Claims (121)
1. Полипептид, содержащий Fc-область, где Fc-область содержит мутацию, где полипептид имеет 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 или все из следующих свойств:1. A polypeptide comprising an Fc region, where the Fc region contains a mutation, where the polypeptide has 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, or all of the following properties:
а) имеет увеличенную аффинность связывания с неонатальным Fc-рецептором (FcRn) при рН от 6,0 до 6,5 по сравнению с эталонным полипептидом;a) has an increased binding affinity for the neonatal Fc receptor (FcRn) at a pH of 6.0 to 6.5 compared to a reference polypeptide;
b) имеет более высокую аффинность связывания с FcRn при рН между 6,0 и 6,5, чем аффинность связывания при рН между 7,0 и 7,4;b) has a higher binding affinity for FcRn at a pH between 6.0 and 6.5 than a binding affinity for a pH between 7.0 and 7.4;
c) связывается с FcRn при pH от 6,0 до 6,5 с константой диссоциации (Kd), равной 300 нМ или ниже;c) binds to FcRn at a pH of 6.0 to 6.5 with a dissociation constant (K d ) of 300 nM or less;
d) связывается с FcRn при pH от 7,0 до 7,4 с Kd, равной 50 нМ или выше;d) binds to FcRn at a pH of 7.0 to 7.4 with a K d of 50 nM or higher;
е) имеет одинаковую, по существу одинаковую или увеличенную аффинность связывания с рецептором Fcγ по сравнению с эталонным полипептидом;e) has the same, substantially the same or increased binding affinity for the Fcγ receptor compared to the reference polypeptide;
f) имеет одинаковую или по существу одинаковую термостабильность по сравнению с эталонным полипептидом;f) has the same or substantially the same thermal stability as compared to the reference polypeptide;
g) имеет одинаковую, по существу одинаковую или увеличенную аффинность связывания с C1q по сравнению с эталонным полипептидом;g) has the same, substantially the same or increased binding affinity for C1q as compared to a reference polypeptide;
h) имеет одинаковую, по существу одинаковую или увеличенную аффинность связывания с TRIM21 по сравнению с эталонным полипептидом;h) has the same, substantially the same or increased binding affinity for TRIM21 compared to a reference polypeptide;
i) имеет эффекторную функцию, которая является одинаковой, по существу одинаковой или увеличенной по сравнению с эталонным полипептидом;i) has an effector function that is the same, substantially the same or increased as compared to a reference polypeptide;
j) имеет повышенный период полураспада in vivo по сравнению с эталонным полипептидом;j) has an increased in vivo half-life compared to a reference polypeptide;
k) имеет биологическую функцию in vitro, ex vivo или in vivo, которая является одинаковой, по существу одинаковой или увеличенной по сравнению с эталонным полипептидом;k) has an in vitro, ex vivo, or in vivo biological function that is the same, substantially the same, or increased compared to a reference polypeptide;
l) имеет показатели для развития, которые являются одинаковыми или по существу одинаковыми по сравнению с эталонным полипептидом;l) has indicators for development that are the same or substantially the same compared to the reference polypeptide;
m) имеет одинаковую, по существу одинаковую или увеличенную аффинность, специфичность связывания, или обе, для эпитопа по сравнению с эталонным полипептидом; илиm) has the same, substantially the same or increased affinity, binding specificity, or both, for an epitope compared to a reference polypeptide; or
n) имеет повышенное поглощение слизистой по сравнению с эталонным полипептидом, иn) has increased mucosal uptake compared to the reference polypeptide, and
где полипептид обладает, по меньшей мере, свойствами а), b) и одним, двумя, тремя, четырьмя или всеми из свойств е), f), g), h) или i).where the polypeptide has at least properties a), b) and one, two, three, four, or all of properties e), f), g), h) or i).
