D-галактозид. Это позволяет сократить время обнаружения E. coli до 1,5 1,5 ч. [2] Однако эти методы непригодны для оценки загрязненности водоемов патогенными бактериями, которые не имеют этого фермента (например, Vibro cholerae), и вирусами, то есть не годятся для объективной оценки загрязненности воды. Known methods include the use of fluorescence indications to determine β-D-galactosidase of the E. coli enzyme, which hydrolyzes 4-methylumbelliferyl b -D-galactoside. This makes it possible to reduce the detection time of E. coli to 1.5–1.5 h. [2] However, these methods are not suitable for assessing the pollution of water bodies by pathogenic bacteria that do not have this enzyme (for example, Vibro cholerae) and viruses, that is, they are not suitable for an objective assessment of water pollution.
Известны достаточно быстрые и чувствительные способы обнаружения бактерий в воде, но выполнение их связано с использованием достаточно сложного оборудования, в частности проточного цитометра [3] Способ состоит в том, что анализируемый образец, содержащий микроорганизмы, смешивается с параформальдегидом (0,5% конечная концентрация) выдерживается в течение 15 - 20 мин и находится в жидком азоте до проведения цитометрического анализа. Клетки окрашиваются ДНК-специфичным флуоресцентным красителем - 4',6-диамидино-2-фенилиндолом (ДАФИ) и затем с помощью проточного цитометра производится подсчет бактерий. Распределение клеток в соответствии с количеством содержащейся в них ДНК регистрируется в памяти компьютера этого цитометра. С помощью специальной программы компьютера подсчет количества клеток выражается как процент к стандарту (шарики диаметром 1 мкм), который добавлялся в анализируемый образец. В пределах 30 мин может быть определено число бактерий в воде в концентрации порядка 25 кл/мл. Авторы полагают, что предел определения может быть 10 бактерий/мл. Такой метод является достаточно быстрым (около 30 мин) и чувствительным, но безусловно стационарным. Так, использование в проточном цитометре в качестве источника возбуждения флуорохрома ртутной дуговой лампы (или лазера в других конструкциях приборов) требует достаточно мощного источника измерения. Проточные цитометры являются стационарным и достаточно сложным лабораторным оборудованием; из доступной литературы нам не известно их применение в полевых условиях. Known fairly fast and sensitive methods for detecting bacteria in water, but their implementation is associated with the use of rather sophisticated equipment, in particular a flow cytometer [3]. The method consists in the fact that the analyzed sample containing microorganisms is mixed with paraformaldehyde (0.5% final concentration ) is aged for 15 to 20 minutes and is in liquid nitrogen until a cytometric analysis is performed. Cells are stained with a DNA-specific fluorescent dye - 4 ', 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) and then bacteria are counted using a flow cytometer. The distribution of cells in accordance with the amount of DNA contained in them is recorded in the computer memory of this cytometer. Using a special computer program, counting the number of cells is expressed as a percentage of the standard (balls with a diameter of 1 μm), which was added to the analyzed sample. Within 30 minutes, the number of bacteria in water at a concentration of about 25 cells / ml can be determined. The authors suggest that the limit of determination may be 10 bacteria / ml. This method is quite fast (about 30 minutes) and sensitive, but certainly stationary. Thus, the use of a mercury arc lamp (or a laser in other instrument designs) as a source of excitation of a fluorochrome of a fluorochrome of a cytometer requires a sufficiently powerful measurement source. Flow cytometers are stationary and quite complex laboratory equipment; from the available literature we do not know their application in the field.
