RU2023128356A

RU2023128356A - Антитела к cd38 и комбинации с антителами к cd3 и сd28

Info

Publication number: RU2023128356A
Application number: RU2023128356A
Authority: RU
Inventors: Лин СЮЙ; Эдвард Сьюнг; Ронни Вэй; Гари НЕЙБЕЛ; Цжи-Юн Ян; Тарик ДАБДУБИ; Беатрис Камерон; Сендрин Лемуан; Катрин Прад; Лань У
Original assignee: Санофи
Priority date: 2017-10-10
Filing date: 2018-10-09
Publication date: 2023-11-08

Claims

1. Триспецифический связывающий белок, содержащий три антигенсвязывающих сайта, каждый из которых связывает один или более целевых белков, где указанный связывающий белок содержит антигенсвязывающий сайт, который перекрестно реагирует с внеклеточным доменом полипептида CD38 человека и внеклеточным доменом полипептида CD38 макака-крабоеда, и два антигенсвязывающих сайта, каждый из которых связывает поверхностный белок Т-клеток.

2. Триспецифический связывающий белок по п. 1, где триспецифический связывающий белок перекрестно реагирует с полипептидом CD38 человека, содержащим аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:1 или под SEQ ID NO:105.

3. Триспецифический связывающий белок по п. 1 или 2, где триспецифический связывающий белок перекрестно реагирует с полипептидом CD38 макака-крабоеда, содержащим аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:30.

4. Триспецифический связывающий белок по п. 1, где триспецифический связывающий белок содержит антигенсвязывающий сайт, который перекрестно реагирует с внеклеточным доменом полипептида CD38 человека и внеклеточным доменом полипептида CD38 макака-крабоеда, антигенсвязывающий сайт, который связывает полипептид CD28 человека, и антигенсвязывающий сайт, который связывает полипептид CD3 человека.

5. Триспецифический связывающий белок по любому из пп. 1-4, где триспецифический связывающий белок содержит четыре полипептидные цепи, которые образуют три антигенсвязывающих сайта, где первая полипептидная цепь содержит структуру, представленную формулой

V_L2-L₁-V_L1-L₂-C_L [I];

и вторая полипептидная цепь содержит структуру, представленную формулой

V_H1-L₃-V_H2-L₄-C_H1-шарнир-C_H2-C_H3 [II];

и третья полипептидная цепь содержит структуру, представленную формулой

V_H3-C_H1-шарнир-C_H2-C_H3 [III];

и четвертая полипептидная цепь содержит структуру, представленную формулой

V_L3-C_L[IV];

где V_L1 представляет собой первый вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина;

V_L2 представляет собой второй вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина;

V_L3 представляет собой третий вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина;

V_H1 представляет собой первый вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина;

V_H2 представляет собой второй вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина;

V_H3 представляет собой третий вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина;

C_L представляет собой константный домен легкой цепи иммуноглобулина;

C_H1 представляет собой константный домен C_H1 тяжелой цепи иммуноглобулина;

C_H2 представляет собой константный домен C_H2 тяжелой цепи иммуноглобулина;

C_H3 представляет собой константный домен C_H3 тяжелой цепи иммуноглобулина;

шарнир представляет собой шарнирный участок иммуноглобулина, соединяющий домены C_H1 и C_H2;

L₁, L₂, L₃ и L₄ представляют собой аминокислотные линкеры;

где полипептид формулы I и полипептид формулы II образуют кроссоверную пару легкая цепь-тяжелая цепь,

где (a) домен V_H1 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GYTFTSFN (SEQ ID NO:31) или GYTFTSYA (SEQ ID NO:37), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IYPGNGGT (SEQ ID NO:32) или IYPGQGGT (SEQ ID NO:38), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность ARTGGLRRAYFTY (SEQ ID NO:33), и домен V_L1 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность ESVDSYGNGF (SEQ ID NO:34) или QSVSSYGQGF (SEQ ID NO:39), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность LAS (SEQ ID NO:35) или GAS (SEQ ID NO:40), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность QQNKEDPWT (SEQ ID NO:36);