2. Полипептид по п. 1, который имеет, по меньшей мере, свойства а), b), с), d) и одно, два, три, четыре или все из свойств е), f), g), h) или i).2. The polypeptide according to claim 1, which has at least properties a), b), c), d) and one, two, three, four or all of properties e), f), g), h) or i).
3. Полипептид по п. 1 или 2, который имеет, по меньшей мере, свойства а), b), одно, два, три, четыре или все из свойств е), f), g), h) или i) и одно, два, три, четыре, пять, шесть или все из свойств c), d), j), k), l), m) или n).3. A polypeptide according to claim 1 or 2, which has at least properties a), b), one, two, three, four or all of properties e), f), g), h) or i), and one, two, three, four, five, six, or all of the properties c), d), j), k), l), m), or n).
4. Полипептид по любому из пп. 1-3, который имеет, по меньшей мере, в 1,5, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 30, 40 или 50 раз более высокую аффинность связывания для FcRn при рН 6,0 по сравнению с эталонным полипептидом, как определено анализом на основе системы Octet или клеточным анализом.4. The polypeptide according to any one of claims. 1-3, which has at least 1.5, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 30, 40 or 50 times the binding affinity for FcRn at pH 6.0 compared to a reference polypeptide as determined by Octet assay or cellular assay.
5. Полипептид по любому из пп. 1-4, который имеет, по меньшей мере, в 1,5, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20 или 50 раз более высокую аффинность связывания для FcRn при рН 6,0, чем при рН 7,4, как определено анализом на основе системы Octet или клеточным анализом.5. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-4, which has at least 1.5, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, or 50 times the binding affinity for FcRn at pH 6, 0 than at pH 7.4 as determined by Octet assay or cellular assay.
6. Полипептид по любому из пп. 1-5, который связывается с FcRn при рН 6,0 с константой диссоциации (Kd) , равной 250 нМ или ниже, 200 нМ или ниже, 150 нМ или ниже, 100 нМ или ниже, 50 нМ или ниже, 25 нМ или ниже, 10 нМ или ниже, 5 нМ или ниже, 2 нМ или ниже, 1 нМ или ниже, 0,5 нМ или ниже, 0,2 нМ или ниже, 0,1 нМ или ниже, 0,05 нМ или ниже, 0,02 нМ или ниже, 0,01 нМ или ниже, от 25 нМ до 0,1 нМ, от 20 нМ до 0,5 нМ, от 15 нМ до 1 нМ, от 10 нМ до 5 нМ или от 20 нМ до 10 нМ, как определено анализом на основе системы Octet или клеточным анализом.6. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-5, which binds to FcRn at pH 6.0 with a dissociation constant (K d ) of 250 nM or less, 200 nM or less, 150 nM or less, 100 nM or less, 50 nM or less, 25 nM or below, 10 nM or below, 5 nM or below, 2 nM or below, 1 nM or below, 0.5 nM or below, 0.2 nM or below, 0.1 nM or below, 0.05 nM or below, 0.02 nM or less, 0.01 nM or less, 25 nM to 0.1 nM, 20 nM to 0.5 nM, 15 nM to 1 nM, 10 nM to 5 nM, or 20 nM to 10 nM as determined by Octet assay or cellular assay.
7. Полипептид по любому из пп. 1-6, который связывается с FcRn при pH 7,4 с Kd, равной 60 нМ или выше, 80 нМ или выше, 100 нМ или выше, 150 нМ или выше, 200 нМ или выше, 500 нМ или выше, от 50 нМ до 500 нМ или от 100 нМ до 250 нМ, как определено анализом на основе системы Octet или клеточным анализом.7. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-6, which binds to FcRn at pH 7.4 with a K d of 60 nM or higher, 80 nM or higher, 100 nM or higher, 150 nM or higher, 200 nM or higher, 500 nM or higher, from 50 nM to 500 nM, or 100 nM to 250 nM, as determined by Octet assay or cell assay.
