RU2074159C1

RU2074159C1 - Strain of bacterium azotobacter chroococcum used for preparing the bacterial fertilizer for green cultures

Info

Publication number: RU2074159C1
Authority: RU
Inventors: Г.У. Ожиганова; Г.П. Ланских; И.А. Чернов
Original assignee: Товарищество с ограниченной ответственностью "Амарант"
Priority date: 1992-09-02
Filing date: 1992-09-02
Publication date: 1997-02-27

Abstract

FIELD: agriculture microbiology, bacterial fertilizers. SUBSTANCE: invention proposes the strain of bacterium Azotobacter chroococcum for the preparing bacterial fertilizers for green cultures, for example, lettuce, celery, parsley and others. The use of the proposed bacterial fertilizer based on this strain decreases nitrate content in cultures by 3-5-fold. EFFECT: decreased nitrate content. 1 tbl

Description

Изобретение относится к области сельскохозяйственной микробиологии и представляет собой новый штамм микроорганизмов Azotobacter chroococcum, который может быть реализован в микробиологической промышленности для получения различных бактериальных удобрений. The invention relates to the field of agricultural microbiology and is a new strain of microorganisms Azotobacter chroococcum, which can be implemented in the microbiological industry to obtain various bacterial fertilizers.

Известен штамм Azotobacter chroococcum Т-12, предназначенный для получения бактериального удобрения. Недостатком данного известного штамма является отсутствие положительного эффекта в повышении урожайности зеленых культур, а также довольно высокое содержание нитратов в них, в случае использования для их возделывания бактериального удобрения на базе данного штамма. Known strain Azotobacter chroococcum T-12, designed to obtain bacterial fertilizers. The disadvantage of this known strain is the lack of a positive effect in increasing the yield of green crops, as well as a rather high nitrate content in them, if bacterial fertilizer based on this strain is used for their cultivation.

Наиболее близким к заявляемому нами объекту является штамм Azotobacter chroococcum, депонированный в ЦМПМ ВНИИГенетики как В-3173. Этот штамм по совокупности морфологических и физиолого-биохимических признаков, а также по достигаемому техническому эффекту весьма схож с заявляемым нами объектом и выбран нами поэтому в качестве прототипа. Недостатками же данного известного штамма также является отсутствие положительного эффекта в повышении урожайности зеленых культур, а также сравнительно высокое содержание нитратов в них в случае его использования как бактериального удобрения в процессе их возделывания. The closest to the object we are declaring is a strain of Azotobacter chroococcum deposited in the Center for Medical Research at All-Russian Research Institute of Genetics as B-3173. This strain in terms of the combination of morphological and physiological and biochemical characteristics, as well as in the achieved technical effect, is very similar to the object declared by us and therefore we have chosen as a prototype. The disadvantages of this known strain is also the lack of a positive effect in increasing the yield of green crops, as well as the relatively high content of nitrates in them if it is used as a bacterial fertilizer in the process of cultivation.

Целью данного изобретения являются повышение урожайности зеленых культур и снижение содержания нитратов в них. The aim of this invention is to increase the yield of green crops and reduce the content of nitrates in them.

Декларируемая цель достигается путем использования нового штамма - Azotobacter chroococcum В35, выделенного из ризосферы томата Lycopersicon esculentum при выращивании их в тепличном грунте с рН 6,5 7,0. Новый штамм депонирован в ЦМПМ ВНИИГенетики под В-6010. The declared goal is achieved by using a new strain - Azotobacter chroococcum B35, isolated from the rhizosphere of the tomato Lycopersicon esculentum when growing them in greenhouse soil with a pH of 6.5 to 7.0. The new strain was deposited at the TsMPM VNII Genetics under B-6010.

Морфологические признаки. Клетки штамма в молодом возрасте кокки, реже диплококки, размер которых в зависимости от возраста колеблется от 1, до 3,2 μ. С возрастом происходит объединение кокков и диплококков в цепочки. Клетки малоподвижны, капсула во круг них незаметна. На твердых средах штамм образует типичные колонии. Покоящаяся форма-циста. При старении культура приобретает светло-коричневую окраску, которая появляется в возрасте 2 сут. Пигмент не проникает в среду. Окрашивание клеток может быть проведено различными анилиновыми красителями по Граму. Morphological signs. The cells of the strain at a young age are cocci, less often diplococci, the size of which, depending on age, ranges from 1 to 3.2 μ. With age, cocci and diplococci combine into chains. The cells are inactive, the capsule in the circle of them is invisible. On solid media, the strain forms typical colonies. Resting cyst. With aging, the culture acquires a light brown color, which appears at the age of 2 days. The pigment does not penetrate the medium. Cell staining can be carried out with various Gram aniline dyes.

