RU2034469C1

RU2034469C1 - Strain of beauveria bassiana micromycet used for manufacture of entomopathogenic preparation

Info

Publication number: RU2034469C1
Application number: RU9393028451A
Authority: RU
Inventors: Анатолий Петрович Третьяков; Владимир Емельянович Лиховидов; Надежда Ивановна Стирманова
Original assignee: Анатолий Петрович Третьяков; Владимир Емельянович Лиховидов; Надежда Ивановна Стирманова
Priority date: 1993-06-21
Filing date: 1993-06-21
Publication date: 1995-05-10

Abstract

FIELD: microbiological industry. SUBSTANCE: strain of Beauveria bassiana, microscopic fungus, has been produced by selecting strain of Beauveria bassiana 124/1, selecting most productive and biologically effective clones by testing these on insects and for thermal resistance. For producing entomopathogenic preparation, strain should be grown on liquid nutrient medium containing 1 % commercial-grade glucose, 3 % glycerine and 7 % hydrolysate of protein-vitamin concentrate at temperature of 25 C with aeration during 57 h. This technique prescribes that thus prepared culture liquid should be concentrated to 10 % by volume and stabilizer and wetting agent to produce liquid preparation having titer of 10·10⁹ спор/мл spore/ml. EFFECT: biological effectiveness of disclosed preparation having working concentration of 1 % is 90 % in combatting cucumber thrips. 4 tbl

Description

Изобретение относится к микробиологической промышленности, в частности к производству средств защиты растений от вредных насекомых, и касается нового штамма гриба для производства энтопатогенного препарата. The invention relates to the microbiological industry, in particular to the production of plant protection products from harmful insects, and relates to a new strain of fungus for the production of an entopathogenic preparation.

Известны штаммы грибов вида Beauveria bassiana для производства энтомопатогенных препаратов. Known strains of the species Beauveria bassiana for the production of entomopathogenic preparations.

Наиболее близким штаммом к решаемой задаче является штамм Beauveria bassiana 124/1. The closest strain to the task at hand is Beauveria bassiana 124/1.

Основным недостатком известного штамма является его невысокая эффективность и низкая терморезистентность. The main disadvantage of the known strain is its low efficiency and low thermal resistance.

Целью изобретения является исключение вышеуказанных недостатков. The aim of the invention is to eliminate the above disadvantages.

Штамм гриба Beauveria bassiana TC-92 получен путем селекции штамма Beauveria bassiana 124/1 на жидких и твердых питательных средах, содержащих гидролизат белково-витаминного концентрата (БВК) и глицерин с последующим отбором чистых культур по продуктивности, биологической активности на тест-насекомых и терморезистности. Штамм депонирован в Центральной коллекции микроорганизмов государственного концерна "Биопрепарат" (ЦКМК"Б") под N ЦКМ F-54Ц. The strain of the fungus Beauveria bassiana TC-92 was obtained by breeding strain Beauveria bassiana 124/1 on liquid and solid nutrient media containing a hydrolyzate of protein-vitamin concentrate (BVK) and glycerin, followed by selection of pure cultures for productivity, biological activity for test insects and thermal resistance . The strain is deposited in the Central collection of microorganisms of the state concern "Biological product" (CCMC "B") under N CCM F-54C.

Штамм гриба Beauveria bassiana TC-92 характеризуется следующими культурально-морфологическими признаками. The strain of the fungus Beauveria bassiana TC-92 is characterized by the following cultural and morphological characteristics.

При выращивании штамма на твердой среде Чапека при 26-27^оС в течение 6 сут колонии беловатого цвета с точкой в центре, с ровными краями. Воздушный мицелий разветвленный, септированный, гифы мицелия в диаметре 3,0-5,0 мкм, конидиеносцы бутылевидные формируются одиночно, попарно или мутовками. Размер конидий 2,8-3,5 мкм одноклеточные, одноядерные на среде Сабуро при тех же условиях выращивания колонии с ровными краями белые с кремовым оттенком сверху и снизу, врастающие в агар, на сусло-агаре формирует морщинистые колонии кремового цвета снизу и белые сверху, плоские с приподнятым центром.When growing the strain on a solid Czapek's medium at 26-27 ^{° C} for 6 days colonies whitish dot in the center, with smooth edges. Branched, septate aerial mycelium, mycelial hyphae in diameter 3.0–5.0 μm, conidiophores bottle-shaped are formed singly, in pairs or whorls. The size of the conidia is 2.8-3.5 μm unicellular, single-core on Saburo medium under the same growing conditions colonies with even edges are white with a cream tint on top and bottom, growing into agar, on the wort agar forms wrinkled colonies of cream color on the bottom and white on top flat with a raised center.

