RU2043767C1 - Способ подавления вич-инфекции - Google Patents
Способ подавления вич-инфекции Download PDFInfo
- Publication number
- RU2043767C1 RU2043767C1 RU93020154A RU93020154A RU2043767C1 RU 2043767 C1 RU2043767 C1 RU 2043767C1 RU 93020154 A RU93020154 A RU 93020154A RU 93020154 A RU93020154 A RU 93020154A RU 2043767 C1 RU2043767 C1 RU 2043767C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- dna
- ratio
- hiv
- virus infection
- administration
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине и может быть использовано для подавления ВИЧ-инфекции, вызывающей СПИД у человека. Сущность изобретения состоит в том, что для подавления ВИЧ-инфекции используют комплексы экзогенной ДНК с поливалентными металлами. Способ обладает высокой противовирусной активностью при низкой токсичности. 2 табл.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к вирусологии, и может, быть использовано для подавления ВИЧ-инфекции, вызывающей СПИД у человека.
Рост заболеваемости и возрастающая смертность от СПИДа при невозможности эффективного лечения делает актуальным поиск новых препаратов для борьбы с ВИЧ-инфекцией.
Известны способы подавления ВИЧ-инфекции, включающие введение нуклеотидных аналогов, в частности 3-ази-3-дезокситимидина-АЗТ. Однако этот препарат эффективен лишь на ранних стадиях развития заболевания и даже в терапевтических дозах обладает высокой токсичностью, дающей в клинической практике осложнения (головная боль, анемия, нарушения со стороны желудочно-кишечного тракта), ограничивающие его использование. Известны способы, включающие введение дифторированных нуклеозидов, липосомных нуклеозидных аналогов, однако эффективность их невелика.
Цель изобретения разработать эффективность способ ингибирования ВИЧ-инфекции, сочетающий высокую эффективность с низкой токсичностью.
Предлагаемый способ заключается в том, что используют комплекс натриевой соли дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) с поливалентными металлами (цинком, никелем, кобальтом, железом) при соотношения от 1:1 до 1:1000, а введение препарата осуществляют подкожно, внутрибрюшинно, интраназально или в спинномозговой канал в зависимости от формы заболевания в терапевтически эквивалентных дозах.
Существенными признаками изобретения следует считать использование в рамках способа комплекса натриевой соли ДНК с поливалентными металлами, ранее по данным показаниям не использовавшимися, их соотношения, а также дозы и режимы введения препаратов. Впервые показана возможность получения противовирусного эффекта при различных способах введения препарата, что очень важно при различных клинических формах СПИДа легочной, желудочно-кишечной, с поражением ЦНС.
Комплекс натриевая соль ДНК металл состоит из соединений натриевой соли ДНК низкомолекулярной, низкополимерной, содержит не менее 80% нативной натриевой соли ДНК, полученной из молок осетра, и обладает следующими характеристиками: Мол. м 270-500˙103 Дальтон Гиперхромный эффект: 37% не более 1% белка по весу, не более 17% влаги по весу Молярные соотношения нуклеотидов аденин 29,0 тимин 27,0 гуанин 22,0 цитозин 20,0 и поливалентного металла, а именно цинка (Zn), кобальта (Со), никеля (Ni), железа (Fe).
Для подавления ВИЧ в системах in vitro использовали комплексы ДНК-Nа с цинком, кобальтом, никелем и железом при различных концентрациях компонентов. Для сравнения использовали АЗТ производства компании "Wellcome". Антивирусную активность препаратов оценивали с использованием методов, рекомендованных для этой цели ВОЗ. Были использованы культуры перевиваемых клеточных линий СЕМ-SS и МТ-4. Клетки культивировали при концентрации (0,03-0,05) х 105 клеток на 1 мл среды РРМI 1640 с 10% фетальной сыворотки телят, 300 мг/мл L-глутамина, 100 мкг/мл гентамицина и выращивали в форме суспензии. Жизнеспособность клеток проверяли путем окрашивания их 0,4%-ного раствора трепанового синего. В качестве источников вирусов использовали штаммы HIV/IVS и HIV-1 HTLV/IIIB.
Суспензию клеток помещали в 24-луночные панели, обрабатывали различными дозами препарата и заражали ВИЧ. Множественность инфекции составляла 0,01 ДТС50 на клетку. После этого культуры инкубировали при 37оС в атмосфере, содержащей 5% СО2 при влажности 98% в течение 5-7 дней до момента определения цитопатического влияния вируса на культуру клеток.
