RU2021208C1 - Способ определения активности системы пероксидаза-эндогенная перекись водорода в крови на мазках - Google Patents
Способ определения активности системы пероксидаза-эндогенная перекись водорода в крови на мазках Download PDFInfo
- Publication number
- RU2021208C1 RU2021208C1 SU4755112A RU2021208C1 RU 2021208 C1 RU2021208 C1 RU 2021208C1 SU 4755112 A SU4755112 A SU 4755112A RU 2021208 C1 RU2021208 C1 RU 2021208C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- activity
- hydrogen peroxide
- determination
- blood smears
- formalin
- Prior art date
Links
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике. Целью является более полное выявление активности за счет лучшей сохранности гранулоцитов. Цель достигается тем, что фиксацию мазков в спирт-формалине осуществляют в течение 15 - 20 мин. При этом среда для инкубации дополнительно содержит трис-буфер и 0,1 н. соляную кислоту, что позволяет выявить систему пероксидаза-эндогенная перекись водорода в эозинофилах крови. Способ избирательно выявляет активность в этих клетках.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к способам анализа крови, и может быть использовано в лабораторной диагностике.
Целью изобретения является более полное выявление активности и возможности определения активности в гранулоцитах.
Способ осуществляют следующим образом. Мазки крови сушат, затем фиксируют в растворе спирта и формалина 9:1, инкубируют в среде, содержащей субстрат. Окрашивают ядерным красителем и исследуют под микроскопом. При этом фиксацию в спирт-формалине проводят в течение 15-20 мин, а инкубирование осуществляют в среде, содержащей 3 мг 3,3-диаминобензидина гидрохлорида 0,25-0,3 на 10 мл 0,05 М трис-буфера и 0,1 н.раствора соляной кислоты.
П р и м е р 1. Мазки крови высушивают на воздухе. Затем фиксируют в спирт - формалине (9: 1) в течение 15 мин. Промывают в дистиллированной воде. Инкубируют в течение 1 ч 15 мин при 37оС в среде, содержащей 3 мг 3,3-диаминобензидина тетрагидрохлорида на 10 мл 0,05 М трис-буфера при рН 7,7 и 0,1 н.раствор соляной кислоты. Промывают дистиллированной водой. Подкрашивают ядра 5%-ным водным раствором метилового зеленого 1 мин и определяют активность по Кеплоу.
Крупные клетки с ядром, состоящим из двух сегментов, содержат многочисленные крупные овальные пероксидазосомы, иногда лежащие на ядре. Фон, на котором лежат пероксидазосомы, бесцветный.
П р и м е р 2. Мазки крови обрабатывают также. Определяют активность системы в эозинофилах. при этом фиксацию в спирт-формалине (9:1) осуществляют в течение 20 мин. Активность по Кеплоу не меняется. Эозинофилы содержат много гранул.
П р и м е р 3. Высушенные на воздухе мазки крови фиксируют в спирт - формалине (9: 1) в течение 15 мин. Промывают в дистиллированной воде. Инкубируют в течение 1 ч 15 мин при 37оС в среде, содержащей 3 мг бензидина на 10 мл 0,05 М трис-буфера при рН 7,7 и 0,1 н.раствор соляной кислоты. Мазки промывают дистиллированной водой. Ядра докрашивают 5% -ным водным раствором метилового зеленого в течение 1 мин и определяют активность по Кеплоу. Эозинофилы содержат много гранул.
Способ позволяет определять активность системы пероксидаза - эндогенная перекись водорода в эозинофилах крови человека и животных. Кроме того, позволяет полностью сохранить структуру исследуемой клетки и обеспечивает полное выявление активности системы, исключает диффузность окраски.