Наиболее близким к способу является метод оценки микробиологической загрязненности воды с помощью определения числа бактерий, удерживающихся на поликарбонатных фильтрах после обработки их неионным детергентом и окраски ДАФИ, путем подсчета количества люминесцирующих частиц, возбужденных УФ-освещением, с помощью эпифлуоресцентной микроскопии [4] Этот способ взят нами в качестве прототипа. Он позволяет выявить микроорганизмы в воде в течение 2 часов в концентрациях порядка 2000 кл/мл. Вместе с тем, этот способ как и вышеописанный требует стационарных условий и не может быть использован в полевых условиях, а также как экспрессный в случае чрезвычайных ситуаций. Closest to the method is a method for assessing the microbiological contamination of water by determining the number of bacteria retained on polycarbonate filters after treatment with a non-ionic detergent and staining DAPI by counting the number of luminescent particles excited by UV light using epifluorescence microscopy [4] This method is taken us as a prototype. It allows you to identify microorganisms in water for 2 hours at concentrations of the order of 2000 cells / ml. At the same time, this method as described above requires stationary conditions and cannot be used in the field, as well as express in emergency situations.
Технический результат настоящего изобретения состоит в сокращении времени оценки микробиологического загрязнения воды при сохранении высокой чувствительности определения микроорганизмов. The technical result of the present invention is to reduce the time of assessment of microbiological contamination of water while maintaining high sensitivity of the determination of microorganisms.
Этот результат достигается тем, что в известном способе оценки микробиологической загрязненности воды путем обработки пробы воды неионным детергентом, инкубации ее с ДАФИ и последующего ультрафиолетового освещения, согласно изобретению, детергентную обработку проводят в присутствии комплексона и ионной силе, соответствующей концентрации NaCl более 0,1 М, ультрафиолетовое возбуждение выполняют при lвозб= 360±5 нм , а интенсивность флуоресценции определяют при λфл = 460±5 нм, и, при превышении ее над контролем, получаемым путем аналогичной обработки пробы дистиллированной воды, более, чем на 20% микробиологическую загрязненность оценивают как эпидемиологически опасную.This result is achieved in that in the known method for assessing microbiological contamination of water by treating a water sample with a nonionic detergent, incubating it with DAPI and subsequent ultraviolet illumination, according to the invention, the detergent treatment is carried out in the presence of complexon and an ionic strength corresponding to a NaCl concentration of more than 0.1 M , ultraviolet excitation is performed at l exc = 360 ± 5 nm, and the fluorescence intensity is determined at λ fl = 460 ± 5 nm, and when it is exceeded over the control obtained by a similar sample Work of a sample of distilled water, more than 20% microbiological contamination is assessed as epidemiologically dangerous.
Целесообразно в качестве раствора для детергентной обработки использовать раствор 0,05% тритона X-100, содержащего 0,1 М Na2EDTA и 2 М NaCl при pH 7,8 8,2.It is advisable to use a solution of 0.05% Triton X-100 containing 0.1 M Na 2 EDTA and 2 M NaCl at pH 7.8 8.2 as a solution for detergent treatment.
Проведение обработки неионным детергентом в присутствии комплексона при высокой ионной силе позволяет в течение 3 5 мин солюбилизировать мембраны бактерий и тем самым обеспечить беспрепятственный доступ флуорохрома (ДАФИ) к содержащейся в микроорганизмах ДНК. Это дает возможность быстро связываться флуоресцирующему лиганду с субстратом, а так как содержание ДНК в пробах пропорционально связано с содержанием в ней микроорганизмов, то благодаря этому стало возможным быстрое количественное флуориметрическое определение числа бактерий в пробе. Определение флуоресценции осуществляется при λвозб= 360±5 нм и λфл = 460±5 нм, поскольку эти длины волн соответствуют максимумам возбуждения и флуоресценции ДАФИ. Использование последнего в качестве красителя дает возможность определить искомую величину концентрацию ДНК, а следовательно количество бактерий в пробе, как нами показано, с наименьшей погрешностью.Processing with a nonionic detergent in the presence of complexon at high ionic strength allows solubilizing bacterial membranes for 3–5 min and thereby providing unhindered access of fluorochrome (DAPI) to DNA contained in microorganisms. This makes it possible to quickly bind the fluorescent ligand to the substrate, and since the DNA content in the samples is proportionally related to the content of microorganisms in it, this made it possible to quickly quantify the number of bacteria in the sample. The determination of fluorescence is carried out at λ exc = 360 ± 5 nm and λ fl = 460 ± 5 nm, since these wavelengths correspond to the maxima of excitation and fluorescence of DAPI. Using the latter as a dye makes it possible to determine the desired concentration of DNA, and therefore the number of bacteria in the sample, as we have shown, with the smallest error.
