RU2021117249A - Модулирующие полинуклеотиды - Google Patents
Модулирующие полинуклеотиды Download PDFInfo
- Publication number
- RU2021117249A RU2021117249A RU2021117249A RU2021117249A RU2021117249A RU 2021117249 A RU2021117249 A RU 2021117249A RU 2021117249 A RU2021117249 A RU 2021117249A RU 2021117249 A RU2021117249 A RU 2021117249A RU 2021117249 A RU2021117249 A RU 2021117249A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- sequence
- stem
- paragraphs
- flanking region
- flanking
- Prior art date
Links
- 230000000051 modifying Effects 0.000 title claims 29
- 229920000023 polynucleotide Polymers 0.000 title claims 29
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 title claims 29
- 229920001850 Nucleic acid sequence Polymers 0.000 claims 19
- 230000003612 virological Effects 0.000 claims 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims 9
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims 9
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims 9
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims 8
- 210000004027 cells Anatomy 0.000 claims 6
- 210000003169 Central Nervous System Anatomy 0.000 claims 5
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims 4
- 210000000234 Capsid Anatomy 0.000 claims 3
- 229920002459 Intron Polymers 0.000 claims 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims 3
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 claims 3
- 230000002708 enhancing Effects 0.000 claims 3
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims 3
- 229920000160 (ribonucleotides)n+m Polymers 0.000 claims 2
- 241000432074 Adeno-associated virus Species 0.000 claims 2
- 210000000278 Spinal Cord Anatomy 0.000 claims 2
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 claims 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims 2
- 241000702423 Adeno-associated virus - 2 Species 0.000 claims 1
- 210000001130 Astrocytes Anatomy 0.000 claims 1
- 230000036912 Bioavailability Effects 0.000 claims 1
- 210000004705 Lumbosacral Region Anatomy 0.000 claims 1
- 108020004999 Messenger RNA Proteins 0.000 claims 1
- 108020004388 MicroRNAs Proteins 0.000 claims 1
- 210000002161 Motor Neurons Anatomy 0.000 claims 1
- 210000000944 Nerve Tissue Anatomy 0.000 claims 1
- 108020004412 RNA 3' Polyadenylation Signals Proteins 0.000 claims 1
- DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N Uridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N 0.000 claims 1
- 229940045145 Uridine Drugs 0.000 claims 1
- DRTQHJPVMGBUCF-UCVXFZOQSA-N Uridine Natural products O[C@H]1[C@H](O)[C@H](CO)O[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-UCVXFZOQSA-N 0.000 claims 1
- 230000035514 bioavailability Effects 0.000 claims 1
- 230000000295 complement Effects 0.000 claims 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims 1
- 238000007914 intraventricular administration Methods 0.000 claims 1
- 229920002106 messenger RNA Polymers 0.000 claims 1
- 229920001239 microRNA Polymers 0.000 claims 1
- 210000003867 nerve cell Anatomy 0.000 claims 1
- 210000002569 neurons Anatomy 0.000 claims 1
- 210000000056 organs Anatomy 0.000 claims 1
- 239000000546 pharmaceutic aid Substances 0.000 claims 1
- 108091007167 primary miRNA Proteins 0.000 claims 1
Claims (77)
1. Модулирующий полинуклеотид, содержащий
(а) стебель и петлю, которые образуют структуру стебель-петля, причем последовательность указанной структуры стебель-петля содержит в направлении от 5’ к 3’:
5’-ветвь стебля, причем указанная 5’-ветвь стебля содержит сопровождающую цепь и 5’-спейсерную последовательность, причем указанная 5’-спейсерная последовательность расположена в 5’-направлении от указанной сопровождающей цепи;
петлевой участок длиной от 4 до 20 нуклеотидов;
3’-ветвь стебля, причем указанная 3’-ветвь стебля содержит направляющую цепь и 3’-спейсерную последовательность, причем указанная 3’-спейсерная последовательность расположена в 3’-направлении от указанной направляющей цепи;
(b) первую фланкирующую область, расположенную в 5’-направлении от указанной сопровождающей цепи, причем указанная первая фланкирующая область содержит указанную 5’-спейсерную последовательность и 5’-фланкирующую последовательность; и
(c) вторую фланкирующую область, расположенную в 3’-направлении от указанной направляющей цепи, причем указанная вторая фланкирующая область содержит указанную 3’-спейсерную последовательность и 3’-фланкирующую последовательность, и причем указанная вторая фланкирующая область содержит нуклеотидную последовательность, которая имеет по меньшей мере 85% идентичности с любой последовательностью, выбранной из SEQ ID NO: 10-14 и 810.