(b) домен V_H2 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GYTFTSFN (SEQ ID NO:31) или GYTFTSYA (SEQ ID NO:37), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IYPGNGGT (SEQ ID NO:32) или IYPGQGGT (SEQ ID NO:38), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность ARTGGLRRAYFTY (SEQ ID NO:33), и домен V_L2 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность ESVDSYGNGF (SEQ ID NO:34) или QSVSSYGQGF (SEQ ID NO:39), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность LAS (SEQ ID NO:35) или GAS (SEQ ID NO:40), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность QQNKEDPWT (SEQ ID NO:36); или

(c) домен V_H3 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GYTFTSFN (SEQ ID NO:31) или GYTFTSYA (SEQ ID NO:37), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IYPGNGGT (SEQ ID NO:32) или IYPGQGGT (SEQ ID NO:38), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность ARTGGLRRAYFTY (SEQ ID NO:33), и домен V_L3 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность ESVDSYGNGF (SEQ ID NO:34) или QSVSSYGQGF (SEQ ID NO:39), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность LAS (SEQ ID NO:35) или GAS (SEQ ID NO:40), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность QQNKEDPWT (SEQ ID NO:36).

6. Триспецифический связывающий белок по п. 5, где

(а) домен V_H1 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GYTFTSFN (SEQ ID NO:31), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IYPGNGGT (SEQ ID NO:32), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность ARTGGLRRAYFTY (SEQ ID NO:33), и домен V_L1 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность ESVDSYGNGF (SEQ ID NO:34), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность LAS (SEQ ID NO:35), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность QQNKEDPWT (SEQ ID NO:36);

(b) домен V_H1 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GYTFTSYA (SEQ ID NO:37), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IYPGQGGT (SEQ ID NO:38), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность ARTGGLRRAYFTY (SEQ ID NO:33), и домен V_L1 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность QSVSSYGQGF (SEQ ID NO:39), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность GAS (SEQ ID NO:40), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность QQNKEDPWT (SEQ ID NO:36);

(c) домен V_H2 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GYTFTSFN (SEQ ID NO:31), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IYPGNGGT (SEQ ID NO:32), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность ARTGGLRRAYFTY (SEQ ID NO:33), и домен V_L2 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность ESVDSYGNGF (SEQ ID NO:34), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность LAS (SEQ ID NO:35), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность QQNKEDPWT (SEQ ID NO:36);

(d) домен V_H2 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GYTFTSYA (SEQ ID NO:37), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IYPGQGGT (SEQ ID NO:38), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность ARTGGLRRAYFTY (SEQ ID NO:33), и домен V_L2 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность QSVSSYGQGF (SEQ ID NO:39), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность GAS (SEQ ID NO:40), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность QQNKEDPWT (SEQ ID NO:36);

(е) домен V_H3 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GYTFTSFN (SEQ ID NO:31), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IYPGNGGT (SEQ ID NO:32), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность ARTGGLRRAYFTY (SEQ ID NO:33), и домен V_L3 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность ESVDSYGNGF (SEQ ID NO:34), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность LAS (SEQ ID NO:35), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность QQNKEDPWT (SEQ ID NO:36); или

(h) домен V_H3 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GYTFTSYA (SEQ ID NO:37), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IYPGQGGT (SEQ ID NO:38), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность ARTGGLRRAYFTY (SEQ ID NO:33), и домен V_L3 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность QSVSSYGQGF (SEQ ID NO:39), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность GAS (SEQ ID NO:40), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность QQNKEDPWT (SEQ ID NO:36).