Проведение аналогичного измерения с дистиллированной водой позволяет учесть различные температурные режимы и качество реактивов, используемых при измерении пробы. Carrying out a similar measurement with distilled water allows you to take into account the various temperature conditions and the quality of the reagents used in the measurement of the sample.
Вся эта процедура требует нескольких минут, что сокращает весь способ измерения и делает весь метод пригодным для экспрессной оценки. Кроме того, предлагаемая нами обработка неионным детергентом в присутствии комплексона при высокой ионной силе позволила достоверно определить, как нами показано, концентрацию микроорганизмов в диапазоне, начиная уже от 20 кл/мл. Это обеспечивает достаточно высокую чувствительность метода, так как значение коли-индекса 50 кл/мл является критерием экологического бедствия для поверхностных вод, служащих источниками централизованного хозяйственно-питьевого водоснабжения, независимо от наличия или отсутствия полного комплекса очистных сооружений, а значение коли-индекса 25 кл/мл - критерием чрезвычайной экологической ситуации для тех же объектов при наличии полного комплекса очистных сооружений. This whole procedure takes several minutes, which reduces the entire measurement method and makes the whole method suitable for rapid assessment. In addition, our proposed treatment with a nonionic detergent in the presence of complexon at high ionic strength allowed us to reliably determine, as we have shown, the concentration of microorganisms in the range starting from 20 cells / ml. This provides a sufficiently high sensitivity of the method, since the value of the coli index of 50 cells / ml is a criterion of environmental disaster for surface waters serving as sources of centralized drinking water supply, regardless of the presence or absence of a full range of treatment facilities, and the value of the coli index of 25 cells / ml - the criterion of environmental emergency for the same facilities in the presence of a full range of treatment facilities.
Использование в качестве лизирующей смеси раствора, содержащего 0,5% тритона X-100, 0,1 М Na2EDTA в 2 М NaCl при pH 7,8 8,2, известно для клеток млекопитающих, но для количественного определения ДНК бактерий она ранее не применялась. Вместе с тем, использование лизирующей смеси, включающей ионные детергенты, не обеспечивает количественного определения ДНК микроорганизмов, а также приводит к увеличению коэффициента вариации измеряемого параметра.The use as a lysing mixture of a solution containing 0.5% Triton X-100, 0.1 M Na 2 EDTA in 2 M NaCl at pH 7.8 8.2 is known for mammalian cells, but for the quantitative determination of bacterial DNA, it was previously not used. However, the use of a lysing mixture, including ionic detergents, does not provide a quantitative determination of the DNA of microorganisms, and also leads to an increase in the coefficient of variation of the measured parameter.
Сущность метода заключается в следующем. К 1,0 мл образца воды из исследуемого водоема добавляют детергент (лизирующую смесь), а затем через 3 - 5 минут буферный раствор, содержащий краситель ДАФИ при pH 7,4. После этого производят измерение интенсивности флуоресценции (1) приготовленной пробы при λвозб= 360 нм и λфл=460 нм. Кроме того, определяют интенсивность флуоресценции (I0) раствора, приготавливаемого аналогичным способом, но где вместо образца с суспензией клеток используют 1,0 мл дистиллированной воды. По полученному значению ΔI = I-I0, исходя из построенной калибровочной кривой с использованием E. coli в качестве объекта измерения, определяют содержание микроорганизмов в исследуемом образце и делают вывод о степени санитарно-эпидемиологической опасности источника, из которого был взят данный образец.The essence of the method is as follows. A detergent (lysing mixture) is added to 1.0 ml of a sample of water from the test reservoir, and then after 3 - 5 minutes a buffer solution containing DAPI dye at pH 7.4. After that, the fluorescence intensity (1) of the prepared sample is measured at λex = 360 nm and λfl = 460 nm. In addition, determine the fluorescence intensity (I 0 ) of a solution prepared in a similar way, but where instead of a sample with a suspension of cells, 1.0 ml of distilled water is used. Based on the obtained value ΔI = II 0 , based on the constructed calibration curve using E. coli as the measurement object, the microorganism content in the test sample is determined and a conclusion is drawn on the degree of sanitary and epidemiological danger of the source from which the sample was taken.
