RU2075219C1 - Коллагеназа - Google Patents

Abstract

Коллагеназа, выделенная из культуральной жидкости штамма Streptomyces lavendulae ВКПМ S- 910, обладающая коллагенолитической и общей протеолитической активностью и имеющая следующие свойства: субстратная специфичность: лизирует нерастворимые коллагены I-IV типов, не гидролизует казеин; коллагенолитическая активность по нингидриновому методу 1250-2000 ед. лей/мг; специфическая активность по коллагену 3000-3200 ед./мг белка (модифицированный метод Howard); общая протеолитическая активность 0,8-1,0 ед./мг препарата по тирозину (метод Ансона); молекулярная масса: м.м. высокомолекулярной коллагеназы 110-120 кДа и низкомолекулярной коллагеназы 60-65 кДа (при определении методом электрофореза и электрофокусирования); рН - оптимум : 7,4 ( в 0,5 триc- HCl- буфере, рН - метр); диапазоны рН - стабильности: 7,0-7,8 (условия: в триc- HCl буфере при 37С в течение 60 мин, субстрат-коллаген крысы (тип 1); при рН 6,5 - за 10 мин остаточная активность 80%; при рН 8,0 - 90% (условия те же); рН - термостабильность: активен при 37-42С, рН 7,0-7,8; при температуре выше 42С активность резко падает при любом значении рН; при температуре 2-10С и рН 6,0-7,8 активность стабильна; при температуре выше 10С до 37С активность низкая (рН 6,0 - 7,8/; константа Михаэлиса: 0,9•10, субстрат-коллаген крысы I типа; ингибиторы: ЕДТА, фенилметилсульфанилфторид (при концентрации выше 10М); термостабильность: активность падает с 42С (трис- HCl - буфер, рН 7,4); 42С в течение 60 мин - 100%; 50С за 10 мин - 90%; 60С за 10 мин - 45%; по активности препарат коллагеназы из Streptomyces lavendulae расщепляет альфа-цепь нативного коллагена до 84-86 кДа + 26-28 кДа.