7. Триспецифический связывающий белок по п. 6, где

(а) домен V_H3 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GYTFTSFN (SEQ ID NO:31), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IYPGNGGT (SEQ ID NO:32), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность ARTGGLRRAYFTY (SEQ ID NO:33), и домен V_L3 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность ESVDSYGNGF (SEQ ID NO:34), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность LAS (SEQ ID NO:35), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность QQNKEDPWT (SEQ ID NO:36); или

(b) домен V_H3 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GYTFTSYA (SEQ ID NO:37), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IYPGQGGT (SEQ ID NO:38), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность ARTGGLRRAYFTY (SEQ ID NO:33), и домен V_L3 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность QSVSSYGQGF (SEQ ID NO:39), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность GAS (SEQ ID NO:40), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность QQNKEDPWT (SEQ ID NO:36).

8. Триспецифический связывающий белок по п. 7, где

(а) домен V_H3 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:5, и домен V_L3 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:6;

(b) домен V_H3 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:17, и домен V_L3 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:18;

(с) домен V_H3 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:21, и домен V_L3 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:18;

(d) домен V_H3 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:23, и домен V_L3 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:18; или

(e) домен V_H3 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:13, и домен V_L3 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:14.

9. Триспецифический связывающий белок по любому из пп. 1-4, где триспецифический связывающий белок содержит четыре полипептидные цепи, которые образуют три антигенсвязывающих сайта, где первая полипептидная цепь содержит структуру, представленную формулой

V_L2-L₁-V_L1-L₂-C_L [I];

V_H1-L₃-V_H2-L₄-C_H1-шарнир-C_H2-C_H3 [II];

V_H3-C_H1-шарнир-C_H2-C_H3 [III];

V_L3-C_L[IV];

шарнир представляет собой шарнирный участок иммуноглобулина, соединяющий домены C_H1 и C_H2; и

где (а) домен V_H1 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GFTFSSYG (SEQ ID NO:41), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IWYDGSNK (SEQ ID NO:42), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность ARMFRGAFDY (SEQ ID NO:43), и домен V_L1 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность QGIRND (SEQ ID NO:44), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность AAS (SEQ ID NO:45), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность LQDYIYYPT (SEQ ID NO:46);

(b) домен V_H2 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GFTFSSYG (SEQ ID NO:41), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IWYDGSNK (SEQ ID NO:42), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность ARMFRGAFDY (SEQ ID NO:43), и домен V_L2 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность QGIRND (SEQ ID NO:44), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность AAS (SEQ ID NO:45), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность LQDYIYYPT (SEQ ID NO:46); или

(с) домен V_H3 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GFTFSSYG (SEQ ID NO:41), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IWYDGSNK (SEQ ID NO:42), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность ARMFRGAFDY (SEQ ID NO:43), и домен V_L3 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность QGIRND (SEQ ID NO:44), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность AAS (SEQ ID NO:45), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность LQDYIYYPT (SEQ ID NO:46).

10. Триспецифический cвязывающий белок по п. 9, где домен V_H3 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GFTFSSYG (SEQ ID NO:41), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IWYDGSNK (SEQ ID NO:42), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность ARMFRGAFDY (SEQ ID NO:43), и домен V_L3 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность QGIRND (SEQ ID NO:44), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность AAS (SEQ ID NO:45), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность LQDYIYYPT (SEQ ID NO:46).

11. Триспецифический cвязывающий белок по п. 10, где домен V_H3 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:9, и домен V_L3 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:10.

