Claims (58)
1. Средство двухцепочечной рибонуклеиновой кислоты (дцРНК) для ингибирования экспрессии сходного с ангиопоэтином 3 (ANGPTL3), содержащее смысловую цепь и антисмысловую цепь, образующие дуплексную область,1. A double-stranded ribonucleic acid (dsRNA) agent for inhibiting the expression of angiopoietin-like 3 (ANGPTL3), containing a sense strand and an antisense strand forming a duplex region,
где антисмысловая цепь включает по меньшей мере 17 смежных нуклеотидов, которые отличаются не более чем на три нуклеотида от нуклеотидов 1354-1422 SEQ ID NO: 1,where the antisense strand includes at least 17 contiguous nucleotides that differ by no more than three nucleotides from nucleotides 1354-1422 SEQ ID NO: 1,
где все нуклеотиды смысловой цепи и все нуклеотиды антисмысловой цепи представляют собой модифицированные нуклеотиды,where all nucleotides of the sense strand and all nucleotides of the antisense strand are modified nucleotides,
где по меньшей мере один из модифицированных нуклеотидов выбран из группы, состоящей из 2'-O-метил-модифицированного нуклеотида, 2'-фтор-модифицированного нуклеотида и нуклеотида, содержащего 5'-тиофосфоротиоатную группу, иwherein at least one of the modified nucleotides is selected from the group consisting of a 2'-O-methyl-modified nucleotide, a 2'-fluoro-modified nucleotide, and a nucleotide containing a 5'-thiophosphorothioate group, and
где лиганд, содержащий N-ацетилгалактозамин (GalNAc), конъюгирован по меньшей мере с одной цепью средства дцРНК.wherein the N-acetylgalactosamine (GalNAc) containing ligand is conjugated to at least one strand of the dsRNA agent.
2. Средство двухцепочечной рибонуклеиновой кислоты (дцРНК) для ингибирования экспрессии сходного с ангиопоэтином 3 (ANGPTL3), содержащее смысловую цепь и антисмысловую цепь, образующие дуплексную область,2. A double-stranded ribonucleic acid (dsRNA) agent for inhibiting the expression of angiopoietin-like 3 (ANGPTL3), containing a sense strand and an antisense strand forming a duplex region,
где антисмысловая цепь содержит по меньшей мере 17 смежных нуклеотидов, которые отличаются не более чем на три нуклеотида от нуклеотидов 1354-1410 SEQ ID NO: 1,where the antisense strand contains at least 17 contiguous nucleotides that differ by no more than three nucleotides from nucleotides 1354-1410 SEQ ID NO: 1,
где все нуклеотиды смысловой цепи и все нуклеотиды антисмысловой цепи представляют собой модифицированные нуклеотиды,where all nucleotides of the sense strand and all nucleotides of the antisense strand are modified nucleotides,
где по меньшей мере один из модифицированных нуклеотидов выбран из группы, состоящей из 2'-O-метил-модифицированного нуклеотида, 2'-фтор-модифицированного нуклеотида и нуклеотида, содержащего 5'-тиофосфоротиоатную группу, иwherein at least one of the modified nucleotides is selected from the group consisting of a 2'-O-methyl-modified nucleotide, a 2'-fluoro-modified nucleotide, and a nucleotide containing a 5'-thiophosphorothioate group, and
где лиганд, содержащий N-ацетилгалактозамин (GalNAc), конъюгирован по меньшей мере с одной цепью средства дцРНК.wherein the N-acetylgalactosamine (GalNAc) containing ligand is conjugated to at least one strand of the dsRNA agent.
3. Средство двухцепочечной рибонуклеиновой кислоты (дцРНК) для ингибирования экспрессии сходного с ангиопоэтином 3 (ANGPTL3), содержащее смысловую цепь и антисмысловую цепь, образующие дуплексную область,3. A double-stranded ribonucleic acid (dsRNA) agent for inhibiting the expression of angiopoietin-like 3 (ANGPTL3), containing a sense strand and an antisense strand forming a duplex region,
где антисмысловая цепь содержит по меньшей мере 17 смежных нуклеотидов, которые отличаются не более чем на три нуклеотида от нуклеотидов 1354-1406 SEQ ID NO: 1,where the antisense strand contains at least 17 contiguous nucleotides that differ by no more than three nucleotides from nucleotides 1354-1406 SEQ ID NO: 1,
где все нуклеотиды смысловой цепи и все нуклеотиды антисмысловой цепи представляют собой модифицированные нуклеотиды,where all nucleotides of the sense strand and all nucleotides of the antisense strand are modified nucleotides,
где по меньшей мере один из модифицированных нуклеотидов выбран из группы, состоящей из 2'-O-метил-модифицированного нуклеотида, 2'-фтор-модифицированного нуклеотида и нуклеотида, содержащего 5'-тиофосфоротиоатную группу, иwherein at least one of the modified nucleotides is selected from the group consisting of a 2'-O-methyl-modified nucleotide, a 2'-fluoro-modified nucleotide, and a nucleotide containing a 5'-thiophosphorothioate group, and
где лиганд, содержащий N-ацетилгалактозамин (GalNAc), конъюгирован по меньшей мере с одной цепью средства дцРНК.wherein the N-acetylgalactosamine (GalNAc) containing ligand is conjugated to at least one strand of the dsRNA agent.