Физиолого-биохимические признаки. Штамм Azotobacter chroococcum В35 - аэроб, оптимальная температура роста 28 30^oC, минус -15^oC, максимум -45^oC. Штамм ассимилирует следующие углеводы: глюкозу, сахарозу, декстрин, галактозу, арабинозу, девулезу, маннозу, а также спирты: маннит, глицерин, этанол. Не ассимилирует: формиаты, стеараты, олеаты, салицилаты, фенол, лигнин. Использует для развития аммонийный, нитритный, нитратный, а также свободный азот. На МПА растет хорошо. Реакция на рН: оптимум 7,0 7,8, минимум 5,2, максимум 9,5.Physiological and biochemical characteristics. The strain Azotobacter chroococcum B35 is aerobic, the optimum growth temperature is 28 30 ^o C, minus -15 ^o C, maximum -45 ^o C. The strain assimilates the following carbohydrates: glucose, sucrose, dextrin, galactose, arabinose, devulose, mannose, as well as alcohols: mannitol, glycerin, ethanol. Does not assimilate: formates, stearates, oleates, salicylates, phenol, lignin. It uses ammonia, nitrite, nitrate, and free nitrogen for development. On the IPA is growing well. Reaction to pH: optimum 7.0 7.8, minimum 5.2, maximum 9.5.

Продукты синтеза на питательной среде Бэрка (после 4 суток инкубации при 28 30^oC): б иотин 0,07, пиридоксин 0,59, тиамин 1,9 мг/л, гетерофуксин 65,0 мг/л. Азотфиксация 0,26 мкг азота/мл в час.Synthesis products on Burke culture medium (after 4 days of incubation at 28-30 ^° C): b iotin 0.07, pyridoxine 0.59, thiamine 1.9 mg / l, heterofuchsin 65.0 mg / l. Nitrogen fixation 0.26 μg nitrogen / ml per hour.

Штамм Azotobacter chroococcum В35 обладает способность прикрепляться к поверхности корней ряда зеленых культур, в частности сельдерея (Apium), петрушки (Petroselinum) и салата (Lactuca sativa), где функционирует в течение 5 мес. после инокуляции. The strain Azotobacter chroococcum B35 has the ability to attach to the root surface of a number of green crops, in particular celery (Apium), parsley (Petroselinum) and lettuce (Lactuca sativa), where it functions for 5 months. after inoculation.

Ранее штамм Azotobacter chroococcum В35 с вышеуказанными морфологическими и физиолого-биохимическими характеристиками в литературе не описывался. Это позволяет нам говорить о том, что заявляемый нами объект обладает первым критериальным признаком изобретения новизной. Сопоставление известных характеристик штамма-прототипа и отличительных признаков, которые характеризуют заявляемый нами объект, не позволяет предсказать появление у него новых свойств, а именно повышение урожайности зеленых культур и снижение содержания нитратов в них в случае использования заявляемого штамма как бактериального удобрения. У учетом данного обстоятельства можно утверждать, что заявляемый нами объект явным образом не следует из известного в данной отрасли техники уровня, а это означает наличие у него второго критериального признака изобретения изобретательского уровня. К тому же данный штамм легко культивируется, его производство без особых затруднений может быть реализовано в промышленности масштабах, и есть все основания утверждать о наличии у него и третьего критериального признака изобретения промышленной применимости. Previously, the Azotobacter chroococcum B35 strain with the above morphological and physiological-biochemical characteristics was not described in the literature. This allows us to say that the claimed object has the first criterion for inventing novelty. A comparison of the known characteristics of the prototype strain and the distinguishing features that characterize the object we declare does not allow us to predict the appearance of new properties in it, namely, an increase in the yield of green crops and a decrease in the nitrate content in them if the inventive strain is used as a bacterial fertilizer. In view of this circumstance, it can be argued that the object claimed by us explicitly does not follow from the level known in the art, and this means that it has a second criterion feature of an invention of an inventive step. In addition, this strain is easily cultivated, its production without special difficulties can be implemented on an industrial scale, and there is every reason to assert that it has a third criterion feature of the invention of industrial applicability.