12. Триспецифический cвязывающий белок по любому из пп. 5-11, где

(a) домен V_H1 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:49, домен V_L1 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:50, домен V_H2 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:53, и домен V_L2 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:54;

(b) домен V_H2 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:49, домен V_L2 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:50, домен V_H1 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:53, и домен V_L1 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:54;

(с) домен V_H1 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:51, домен V_L1 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:52, домен V_H2 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:53, и домен V_L2 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:54;

(d) домен V_H2 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:51, домен V_L2 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:52, домен V_H1 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:53, и домен V_L1 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:54;

(e) домен V_H1 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:49, домен V_L1 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:50, домен V_H2 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:84, и домен V_L2 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:85;

(f) домен V_H2 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:49, домен V_L2 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:50, домен V_H1 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:84, и домен V_L1 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:85;

(g) домен V_H1 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:51, домен V_L1 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:52, домен V_H2 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:84, и домен V_L2 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:85; или

(h) домен V_H2 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:51, домен V_L2 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:52, домен V_H1 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:84, и домен V_L1 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:85.

13. Связывающий белок по п. 12, где

(a) домен V_H1 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:49, домен V_L1 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:50, домен V_H2 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:53, домен V_L2 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:54, домен V_H3 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:13, и домен V_L3 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:14; или

(b) домен V_H1 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:49, домен V_L1 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:50, домен V_H2 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:53, домен V_L2 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:54, домен V_H3 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:9, и домен V_L3 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:10.

14. Триспецифический cвязывающий белок по любому из пп. 5-13, где длина по меньшей мере одного из L₁, L₂, L₃ или L₄ независимо составляет 0 аминокислот.

15. Триспецифический cвязывающий белок по любому из пп. 5-13, где длина каждого из L₁, L₂, L₃ или L₄ независимо составляет по меньшей мере одну аминокислоту.

16. Триспецифический cвязывающий белок по любому из пп. 5-13, где (a) каждый из L₁, L₂, L₃и L₄ независимо имеет длину, составляющую ноль аминокислот, или содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из GGGGSGGGGS (SEQ ID NO:55), GGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO:56), S, RT, TKGPS (SEQ ID NO:57), GQPKAAP (SEQ ID NO: 58) и GGSGSSGSGG (SEQ ID NO: 59); или (b) каждый из L₁, L₂, L₃и L₄ независимо содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из GGGGSGGGGS (SEQ ID NO:55), GGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO:56), S, RT, TKGPS (SEQ ID NO:57), GQPKAAP (SEQ ID NO: 58) и GGSGSSGSGG (SEQ ID NO:59).

17. Триспецифический cвязывающий белок по любому из пп. 5-13, где

(a) L₁ содержит последовательность GQPKAAP (SEQ ID NO: 58), L₂ содержит последовательность TKGPS (SEQ ID NO: 57), L₃ содержит последовательность S, и L₄ содержит последовательность RT;

(b) L₁ содержит последовательность GGGGSGGGGS (SEQ ID NO: 55), L₂ содержит последовательность GGGGSGGGGS (SEQ ID NO: 55), длина L₃ составляет 0 аминокислот, и длина L₄ составляет 0 аминокислот;

(c) L₁ содержит последовательность GGSGSSGSGG (SEQ ID NO: 59), L₂ содержит последовательность GGSGSSGSGG (SEQ ID NO: 59), длина L₃ составляет 0 аминокислот, и длина L₄ составляет 0 аминокислот; или

(d) L₁ содержит последовательность GGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO: 56), длина L₂ составляет 0 аминокислот, L₃ содержит последовательность GGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO: 56), и длина L₄ составляет 0 аминокислот.

18. Триспецифический cвязывающий белок по любому из пп. 5-17, где домены шарнир-C_H2-C_H3 второй и третьей полипептидных цепей представляют собой домены шарнир-C_H2-C_H3 IgG4 человека, и где каждый из доменов шарнир-C_H2-C_H3 содержит аминокислотные замены в положениях, соответствующих положениям 234 и 235 IgG4 человека в соответствии с EU-индексом, где аминокислотные замены представляют собой F234A и L235A.