4. Средство дцРНК по п. 1, где каждая цепь независимо имеет длину 19-25 нуклеотидов.4. The dsRNA agent according to claim 1, where each chain independently has a length of 19-25 nucleotides.
5. Средство дцРНК по п. 1, где дуплексная область имеет длину 15-30 пар оснований.5. The dsRNA agent according to claim 1, where the duplex region has a length of 15-30 base pairs.
6. Средство дцРНК по п. 1, где дуплексная область имеет длину 18-21 пару оснований.6. The dsRNA agent according to claim 1, where the duplex region has a length of 18-21 base pairs.
7. Средство дцРНК по п. 6, где дуплексная область имеет длину 20 пар оснований.7. The dsRNA agent according to claim 6, wherein the duplex region is 20 base pairs in length.
8. Средство дцРНК по п. 1, отличающееся тем, что средство дцРНК содержит по меньшей мере одну тиофосфатную или метилфосфонатную межнуклеотидную связь.8. The dsRNA agent according to claim 1, characterized in that the dsRNA agent contains at least one thiophosphate or methylphosphonate internucleotide bond.
9. Средство дцРНК по п. 1, в котором N-ацетилгалактозамин (GalNAc) конъюгирован по меньшей мере с одной цепью средства дцРНК через линкер.9. The dsRNA agent according to claim 1, wherein N-acetylgalactosamine (GalNAc) is conjugated to at least one strand of the dsRNA agent through a linker.
10. Средство дцРНК по п. 9, в котором N-ацетилгалактозамин (GalNAc) конъюгирован через двухвалентный или трехвалентный разветвленный линкер.10. The dsRNA agent of claim 9, wherein N-acetylgalactosamine (GalNAc) is conjugated through a divalent or trivalent branched linker.
11. Средство дцРНК по п. 10, где линкер содержит C(O)NH.11. The dsRNA agent according to claim 10, where the linker contains C(O)NH.
12. Средство дцРНК по п. 11, где линкер содержит 1-24 атома.12. The dsRNA agent according to claim 11, where the linker contains 1-24 atoms.
13. Средство дцРНК по п. 11, где линкер содержит 6-24 атома.13. The dsRNA agent according to claim 11, where the linker contains 6-24 atoms.
14. Средство дцРНК по п. 1, где смысловая и антисмысловая цепи содержат нуклеотидные последовательности, выбранные из группы, состоящей из14. The dsRNA agent according to claim 1, where the sense and antisense chains contain nucleotide sequences selected from the group consisting of
5'-UACUCUAUAAAAUCAACCAAAA-3' (SEQ ID NO: 1182) и5'-UACUCUAUAAAAUCAACCAAAA-3' (SEQ ID NO: 1182) and
5'-UUUGGUUGAUUUUAUAGAGUAUA-3' (SEQ ID NO: 1363);5'-UUUGGUUGAUUUUAUAGAGUAUA-3' (SEQ ID NO: 1363);
5'-AUACUCUAUAAAAUCAACCAA-3' (SEQ ID NO: 1177) и5'-AUACUCUAUAAAAUCAACCAA-3' (SEQ ID NO: 1177) and
5'-UUGGUUGAUUUUAUAGAGUAUAA-3' (SEQ ID NO: 1358);5'-UUGGUUGAUUUUAUAGAGUAUAA-3' (SEQ ID NO: 1358);
5'-AUGGAAGGUUAUACUCUAUAA-3' (SEQ ID NO: 1166) и5'-AUGGAAGGUUAUACUCUAUAA-3' (SEQ ID NO: 1166) and
5'-UUAUAGAGUAUAACCUUCCAUUU-3' (SEQ ID NO: 1347);5'-UUAUAGAGUAUAACCUUCCAUUU-3' (SEQ ID NO: 1347);
5'-CAACCAAAAUGUUGAUCCA-3' (SEQ ID NO: 43) и5'-CAACCAAAAUGUUGAUCCA-3' (SEQ ID NO: 43) and
5'-UGGAUCAACAUUUUGGUUG-3' (SEQ ID NO: 105);5'-UGGAUCAACAUUUUGGUUG-3' (SEQ ID NO: 105);
5'-CAAAAUGUUGAUCCAUCCA-3' (SEQ ID NO: 28) и5'-CAAAAUGUUGAUCCAUCCA-3' (SEQ ID NO: 28) and
5'-UGGAUGGAUCAACAUUUUG-3' (SEQ ID NO: 90);5'-UGGAUGGAUCAACAUUUUG-3' (SEQ ID NO: 90);
5'-UGGAAGGUUAUACUCUAUAAA-3' (SEQ ID NO: 1172) и5'-UGGAAGGUUAUACUCUAUAAA-3' (SEQ ID NO: 1172) and
5'-UUUAUAGAGUAUAACCUUCCAUU-3' (SEQ ID NO: 1353);5'-UUUAUAGAGUAUAACCUUCCAUU-3' (SEQ ID NO: 1353);
5'-GUCUCAAAAUGGAAGGUUAUA-3' (SEQ ID NO: 1160) и5'-GUCUCAAAAUGGAAGGUUAUA-3' (SEQ ID NO: 1160) and
5'-UAUAACCUUCCAUUUUGAGACUU-3' (SEQ ID NO: 1341); и5'-UAUAACCUUCCAUUUUGAGACUU-3' (SEQ ID NO: 1341); And
5'-AUCCAUCCAACAGAUUCAGAA-3' (SEQ ID NO: 1144) и5'-AUCCAUCCAACAGAUUCAGAA-3' (SEQ ID NO: 1144) and
5'-UUCUGAAUCUGUUGGAUGGAUCA-3' (SEQ ID NO: 325).5'-UUCUGAAUCUGUUGGAUGGAUCA-3' (SEQ ID NO: 325).
