RU2077051C1

RU2077051C1 - Method for diagnosing human malignant tumors

Info

Publication number: RU2077051C1
Application number: RU92010360A
Authority: RU
Inventors: Евгений Иванович Суслов; Константин Александрович Галахин; Виталий Александрович Владимиров
Original assignee: Евгений Иванович Суслов; Константин Александрович Галахин; Виталий Александрович Владимиров
Priority date: 1992-12-17
Filing date: 1992-12-17
Publication date: 1997-04-10

Abstract

FIELD: medicine. SUBSTANCE: method involves laying complex solution layer over blood sample taken from patient finger, then adding standard blood serum and applying calcium-protein complex developer. Some time later, color and structure of the so formed spot are compared with those of some reference preparation produced in the like manner from healthy person blood sample. Some differences being detected, malignant tumor is to be diagnosed in the patient organism. A series of optimum reagent combinations are proposed to provide reliable results. EFFECT: simplified method; reduced traumatic injuries. 5 cl, 2 tbl

Description

Изобретение относится к медицине, более конкретно к клинической онкологии и, в частности, касается способов диагностики злокачественных опухолей человека, которые могут найти применение при массовых профилактических обследованиях населения. The invention relates to medicine, more specifically to clinical oncology and, in particular, relates to methods for the diagnosis of human malignant tumors, which may find application in mass preventive examinations of the population.

Одной из главных проблем клинической онкологии является диагностика злокачественных опухолей в начальной стадии их развития, когда существующие методы лечения бывают наиболее эффективными. Современная онкологическая наука располагают рядом методов скрининговой диагностики злокачественных новообразований, позволяющих судить о наличии или отсутствии опухоли в момент обследования. One of the main problems of clinical oncology is the diagnosis of malignant tumors in the initial stage of their development, when existing methods of treatment are most effective. Modern oncological science has a number of methods for screening diagnosis of malignant neoplasms, which make it possible to judge the presence or absence of a tumor at the time of examination.

В частности, широкое распространение получила профилактическая маммография, проводимая с целью ранней диагностики злокачественных новообразований молочной железы у женского населения (A. G. Holleb. Review of Breast Cancer Screening Guidelines. Cancer Supplement, 1992; 69, с. 1911 -1912). In particular, prophylactic mammography has been widely used for the early diagnosis of breast cancer in the female population (A. G. Holleb. Review of Breast Cancer Screening Guidelines. Cancer Supplement, 1992; 69, p. 1911-1912).

Известен также метод цитологического скрининга злокачественных опухолей шейки матки (Guzick DS. Efficacy of screening for cervical cancer. A review. Am. J. Public Heath, 1978; 68, с. 125-134.) Однако использование большинства известных методов скрининговой диагностики направлено на выявление опухоли только одного органа и при проводимом обследовании могут быть пропущены другие злокачественные новообразования. Also known is the method of cytological screening for malignant tumors of the cervix (Guzick DS. Efficacy of screening for cervical cancer. A review. Am. J. Public Heath, 1978; 68, pp. 125-134.) However, the use of most known methods of screening diagnosis is aimed at detection of a tumor of only one organ, and other malignant neoplasms may be missed during the examination.

Поэтому до настоящего времени существует проблема создания универсального способа диагностики злокачественных опухолей, отвечающего требованиям, предъявляемым к скрининговым методикам. Therefore, to date, there is the problem of creating a universal method for the diagnosis of malignant tumors that meets the requirements for screening methods.

Ряд исследователей считает, что наиболее перспективными в этом направлении являются методы, основанные на определении опухолевых маркеров в биологических жидкостях организма, в частности в крови. A number of researchers believe that the most promising in this direction are methods based on the determination of tumor markers in biological body fluids, in particular in the blood.