Claims (1)
- СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ СИСТЕМЫ ПЕРОКСИДАЗА-ЭНДОГЕННАЯ ПЕРЕКИСЬ ВОДОРОДА В КРОВИ НА МАЗКАХ путем фиксации мазков в спирт-формалине, инкубирования в среде, содержащей 3,31-диаминобензидин гидрохлорид, и окрашивания ядерным красителем, отличающийся тем, что, с целью более полного выявления активности за счет лучшей сохранности гранулоцитов, фиксацию проводят в течение 15-20 мин, а среда для инкубации дополнительно содержит трис-буфер и 0,1 N соляную кислоту при следующем соотношения компонентов, мас.%:
3,31-диаминобензидин гидрохлорид 0,025 - 0,030
Трис-буфер 0,556 - 0,606
0,1 N соляная килота 36,5 - 37,5
Вода Остальное
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU4755112 RU2021208C1 (ru) | 1989-11-14 | 1989-11-14 | Способ определения активности системы пероксидаза-эндогенная перекись водорода в крови на мазках |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU4755112 RU2021208C1 (ru) | 1989-11-14 | 1989-11-14 | Способ определения активности системы пероксидаза-эндогенная перекись водорода в крови на мазках |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2021208C1 true RU2021208C1 (ru) | 1994-10-15 |
Family
ID=21477520
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU4755112 RU2021208C1 (ru) | 1989-11-14 | 1989-11-14 | Способ определения активности системы пероксидаза-эндогенная перекись водорода в крови на мазках |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2021208C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2662681C2 (ru) * | 2013-02-28 | 2018-07-26 | Нитирей Байосайенсиз Инк. | Набор даб-содержащего субстрата для окрашивания, производимого ферментом для мечения |
-
1989
- 1989-11-14 RU SU4755112 patent/RU2021208C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
В.В.Роговин и др. Цитохимический тест для определения активности системы перекись водорода пероксидаза-эндогенная перекись водорода в нейтрофилах крови человека. Известия АН СССР. Серия биологии 1976. N 3, с.453-455. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2662681C2 (ru) * | 2013-02-28 | 2018-07-26 | Нитирей Байосайенсиз Инк. | Набор даб-содержащего субстрата для окрашивания, производимого ферментом для мечения |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Erwin et al. | A rapid fluorometric method for the estimation of DNA in cultured cells | |
Smith et al. | Antioxidant properties of 2-imidazolones and 2-imidazolthiones | |
Okamura et al. | Sodium bicarbonate in seminal plasma stimulates the motility of mammalian spermatozoa through direct activation of adenylate cyclase. | |
SHERMAN et al. | The pigment (hemozoin) and proteins of the avian malaria parasite Plasmodium lophurae. | |
US8304243B2 (en) | Reagents and methods for classifying leukocytes | |
Tollrian et al. | Enrichment and purification of Chaoborus kairomone from water: further steps toward its chemical characterization | |
FI78926B (fi) | Bestaemning av esterasaktivitet i ett flytande prov. | |
BENDITT et al. | Histochemistry of connective tissue: I. The use of enzymes as specific histochemical reagents | |
Van Heyningen | Fluorescent derivatives of 3-hydroxy-L-kynurenine in the lens of man, the baboon and the grey squirrel. | |
RU2021208C1 (ru) | Способ определения активности системы пероксидаза-эндогенная перекись водорода в крови на мазках | |
Mustafa et al. | Uptake of adenosine by dispersed chich embryonic cardiac cells | |
Walker et al. | Giemsa staining for cysts and trophozoites of Pneumocystis carinii. | |
McLennan | The identification of one active component from brain extracts containing factor I | |
Robinson et al. | Estimation of protamine and insulin in protamine zinc insulin | |
Peterson | Cell size and rate of protein synthesis in ventral horn neurones | |
RU2022241C1 (ru) | Способ определения активности системы пероксидаза - эндогенная перекись водорода в лейкоцитах крови на мазках | |
Rorem et al. | A test paper for the detection of galactose and certain galactose-containing sugars | |
Weinbach et al. | Structural changes in mitochondria induced by uncoupling reagents. The response to snake-venom phospholipase A | |
Esbenshade et al. | Electrophoretic characterization of proteins in the plasma membrane of porcine spermatozoa | |
Price et al. | Interaction between paralytic shellfish poison and melanin obtained from butter clam (Saxidomus giganteus) and synthetic melanin | |
Young et al. | Isoelectric focusing comparison of human tissue esterases with those from normal and Bacillus Calmette-Guérin-treated mice | |
Beck | Comparison of two radioassay methods for cyanocobalamin in seafoods | |
RU2198403C2 (ru) | Способ выявления пероксидазы в иммунокомпетентных органах животных | |
RU2012331C1 (ru) | Раствор для консервирования энзимированных эритроцитов, используемых в изосерологических реакциях | |
Goldstein | IMMUNOCYTOCHEMICAL, HISTOFLUORESCENT AND ULTRASTRUCTURAL STUDIES OF MONOAMINERGIC NEURONS AND THEIR PROCESSES IN APLYSIA CALIFORNICA. |