Для оценки формирования вирусного антигена использовали иммуноферментный анализ.
Результаты представлены в табл.1.
Из представленной таблицы видно, что при введении в культуральную среду комплекса ДНК-металл отмечается подавление ВИЧ-инфекции in vitro. Причем оптимальное соотношение ДНК-металл находится в пределах 1:1-1:1000. При этом вирусостатический эффект сочетается с низкой цитотоксичностью. При введении в культивируемую среду препарата АЗТ отмечается высокая цитотоксичность при умеренном противовирусном действии.
В дальнейшем токсичность препаратов при использовании предлагаемого способа была исследована на экспериментальных животных в системе in vivo.
Тесты проводились параллельно по всем 4 кодированным препаратам в сравнении с азидотимидином в дозах 5, 10, 20, 35, и 50 мг/кг. Исследования токсичности четырех препаратов и азидотимидина проводились на нелинейных белых мышах весом 6-7 г с использованием разных концентраций препаратов на килограмм веса животных в объеме 0,2 мл в форме подкожных, интраназальных и внутрибрюшинных инъекций и в объеме 0,03 мл в форме интрацеребральных инъекций. Животных держали под наблюдением в течение 2 недель, затем рассчитывали LD50 по методу Curber. За дозу LD50 принимали летальную дозу препарата, вызывавшую смерть 50% животных.
Результаты исследования токсичности этих препаратов приведены в табл.2.
Из таблиц видно, что все пять препаратов независимо от дозы оказались нетоксичными для белых мышей весом 5-7 г при подкожном, интраназальном, интраабдоминальном введении (срок наблюдения 2 недели). В то же время, зарегистрирована 50%-ная смертность среди мышей при превышении дозы ДНК-Na-Fe 50 мг/кг при интрацеребральном введении. Азидотимидин также вызывал смерть 50% мышей при интрацеребральном введении в дозах от 10 до 50 мг/кг веса животных. Характерно, что у исследуемых комплексов, практически при любом способе введения сохраняется противовирусная активность, в то же время, как у AZT она лучше выражена при внутрицеребральном, подкожном и внутрибрюшинном введении.
Предложенные комплексы ДНК-Na-металл обладают выраженной антиВИЧ-активностью; их противовирусная активность сочетается с низкой токсичностью практически при любом способе введения в дозе 10-50 мг/кг, противовирусная активность проявляется практически при любом способе введения.
П р и м е р 1. В эксперименте использовали культуру перевиваемых клеток линии CEM-SS и МТ-4. Клетки культивировали при концентрации 0,03- 0,05˙106 клеток на 1 мл среды РРМI 1640 с 10% фетальной сыворотки телят, 300 мкг/мл L-глутамина, 100 мкг/мл гентамицина и выращивали в форме суспензии. Жизнеспособность клеток проверяли путем окрашивания 0,4%-ным раствором трепанового синего. В качестве источников вирусов использовали штаммы HIV/IVS и HIV-1 HT2V/IIIB. Суспензию клеток помещали в 24-луночные панели, обрабатывали различными дозами комплекса ДНК-Na-Zn при соотношении ДНК и металла (М/M) 1: 1; 4:9; 3:10; 0,5:350; 1:1000; 1:1100 и заражали ВИЧ. Множественность инфекции составляла 0,01 ТСD50 на клетку. После этого культуры инкубировали при 37оС в атмосфере, содержащей 5% СО2 при влажности 98% в течение 5-7 дней до момента определения цитопатического влияния вируса на культуру клеток. Для оценки формирования вирусного антигена использовали иммуноферментный анализ.
В эксперименте было показано, что количество синцитиев в процентах от контроля по вирусу при соотношении ДНК-металл 3:10 составило 25% при 69% жизнеспособных клеток; при соотношении 0,5:350 35% при 81,2% жизнеспособных клеток; при соотношении 1:1000 70% и 84,3% жизнеспособных клеток, при соотношении 1:1100 100% и 86,2% жизнеспособных клеток.
П р и м е р 2. Постановка эксперимента, как в примере 1.
Суспензию клеток обрабатывали различными дозами комплекса ДНК-Na-никель при тех же соотношениях компонентов, что и в примере 1. В эксперименте показано, что количество синцитиев в процентах от контроля по вирусу при соотношении ДНК:никель 3:10 0,5:350 равнялось нулю при жизнеспособности клеток 71 и 79% при соотношении 1:1000 68% при 84,3% жизнеспособных клеток и при соотношении 1:1100 100% при 87,5% жизнеспособных клеток.