19. Триспецифический cвязывающий белок по любому из пп. 5-17, где домены шарнир-C_H2-C_H3 второй и третьей полипептидных цепей представляют собой домены шарнир-C_H2-C_H3 IgG4 человека, и где каждый из доменов шарнир-C_H2-C_H3 содержит аминокислотные замены в положениях, соответствующих положениям 233-236 IgG4 человека в соответствии с EU-индексом, где аминокислотные замены представляют собой E233P, F234V, L235A, и делецию в положении 236.

20. Триспецифический cвязывающий белок по любому из пп. 5-19, где домены шарнир-C_H2-C_H3 второй и третьей полипептидных цепей представляют собой домены шарнир-C_H2-C_H3 IgG4 человека, и где каждый из доменов шарнир-C_H2-C_H3 содержит аминокислотные замены в положениях, соответствующих положениям 228 и 409 IgG4 человека в соответствии с EU-индексом, где аминокислотные замены представляют собой S228P и R409K.

21. Триспецифический cвязывающий белок по любому из пп. 5-17, где домены шарнир-C_H2-C_H3 второй и третьей полипептидных цепей представляют собой домены шарнир-C_H2-C_H3 IgG1 человека, и где каждый из доменов шарнир-C_H2-C_H3 содержит аминокислотные замены в положениях, соответствующих положениям 234, 235 и 329 IgG1 человека в соответствии с EU-индексом, где аминокислотные замены представляют собой L234A, L235A и P329A.

22. Триспецифический cвязывающий белок по любому из пп. 5-17, где домены шарнир-C_H2-C_H3 второй и третьей полипептидных цепей представляют собой домены шарнир-C_H2-C_H3 IgG1 человека, и где каждый из доменов шарнир-C_H2-C_H3 содержит аминокислотные замены в положениях, соответствующих положениям 298, 299 и 300 IgG1 человека в соответствии с EU-индексом, где аминокислотные замены представляют собой S298N, T299A и Y300S.

23. Триспецифический cвязывающий белок по любому из пп. 5-22, где домен шарнир-C_H2-C_H3 второй полипептидной цепи содержит аминокислотные замены в положениях, соответствующих положениям 349, 366, 368 и 407 IgG1 или IgG4 человека в соответствии с EU-индексом, где аминокислотные замены представляют собой Y349C, T366S, L368A и Y407V; и где домен шарнир-C_H2-C_H3 третьей полипептидной цепи содержит аминокислотные замены в положениях, соответствующих положениям 354 и 366 IgG1 или IgG4 человека в соответствии с EU-индексом, где аминокислотные замены представляют собой S354C и T366W.

24. Триспецифический связывающий белок по любому из пп. 5-22, где домен шарнир-C_H2-C_H3 второй полипептидной цепи содержит аминокислотные замены в положениях, соответствующих положениям 354 и 366 IgG1 или IgG4 человека в соответствии с EU-индексом, где аминокислотные замены представляют собой S354C и T366W; и где домен шарнир-C_H2-C_H3 третьей полипептидной цепи содержит аминокислотные замены в положениях, соответствующих положениям 349, 366, 368 и 407 IgG1 или IgG4 человека в соответствии с EU-индексом, где аминокислотные замены представляют собой Y349C, T366S, L368A и Y407V.

25. Триспецифический связывающий белок по п. 5, где первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:61, вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:60, третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:62, и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:63.

26. Триспецифический связывающий белок по п. 5, где первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:61, вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:64, третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:65, и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:63.

27. Триспецифический связывающий белок по п. 5, где первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:61, вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:66, третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:67, и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:63.

28. Триспецифический связывающий белок по п. 9, где первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:61, вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:60, третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:68, и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:69.

29. Триспецифический связывающий белок по п. 9, где первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:61, вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:64, третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:70, и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:69.

30. Триспецифический связывающий белок по п. 9, где первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:61, вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:66, третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:71, и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:69.