8. Полипептид по любому из пп. 1-7, который имеет аффинность связывания для одного, двух или всех FcγRI, FcγRIIa/b или FcγRIII, которая уменьшается не более чем на 10%, 20%, 30%, 40%, или на 50%, или аффинность связывания для одного, двух или всех FcγRI, FcγRIIa/b или FcγRIII, которая увеличивается, по меньшей мере, в 1,5, 2, 3, 4 или 5 раз по сравнению с эталонным полипептидом, как определено анализом на основе системы Octet или клеточным анализом.8. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-7, which has a binding affinity for one, two, or all FcγRI, FcγRIIa / b, or FcγRIII that is reduced by no more than 10%, 20%, 30%, 40%, or 50%, or a binding affinity for one , two or all FcγRI, FcγRIIa / b, or FcγRIII that is increased at least 1.5, 2, 3, 4, or 5 times the reference polypeptide as determined by Octet assay or cellular assay.
9. Полипептид по любому из пп. 1-8, который имеет температуру плавления, которая повышается или снижается не более чем на 1°С, 2°С, 3°С, 4°С, 5°С, 6°С, 7°С, 8°С, 9°С или 10°С по сравнению с эталонным полипептидом, как определено анализом с красителем Sypro Orange.9. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-8, which has a melting point that rises or falls by no more than 1 ° C, 2 ° C, 3 ° C, 4 ° C, 5 ° C, 6 ° C, 7 ° C, 8 ° C, 9 ° C or 10 ° C compared to the reference polypeptide, as determined by the analysis with the Sypro Orange dye.
10. Полипептид по любому из пп. 1-9, который имеет аффинность связывания для C1q, которая уменьшается не более чем на 10%, 20%, 30%, 40% или 50%, или аффинность связывания для C1q, которая увеличивается, по меньшей мере, в 1,5, 2, 3, 4 или 5 раз по сравнению с эталонным полипептидом, как определено с использованием ELISA.10. The polypeptide according to any one of claims. 1-9, which has a binding affinity for C1q that decreases by no more than 10%, 20%, 30%, 40% or 50%, or a binding affinity for C1q that increases by at least 1.5, 2, 3, 4, or 5 times the reference polypeptide as determined using ELISA.
11. Полипептид по любому из пп. 1-10, который имеет аффинность связывания для TRIM21, которая уменьшается не более чем на 10%, 20%, 30%, 40% или 50%, или аффинность связывания для TRIM21, которая увеличивается, по меньшей мере, в 1,5, 2, 3, 4 или 5 раз по сравнению с эталонным полипептидом, как определено с использованием ELISA.11. The polypeptide according to any one of claims. 1-10, which has a binding affinity for TRIM21 that decreases by no more than 10%, 20%, 30%, 40% or 50%, or a binding affinity for TRIM21 that increases by at least 1.5, 2, 3, 4, or 5 times the reference polypeptide as determined using ELISA.
12. Полипептид по любому из пп. 1-11, который имеет уменьшение одного, двух, трех или всех из комплемент-зависимой цитотоксичности (CDC), антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности (ADCC), антителозависимого клеточно-опосредованного фагоцитоза (ADCP) или антителозависимой внутриклеточной нейтрализации (ADIN) не более чем на 10%, 20%, 30%, 40% или 50%, или увеличение одного, двух, трех или всех из комплемент-зависимой цитотоксичности (CDC), антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности (ADCC), антителозависимого клеточно-опосредованного фагоцитоза (ADCP) или антителозависимой внутриклеточной нейтрализации (ADIN), по меньшей мере, в 1,5, 2, 3, 4 или 5 раз по сравнению с эталонным полипептидом.12. The polypeptide according to any one of claims. 1-11, which has a reduction of one, two, three, or all of complement-dependent cytotoxicity (CDC), antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC), antibody-dependent cell-mediated phagocytosis (ADCP), or antibody-dependent intracellular neutralization (ADIN) no more than 10%, 20%, 30%, 40% or 50%, or an increase in one, two, three, or all of complement-dependent cytotoxicity (CDC), antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC), antibody-dependent cell-mediated phagocytosis (ADCP ) or antibody-dependent intracellular neutralization (ADIN), at least 1.5, 2, 3, 4 or 5 times compared to the reference polypeptide.