П р и м е р 3. Постановка эксперимента, как в примере 1.
Суспензию клеток обрабатывали различными дозами комплекса ДНК-Na-кобальт при тех же соотношениях компонентов, что в примере 1. В эксперименте показано, что количество синцитиев в процентах от контроля по вирусу при соотношении ДНК-Na-кобальт 3:10 соответствует 10% при жизнеспособности клеток 78,4% при соотношении 0,5:350 15% при жизнеспособности клеток 87,1, при соотношении 1:1000 66% при жизнеспособности 76,3% и при соотношении 1:1100 жизнеспособность соответственно составила 82,1%
П р и м е р 4. Постановка эксперимента, как в примере 1.
П р и м е р 4. Постановка эксперимента, как в примере 1.
Суспензию клеток обрабатывали различными дозами комплекса ДНК-Na-железо, при тех же соотношениях компонентов, что в примере 1. В эксперименте показано, что количество синцитиев в процентах от контроля по вирусу при соотношении ДНК-Fe 3:10, 0,5:350 соответствует 0 при жизнеспособности клеток соответственно 79,3 и 82,1% При соотношении ДНК-Fе 1:1000 количество синцитиев 61% при жизнеспособности клеток 81,7, при соотношении 1:1100 100% при жизнеспособности 84,5%
Таким образом, представленные примеры иллюстрируют высокую анти-ВИЧ активность предложенного способа при низкой токсичности.
Таким образом, представленные примеры иллюстрируют высокую анти-ВИЧ активность предложенного способа при низкой токсичности.
Такой способ по сравнению с известным обладает следующими преимуществами: высокая анти-ВИЧ активность в сочетании с низкой токсичностью, эффективность в низких дозах при любом способе введения, что позволяет выбрать адекватный путь введения препарата при различных клинических формах СПИДа. Способ может быть рекомендован для клинического изучения.
Claims (1)
- СПОСОБ ПОДАВЛЕНИЯ ВИЧ-ИНФЕКЦИИ, включающий введение препарата нуклеиновых кислот, отличающийся тем, что используют препарат, полученный из молок осетра, содержащий не менее 80% нативной натриевой соли ДНК мол.м. 270 500 · 103Д при молярных соотношениях нуклеотидов аденин 29,0, тимин 27,0, гуанин 22,0, цитозин 20,0, в комбинации с нетоксичным поливалентным металлом в молярных соотношениях 1 1 1 1000, который вводят подкожно, внутрибрюшинно или в спинномозговой канал в зависимости от клинической формы заболевания, подбирая терапевтические адекватные дозы.
Priority Applications (9)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU93020154A RU2043767C1 (ru) | 1993-05-24 | 1993-05-24 | Способ подавления вич-инфекции |
PCT/RU1994/000084 WO1994028153A2 (fr) | 1993-05-24 | 1994-04-14 | Adn de faible masse moleculaire tiree de laitance d'esturgeon, procede d'obtention de l'adn et preparation pharmaceutique a base de celui-ci |
EP94913856A EP0712936B1 (en) | 1993-05-24 | 1994-04-14 | Low-molecular dna from sturgeon milt, a method of obtaining the dna and a pharmaceutical preparation based on it |
DE69429812T DE69429812T2 (de) | 1993-05-24 | 1994-04-14 | Niedermolekulare dna aus störmilch, methode zur gewinnung der dna und ein pharmazeutisches präparat darauf basierend |
AU65849/94A AU6584994A (en) | 1993-05-24 | 1994-04-14 | Low-molecular dna from sturgeon milt, a method of obtaining the dna and a pharmaceutical preparation based on it |
JP7500517A JP2772140B2 (ja) | 1993-05-24 | 1994-04-14 | チョウザメの魚精の低分子デオキシリボ核酸(dna)、そのdnaの抽出方法及びそのdnaに基づく医薬製剤 |
AT94913856T ATE212848T1 (de) | 1993-05-24 | 1994-04-14 | Niedermolekulare dna aus störmilch, methode zur gewinnung der dna und ein pharmazeutisches präparat darauf basierend |
ES94913856T ES2171450T3 (es) | 1993-05-24 | 1994-04-14 | Adn de bajo peso molecular procedente de lecha de esturion, procedimiento para obtener el adn y preparacion farmaceutica basada en el mismo. |
SG1996002706A SG47539A1 (en) | 1993-05-24 | 1994-04-14 | Low molecular deoxribonucleic acid dna of sturgeon milt method for dna extraction and pharmaceutic preparation on the base of dna sturgeon milt |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU93020154A RU2043767C1 (ru) | 1993-05-24 | 1993-05-24 | Способ подавления вич-инфекции |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2043767C1 true RU2043767C1 (ru) | 1995-09-20 |