Известен способ диагностики злокачественных опухолей человека, основанный на выявлении в крови обследуемого белковых фракций, специфичных для злокачественного роста (Короткоручко В. П. Осадочная реакция на рак при диагностике опухолевой болезни. Киев, "Наукова думка". 1967). Выявление этой белковой фракции осуществляли путем выдерживания сыворотки крови в растворе соляной кислоты с последующим осаждением белка азотной кислотой и дальнейшим растворением его в дистиллированной воде. Образующийся осадок белков сыворотки крови онкологических больных в отличие от здоровых людей не растворялся. Результат реакции, получившей название осадочной реакции на рак (ОРР), учитывали по визуальному определению белкового осадка. A known method for the diagnosis of human malignant tumors, based on the identification in the blood of the examined protein fractions specific for malignant growth (V. Korotoruchko, P. Sedimentary reaction to cancer in the diagnosis of tumor disease. Kiev, "Naukova Dumka". 1967). Identification of this protein fraction was carried out by keeping the blood serum in a solution of hydrochloric acid, followed by precipitation of the protein with nitric acid and its further dissolution in distilled water. The resulting precipitate of blood serum proteins of cancer patients, unlike healthy people, did not dissolve. The result of the reaction, called the sedimentary response to cancer (ORP), was taken into account by visual determination of protein precipitate.

Этот известный способ является универсальным и позволяет выявить различные формы и локализации злокачественных новообразований. Однако он обладает недостаточной специфичностью, т. к. ОРР часто бывает положительной при воспалительных и других неопухолевых заболеваниях. Кроме того, способ довольно трудоемкий (требуется приготовление сыворотки крови обследуемого) и травматичный (кровь для исследования берется из вены). Поэтому для проведения массовых профилактических исследований такой способ будет мало эффективен. This known method is universal and allows you to identify various forms and localization of malignant neoplasms. However, it has a lack of specificity, because ORR is often positive for inflammatory and other non-tumor diseases. In addition, the method is quite time-consuming (preparation of the blood serum of the subject is required) and traumatic (blood for the study is taken from a vein). Therefore, for carrying out mass preventive studies, this method will be little effective.

Задача изобретения создание такого способа диагностики злокачественных опухолей человека, в котором путем оригинальной методики выявления в мазке крови, взятой, преимущественно, из пальца обследуемого, определенных белковых фракций (кальций-белковых комплексов), характерных для злокачественного роста, удалось бы повысить специфичность и чувствительность способа одновременно со снижением его трудоемкости и травматичности, что позволяет, в конечном итоге, использовать этот способ для массовых профилактических обследований с целью онкологического скрининга. The objective of the invention is the creation of such a method for the diagnosis of human malignant tumors, in which, using an original technique for detecting certain types of protein fractions (calcium-protein complexes) characteristic of malignant growth in a blood smear, taken mainly from the finger of the patient, it would be possible to increase the specificity and sensitivity of the method while reducing its complexity and morbidity, which allows, ultimately, to use this method for mass preventive examinations with the aim of ologicheskogo screening.

Поставленная задача решается тем, что в способе диагностики злокачественных опухолей человека, основанном на выявлениив крови обследуемого белковых фракций, специфичных для злокачественного роста, согласно изобретению, в процессе анализа готовят мазок крови, взятой, преимущественно, из пальца обследуемого, и последовательно наносят на него раствор комплексона, стандартную сыворотку крови, а затем проявитель кальций-белковых комплексов (КБК) и после экспозиции на свету сравнивают цвет и структуру полученного пятна с цветом и структурой пятна на эталоне, выполненном аналогичным образом на мазке крови здорового человека, и при обнаружении различий диагностируют злокачественную опухоль. The problem is solved in that in a method for the diagnosis of human malignant tumors based on the detection of the blood of the examined protein fractions specific for malignant growth, according to the invention, a blood smear is taken in the analysis process, taken mainly from the finger of the examined, and a solution is sequentially applied to it complexon, standard blood serum, and then the developer of calcium-protein complexes (KBK) and after exposure to light, the color and structure of the resulting spot are compared with color and structure spot on the reference image, performed similarly in blood smear of a healthy person, and when it detects differences diagnosed with a malignant tumor.