Морфологические признаки штамма при культивировании на различных жидких питательных средах при 24-26^оС в течение 72 ч представлены в табл. 1.Morphological signs of strain when cultured on different liquid media at 24-26 ^{° C} for 72 hours are shown in Table. 1.

Физиолого-биохимические признаки штамма. Physiological and biochemical characteristics of the strain.

Растет при 18-32^оС, оптимально 25-27^о, рН среды 5,35-7,2, оптимально 5,8-6,8.It grows at 18-32 ^{° C,} optimally ^about 25-27, pH 5,35-7,2 optimally 5,8-6,8.

Отношение к источникам углерода: усваивает сахарозу, глюкозу, лактозу, глицерин. Attitude to carbon sources: assimilates sucrose, glucose, lactose, glycerin.

Отношение к источникам азота: утилизирует пептон, казеин, рыбо-костную муку, мясной бульон, дрожжи и их гидролизаты. Attitude to nitrogen sources: utilizes peptone, casein, fish and bone meal, meat broth, yeast and their hydrolysates.

При глубинном культивировании штамма на различных составах сред происходит изменение рН культуральной жидкости различно в зависимости от состава среды. Данные по изменению рН в процессе культивирования представлены в табл. 2. During the deep cultivation of the strain on various media compositions, the pH of the culture fluid changes differently depending on the composition of the medium. Data on pH changes during cultivation are presented in table. 2.

Продуктивность штаммов ТС-92 и родительского представлена в табл. 3. The productivity of strains TS-92 and parent are presented in table. 3.

Процентное содержание биомассы по сухому остатку после фильтрации культуральной жидкости составляет 17-19% для штамма ТС-92 и 10-12% исходного родительского штамма 124/1, что ниже на 39% по продуктивности. The percentage of biomass by dry residue after filtering the culture fluid is 17-19% for strain TC-92 and 10-12% of the original parent strain 124/1, which is 39% lower in productivity.

Исследована терморезистентность предложенного и исходного штаммов при 80^оС в течение 1-2 мин. Полученные результаты представлены в табл. 4.Thermoresistance proposed and investigated starting strains at ⁸⁰ ° C for 1-2 min. The results are presented in table. 4.

Как видно из таблицы предложенный штамм устойчивее на 20%
Биологическая эффективность штамма ТС-92 на личинках оранжерейной белокрылки и паутинном клеще при опрыскивании растений, обильно заселенных вредителями, суспензией с титром 10⁷ спор/мл составляет 65 и 55% на 5-е сутки, а у известного соответственно 55 и 40%
Пример использования штамма для получения энтомопатогенного препарата.As can be seen from the table, the proposed strain is more stable by 20%
The biological effectiveness of TS-92 strain on the larvae of the greenhouse whitefly and spider mite when spraying plants abundantly populated by pests, with a suspension with a titer of 10 ⁷ spores / ml is 65 and 55% on the 5th day, and in the known 55 and 40%
An example of using a strain to obtain an entomopathogenic drug.

В жидкую питательную среду, содержащую 1% технической глюкозы, 3% глицерина и 7% гидролизата БВК, вносят 5% посевной споровой культуры штамма ТС-92 и культивируют при 25^оС и аэрации в ферментере объемом 50 л в течение 57 ч. Полученную культуральную жидкость концентрируют в 10 раз. В концентрат вводят смачиватель и стабилизатор суспензии и получают препарат в жидком виде с титром 10 ^.10⁹ спор/мл. Биологическая эффективность полученного препарата против трипса огурца при рабочей концентрации 1% составляет 90%
Таким образом, предложенный штамм превосходит родительский штамм по продуктивности и биологической эффективности.The liquid nutrient medium containing 1% technical glucose, 3% of glycerol and 7% of the hydrolyzate IOO, making a 5% inoculum spore culture strain TC-92, and cultured at ²⁵ ° C and aeration in a fermentor of 50 L for 57 hours. The culture the liquid is concentrated 10 times. A wetting agent and suspension stabilizer are introduced into the concentrate and the preparation is obtained in liquid form with a titer of 10 ^. 10 ⁹ spores / ml. The biological effectiveness of the drug against trips of cucumber at a working concentration of 1% is 90%
Thus, the proposed strain is superior to the parent strain in productivity and biological effectiveness.

Claims

The strain of micromycete Beauveria bassiana CC MK "B" N CCM F-54C to obtain an entomopathogenic drug.