RU2063436C1

RU2063436C1 - Strain of lactobacillus acidophilus - antibiotic-resistant antagonist of intestine infection pathogen

Info

Publication number: RU2063436C1
Application number: RU9494004161A
Authority: RU
Inventors: В.Д. Кругликов; Р.И. Цураева; В.В. Кучин; И.В. Рыжко
Original assignee: Ростовский-На-Дону Государственный Научно-Исследовательский Противочумный Институт
Priority date: 1994-02-08
Filing date: 1994-02-08
Publication date: 1996-07-10
Also published as: RU94004161A

Abstract

FIELD: medicinal microbiology. SUBSTANCE: strain-antagonist of enteropathogenic microflora including choleraic vibrios and showing polyantibiotic-resistance. Strain Lactobacillus acidophilus VKM V-2020 D is obtained by selection from symbiosis of mucosal acidophilic coli PEZ VNIMI MMMP USSR. Strain can be used for prophylaxis aims. EFFECT: strain indicated above.

Description

Изобретение относится к медицинской микробиологии, в частности к антагонистам патогенной и условно-патогенной для человека микрофлоры и представляет собой биологически активный, антибиотикоустойчивый штамм Lactobacillus acidopilus, обладающий выраженной антимикробной активностью по отношению к возбудителям кишечных инфекционных заболеваний, в т.ч. холеры. The invention relates to medical microbiology, in particular to antagonists of pathogenic and conditionally pathogenic for humans microflora, and is a biologically active, antibiotic-resistant strain of Lactobacillus acidopilus, which has a pronounced antimicrobial activity against pathogens of intestinal infectious diseases, including cholera.

Антагонизм лактобацилл, ведущими звеньями которого является интенсивность кислотообразования, способность к продукции лизоцима и антибиотических веществ, обусловливает их использование в качестве физиологических биологических препаратов на основе жирных культур микроорганизмов симбионтов желудочно-кишечного тракта человека, как при лечении и профилактике острых кишечных инфекций и преодолении негативных последствий побочного действия антибиотикотерапии, так и при производстве кисломолочных продуктов. The antagonism of lactobacilli, the leading links of which is the intensity of acid formation, the ability to produce lysozyme and antibiotic substances, determines their use as physiological biological preparations based on fatty cultures of microorganisms of the symbionts of the human gastrointestinal tract, as in the treatment and prevention of acute intestinal infections and overcoming the negative consequences side effects of antibiotic therapy, and in the production of dairy products.

Увеличение арсенала эффективных и доступных бактериальных препаратов и совершенствование существующих связано с необходимостью получения новых высокоактивных штаммов лактобацилл: 1) штаммов интенсивных кислотообразователей, способных продуцировать лизоцим (штаммов с повышенной антагонистической активностью и расширенным спектром антагонизма); 2) штаммов с полиантибиотикорезистентностью (для возможности комбинации бактерио- и антибиотикотерапии с целью повышения санирующего и профилактирующего эффекта); 3) штаммов, адаптированных к упрощенным условиям культивирования (т.к. лактобациллы факультативные анаэробы). The increase in the arsenal of effective and affordable bacterial preparations and the improvement of existing ones is associated with the need to obtain new highly active strains of lactobacilli: 1) strains of intense acid-forming agents capable of producing lysozyme (strains with increased antagonistic activity and an extended spectrum of antagonism); 2) strains with polyantibiotic resistance (for the possibility of a combination of bacterio- and antibiotic therapy in order to increase sanitizing and preventive effect); 3) strains adapted to simplified cultivation conditions (since lactobacilli are optional anaerobes).

Предполагаемый штамм Lactobacillus acidophilus ВКМ В-2020 Д новый, в научно-медицинской и патентной литературе не описан. The proposed strain of Lactobacillus acidophilus VKM B-2020 D is new, not described in the medical, scientific and patent literature.

Цель изобретения новый штамм Lactobacillus acidophilus ВКМ В-2020 Д, антибиотикорезистентный антагонист патогенной и условно-патогенной кишечной микрофлоры, в т. ч. холерных вибрионов, с повышенной кислотообразующей активностью и способностью к продукции лизоцима, адаптированный к аэробным условиям выращивания. The purpose of the invention is a new strain of Lactobacillus acidophilus VKM B-2020 D, an antibiotic-resistant antagonist of pathogenic and conditionally pathogenic intestinal microflora, including cholera vibrios, with increased acid-forming activity and the ability to produce lysozyme, adapted to aerobic growing conditions.

Штамм был получен в результате направленного отбора из исходной культуры слизистой ацидофильной палочки ПЭЗ ВНИМИ МММП СССР с селекцией по антагонистической активности по отношению к энтеропатогенной кишечной микрофлоре и по устойчивости к рифампицину и другим антибиотикам. The strain was obtained as a result of targeted selection from the initial culture of the mucosa of acidophilus bacillus PEZ VNIMI MMMP of the USSR with selection for antagonistic activity against enteropathogenic intestinal microflora and resistance to rifampicin and other antibiotics.