Изобретение позволяет на основе предлагаемой обработки мазка крови визуализировать КБК, обнаружение которых является более достоверным и информативным признаком злокачественного роста. Вероятнее всего, КБК в процессе жизнедеятельности малигнизированных клеток отщепляются от их ДНК и сбрасываются в кровь (shedding effect), затем захватываются лимфоцитами и при определенных условиях обработки, предлагаемых в соответствии с изобретением, могут быть обнаружены в мазке даже периферической крови. The invention allows on the basis of the proposed treatment of a blood smear to visualize BSC, the detection of which is a more reliable and informative sign of malignant growth. Most likely, in the process of vital activity of malignant cells, BSCs are cleaved from their DNA and discharged into the blood (shedding effect), then captured by lymphocytes and, under certain processing conditions, proposed in accordance with the invention, can be detected in a smear even of peripheral blood.

Таким образом, способ согласно изобретению позволяет проводить обследования, используя мазок крови из пальца, что практически не приводит к развитию осложнений и значительно снижает трудоемкость. Указанный выше патогенез злокачественного роста характерен для опухолей любых локализаций и различного гистогенеза. С учетом вышеуказанного, можно утверждать, что предлагаемый способ является универсальным, простым в исполнении, не травматичным, достаточно специфичным и, следовательно, его можно использовать при массовых профилактических обследованиях населениях с целью онкологического скрининга. Thus, the method according to the invention allows examinations using a blood smear from a finger, which practically does not lead to the development of complications and significantly reduces the complexity. The above pathogenesis of malignant growth is characteristic of tumors of any localization and various histogenesis. In view of the above, it can be argued that the proposed method is universal, simple in execution, not traumatic, rather specific and, therefore, it can be used in mass prophylactic examinations of populations for the purpose of cancer screening.

В соответствии с одним из аспектов данного изобретения целесообразно, чтобы концентрация раствора комплексона была выбрана в пределах 1 25 Было установлено, что при концентрации раствора комплексона менее 1 значительно удлиняется время реакции, а при концентрации свыше 25 структура (зернистость) пятна определяется менее четко. In accordance with one aspect of the present invention, it is advisable that the concentration of the complexone solution be selected within the range of 1 25. It has been found that when the concentration of the complexone solution is less than 1, the reaction time is significantly extended, and if the concentration is over 25, the structure (grain) of the spot is less clearly defined.

Кроме того, желательно также, чтобы в качестве проявителя КБК был использован раствор азотно-кислого серебра концентрацией 0,1 0,5
Раствор азотно-кислого серебра является наиболее эффективным проявителем, причем, если концентрация этого раствора будет выбрана менее 0,1 продолжительность реакции увеличивается, пятно недостаточно прокрашивается и слабо проявляется зернистость. Более высокие концентрации этого раствора, а именно свыше 0,5 вызывают закрашивание очертания зернистости и затрудняют учет реакции.In addition, it is also desirable that a solution of nitric acid silver with a concentration of 0.1 0.5 be used as a developer of BCF
A solution of nitric acid silver is the most effective developer, and if the concentration of this solution is chosen less than 0.1, the reaction time increases, the stain is not sufficiently stained and the granularity is weakly manifested. Higher concentrations of this solution, namely over 0.5, cause a shading of the grain pattern and make it difficult to account for the reaction.

Важным моментом постановки реакции является соблюдение количественного соотношения используемых реагентов. Согласно одному из вариантов осуществления данного способа, предпочтительно выбирать соотношения раствора комплексона и проявителя равными (1,5 3) 1. An important point in the formulation of the reaction is compliance with the quantitative ratio of the reagents used. According to one of the embodiments of this method, it is preferable to choose the ratio of the solution of complexon and developer equal to (1.5 3) 1.

Выбор в данном соотношении раствора комплексона менее 1,5 приводит к недостаточному прокрашиванию пятна, а более 3 к полному закрашиванию получаемого изображения. The choice in this ratio of a complexon solution of less than 1.5 leads to insufficient staining of the spot, and more than 3 to complete painting of the resulting image.

Согласно еще одному из аспектов изобретения оптимальным может быть выбор времени экспозиции. Так, при экспозиции на свету более 4 ч в пятне наблюдается закрашивание структуры, а менее 2 ч недостаточная проработка и соответственно снижение информативности результата. Сущность предлагаемого способа станет более понятной из приведенных ниже подробного описания лучшего варианта его осуществления и конкретных примеров производимой в соответствии с этим способом диагностики. According to yet another aspect of the invention, exposure timing may be optimal. So, when exposure to light for more than 4 hours in a spot, a shading of the structure is observed, and less than 2 hours insufficient study and, accordingly, a decrease in the information content of the result. The essence of the proposed method will become more clear from the following detailed description of the best option for its implementation and specific examples produced in accordance with this diagnostic method.

