Claims (27)
1. РНКи, содержащая первую нить и вторую нить, где1. RNAi containing the first strand and the second strand, where
a) первая нить и вторая нить образуют дуплекс;a) the first thread and the second thread form a duplex;
b) первая нить содержит направляющую область, где направляющая область содержит нуклеиновую кислоту, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 90% идентичностью с последовательностью 5’-ACUGCGCACAUUGGAACUGAG -3’ (SEQ ID NO:29); иb) the first strand contains a guide region, where the guide region contains a nucleic acid characterized by at least about 90% identity with the sequence 5'-ACUGCGCACAUUGGAACUGAG -3' (SEQ ID NO:29); And
c) вторая нить содержит область, не являющуюся направляющей.c) the second thread contains an area that is not a guide.
2. РНКи по п. 1, где направляющая область содержит нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 90% идентичностью с последовательностью 5’- ACUGCGCACAUUGGAACUGAG -3’ (SEQ ID NO:29).2. RNAi according to claim 1, where the targeting region contains a nucleotide sequence characterized by at least about 90% identity with the sequence 5'-ACUGCGCACAUUGGAACUGAG -3' (SEQ ID NO:29).
3. РНКи по п. 1, где направляющая область содержит нуклеотидную последовательность 5’- ACUGCGCACAUUGGAACUGAG -3’ (SEQ ID NO:29).3. RNAi according to claim 1, where the targeting region contains the nucleotide sequence 5'- ACUGCGCACAUUGGAACUGAG -3' (SEQ ID NO:29).
4. РНКи по любому из пп. 1-3, где вторая нить содержит нуклеиновую кислоту, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 90% идентичностью с последовательностью 5’-CUCAGUUCAUGUGCGCAGU -3’ (SEQ ID NO 58).4. RNAi according to any one of paragraphs. 1-3, wherein the second strand contains a nucleic acid having at least about 90% identity to the sequence 5'-CUCAGUUCAUGUGCGCAGU -3' (SEQ ID NO 58).
5. РНКи по п. 4, где вторая нить содержит нуклеиновую кислоту, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 90% идентичностью с последовательностью 5’-CUCAGUUCAUGUGCGCAGU -3’ (SEQ ID NO: 58).5. The RNAi of claim 4, wherein the second strand contains a nucleic acid having at least about 90% identity to the sequence 5'-CUCAGUUCAUGUGCGCAGU -3' (SEQ ID NO: 58).
6. РНКи по п. 4, где вторая нить содержит нуклеиновую кислоту 5’-CUCAGUUCAUGUGCGCAGU -3’ (SEQ ID NO: 58).6. RNAi according to claim 4, where the second strand contains the nucleic acid 5'-CUCAGUUCAUGUGCGCAGU -3' (SEQ ID NO: 58).
7. РНКи по любому из пп. 1-6, где первая нить и вторая нить соединены посредством РНК-линкера, способного к образованию петлевой структуры.7. RNAi according to any one of paragraphs. 1-6, where the first strand and the second strand are connected by an RNA linker capable of forming a loop structure.
8. РНКи по п. 7, где РНК-линкер содержит 4-50 нуклеотидов.8. RNAi according to claim 7, where the RNA linker contains 4-50 nucleotides.
9. РНКи по п. 7 или 8, где петлевая структура содержит 4-20 нуклеотидов.9. RNAi according to claim 7 or 8, where the loop structure contains 4-20 nucleotides.
10. РНКи по любому из пп. 1-9, где РНКи представляет собой малую ингибирующую РНК (siRNA), микроРНК (miRNA) или малую шпилечную РНК (shRNA). 10. RNAi according to any one of paragraphs. 1-9, wherein RNAi is small inhibitory RNA (siRNA), microRNA (miRNA) or small hairpin RNA (shRNA).
11. РНКи по любому из пп. 1-10, где РНКи нацеливается на РНК, кодирующую полипептид, ассоциированный с нейродегенеративной синуклеинoпатией.11. RNAi according to any one of paragraphs. 1-10, wherein RNAi targets RNA encoding a polypeptide associated with neurodegenerative synucleinopathy.
12. РНКи по п. 11, где полипептид представляет собой альфа-синуклеин (SNCA).12. RNAi according to claim 11, wherein the polypeptide is alpha-synuclein (SNCA).
13. РНКи по п. 12, где альфа-синуклеин представляет собой человеческий альфа-синуклеин.13. RNAi according to claim 12, wherein the alpha-synuclein is human alpha-synuclein.
14. РНКи по любому из пп. 11-13, где нейродегенеративная синуклеинoпатия представляет собой болезнь Паркинсона (PD), множественную системную атрофию (MSA) или деменцию с тельцами Леви (DLB).14. RNAi according to any one of paragraphs. 11-13, wherein the neurodegenerative synucleinopathy is Parkinson's disease (PD), multiple system atrophy (MSA) or dementia with Lewy bodies (DLB).
15. Экспрессионная конструкция, содержащая нуклеиновую кислоту, кодирующую РНКи по любому из пп. 1-14.15. An expression construct containing a nucleic acid encoding RNAi according to any one of claims. 1-14.
16. Экспрессионная конструкция по п. 15, где нуклеиновая кислота, кодирующая РНКи содержит каркас miRNA.16. The expression construct according to claim 15, where the nucleic acid encoding RNAi contains a miRNA scaffold.
17. Вектор, содержащий экспрессионную конструкцию по п. 15 или 16.17. A vector containing the expression construct according to claim 15 or 16.
18. Вектор по п. 17, где вектор представляет собой вектор на основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса (rAAV).18. The vector of claim 17, wherein the vector is a recombinant adeno-associated virus (rAAV) vector.
19. Вектор по п. 18, где экспрессионная конструкция фланкирована одной или несколькими последовательностями инвертированных концевых повторов (ITR) AAV.19. The vector of claim 18, wherein the expression construct is flanked by one or more AAV inverted terminal repeat (ITR) sequences.
20. Вектор по п. 19, где экспрессионная конструкция фланкирована двумя ITR AAV.20. The vector according to claim 19, where the expression construct is flanked by two AAV ITRs.
21. Вектор по п. 19 или 20, где ITR AAV представляют собой ITR серотипа AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAVrh8, AAVrh8R, AAV9, AAV10, AAVrh10, AAV11, AAV12, AAV2R471A, AAV DJ, AAV козы, AAV крупного рогатого скота, или AAV мыши.21. Vector according to claim 19 or 20, where the AAV ITRs are ITRs of serotype AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAVrh8, AAVrh8R, AAV9, AAV10, AAVrh10, AAV11, AAV12, AAV2R471A, AAV DJ, goat AAV, bovine AAV, or mouse AAV.
22. Вектор по любому из пп. 19-21, где ITR AAV представляют собой ITR AAV2.22. Vector according to any one of paragraphs. 19-21, wherein the AAV ITRs are the AAV2 ITRs.
23. Способ лечения нейродегенеративной синуклеинoпатии у млекопитающего, включающий введение млекопитающему РНКи по любому из пп. 1-14.23. A method of treating neurodegenerative synucleinopathy in a mammal, comprising administering RNAi to the mammal according to any one of claims. 1-14.
24. Способ лечения нейродегенеративной синуклеинoпатии у млекопитающего, включающий введение млекопитающему вектора по любому из пп. 17-23.24. A method of treating neurodegenerative synucleinopathy in a mammal, comprising administering to the mammal a vector according to any one of claims. 17-23.