2. Модулирующий полинуклеотид, содержащий
(а) стебель и петлю, которые образуют структуру стебель-петля, причем последовательность указанной структуры стебель-петля содержит в направлении от 5’ к 3’:
5’-ветвь стебля, причем указанная 5’-ветвь стебля содержащит направляющую цепь и 5’-спейсерную последовательность, причем указанная 5’- спейсерная последовательность расположена в 5’-направлении от указанной направляющей цепи;
петлевой участок длиной от 4 до 20 нуклеотидов;
3’-ветвь стебля, причем указанная 3’-ветвь стебля содержит сопровождающую цепь и 3’-спейсерную последовательность, причем указанная 3’-спейсерная последовательность расположена в 3’-направлении от указанной сопровождающей цепи;
(b) первую фланкирующую область, расположенную в 5’-направлении от указанной направляющей цепи, причем указанная первая фланкирующая область содержит указанную 5’-спейсерную последовательность и 5’-фланкирующую последовательность; и
(c) вторую фланкирующую область, расположенную в 3’-направлении от указанной сопровождающей цепи, причем указанная вторая фланкирующая область содержит указанную 3’-спейсерную последовательность и 3’-фланкирующую последовательность, и причем указанная вторая фланкирующая область содержит нуклеотидную последовательность, которая имеет по меньшей мере 85% идентичности с любой последовательностью, выбранной из SEQ ID NO: 10-14 и 810.
3. Модулирующий полинуклеотид, содержащий
(а) стебель и петлю, которые образуют структуру стебель-петля, причем последовательность указанной структуры стебель-петля содержит в направлении от 5’ к 3’:
5’-ветвь стебля, причем указанная 5’-ветвь стебля содержит сопровождающую цепь и 5’-спейсерную последовательность, расположенную в 5’-направлении от указанной сопровождающей цепи;
петлевой участок длиной от 4 до 20 нуклеотидов;
3’-ветвь стебля, причем указанная 3’-ветвь стебля содержит направляющую цепь и 3’-спейсерную последовательность, расположенную в 3’-направлении от указанной направляющей цепи;
(b) первую фланкирующую область, расположенную в 5’-направлении от указанной сопровождающей цепи, причем указанная первая фланкирующая область содержит указанную 5’-спейсерную последовательность и 5’-фланкирующую последовательность, и причем указанная первая фланкирующая область содержит нуклеотидную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с любой последовательностью, выбранной из SEQ ID NO: 1-4; и
(c) вторую фланкирующую область, расположенную в 3’-направлении от указанной направляющей цепи, причем указанная вторая фланкирующая область содержит указанную 3’-спейсерную последовательность и 3’-фланкирующую последовательность.
4. Модулирующий полинуклеотид, содержащий
(а) стебель и петлю, которые образуют структуру стебель-петля, причем последовательность указанной структуры стебель-петля содержит в направлении от 5’ к 3’:
5’-ветвь стебля, причем указанная 5’-ветвь стебля содержит направляющую цепь и 5’-спейсерную последовательность, расположенную в 5’-направлении от указанной направляющей цепи;
петлевой участок длиной от 4 до 20 нуклеотидов;
3’-ветвь стебля, причем указанная 3’-ветвь стебля содержит сопровождающую цепь и 3’-спейсерную последовательность, расположенную в 3’-направлении от указанной сопровождающей цепи;
(b) первую фланкирующую область, расположенную в 5’-направлении от указанной направляющей цепи, причем указанная первая фланкирующая область содержит указанную 5’-спейсерную последовательность и 5’-фланкирующую последовательность, и причем указанная первая фланкирующая область содержит нуклеотидную последовательность, которая имеет по меньшей мере 85% идентичности с любой последовательностью, выбранной из SEQ ID NO: 1-4; и
(c) вторую фланкирующую область, расположенную в 3’-направлении от указанной сопровождающей цепи, причем указанная вторая фланкирующая область содержит указанную 3’-спейсерную последовательность и 3’-фланкирующую последовательность.
5. Модулирующий полинуклеотид, содержащий
(а) стебель и петлю для образования структуры стебель-петля, причем последовательность указанной структуры стебель-петля содержит в направлении от 5’ к 3’:
мотив UG у основания 5’ стебля структуры стебель-петля или рядом с ним;
5’-ветвь стебля, содержащую сопровождающую цепь и необязательную 5’-спейсерную область, причем указанная 5’- спейсерная область, если она присутствует, расположена между указанным мотивом UG и указанной сопровождающей цепью;
петлевой участок, содержащий мотив UGUG на 5’-конце указанного петлевого участка;
3’-ветвь стебля, содержащую направляющую цепь и необязательно 3’-спейсерную область, причем уридин присутствует на 5’- конце направляющей цепи, и причем указанная 3’-спейсерная область, если она, имеет длину, достаточную для образования одного витка спирали;
(b) первую фланкирующую область, расположенную в 5’-направлении от указанной структуры стебель-петля; и
(c) вторую фланкирующую область, расположенную в 3’-направлении от указанной структуры стебель-петля, причем указанная вторая область содержит мотив CNNC; и
причем модулирующий полинуклеотид включает один или более из следующих компонентов:
первую фланкирующую область, содержащую нуклеотидную последовательность, которая по меньшей мере на 85% идентична любой последовательности, выбранной из SEQ ID NO: 1-4;
петлевой участок, содержащий нуклеотидную последовательность, которая по меньшей мере на 85% идентична любой последовательности, выбранной из SEQ ID NO: 5-9; и/или
вторую фланкирующую область, содержащую нуклеотидную последовательность, которая по меньшей мере на 85% идентична нуклеотидной последовательности любой из SEQ ID NO: 10-14 и 810.