Культурально-морфологические и биохимические признаки штамма. Клетки штамма в мазках 48-часовых культур имеют вид граммположительных полиморфных палочек размером 1,1-1,5х7,0х8,0 микрона, клетки не образуют спор. Штамм адаптирован к выращиванию в аэробных условиях, что упрощает процесс культивирования, на поверхности плотной питательной среды МРС-2n (pH-6,5) в течение 48 часов при 37^oC изолированные бактериальные клетки образуют белые шероховатые колонии размером 1,5- 1,8 мм. В жидкой питательной среде МРС-1 (pH 6,3-6,6) культура бактерий вызывает появление белого порошкообразного осадка. Штамм ферментирует с образованием кислоты: маннозу, галактозу, лактозу, сахарозу; не ферментирует глюкозу, рамнозу, сорбит.Cultural, morphological and biochemical characteristics of the strain. The cells of the strain in smears of 48-hour cultures have the form of gram-positive polymorphic rods 1.1-1.5x7.0x8.0 microns in size, the cells do not form spores. The strain is adapted for cultivation under aerobic conditions, which simplifies the cultivation process, on the surface of a dense nutrient medium MPC-2n (pH-6.5) for 48 hours at 37 ^o C isolated bacterial cells form white rough colonies with a size of 1.5-1, 8 mm. In the liquid nutrient medium MPC-1 (pH 6.3-6.6), bacterial culture causes the appearance of a white powdery precipitate. The strain ferments with the formation of acid: mannose, galactose, lactose, sucrose; Does not ferment glucose, rhamnose, sorbitol.

Устойчивость к антибиотикам (хромосомная): канамицину 500 (мкг/мл), полимиксину (4000 мкг/мл), неомицину (100 мкг/мл), невиграмону (2000 мкг/мл), ципрофлоксацину (1 мкг/мл), рифампицину (250 мкг/мл). Antibiotic resistance (chromosomal): kanamycin 500 (μg / ml), polymyxin (4000 μg / ml), neomycin (100 μg / ml), nevigramone (2000 μg / ml), ciprofloxacin (1 μg / ml), rifampicin (250 μg / ml).

Штамм обладает более выраженной кислотообразующей активностью по сравнению с исходным (соответственно 2,5% и 1,4%), а также повышенным на 2 порядка антагонизмом по отношению к представителям родов Shigella, Salmonella, Vibrio choleraе, Echerichia coli, Staphilococcus, Pseudomonas, Proteus; продуцируют лизоцим. The strain has a more pronounced acid-forming activity compared to the original (2.5% and 1.4%, respectively), as well as antagonism increased by 2 orders of magnitude against representatives of the genera Shigella, Salmonella, Vibrio cholerae, Echerichia coli, Staphilococcus, Pseudomonas, Proteusom ; produce lysozyme.

Полученный штамм Lactobacillus acidophiilus депонирован во Всероссийской коллекции микроорганизмов ИБФМ РАН под номером ВКМ В-2020 Д и может использоваться:
в качестве основы при разработке антагонистических биологических средств профилактики и лечения кишечных заболеваний, вызванных патогенной и условно-патогенной микрофлорой;
с целью создания и совершенствования бактериальных препаратов для коррекции морфофункциональных нарушений желудочно-кишечного тракта как следствия побочного эффекта интенсивного медикаментозного воздействия и перенесенных кишечных инфекций;
как исходный субстрат при получении стартерных культур для производства кисломолочных продуктов;
для изучения антагонистических свойств лактобацилл как штамм-полиантибиотикорезистентный антагонист энтеропатогенной микрофлоры, в т.ч. возбудителей холеры, интенсивный кислотообразователь, способный продуцировать лизоцим.The obtained strain of Lactobacillus acidophiilus is deposited in the All-Russian collection of microorganisms of the IBPM RAS under the number VKM V-2020 D and can be used:
as a basis for the development of antagonistic biological agents for the prevention and treatment of intestinal diseases caused by pathogenic and conditionally pathogenic microflora;
in order to create and improve bacterial preparations for the correction of morphofunctional disorders of the gastrointestinal tract as a consequence of the side effect of intense drug exposure and intestinal infections;
as an initial substrate in the production of starter cultures for the production of dairy products;
to study the antagonistic properties of lactobacilli as a strain-polyantibiotic-resistant antagonist of enteropathogenic microflora, including causative agents of cholera, an intense acidifier capable of producing lysozyme.

Claims

The strain of Lactobacillus acidophilus VKM B-2020 D is an antibiotic-resistant antagonist of pathogens of intestinal infections.