15. Выделенная клетка, содержащая средство дцРНК по п. 11.15. An isolated cell containing the dsRNA agent according to claim 11.
16. Фармацевтическая композиция для ингибирования экспрессии гена ANGPTL3, содержащая средство дцРНК по п. 11.16. Pharmaceutical composition for inhibiting the expression of the ANGPTL3 gene, containing the dsRNA agent according to claim 11.
17. Фармацевтическая композиция по п. 16, в которой средство дцРНК находится в буферном растворе.17. Pharmaceutical composition according to claim 16, in which the dsRNA agent is in a buffer solution.
18. Способ ингибирования экспрессии ANGPTL3 в клетке in vitro, включающий:18. A method for inhibiting the expression of ANGPTL3 in a cell in vitro, including:
(а) приведение клетки в контакт со средством дцРНК по п. 1; и(a) bringing the cell into contact with the dsRNA agent according to claim 1; And
(b) поддержание клетки, полученной на стадии (а), в течение времени, достаточного для деградации транскрипта мРНК гена ANGPTL3, тем самым ингибируя экспрессию гена ANGPTL3 в клетке.(b) maintaining the cell obtained in step (a) for a time sufficient to degrade the ANGPTL3 gene mRNA transcript, thereby inhibiting the expression of the ANGPTL3 gene in the cell.
19. Способ ингибирования экспрессии ANGPTL3 у субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества средства дцРНК по п. 1, тем самым ингибируя экспрессию ANGPTL3 у субъекта.19. A method of inhibiting ANGPTL3 expression in a subject, comprising administering to the subject a therapeutically effective amount of the dsRNA agent of claim 1, thereby inhibiting ANGPTL3 expression in the subject.
20. Способ лечения субъекта, страдающего расстройством, при котором было бы полезно снижение экспрессии ANGPTL3, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества средства дцРНК по п. 1, тем самым излечивая субъекта.20. A method of treating a subject suffering from a disorder that would benefit from reduction of ANGPTL3 expression, comprising administering to the subject a therapeutically effective amount of the dsRNA agent of claim 1, thereby treating the subject.
21. Способ по п. 20, отличающийся тем, что нарушение представляет собой нарушение метаболизма липидов.21. The method according to claim 20, characterized in that the disorder is a disorder of lipid metabolism.
22. Способ по п. 20, где расстройство выбрано из группы, состоящей из гипертриглицеридемии, ожирения, гиперлипидемии, атеросклероза, диабета, сердечно-сосудистого заболевания и болезни коронарных артерий.22. The method of claim 20, wherein the disorder is selected from the group consisting of hypertriglyceridemia, obesity, hyperlipidemia, atherosclerosis, diabetes, cardiovascular disease and coronary artery disease.
23. Способ по п. 22, отличающийся тем, что нарушение представляет собой гиперлипидемию.23. The method according to claim 22, characterized in that the disorder is hyperlipidemia.
24. Способ по п. 20, дополнительно включающий введение субъекту дополнительного терапевтического средства.24. The method of claim 20, further comprising administering to the subject an additional therapeutic agent.
25. Способ по п. 24, где дополнительным терапевтическим средством является статин.25. The method according to claim 24, where the additional therapeutic agent is a statin.
26. Способ по п. 20, где средство дцРНК вводят в дозе от примерно 0,5 мг/кг до примерно 50 мг/кг.26. The method of claim 20, wherein the dsRNA agent is administered at a dose of from about 0.5 mg/kg to about 50 mg/kg.
27. Способ по п. 20, где введение средства дцРНК субъекту вызывает снижение уровня одного или нескольких липидов в сыворотке.27. The method of claim 20, wherein administering the dsRNA agent to a subject causes a decrease in the level of one or more lipids in the serum.
28. Способ по п. 20, где введение средства дцРНК субъекту вызывает уменьшение накопления белка ANGPTL3.28. The method of claim 20, wherein administration of the dsRNA agent to a subject causes a decrease in the accumulation of ANGPTL3 protein.