Предлагаемый способ заключается в следующем: на мазок крови, взятой из пальца обследуемого и равномерно размазанной по предметному стеклу, наносят раствор комплексона, например 0,5 мл 5 раствора, затем через некоторое время, приблизительно 5 10 мин, на этот же участок наносят 0,1 мл стандартной сыворотки крови любой группы, после чего добавляют 0,3 мл реактива -проявителя КБК (преимущественно раствор азотно-кислого серебра). В качестве комплексона, как правило, используют раствор этиленгликоля-бис (β-аминоэтилэфир)-N, N- тетраацетата (ЭГТА) или раствор двунатриевой соли этилендиамин-N,N,N, N-тетраацетат (ЭДТА). Добавление всех выше указанных реагентов производится на свету с последующей экспозицией в течение 2 4 ч. The proposed method consists in the following: on a smear of blood taken from the finger of the subject and uniformly smeared on a glass slide, a complexon solution, for example 0.5 ml of 5 solution, is applied, then after a while, approximately 5 10 minutes, 0 is applied to the same area 1 ml of standard blood serum of any group, after which 0.3 ml of KBK developer reagent is added (mainly a solution of silver nitric acid). As a complexon, as a rule, a solution of ethylene glycol bis (β-aminoethylether) -N, N-tetraacetate (EGTA) or a solution of disodium salt of ethylene diamine-N, N, N, N-tetraacetate (EDTA) is used. The addition of all of the above reagents is performed in the light with subsequent exposure for 2 to 4 hours.

Результат учитывают по разнице в цвете и структуре полученного пятна после реакции на мазке обследуемого и на мазке эталоне. Последний представляет собой мазок крови из пальца пациента, признанного практически здоровым, и приготавливается аналогично мазку обследуемого. Многочисленные опыты с мазками крови практически здоровых людей в исследованиях по предлагаемому способу позволили определить признаки, характерные для эталона: желтую или желто-коричневую окраску краевой зоны пятна, наличие зернистости светло-коричневого цвета с четкими очертаниями в средней и центральной зонах пятна. The result is taken into account by the difference in color and structure of the obtained spot after the reaction on the smear of the subject and on the smear reference. The latter is a smear of blood from the finger of a patient who is considered to be practically healthy, and is prepared similarly to the smear of the subject. Numerous experiments with blood smears of practically healthy people in studies on the proposed method made it possible to determine the characteristics characteristic of the standard: yellow or tan color of the marginal zone of the spot, the presence of light brown granularity with clear outlines in the middle and central zones of the spot.

Если цвет и структура пятна на мазке крови обследуемого пациента совпадают с эталоном, то это свидетельствует об отсутствии в организме обследуемого злокачественного опухолевого процесса. If the color and structure of the spot on the blood smear of the examined patient coincides with the standard, then this indicates the absence in the body of the examined malignant tumor process.

Если краевая зона пятна на мазке крови обследуемого имеет светло-коричневый или коричневый цвет, а в средней и в центральной зонах определяется зернистость темно-коричневого или буро-коричневого цвета с размытыми очертаниями, то полученный результат свидетельствует о наличии в организме обследуемого злокачественной опухоли. If the marginal zone of the spot on the blood smear of the subject has a light brown or brown color, and the granularity of a dark brown or brown-brown color with blurred outlines is determined in the middle and central zones, then the result indicates the presence of a malignant tumor in the body of the subject.