31. Связывающий белок, содержащий три антигенсвязывающих сайта, каждый из которых связывает один или более целевых белков, где связывающий белок содержит четыре полипептидные цепи, которые образуют три антигенсвязывающих сайта, где первая полипептидная цепь содержит структуру, представленную формулой

V_L2-L₁-V_L1-L₂-C_L [I];

и вторая полипептидная цепь содержит структуру, представленную формулой:

V_H1-L₃-V_H2-L₄-C_H1-шарнир-C_H2-C_H3 [II];

и третья полипептидная цепь содержит структуру, представленную формулой:

V_H3-C_H1-шарнир-C_H2-C_H3 [III];

V_L3-C_L[IV];

где (а) домены шарнир-C_H2-C_H3 второй и третьей полипептидных цепей представляют собой домены шарнир-C_H2-C_H3 IgG1 человека, и при этом каждый из доменов шарнир-C_H2-C_H3 содержит аминокислотные замены в положениях, соответствующих положениям 298, 299 и 300 IgG1 человека в соответствии с EU-индексом, где аминокислотные замены представляют собой S298N, T299A и Y300S; или

(b) домены шарнир-C_H2-C_H3 второй и третьей полипептидных цепей представляют собой домены C_H3 IgG4 человека, и при этом каждый из доменов шарнир-C_H2-C_H3 содержит аминокислотные замены в положениях, соответствующих положениям 233-236 IgG4 человека в соответствии с EU-индексом, где аминокислотные замены представляют собой E233P, F234V, L235A, и делецию в положении 236.

32. Связывающий белок по п. 31, где по меньшей мере одна пара из V_H1 и V_L1, V_H2 и V_L2 и V_H3 и V_L3 образует антигенсвязывающий сайт, который связывает полипептид CD38.

33. Связывающий белок по п. 31, где одна, две или три пары из V_H1 и V_L1, V_H2 и V_L2 и V_H3 и V_L3 образуют антигенсвязывающий сайт, который связывает целевой антиген, выбранный из группы, состоящей из A2AR, APRIL, ATPDазы, BAFF, BAFFR, BCMA, BlyS, BTK, BTLA, B7DC, B7H1, B7H4, B7H5, B7H6, B7H7, B7RP1, B7-4, C3, C5, CCL2, CCL3, CCL4, CCL5, CCL7, CCL8, CCL11, CCL15, CCL17, CCL19, CCL20, CCL21, CCL24, CCL25, CCL26, CCR3, CCR4, CD3, CD19, CD20, CD23, CD24, CD27, CD28, CD38, CD39, CD40, CD70, CD80, CD86, CD122, CD137, CD137L, CD152, CD154, CD160, CD272, CD273, CD274, CD275, CD276, CD278, CD279, CDH1, хитиназы, CLEC9, CLEC91, CRTH2, CSF-1, CSF-2, CSF-3, CX3CL1, CXCL12, CXCL13, CXCR3, DNGR-1, эктонуклеозидтрифосфатдифосфогидролазы 1, EGFR, ENTPD1, FCER1A, FCER1, FLAP, FOLH1, Gi24, GITR, GITRL, GM-CSF, Her2, HHLA2, HMGB1, HVEM, ICOSLG, IDO, IFNα, IgE, IGF1R, IL2Rбета, IL1, IL1A, IL1B, IL1F10, IL2, IL4, IL4Ra, IL5, IL5R, IL6, IL7, IL7Ra, IL8, IL9, IL9R, IL10, rhIL10, IL12, IL13, IL13Ra1, IL13Ra2, IL15, IL17, IL17Rb, IL18, IL22, IL23, IL25, IL27, IL33, IL35, ITGB4, ITK, KIR, LAG3, LAMP1, лептина, LPFS2, MHC класса II, NCR3LG1, NKG2D, NTPDазы-1, OX40, OX40L, PD-1H, тромбоцитарного рецептора, PROM1, S152, SISP1, SLC, SPG64, ST2, STEAP2, Syk-киназы, TACI, TDO, T14, TIGIT, TIM3, TLR, TLR2, TLR4, TLR5, TLR9, TMEF1, TNFa, TNFRSF7, Tp55, TREM1, TSLP, TSLPR, TWEAK, VEGF, VISTA, Vstm3, WUCAM, и XCR1.

