RU2021130848A - СЛИТЫЙ ПОЛИПЕПТИД, ВКЛЮЧАЮЩИЙ Fc ОБЛАСТЬ ИММУНОГЛОБУЛИНА И GDF15 - Google Patents

Claims (51)

1. Слитый полипептид,

включающий GDF15 (Фактор роста/дифференцировки 15) или его функциональный вариант и

Fc область иммуноглобулина,

где

Fc область иммуноглобулина представляет собой одну цепь IgG1 Fc области или IgG4 Fc области и связана с N-концом GDF15 или его функционального варианта через гибкий пептидный линкер,

функциональный вариант GDF15 представляет собой вариант с делецией, в котором по меньшей мере одна из 14 аминокислот в положениях с 1 по 14 аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1 делетированы, и

гибкий пептидный линкер представлен (GGGGS)n (n имеет значение 1, 2, 3, 4 или 5).

2. Слитый полипептид по п. 1, где Fc область иммуноглобулина представляет собой Fc область человеческого IgG4.

3. Слитый полипептид по п. 2, где Fc область человеческого IgG4

(1) включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5 или

(2) дополнительно включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10 на N-конце аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 5.

4. Слитый полипептид по п. 3, где Fc область человеческого IgG4

(1) включает аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 6-9, или

(2) дополнительно включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11 или SEQ ID NO: 12 на N-конце аминокислотной последовательности, выбранной из SEQ ID NO: 6-9.

5. Слитый полипептид по п. 1, где функциональный вариант GDF15 включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2.

6. Слитый полипептид по любому из пп. 1-5, где GDF15 или его функциональный вариант, связанный с Fc областью иммуноглобулина в слитом полипептиде, имеет по меньшей мере 1,5-кратно увеличенный период полужизни in vivo по сравнению с GDF15 или его функциональным вариантом, который не связан с Fc областью иммуноглобулина.

7. Димер слитого полипептида, включающий 2 слитых полипептида по любому из пп. 1-5.

8. Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая слитый полипептид по любому из пп. 1-5.

9. Рекомбинантный вектор, включающий молекулу нуклеиновой кислоты по п. 8.

10. Рекомбинантная клетка, включающая рекомбинантный вектор по п. 9.

11. Способ получения слитого полипептида по п. 1, где слитый полипептид включает GDF15 или его функциональный вариант и Fc область иммуноглобулина, где способ включает культивирование рекомбинантной клетки по п. 10.

12. Способ повышения in vivo стабильности GDF15 или его функционального варианта, включающий связывание одной цепи IgG1 Fc области или IgG4 Fc области с N-концом GDF15 или его функционального варианта через гибкий пептидный линкер,

где функциональный вариант GDF15 представляет собой вариант с делецией, в котором по меньшей мере одна из 14 аминокислот от 1 до 14 аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1 делетированы, и гибкий пептидный линкер представлен (GGGGS)n ((SEQ ID NO: 13)n, где n имеет значение 1, 2, 3, 4 или 5).

13. Способ повышения in vivo стабильности GDF15 или его функционального варианта по п. 12, где Fc область иммуноглобулина представляет собой Fc область человеческого IgG4.

14. Способ повышения in vivo стабильности GDF15 или его функционального варианта по п. 13, где Fc область человеческого IgG4

(1) включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5 или

(2) дополнительно включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10 на N-конце аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 5.

15. Способ повышения in vivo стабильности GDF15 или его функционального варианта по п. 14, где Fc область человеческого IgG4

(1) включает аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 6-9, или

(2) дополнительно включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11 или SEQ ID NO: 12 на N-конце аминокислотной последовательности, выбранной из SEQ ID NO: 6-9.

16. Способ повышения in vivo стабильности GDF15 или его функционального варианта по п. 12, где функциональный вариант GDF15 включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2.

17. Способ повышения in vivo стабильности GDF15 или его функционального варианта по любому из пп. 12-16, где GDF15 или его функциональный вариант, связанный с Fc областью иммуноглобулина в слитом полипептиде, имеет по меньшей мере 1,5-кратно увеличенный период полужизни in vivo по сравнению с GDF15 или его функциональным вариантом, который не связан с Fc областью иммуноглобулина.

18. Композиция для снижения массы тела, включающая по меньшей мере одно, выбранное из группы, состоящей из:

слитого полипептида по любому из пп. 1-5,

димера слитого полипептида, включающего два из слитых полипептидов,

молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей слитый полипептид,

рекомбинантного вектора, включающего молекулу нуклеиновой кислоты, и

рекомбинантной клетки, включающей рекомбинантный вектор.

19. Композиция для контроля режима питания, включающая по меньшей мере одно, выбранное из группы, состоящей из:

слитого полипептида по любому из пп. 1-5,

димера слитого полипептида, включающего два из слитых полипептидов,

молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей слитый полипептид,

рекомбинантного вектора, включающего молекулу нуклеиновой кислоты, и

рекомбинантной клетки, включающей рекомбинантный вектор.

20. Фармацевтическая композиция для профилактики или лечения метаболического заболевания, включающая по меньшей мере одно, выбранное из группы, состоящей из:

слитого полипептида по любому из пп. 1-5,

димера слитого полипептида, включающего 2 из слитых полипептидов,

молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей слитый полипептид,

рекомбинантного вектора, включающего молекулу нуклеиновой кислоты, и

рекомбинантной клетки, включающей рекомбинантный вектор.

21. Фармацевтическая композиция по п. 20, где метаболическое заболевание представляет собой ожирение, диабет или неалкогольную жировую болезнь печени.