13. Полипептид по любому из пп. 1-12, который имеет период полураспада in vivo, который увеличивается, по меньшей мере, в 1,5, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 раз по сравнению с эталонным полипептидом, как определено на животной модели.13. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-12, which has an in vivo half-life that is increased by at least 1.5, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, or 10-fold over the reference polypeptide as defined in animal model.
14. Полипептид по любому из пп. 1-13, который имеет биологическую функцию in vitro, ex vivo или in vivo, которая уменьшается не более чем на 10%, 20%, 30%, 40% или 50%, или биологическую функцию in vitro, ex vivo или in vivo, которая увеличивается, по меньшей мере, в 1,5, 2, 3, 4 или 5 раз по сравнению с эталонным полипептидом.14. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-13 that has an in vitro, ex vivo or in vivo biological function that is reduced by no more than 10%, 20%, 30%, 40% or 50%, or an in vitro, ex vivo or in vivo biological function, which is increased by at least 1.5, 2, 3, 4 or 5 times compared to the reference polypeptide.
15. Полипептид по любому из пп. 1-14, который имеет изменение одного, двух, трех или всех показателей из стабильности, растворимости, агрегации или экспрессии не более чем на 10%, 20%, 30%, 40% или 50% по сравнению с эталонным полипептидом.15. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-14, which has a change in one, two, three or all of the parameters of stability, solubility, aggregation or expression of no more than 10%, 20%, 30%, 40% or 50% compared to the reference polypeptide.
16. Полипептид по любому из пп. 1-15, который имеет аффинность, специфичность связывания, или обе, которая уменьшается не более чем на 10%, 20%, 30%, 40% или 50%, или аффинность, специфичность связывания, или обе, которая увеличивается, по меньшей мере, в 1,5, 2, 3, 4 или 5 раз по сравнению с эталонным полипептидом.16. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-15, which has an affinity, binding specificity, or both, which decreases by no more than 10%, 20%, 30%, 40% or 50%, or an affinity, binding specificity, or both, which increases at least , 1.5, 2, 3, 4 or 5 times the reference polypeptide.
17. Полипептид по любому из пп. 1-16, который имеет повышенное поглощение слизистой, по меньшей мере, в 1,5, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 раз по сравнению с эталонным полипептидом, как определено анализом трансцитоза.17. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-16, which has an increased mucosal uptake of at least 1.5, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, or 10-fold compared to a reference polypeptide as determined by a transcytosis assay.
18. Полипептид по любому из пп. 1-4 или 8-17, где эталонный полипептид содержит Fc-область дикого типа, Fc-область, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1 или аминокислотную последовательность, по меньшей мере, примерно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей или которая отличается не более чем на 1, 2, 5, 10 или 15 аминокислотных остатков.18. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-4 or 8-17, wherein the reference polypeptide comprises a wild-type Fc region, an Fc region containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 or the amino acid sequence of at least about 85%, 90%, 95%, 99 % or more identical to it or which differs by no more than 1, 2, 5, 10 or 15 amino acid residues.
19. Полипептид по любому из пп. 1-18, где мутация находится в остатке в домене СН2.19. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-18, where the mutation is in a residue in the CH2 domain.
20. Полипептид по любому из пп. 1-18, где мутация находится в остатке в домене СН3.20. The polypeptide according to any one of claims. 1-18, where the mutation is in a residue in the CH3 domain.
21. Полипептид по любому из пп. 1-20, включающий, по меньшей мере, одну мутацию в остатке в домене СН2 и, по меньшей мере, одну мутацию в остатке в домене СН3.21. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-20, comprising at least one mutation in a residue in the CH2 domain and at least one mutation in a residue in the CH3 domain.