Сущность способа иллюстрируется следующим примером. The essence of the method is illustrated by the following example.
Для определения числа микроорганизмов в анализируемом образце предварительно строится калибровочная кривая с использованием известных концентраций бактерий в пробах. В качестве таких эталонных проб используют суспензии бактерий, содержащие от 0 до 106 E.coli на литр, приготовленные разбавлением исходного раствора с коли-индексом 7•1011 кл/л, который был установлен путем высева бактерий на агар и подсчета титра KOE. С помощью предлагаемой методики в этих же образцах были определены значения ΔI = I-I0. Полученные результаты представлены в табл.(примеры 1 7) и на графике. На чертеже представлена калибровочная кривая для определения микробиологической загрязненности воды, где по оси абсцисс-концентрация микроорганизмов в воде (кл/мл), а по оси ординат - концентрация микроорганизмов в воде (кл/мл), а по оси ординат значение превышения интенсивности флуоресценции анализируемой пробы над контролем (ΔI/I0= I/I0-1) в процентах. Как следует из данных табл. для проб с коли-индексом 25 и 50 бактерий/мл, соответствующим чрезвычайной экологической ситуации и ситуации экологического бедствия, превышение интенсивности флуоресценции над фоном (ΔI/I0) составило 22,5% и 27,9% соответственно.To determine the number of microorganisms in the analyzed sample, a calibration curve is preliminarily constructed using known concentrations of bacteria in the samples. Bacterial suspensions containing from 0 to 10 6 E. coli per liter, prepared by diluting the initial solution with a coli index of 7 • 10 11 cells / l, which was established by plating bacteria on agar and counting the KOE titer, are used as such reference samples. Using the proposed methodology, the values ΔI = II 0 were determined in the same samples. The results are presented in the table (examples 1 to 7) and on the graph. The drawing shows a calibration curve for determining the microbiological contamination of water, where along the abscissa axis is the concentration of microorganisms in water (cells / ml), and along the ordinate axis is the concentration of microorganisms in water (cells / ml), and along the ordinate axis, the excess fluorescence intensity of the analyzed control samples (ΔI / I 0 = I / I 0 -1) in percent. As follows from the data table. for samples with a coli index of 25 and 50 bacteria / ml, corresponding to the ecological emergency and the situation of environmental disaster, the excess of fluorescence intensity over the background (ΔI / I 0 ) was 22.5% and 27.9%, respectively.