Пример 1. Доставлен мазок крови пациента А. взятой из пальца при профилактическом обследовании. Во время врачебного осмотра пациент жалоб не предъявлял. На мазок нанесено 0,5 мл 15 раствора (ЭГТА), через 10 мин добавлено 0,1 мл стандартной сыворотки крови, а затем 0,3 мл 0,2 раствора азотно-кислого серебра. Процесс нанесения реагентов проводился на свету. Результаты оценивались через 2,5 ч. Example 1. A blood smear of a patient A. was taken from a finger during a preventive examination. During the medical examination, the patient did not complain. 0.5 ml of 15 solution (EGTA) was applied to the smear, after 10 min 0.1 ml of standard blood serum was added, and then 0.3 ml of 0.2 solution of silver nitric acid. The process of applying reagents was carried out in the light. Results were evaluated after 2.5 hours.

При этом на мазке пациента А определяется пятно, имеющее светло-коричневую краевую зону. Зернистость пятна темно-коричневого цвета с размытыми очертаниями, сливается в средних и центральных зонах, образуя гомогенный участок с неправильными контурами. При сравнении полученной картины с эталоном наблюдаются выраженные различия в окраске зернистости, что свидетельствуют о наличии в организме обследуемого злокачественного опухолевого процесса. Комплекс клинико-рентгенологических и эндоскопических методов обследования позволил обнаружить у пациента рак желудка второй стадии. In this case, a spot having a light brown edge zone is determined on the smear of patient A. The granularity of the spot is dark brown in color with blurry outlines, merges in the middle and central zones, forming a homogeneous area with irregular contours. When comparing the obtained picture with the standard, pronounced differences in the color of the granularity are observed, which indicates the presence in the body of the examined malignant tumor process. A complex of clinical, radiological, and endoscopic examination methods made it possible to detect second stage gastric cancer in a patient.

Гистологическое заключение железистый рак. The histological conclusion is glandular cancer.

Пример 2. Доставлен мазок крови пациента Н. взятой из пальца с подозрением на рак легкого. Example 2. A blood smear of patient N. taken from a finger with suspected lung cancer was delivered.

На мазок нанесено 0,5 мл 5 раствора ЭГТА, в то же место добавлено 0,2 мл стандартной сыворотки крови и еще через некоторое время 0,3 мл 0,2 раствора азотно-кислого серебра. Процесс нанесения реагентов проводился на свету. Результаты оценивали через 2 ч. 0.5 ml of 5 EGTA solution was applied to the smear, 0.2 ml of standard blood serum was added to the same place and after some time 0.3 ml of 0.2 solution of silver nitric acid. The process of applying reagents was carried out in the light. The results were evaluated after 2 hours

При этом на мазке крови пациента Н. в зоне реакции обнаружена краевая желто-коричневая окраска, в центре пятна коричневая зернистость с четкими очертаниями. При сравнении цвета и структуры пятна с эталоном картина полностью совпадает, что свидетельствует об отсутствии злокачественного опухолевого процесса. Поставленный диагноз подтвержден при морфологическом изучении операционного материала в препаратах обнаружена туберкулома - казеома. Moreover, on the blood smear of patient N. in the reaction zone, a marginal yellow-brown color was found, in the center of the spot there was brown granularity with clear outlines. When comparing the color and structure of the spot with the standard, the picture completely coincides, which indicates the absence of a malignant tumor process. The diagnosis was confirmed by morphological study of the surgical material in the preparations found tuberculoma - caseoma.

Пример 3. Доставлен мазок крови пациента М. который обратился к терапевту с жалобами на увеличение лимфатических узлов шеи. От пункционной биопсии больной категорически отказался. На мазок нанесено 0,3 мл 15 раствора ЭДТА, через некоторое время в то же место добавлено 0,1 мл стандартной сыворотки крови а затем 0,1 мл 0,1 раствора азотно-кислого серебра. Процесс нанесения реагентов проводился на свету. Результаты оценивали через 4 ч. Example 3. A blood smear of a patient M. was delivered who consulted a general practitioner with complaints of swollen lymph nodes in the neck. The patient categorically refused a puncture biopsy. 0.3 ml of 15 EDTA solution was applied to the smear, after some time 0.1 ml of standard blood serum was added to the same place and then 0.1 ml of 0.1 solution of nitric acid silver. The process of applying reagents was carried out in the light. The results were evaluated after 4 hours