34. Связывающий белок по п. 31, где первая пара из V_H1 и V_L1, V_H2 и V_L2 и V_H3 и V_L3 образует антигенсвязывающий сайт, который связывает полипептид CD3 человека, вторая пара из V_H1 и V_L1, V_H2 и V_L2 и V_H3 и V_L3 образует антигенсвязывающий сайт, который связывает полипептид CD28 человека, и третья пара из V_H1 и V_L1, V_H2 и V_L2 и V_H3 и V_L3 образует антигенсвязывающий сайт, который связывает целевой антиген человека, выбранный из группы, состоящей из A2AR, APRIL, ATPDазы, BAFF, BAFFR, BCMA, BlyS, BTK, BTLA, B7DC, B7H1, B7H4, B7H5, B7H6, B7H7, B7RP1, B7-4, C3, C5, CCL2, CCL3, CCL4, CCL5, CCL7, CCL8, CCL11, CCL15, CCL17, CCL19, CCL20, CCL21, CCL24, CCL25, CCL26, CCR3, CCR4, CD3, CD19, CD20, CD23, CD24, CD27, CD28, CD38, CD39, CD40, CD70, CD80, CD86, CD122, CD137, CD137L, CD152, CD154, CD160, CD272, CD273, CD274, CD275, CD276, CD278, CD279, CDH1, хитиназы, CLEC9, CLEC91, CRTH2, CSF-1, CSF-2, CSF-3, CX3CL1, CXCL12, CXCL13, CXCR3, DNGR-1, эктонуклеозидтрифосфатдифосфогидролазы 1, EGFR, ENTPD1, FCER1A, FCER1, FLAP, FOLH1, Gi24, GITR, GITRL, GM-CSF, Her2, HHLA2, HMGB1, HVEM, ICOSLG, IDO, IFNα, IgE, IGF1R, IL2Rбета, IL1, IL1A, IL1B, IL1F10, IL2, IL4, IL4Ra, IL5, IL5R, IL6, IL7, IL7Ra, IL8, IL9, IL9R, IL10, rhIL10, IL12, IL13, IL13Ra1, IL13Ra2, IL15, IL17, IL17Rb, IL18, IL22, IL23, IL25, IL27, IL33, IL35, ITGB4, ITK, KIR, LAG3, LAMP1, лептина, LPFS2, MHC класса II, NCR3LG1, NKG2D, NTPDазы-1, OX40, OX40L, PD-1H, тромбоцитарного рецептора, PROM1, S152, SISP1, SLC, SPG64, ST2, STEAP2, Syk-киназы, TACI, TDO, T14, TIGIT, TIM3, TLR, TLR2, TLR4, TLR5, TLR9, TMEF1, TNFa, TNFRSF7, Tp55, TREM1, TSLP, TSLPR, TWEAK, VEGF, VISTA, Vstm3, WUCAM, и XCR1.

35. Набор полинуклеотидов, содержащий:

(a) первый полинуклеотид, содержащий последовательность под SEQ ID NO:73, второй полинуклеотид, содержащий последовательность под SEQ ID NO:72, третий полинуклеотид, содержащий последовательность под SEQ ID NO:74, и четвертый полинуклеотид, содержащий последовательность под SEQ ID NO:75;

(b) первый полинуклеотид, содержащий последовательность под SEQ ID NO:73, второй полинуклеотид, содержащий последовательность под SEQ ID NO:76, третий полинуклеотид, содержащий последовательность под SEQ ID NO:77, и четвертый полинуклеотид, содержащий последовательность под SEQ ID NO:75;