Пример 1. Example 1
К 1,0 мл воды из р. Волхов добавляли 0,05 мл лизирующей смеси (содержащей 0,5% тритон X-100, 0,1 М Na2EDTA, 0,01 М трис, 2,0 М NaCl при pH 7,8 8,2) и через 3 мин 0,1 мл буферного раствора (содержащего 0,01 М NaCl, 0,01 М Na2EDTA, 0,01 М трис и краситель ДАФИ в концентрации 10 мгк/мл, pH 7,4). Затем производили измерение интенсивности флуоресценции образца на спектрофлуориметре Model-850 фирмы Хитачи (Япония) при λвозб= 360 нм и λфл=460 нм. В данном случае (пример 8 табл.) I 282 отн.ед. Параллельно определяли интенсивность флуоресценции раствора, приготавливаемого аналогичным способом, но где вместо образца с суспензией бактерий использовали 1,0 мл дистиллированной воды и нашли I0 240 отн.ед. По полученным значениям вычисляли ΔI = I-I0= 282-240=42 отн.ед. Исходя из этого, значение ΔI/I0= 42/240 ×100 = 17,5%, и по калибровочной кривой находим для р.Волхов концентрацию микроорганизмов 13 кл/мл. Так как критерием чрезвычайной ситуации является концентрация микроорганизмов в воде более 25 кл/мл, состояние воды в этой реке можно рассматривать как тревожное в случае использования ее в качестве источника водозабора.To 1.0 ml of water from the river. Volkhov was added 0.05 ml of a lysing mixture (containing 0.5% Triton X-100, 0.1 M Na 2 EDTA, 0.01 M Tris, 2.0 M NaCl at pH 7.8 8.2) and after 3 min 0.1 ml of buffer solution (containing 0.01 M NaCl, 0.01 M Na 2 EDTA, 0.01 M Tris and dye DAPI at a concentration of 10 μg / ml, pH 7.4). Then, the fluorescence intensity of the sample was measured on a Model-850 spectrofluorimeter from Hitachi (Japan) at λex = 360 nm and λfl = 460 nm. In this case (example 8 tab.) I 282 rel. In parallel, the fluorescence intensity of the solution prepared in a similar way was determined, but where instead of the sample with a suspension of bacteria, 1.0 ml of distilled water was used and I 0 240 rel. According to the obtained values, ΔI = II 0 = 282-240 = 42 rel. Based on this, the value ΔI / I 0 = 42/240 × 100 = 17.5%, and from the calibration curve we find for the Volkhov River the concentration of microorganisms of 13 cells / ml. Since the criterion of an emergency is the concentration of microorganisms in the water of more than 25 cells / ml, the state of the water in this river can be considered alarming if it is used as a source of water intake.
По сравнению с известными способ имеет ряд существенных преимуществ. Compared with the known method has several significant advantages.
1. Значительно сокращается время выполнения процедуры (до 10 минут), в то время как метод определения микроорганизмов на фильтрах (прототип) требует для своего выполнения не менее 2 часов. Это может быть решающим в случае чрезвычайных ситуаций. Чувствительность способа является достаточной для установления чрезвычайной экологической ситуации и ситуации экологического бедствия. 1. The procedure execution time is significantly reduced (up to 10 minutes), while the method for determining microorganisms on filters (prototype) requires at least 2 hours to complete. This can be crucial in case of emergency. The sensitivity of the method is sufficient to establish an emergency environmental situation and an environmental disaster situation.
2. Метод значительно проще всех известных и при наличии портативного флуориметра может быть использован в полевых условиях. 2. The method is much simpler than all known methods and in the presence of a portable fluorimeter can be used in the field.
Метод разработан в лаборатории биотестирования токсических факторов окружающей среды ЦНИРРИ МЗМП РФ, испытан на ряде штаммов микроорганизмов, и прошел апробацию при анализе воды из р.Волхов. The method was developed in the laboratory of biological testing of toxic environmental factors TsNIRRI MZMP RF, tested on a number of strains of microorganisms, and was tested in the analysis of water from the Volkhov river.