При этом на мазке пациента М. определяется пятно, имеющее светло-коричневую краевую зону. Зернистость пятна темно-коричневого цвета с размытыми очертаниями, сливается в средних и центральных зонах, образуя гомогенный участок с неправильными контурами. При сравнении полученной картины с эталоном наблюдаются выраженные различия в организме обследуемого злокачественного опухолевого процесса. В дальнейшем результат подтвержден при морфологическом исследовании (лимфосаркома). At the same time, a spot having a light brown edge zone is determined on the smear of patient M. The granularity of the spot is dark brown in color with blurry outlines, merges in the middle and central zones, forming a homogeneous area with irregular contours. When comparing the obtained picture with the standard, pronounced differences are observed in the organism of the examined malignant tumor process. Further, the result was confirmed by morphological examination (lymphosarcoma).

Пример 4. Доставлен мазок крови ребенка К. родственники которого обратились в поликлинику по месту жительства с целью обследования ребенка в связи с потерей им массы тела и общим недомоганием. Example 4. A blood smear of a child K. was delivered. His relatives went to the clinic at the place of residence in order to examine the child in connection with his loss of body weight and general malaise.

На мазок нанесено 0,2 мл 20 раствора ЭДТА в то же место добавлено 0,1 мл стандартной сыворотки крови и через некоторое время 0,1 мл 0,4 раствора азотно-кислого серебра. Процесс нанесения реагентов проводился на свету. 0.2 ml of 20 EDTA solution is applied to the smear. 0.1 ml of standard blood serum is added to the same place and after some time 0.1 ml of 0.4 solution of silver nitric acid. The process of applying reagents was carried out in the light.

Результаты оценивали через 2 ч. The results were evaluated after 2 hours

При этом на мазке ребенка К. определяется пятно, имеющее светло-коричневую краевую зону. Зернистость пятна темно-коричневого цвета с размытыми очертаниями, сливается в средних и центральных зонах, образуя гомогенный участок с неправильными контурами. При сравнении полученной картины с эталоном наблюдаются выраженные различия в окраске и зернистости, что свидетельствует о наличии в организме обследуемого злокачественного опухолевого процесса. Ребенок был госпитализирован в онкологическое учреждение, где после тщательного обследования установлен диагноз опухоль Вильмса справа. При морфологическом исследовании удаленного препарата обнаружена эмбриональная нефробластома. At the same time, a spot having a light brown edge zone is determined on the smear of the child K. The granularity of the spot is dark brown in color with blurry outlines, merges in the middle and central zones, forming a homogeneous area with irregular contours. When comparing the obtained picture with the standard, pronounced differences in color and granularity are observed, which indicates the presence in the body of the examined malignant tumor process. The child was hospitalized in an oncological institution, where, after a thorough examination, he was diagnosed with a Wilms tumor on the right. A morphological study of the removed preparation revealed an embryonic nephroblastoma.

Пример 5. Доставлен мазок крови пациентки С. взятой у нее из пальца во время операции на молочной железе (секторальной резекции). Example 5. A blood smear of patient C. was taken from her finger during surgery on the mammary gland (sectoral resection).

На мазок нанесено 0,25 мл 10 раствора ЭГТА, добавлено 0,3 мл стандартной сыворотки крови и еще через некоторое время 0,1 мл 0,2 раствора азотно-кислого серебра. Процесс нанесения реагентов проводился на свету. Результаты оценивались через 3 ч. 0.25 ml of 10 EGTA solution was applied to the smear, 0.3 ml of standard blood serum was added, and after some time 0.1 ml of 0.2 solution of silver nitric acid. The process of applying reagents was carried out in the light. Results were evaluated after 3 hours.

При этом на мазке пациентки С. определяется пятно, имеющее светло-коричневую краевую зону. Зернистость пятна темно-коричневого цвета с размытыми очертаниями, сливается в средних и центральных зонах, образуя гомогенный участок с неправильными контурами. При сравнении полученной картины с эталоном наблюдается выраженные различия в окраске и зернистости, что свидетельствует о наличии в организме обследуемой злокачественного опухолевого процесса. Результат совпал с данными гистологического исследования (аденокарцинома). Moreover, on the smear of patient C., a spot is determined that has a light brown edge zone. The granularity of the spot is dark brown in color with blurry outlines, merges in the middle and central zones, forming a homogeneous area with irregular contours. When comparing the obtained picture with the standard, pronounced differences in color and granularity are observed, which indicates the presence in the body of the examined malignant tumor process. The result coincided with the data of histological examination (adenocarcinoma).