6. Модулирующий полинуклеотид по любому из пп. 1-2 или 5, в котором первая фланкирующая последовательность включает нуклеотидную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с любой последовательностью, выбранной из SEQ ID NO: 1-4.
7. Модулирующий полинуклеотид по любому из пп. 3-6, в котором вторая фланкирующая последовательность включает нуклеотидную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с нуклеотидной последовательностью любой из SEQ ID NO: 10-14 и 810.
8. Модулирующий полинуклеотид по любому из пп. 1-7, причем модулирующий полинуклеотид представляет собой искусственную pri-микроРНК.
9. Модулирующий полинуклеотид по любому из пп. 1-8, в котором первая фланкирующая область содержит нуклеотидную последовательность любой из SEQ ID NO: 1-4 или нуклеотидную последовательность, идентичную ей по меньшей мере на 90%.
10. Модулирующий полинуклеотид по любому из пп. 1-9, в котором вторая фланкирующая область содержит нуклеотидную последовательность любой из SEQ ID NO: 10-14 или 810 или нуклеотидную последовательность, идентичную ей по меньшей мере на 90%.
11. Модулирующий полинуклеотид по любому из пп. 1-10, в котором петлевой участок содержит нуклеотидную последовательность, которая имеет по меньшей мере 85% идентичности с любой последовательностью, выбранной из SEQ ID NO: 5-9.
12. Модулирующий полинуклеотид по любому из пп. 1-11, в котором петлевой участок содержит нуклеотидную последовательность любой из SEQ ID NO: 5-9 или нуклеотидную последовательность, идентичную ей по меньшей мере на 90%.
13. Модулирующий полинуклеотид по любому из пп. 1-12, в котором направляющая цепь содержит затравочную последовательность микроРНК в положениях 2-7, 2-8 или 2-9.
14. Модулирующий полинуклеотид по любому из пп. 1-4, в котором направляющая цепь имеет длину 15-30, 19-20, 21-22 нуклеотидов.
15. Модулирующий полинуклеотид по любому из пп. 1-14, в котором направляющая цепь по меньшей мере на 70% комплементарна РНК-мишени.
16. Модулирующий полинуклеотид по п.15, где РНК-мишень представляет собой кодирующую мРНК млекопитающего в нервной клетке, ткани или органе.
17. Модулирующий полинуклеотид по любому из пп. 1-16, в котором сопровождающая цепь имеет длину от 15 до 30 нуклеотидов; в котором 5’-спейсерная последовательность имеет длину от 8 до 20 нуклеотидов; в котором направляющая цепь имеет длину от 15 до 30 нуклеотидов; и/или в котором 3’-спейсерная последовательность имеет длину от 8 до 20 нуклеотидов.
18. Вирусный геном аденоассоциированного вируса (AAV), содержащий нуклеиновую кислоту, кодирующую модулирующий полинуклеотид по любому из пп. 1-4.
19. Вирусный геном AAV по п.18, в котором нуклеиновая кислота, кодирующая модулирующий полинуклеотид, расположена между двумя инвертированными концевыми повторами (ITR).
20. Вирусный геном AAV по п.18 или 19, который дополнительно включает:
промотор, функционально связанный с последовательностью нуклеиновой кислоты, кодирующей модулирующий полинуклеотид;
энхансер;
интронную область; и/или
поли A сигнальную область.
21. Вирусный геном AAV по п.20, в котором:
промотор включает промотор CBA или CMV;
энхансер включает энхансер CMV; и/или
интрон включает интрон SV40.
22. Рекомбинантный аденоассоциированный вирус (rAAV), содержащий вирусный геном AAV по любому из пп. 18-21 и капсид AAV.
23. rAAV по п.22, в котором капсид AAV включает капсид AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV9.47, AAV9(hu14), AAV10, AAV11, AAV12, AAVrh8, AAVrh10 или AAV-DJ.
24. Вектор, содержащий модулирующий полинуклеотид по любому из пп. 1-4 или вирусный геном AAV по любому из пп. 18-21.