RU93020154A RU93020154A (ru) | 1996-10-10 |
Family
ID=20140597
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU93020154A RU2043767C1 (ru) | 1993-05-24 | 1993-05-24 | Способ подавления вич-инфекции |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2043767C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2002043740A1 (fr) * | 2000-12-01 | 2002-06-06 | Veritas S.R.L. | Procede de fabrication d'un produit antiviral immunotropique |
-
1993
- 1993-05-24 RU RU93020154A patent/RU2043767C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Лалаянц И.Э. и др. Фармакологические аспекты СПИДа - Фармакология и токсикология, 1989, т.52, N 3, с.101-110. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2002043740A1 (fr) * | 2000-12-01 | 2002-06-06 | Veritas S.R.L. | Procede de fabrication d'un produit antiviral immunotropique |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Balzarini et al. | Marked in vivo antiretrovirus activity of 9-(2-phosphonylmethoxyethyl) adenine, a selective anti-human immunodeficiency virus agent. | |
Hilleman | Prospects for the use of double-stranded ribonucleic acid (poly I: C) inducers in man | |
JP4782365B2 (ja) | ウイルス感染症と癌細胞を二重ターゲッティングする組成物及び方法 | |
JPH031310B2 (ru) | ||
JPH06508846A (ja) | アシル化ピリミジンヌクレオシドによる化学療法剤および抗ウイルス剤毒性の治療 | |
Balzarini et al. | Potentiating effect of ribavirin on the in vitro and in vivo antiretrovirus activities of 2', 3'-dideoxyinosine and 2', 3'-dideoxy-2, 6-diaminopurine riboside | |
JP2724711B2 (ja) | 医薬品生成物 | |
AU732120B2 (en) | Pyrimidine nucleotide precursors for treatment of systemic inflammation and inflammatory hepatitis | |
Smee et al. | Inhibition of bluetongue and Colorado tick fever orbiviruses by selected antiviral substances | |
KR20030078906A (ko) | 디술피드 함유 펩티드 및 질소함유 염기를 포함하는화합물, 및 이의 의약 용도 | |
RU2043767C1 (ru) | Способ подавления вич-инфекции | |
AU2442201A (en) | Compositions and methods for l-nucleosides, l-nucleotides, and their analogs | |
Memar et al. | Antiviral agents in dermatology: current status and future prospects. | |
Stringfellow et al. | Interferon inducers in therapy of infection with encephalomyocarditis virus in mice. I. Effect of single doses of polyriboinosinic-polyribocytidylic acid and tilorone hydrochloride on viral pathogenesis | |
Balzarini et al. | Potentiating effect of ribavirin on the anti-retrovirus activity of 3′-azido-2, 6-diaminopurine-2′, 3′-dideoxyriboside in vitro and in vivo | |
DeWys et al. | Synergistic antileukemic effect of theophylline and 1, 3-bis (2-chloroethyl)-1-nitrosourea | |
RU2182828C1 (ru) | Композиция, обладающая антивич и антигерпесной активностью | |
LOTZOVÁ et al. | Stimulation of NK cell cytotoxic potential of normal donors by two species of recombinant alpha interferon | |
JPH01149730A (ja) | レトロウイルス増殖抑制剤 | |
Soike et al. | Inhibition of simian varicella virus infection of monkeys by 1-(2-deoxy-2-fluoro-1-β-D-arabinofuranosyl)-5-ethyluracil (FEAU) and synergistic effects of combination with human recombinant interferon-β | |
RU2178710C1 (ru) | Индивидуальные вещества, полученные на основе химического взаимодействия дисульфидсодержащих пептидов с производными пуриновых или пиримидиновых оснований, фармацевтические композиции и препараты на их основе, способы их применения для лечения инфекционных заболеваний и профилактики осложнений | |
Offensperger et al. | Sulfated polyanions do not inhibit duck hepatitis B virus infection | |
Weber et al. | A novel peptide aldehyde with activity against human cytomegalovirus in two different in vivo models | |
RU2206326C2 (ru) | Применение натрия нуклеоспермата для лечения вич-инфекции и способ лечения | |
RU2005475C1 (ru) | Противовирусное средство |