Заявляемый на предмет изобретения штамм Azotobacter chroococcum В35 в качестве бактериального удобрения под зеленые культуры может быть продемонстрирован на следующих примерах. The inventive strain Azotobacter chroococcum B35 as a bacterial fertilizer for green crops can be demonstrated in the following examples.

ПРИМЕР 1. EXAMPLE 1

Выращивают штамм микроорганизма Azotobacter chroococcum В35 в ферментере до концентрации 10⁸-10⁹ клеток/мл. Затем проводят бактеризацию сельдерея Apium graveders из расчета 1 л препарата на 1 га тепличного грунта с рН 6,5. По достижении вегетационного периода снимают урожай и оценивают суммарную урожайность культуры, а также содержание нитратного азота в зелени. Эти данные представлены в таблице.A strain of the microorganism Azotobacter chroococcum B35 is grown in a fermenter to a concentration of 10 ⁸ -10 ⁹ cells / ml. Then carry out the bacterization of celery Apium graveders at the rate of 1 liter of the drug per 1 ha of greenhouse soil with a pH of 6.5. Upon reaching the growing season, the crop is taken and the total crop yield, as well as the content of nitrate nitrogen in the greenery, is estimated. These data are presented in the table.

ПРИМЕР 2. EXAMPLE 2

Выполняют как и пример 1, но с использованием штамма Azotobacter chroococcum В-3173. Perform as example 1, but using a strain of Azotobacter chroococcum B-3173.

ПРИМЕР 3 (по аналогу [1]). EXAMPLE 3 (similar to [1]).

Осуществляют по технологической схеме примера 1, но с использованием штамма Azotobacter chroococcum Т-12. Carried out according to the technological scheme of example 1, but using a strain of Azotobacter chroococcum T-12.

ПРИМЕР 4. EXAMPLE 4

Выполняют с использованием общей технологической схемы примера 1, но в качестве выращиваемой зеленой культуры берут петрушку Petroselinum salivum. Perform using the General technological scheme of example 1, but as the grown green culture take parsley Petroselinum salivum.

ПРИМЕР 5. EXAMPLE 5

Выполняют как и пример 4, но с использованием штамма Azotobacter chroococcum В-3173. Perform as example 4, but using a strain of Azotobacter chroococcum B-3173.

ПРИМЕР 6. EXAMPLE 6

Осуществляют как и пример 4, но с использованием в качестве бактериального удобрения штамма Azotobacter chroococcum Т-12;
ПРИМЕР 7.Carried out as example 4, but using as a bacterial fertilizer strain Azotobacter chroococcum T-12;
EXAMPLE 7

Проводят, используя ту же технологическую схему, что и в примере 1, но в качестве выращиваемой зеленой культуры берут салат Lactuca sativa. Carried out using the same technological scheme as in example 1, but as a grown green culture take salad Lactuca sativa.

ПРИМЕР 8. EXAMPLE 8

Выполняют как и пример 7, но с использованием штамма Azotobacter chroococcum В-3173. Perform as example 7, but using a strain of Azotobacter chroococcum B-3173.

ПРИМЕР 9. EXAMPLE 9

Осуществляют по типу примера 7, но с использованием штамма Azotobacter chroococcum Т-12. Carried out as in example 7, but using a strain of Azotobacter chroococcum T-12.

Данные по суммарной урожайности культур, а также по содержанию в ней нитратного азота для этого и предшествующих случаев также представлены в таблице. Data on the total crop yield, as well as on the content of nitrate nitrogen in it for this and previous cases are also presented in the table.

Как можно видеть из приводимых в таблице данных, использование заявляемого нами штамма позволяет резко (в среднем в 3 5 раз) и снизить содержание нитратов в выращиваемых зеленых культурах, а также в 1,5 2,0 раза повысить их урожайность. As can be seen from the data given in the table, the use of the strain we declare allows us to sharply (on average 3-5 times) and reduce the nitrate content in the grown green crops, as well as increase their productivity by 1.5 2.0 times.

Claims

The bacterial strain Azotobacter chroococcum VKPM B-6010, used to obtain bacterial fertilizer for green crops.