(c) первый полинуклеотид, содержащий последовательность под SEQ ID NO:73, второй полинуклеотид, содержащий последовательность под SEQ ID NO:78, третий полинуклеотид, содержащий последовательность под SEQ ID NO:79, и четвертый полинуклеотид, содержащий последовательность под SEQ ID NO:75;

(d) первый полинуклеотид, содержащий последовательность под SEQ ID NO:73, второй полинуклеотид, содержащий последовательность под SEQ ID NO:72, третий полинуклеотид, содержащий последовательность под SEQ ID NO:80, и четвертый полинуклеотид, содержащий последовательность под SEQ ID NO:81;

(e) первый полинуклеотид, содержащий последовательность под SEQ ID NO:73, второй полинуклеотид, содержащий последовательность под SEQ ID NO:76, третий полинуклеотид, содержащий последовательность под SEQ ID NO:82, и четвертый полинуклеотид, содержащий последовательность под SEQ ID NO:81; или

(f) первый полинуклеотид, содержащий последовательность под SEQ ID NO:73, второй полинуклеотид, содержащий последовательность под SEQ ID NO:78, третий полинуклеотид, содержащий последовательность под SEQ ID NO:83, и четвертый полинуклеотид, содержащий последовательность под SEQ ID NO:81.

36. Полинуклеотид, кодирующий триспецифический связывающий белок по любому из пп. 1-34.

37. Вектор, содержащий полинуклеотид по п. 36.

38. Клетка-хозяин для получения триспецифического связывающего белка по любому из пп. 1-34, содержащая набор полинуклеотидов по п. 35, полинуклеотид по п. 36 или вектор по п. 37.

39. Способ получения триспецифического связывающего белка, предусматривающий культивирование клетки-хозяина по п. 38, за счет чего обеспечивается получение триспецифического связывающего белка.

40. Способ по п. 39, дополнительно предусматривающий извлечение триспецифического связывающего белка из клетки-хозяина.

41. Фармацевтическая композиция, содержащая триспецифический связывающий белок по любому из пп. 1-34 и фармацевтически приемлемый носитель.

42. Способ предупреждения и/или лечения рака у пациента, предусматривающий введение пациенту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного связывающего белка по любому из пп. 1-30 или фармацевтической композиции по п. 41.

43. Способ по п. 42, где триспецифический связывающий белок содержит один антигенсвязывающий сайт, который связывает поверхностный белок Т-клеток, и другой антигенсвязывающий сайт, который связывает внеклеточный домен полипептида CD38 человека.

44. Способ по п. 43, где триспецифический связывающий белок содержит первый антигенсвязывающий сайт, который связывает CD3, второй антигенсвязывающий сайт, который связывает CD28, и третий антигенсвязывающий сайт, который связывает внеклеточный домен полипептида CD38 человека.

45. Способ по любому из пп. 42-44, где лекарственное средство дополнительно содержит химиотерапевтическое средство.

46. Способ по любому из пп. 42-45, где рак представляет собой множественную миелому.

47. Способ по любому из пп. 42-45, где рак представляет собой острый миелоидный лейкоз (AML), острый лимфобластный лейкоз (ALL), хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL) или B-клеточную лимфому.

48. Способ по любому из пп. 42-47, где пациентом является человек.

49. Способ по любому из пп. 42-48, где пациент выбран для лечения ввиду того, что раковые клетки экспрессируют полипептид CD38 изоформы Е человека на своей клеточной поверхности.

50. Способ по п.49, где полипептид CD38 изоформы Е человека содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:105.

51. Способ по любому из пп. 42-48, где пациент выбран для лечения ввиду того, что раковые клетки экспрессируют полипептид CD38 изоформы A человека на своей клеточной поверхности.

52. Способ по п.51, где полипептид CD38 изоформы A человека содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:1.

53. Способ по любому из пп.42-52, где раковые клетки экспрессируют CD38 человека и CD28 человека.

54. Способ по любому из пп. 42-52, где раковые клетки экспрессируют CD38 человека и не экспрессируют CD28 человека.