Claims (2)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU9696101131A RU2079138C1 (en) | 1996-01-30 | 1996-01-30 | Method of assay of microbiological water pollution |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU9696101131A RU2079138C1 (en) | 1996-01-30 | 1996-01-30 | Method of assay of microbiological water pollution |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2079138C1 true RU2079138C1 (en) | 1997-05-10 |
| RU96101131A RU96101131A (en) | 1997-07-27 |
Family
ID=20175961
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU9696101131A RU2079138C1 (en) | 1996-01-30 | 1996-01-30 | Method of assay of microbiological water pollution |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2079138C1 (en) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2481574C2 (en) * | 2011-05-31 | 2013-05-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Курская государственная сельскохозяйственная академия имени профессора И.И. Иванова" (ФГБОУ ВПО "Курская ГСХА") | Method of determining allowable amount of imported microbiological indicators in water bodies |
| RU2576030C1 (en) * | 2015-03-04 | 2016-02-27 | Сергей Дмитриевич Иванов | Method for detecting danger of microbiological water pollution |
| CN106290762A (en) * | 2016-07-29 | 2017-01-04 | 无锡信大气象传感网科技有限公司 | A kind of water quality detection reagent and preparation method thereof |
| RU2688745C1 (en) * | 2018-06-25 | 2019-05-22 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Санкт-Петербургский государственный технологический институт (технический университет)" | Method for determining toxicity of samples |
-
1996
- 1996-01-30 RU RU9696101131A patent/RU2079138C1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Zweifel U.L. et al Total counts of marine bacteria include a large fraction of non-nucleoid-containing bacteria (Ghosts). - Apple. Environm. Microbiol., 1995, V.61, p.2180-2185. * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2481574C2 (en) * | 2011-05-31 | 2013-05-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Курская государственная сельскохозяйственная академия имени профессора И.И. Иванова" (ФГБОУ ВПО "Курская ГСХА") | Method of determining allowable amount of imported microbiological indicators in water bodies |
| RU2576030C1 (en) * | 2015-03-04 | 2016-02-27 | Сергей Дмитриевич Иванов | Method for detecting danger of microbiological water pollution |
| CN106290762A (en) * | 2016-07-29 | 2017-01-04 | 无锡信大气象传感网科技有限公司 | A kind of water quality detection reagent and preparation method thereof |
| RU2688745C1 (en) * | 2018-06-25 | 2019-05-22 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Санкт-Петербургский государственный технологический институт (технический университет)" | Method for determining toxicity of samples |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5314805A (en) | Dual-fluorescence cell viability assay using ethidium homodimer and calcein AM | |
| Mesquita et al. | Identifying different types of bulking in an activated sludge system through quantitative image analysis | |
| Garcia-Armisen et al. | Enumeration of viable E. coli in rivers and wastewaters by fluorescent in situ hybridization | |
| US6498041B1 (en) | Optical sensors for rapid, sensitive detection and quantitation of bacterial spores | |
| AU2009269581C1 (en) | Method, kit and system for culturable cell count | |
| Farhat et al. | Online characterization of bacterial processes in drinking water systems | |
| Thiriat et al. | Determination of Giardia cyst viability in environmental and faecal samples by immunofluorescence, fluorogenic dye staining and differential interference contrast microscopy | |
| Paton et al. | Use of luminescence-marked bacteria to assess copper bioavailability in malt whisky distillery effluent | |
| US20030022270A1 (en) | Automated epifluorescence microscopy for detection of bacterial contamination in platelets | |
| Ramı́rez et al. | A rapid, direct method for assessing chlorine effect on filamentous bacteria in activated sludge | |
| RU2079138C1 (en) | Method of assay of microbiological water pollution | |
| CA1089339A (en) | Method of staining micro-organisms | |
| Aggarwal et al. | Feasibility of using a particle counter or flow-cytometer for bacterial enumeration in the assimilable organic carbon (AOC) analysis method | |
| JPH022397A (en) | Urine examination method and kit | |
| EP1204737B1 (en) | Internal quality control | |
| Smith et al. | The status of UK methods for the detection of Cryptosporidium spp oocysts and Giardia spp cysts in water concentrates | |
| CA2427106A1 (en) | Method and apparatus for prokaryotic and eukaryotic cell quantitation | |
| Coyne et al. | Frequency of MUG negative Escherichia coli in Kentucky groundwater samples | |
| RU2006027C1 (en) | Method of bioindication of water quality | |
| EP1292703B1 (en) | Biomolecular toxicity assay | |
| US20230194522A1 (en) | Methods and kits for assaying a large fluid volume using flow cytometry | |
| US7098042B2 (en) | Internal quality control | |
| JP2006042677A (en) | Method for detecting microbial cell | |
| KR100592693B1 (en) | Antibiotic sensitivity testing and a test kit | |
| JPH05322897A (en) | Method for measuring enzyme immunity of bacterium using filter |