Пример 6. Доставлен мазок крови из пальца пациентки Ц. с подозрением на злокачественную опухоль толстой кишки. Example 6. A blood smear was delivered from the finger of patient C. with a suspected malignant tumor of the colon.

На мазок нанесено 0,2 мл 25 раствора ЭГТА, добавлено 0,1 мл стандартной сыворотки крови а затем 0,1 мл 0,5 раствора азотно-кислого серебра. Процесс нанесения реагентов проводился на свету. Результаты оценивались через 2 ч. 0.2 ml of 25 EGTA solution was applied to the smear, 0.1 ml of standard blood serum was added, and then 0.1 ml of 0.5 nitric acid silver solution. The process of applying reagents was carried out in the light. Results were evaluated after 2 hours.

При этом на мазке пациентки Ц. определяется пятно, имеющее светло-коричневую краевую зону. Зернистость пятна темно-коричневого цвета с размытыми очертаниями, сливается в средних и центральных зонах, образуя гомогенный участок с неправильными контурами. При сравнении полученной картины с эталоном наблюдается выраженные различия в окраске и зернистости, что свидетельствует о наличии в организме обследуемой злокачественного опухолевого процесса. При ректороманоскопии обнаружена опухоль верхне-ампулярного отдела прямой кишки. Moreover, on the smear of patient C., a spot is determined that has a light brown edge zone. The granularity of the spot is dark brown in color with blurry outlines, merges in the middle and central zones, forming a homogeneous area with irregular contours. When comparing the obtained picture with the standard, pronounced differences in color and granularity are observed, which indicates the presence in the body of the examined malignant tumor process. When sigmoidoscopy revealed a tumor of the upper ampulla of the rectum.

Гистологическое заключение аденокарцинома. The histological conclusion of adenocarcinoma.

Пример 7. Доставлен мазок крови пациента Д. обратившегося к врачам по поводу темно-вишневого опухолевого образования на коже спины. Example 7. A blood smear of a patient D. was delivered who turned to doctors about a dark cherry tumor on the skin of the back.

На мазок нанесено 0,15 мл 3 раствора ЭДТА, затем в то же место добавлено 0,2 мл стандартной сыворотки крови, после чего еще 0,1 мл 0,4 раствора азотно-кислого серебра. Процесс нанесения реагентов проводился на свету. 0.15 ml of 3 EDTA solution was applied to the smear, then 0.2 ml of standard blood serum was added to the same place, followed by another 0.1 ml of 0.4 solution of silver nitric acid. The process of applying reagents was carried out in the light.

Результаты оценивались через 2 ч. Results were evaluated after 2 hours.

При этом на мазке пациента Д. определяется пятно, имеющее светло-коричневую краевую зону. Зернистость пятна темно-коричневого цвета с размытыми очертаниями, сливается в средних и центральных зонах, образуя гомогенный участок с неправильными контурами. При сравнении полученной картины с эталоном наблюдается выраженные различия в окраске и зернистости, что свидетельствует о наличии в организме обследуемого злокачественного опухолевого процесса. Больному было произведено широкое иссечение опухоли в пределах здоровых тканей. Гистологическое заключение меланома. At the same time, a spot having a light brown edge zone is determined on the smear of patient D. The granularity of the spot is dark brown in color with blurry outlines, merges in the middle and central zones, forming a homogeneous area with irregular contours. When comparing the obtained picture with the standard, pronounced differences in color and granularity are observed, which indicates the presence in the body of the examined malignant tumor process. The patient underwent a wide excision of the tumor within healthy tissues. The histological conclusion of melanoma.

Пример 8. Доставлен мазок крови пациентки Л. обратившейся к гинекологу с жалобами на кровянистые выделения из влагалища. Example 8. A blood smear of patient L. was delivered to a gynecologist complaining of spotting from the vagina.