22. Полипептид по любому из пп. 1-21, дополнительно включающий мутацию в остатке в области, отличной от домена СН2 и/или домена СН3.22. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-21, further comprising a mutation at a residue in a region other than the CH2 domain and / or the CH3 domain.
23. Полипептид по любому из пп. 1-22, где мутация не изменяет или существенно не изменяет конформацию линкерной области между доменом СН2 и доменом СН3.23. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-22, where the mutation does not alter or significantly alter the conformation of the linker region between the CH2 domain and the CH3 domain.
24. Полипептид по любому из пп. 1-23, где мутация не вносит 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более последовательных гидрофобных или ароматических остатков в поверхностной области.24. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-23, where the mutation does not introduce 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 or more consecutive hydrophobic or aromatic residues in the surface region.
25. Полипептид по любому из пп. 1-24, который включает молекулу антитела.25. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-24, which includes an antibody molecule.
26. Полипептид по любому из пп. 1-25, который включает IgG.26. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-25, which includes IgG.
27. Полипептид по любому из пп. 1-26, который включает IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4.27. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-26, which includes IgG1, IgG2, IgG3, or IgG4.
28. Полипептид по любому из пп. 1-27, который включает вариабельную область тяжелой цепи иммуноглобулина, вариабельную область легкой цепи иммуноглобулина или обе.28. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-27, which includes an immunoglobulin heavy chain variable region, an immunoglobulin light chain variable region, or both.
29. Полипептид по любому из пп. 1-28, который содержит тетрамер из двух вариабельных областей тяжелой цепи иммуноглобулина и двух вариабельных областей легкой цепи иммуноглобулина.29. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-28, which contains a tetramer of two immunoglobulin heavy chain variable regions and two immunoglobulin light chain variable regions.
30. Полипептид по любому из пп. 1-29, который включает полноразмерную молекулу антитела.30. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-29, which includes a full-length antibody molecule.
31. Полипептид по любому из пп. 1-30, который включает фрагмент молекулы антитела.31. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-30, which includes a fragment of an antibody molecule.
32. Полипептид по любому из пп. 1-31, который включает молекулу химерного антитела или молекулу мышиного антитела.32. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-31, which includes a chimeric antibody molecule or a murine antibody molecule.
33. Полипептид по любому из пп. 1-32, который включает молекулу человеческого антитела или молекулу гуманизированного антитела.33. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-32, which includes a human antibody molecule or a humanized antibody molecule.
34. Полипептид по любому из пп. 1-24, который включает слитый белок.34. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-24, which includes the fusion protein.
35. Полипептид по любому из пп. 1-34, содержащий 1, 2, 3, 4 или все из следующих:35. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-34 containing 1, 2, 3, 4, or all of the following:
(i) мутации в остатке в поверхностной области, которая взаимодействует с FcRn;(i) mutations in a residue in the surface region that interacts with FcRn;
(ii) мутации в остатке, который является периферическим остатком вдоль поверхности раздела Fc-FcRn;(ii) mutation in a residue that is a peripheral residue along the Fc-FcRn interface;
(iii) мутации в остатке, который является неконтактным остатком в связывании Fc-FcRn;(iii) mutation in a residue that is a non-contact residue in Fc-FcRn binding;
(iv) мутации в остатке, который представляет контактный остаток спирали, которая усиливает конформационную динамику спирали, включающей 1, 2, 3, 4, 5 или все из P247, K248 , D249, T250, L251 или M252; или(iv) mutations in a residue that represents a helix contact residue that enhances the conformational dynamics of a helix comprising 1, 2, 3, 4, 5 or all of P247, K248, D249, T250, L251, or M252; or
(v) мутации, которая модулирует pK гистидина и/или представляет введение гистидина вдоль поверхности раздела Fc-FcRn.(v) a mutation that modulates the pK of histidine and / or represents the introduction of histidine along the Fc-FcRn interface.