25. Клетка, содержащая модулирующий полинуклеотид по любому из пп. 1-4, вирусный геном AAV по любому из пп. 18-21, rAAV по п.22 или 23 или вектор по п.24.
26. Клетка по п.25, где клетка представляет собой клетку человека, клетку HEK293, клетку центральной нервной системы, двигательный нейрон или астроцит.
27. Фармацевтическая композиция, содержащая модулирующий полинуклеотид по любому из пп. 1-17, вирусный геном AAV по любому из пп. 18-21, rAAV по п.22 или 23 или вектор по п.24, и фармацевтически приемлемый эксципиент.
28. Композиция, содержащая модулирующий полинуклеотид по любому из пп. 1-17, вирусный геном AAV по любому из пп. 18-21, rAAV по п.22 или 23 или фармацевтическую композицию по п.27, для применения в лечение заболевания или расстройства центральной нервной системы у субъекта.
29. Применение композиции, содержащей модулирующий полинуклеотид по любому из пп. 1-17, вирусный геном AAV по любому из пп. 18-21, rAAV по п.22 или 23 или фармацевтическую композицию по п.27, в получении лекарственного средства для лечения заболевания или расстройства центральной нервной системы у субъекта.
30. Способ лечения заболевания или нарушения центральной нервной системы у субъекта, включающий введение субъекту композиции, содержащей модулирующий полинуклеотид по любому из пп. 1-17, вирусный геном AAV по любому из пп. 18-21, rAAV по п.22 или 23 или фармацевтическую композицию по п.27, с излечением, тем самым, заболевания или расстройства центральной нервной системы у субъекта.
31. Композиция для применения по п.28, применение по п.29 или способ по п.30, где композицию вводят:
в спинной мозг субъекта, необязательно где отдел спинного мозга включает поясничный отдел и/или шейный отдел;
внутривенно, внутрицистернальной инъекцией, внутрисосудисто и/или внутрижелудочково; и/или
по меньшей мере в 2, 3, 4 или 5 участков тела субъекта.
32. Композиция для применения по п.28 или 31, применение по п.29 или 31 или способ по пп. 30, 31, где композицию вводят в комбинации с дополнительным терапевтическим агентом, необязательно где дополнительный терапевтический агент улучшает биодоступность и/или распределение композиции.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US62/079,590 | 2014-11-14 | ||
US62/212,004 | 2015-08-31 | ||
US62/234,477 | 2015-09-29 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2020113262A Division RU2749882C2 (ru) | 2014-11-14 | 2015-11-13 | Модулирующие полинуклеотиды |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2021117249A true RU2021117249A (ru) | 2022-12-15 |
Family
ID=
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN106488984B (zh) | 一种治疗周围神经病变以及运动神经元疾病的方法 | |
RU2017115477A (ru) | Полинуклеотиды aadc для лечения болезни паркинсона | |
US9938541B2 (en) | AAV variant | |
RU2018116076A (ru) | Модифицированные гены атаксии фридрейха и векторы для генной терапии | |
JP2021106619A5 (ru) | ||
JP5704361B2 (ja) | 神経系細胞への遺伝子導入のためのアデノ随伴ウイルスビリオン | |
FI3684423T3 (fi) | Adenoassesioidun viruksen kapsidivariantteja ja niiden käyttömenetelmiä | |
JP2020522269A5 (ru) | ||
JP2013531471A5 (ru) | ||
RU2019111648A (ru) | Средство лечения болезни гентингтона на основе aav | |
JP2017529395A5 (ru) | ||
EP3952920A1 (en) | Hybrid promoters for muscle expression | |
JP2020510433A5 (ru) | ||
RU2021117249A (ru) | Модулирующие полинуклеотиды | |
WO2020127813A1 (en) | Expression cassettes for gene therapy vectors | |
FI3177313T3 (fi) | Telomeraasi-käänteistranskriptaasipohjaisia hoitoja sydäninfarktiin liittyvien tilojen hoitamiseksi | |
WO2023111106A1 (en) | Fukutin related protein gene transfer increase using modified itr sequences | |
JPWO2019153009A5 (ru) | ||
IL300294A (en) | Gene therapy using nucleic acid constructs containing methyl CPG-binding protein 2 (MECP2) promoter sequences | |
JP2020533313A5 (ru) | ||
JPWO2021014428A5 (ru) | ||
RU2023132088A (ru) | Получение улучшенной человеческой pah для лечения тяжелой pku с помощью генной заместительной терапии, направленной на печень | |
WO2023111102A1 (en) | Alpha-sarcoglycan gene transfer increase using modified itr sequences | |
Nijmeijer et al. | 582. Expression of Therapeutic Levels of Human Clotting Factor IX in Non Human Primates from an AAV5-Based Gene Therapeutic Vector Generated Using a Fully-Scalable GMP-Compliant Production System | |
JP2016512028A5 (ru) |