На мазок нанесено 0,3 мл 15 раствора ЭГТА, затем в то же место добавлено 0,3 мл стандартной сыворотки крови и еще через некоторое время 0,2 мл 0,5 раствора азотно-кислого серебра. Процесс нанесения реагентов проводился на свету. Результаты оценивались через 4 ч. 0.3 ml of 15 EGTA solution was applied to the smear, then 0.3 ml of standard blood serum was added to the same place and after some time 0.2 ml of 0.5 solution of silver nitric acid. The process of applying reagents was carried out in the light. Results were evaluated after 4 hours.

При этом на мазке пациентки Л. определяется пятно, имеющее светло-коричневую краевую зону. Зернистость пятна темно-коричневого цвета с размытыми очертаниями, сливается в средних и центральных зонах, образуя гомогенный участок с неправильными контурами. При сравнении полученной картины с эталоном наблюдаются выраженные различия в окраске и зернистости, что свидетельствует о наличии в организме обследуемой злокачественного опухолевого процесса. Больной произведено диагностическое выскабливание. При гистологическом исследовании обнаружен плоскоклеточный рак шейки матки. Moreover, on the smear of patient L., a spot is determined that has a light brown edge zone. The granularity of the spot is dark brown in color with blurry outlines, merges in the middle and central zones, forming a homogeneous area with irregular contours. When comparing the obtained picture with the standard, pronounced differences in color and granularity are observed, which indicates the presence in the body of the examined malignant tumor process. The patient produced diagnostic curettage. Histological examination revealed squamous cervical cancer.

Оценка диагностической эффективности способа проводилась в соответствии с рекомендациями Комитета экспертов Международной федерации клинической химии по референтным величинам. Assessment of the diagnostic effectiveness of the method was carried out in accordance with the recommendations of the Expert Committee of the International Federation of Clinical Chemistry by reference values.

С целью определения диагностической чувствительности и диагностической специфичности, были изучены результаты применения способа у 50 практически здоровых лиц (доноров) и больных раком легких, пищевода, желудка, прямой кишки, молочной железы, матки и лимфатической системы (по 50 пациентов в каждой группе). In order to determine the diagnostic sensitivity and diagnostic specificity, we studied the results of applying the method in 50 practically healthy individuals (donors) and patients with cancer of the lungs, esophagus, stomach, rectum, breast, uterus and lymphatic system (50 patients in each group).

Чувствительность и специфичность определялась по общепринятой методике. Полученные результаты представлены в табл. 1 и 2. Sensitivity and specificity were determined according to generally accepted methods. The results are presented in table. 1 and 2.

Разработанный способ диагностики злокачественных опухолей человека не травматичен, высоко информативен, прост в проведении. The developed method for the diagnosis of human malignant tumors is not traumatic, highly informative, easy to conduct.

Этот способ может быть использован для диагностики всех форм злокачественных новообразований. Высокая диагностическая чувствительность 89,4 и специфичность 86 позволяют считать перспективным его применение для скрининга злокачественных опухолей при массовых профилактических обследованиях населения. This method can be used to diagnose all forms of malignant neoplasms. The high diagnostic sensitivity of 89.4 and the specificity of 86 make it possible to consider its use for screening malignant tumors in mass prophylactic examinations of the population promising.

Claims

1. A method for the diagnosis of human malignant tumors by detecting protein fractions specific for malignant growth during blood analysis, characterized in that during the analysis a smear of blood is taken, taken mainly from the finger of the subject, and a complexon solution, standard blood serum is sequentially applied to it, and then the developer of calcium-protein complexes, and after exposure to light, the color and structure of the resulting spot are compared with the color and structure of the spot on a standard prepared analogously In a different way, on a blood smear of a healthy person, and when differences are detected, a malignant tumor is diagnosed.

2. The method according to claim 1, characterized in that the complexone solution is used in a concentration of preferably 20%
3. The method according to PP.1 and 2, characterized in that as a solution of the developer of calcium-protein complexes using a solution of silver nitrate with a concentration of preferably 0.3%
4. The method according to claims 1 to 3, characterized in that a solution of complexon and developer is used in a ratio of preferably 2 1.

5. The method according to PP. 1-4, characterized in that the exposure time to light is preferably 3 hours