36. Полипептид по любому из пп. 1-35, содержащий мутацию в остатке в поверхностной области, которая взаимодействует с FcRn.36. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-35 containing a mutation in the residue in the surface region that interacts with FcRn.
37. Полипептид по п.36, где мутация находится в остатке, выбранном из: L251, I253, R255, P257, H285, N286, K288, T307, V308, L309, Q311, L314, H310, H433, N434, H435, или Y436.37. The polypeptide of claim 36, wherein the mutation is in a residue selected from: L251, I253, R255, P257, H285, N286, K288, T307, V308, L309, Q311, L314, H310, H433, N434, H435, or Y436.
38. Полипептид по любому из пп. 1-37, включающий множество мутаций в 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16 или всех остатках, выбранных из L251, I253, R255, P257, H285, N286, K288, T307, V308, L309, Q311, L314, H310, H433, N434, H435 или Y436.38. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-37, including many mutations in 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16 or all residues selected from L251, I253, R255, P257 , H285, N286, K288, T307, V308, L309, Q311, L314, H310, H433, N434, H435 or Y436.
39. Полипептид по любому из пп. 1-38, содержащий мутацию в остатке, который является периферическим остатком вдоль поверхности раздела Fc-FcRn.39. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-38 containing the mutation in a residue that is a peripheral residue along the Fc-FcRn interface.
40. Полипептид по п.39, где мутация находится в остатке, выбранном из М252, Т256, Т307, L309, Q311, Н433, N434, Y436, N286 или К288.40. The polypeptide of claim 39, wherein the mutation is in a residue selected from M252, T256, T307, L309, Q311, H433, N434, Y436, N286, or K288.
41. Полипептид по любому из пп. 1-40, содержащий множество мутаций в 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или всех остатках, выбранных из M252, T256, T307, L309, Q311, H433, N434, Y436, N286 или K288.41. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-40 containing many mutations at 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, or all residues selected from M252, T256, T307, L309, Q311, H433, N434, Y436, N286, or K288.
42. Полипептид по любому из пп. 1-41, содержащий мутацию, которая находится в остатке, который является неконтактным остатком в связывании Fc-FcRn.42. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-41, containing a mutation that resides in a residue that is a non-contact residue in Fc-FcRn binding.
43. Полипептид по п.42, где мутация находится в остатке, выбранном из A287, V308, N315, L314, L432, H429, E430 или A431.43. The polypeptide of claim 42, wherein the mutation is in a residue selected from A287, V308, N315, L314, L432, H429, E430, or A431.
44. Полипептид по любому из пп. 1-43, содержащий множество мутаций в 2, 3, 4, 5, 6, 7 или всех остатках, выбранных из A287, V308, N315, L314, L432, H429, E430 или А431.44. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-43, containing many mutations at 2, 3, 4, 5, 6, 7, or all residues selected from A287, V308, N315, L314, L432, H429, E430, or A431.
45. Полипептид по любому из пп. 1-44, содержащий мутацию в остатке, который находится в контактном остатке спирали, которая усиливает конформационную динамику спирали, включающей 1, 2, 3, 4, 5 или все из P247, K248, D249, T250, L251 или M252.45. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-44, containing a mutation in a residue that is in the contact residue of the helix that enhances the conformational dynamics of a helix comprising 1, 2, 3, 4, 5, or all of P247, K248, D249, T250, L251, or M252.
46. Полипептид по п.45, где мутация находится в остатке, выбранном из P244, P245, T250, L251, P247, E380, M428, A378, D376, P257, V308, A287, L306 или H427.46. The polypeptide of claim 45, wherein the mutation is in a residue selected from P244, P245, T250, L251, P247, E380, M428, A378, D376, P257, V308, A287, L306, or H427.
47. Полипептид по любому из пп. 1-46, содержащий множество мутаций в 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 или всех остатках, выбранных из P244, P245, T250, L251, P247, E380, M428, A378, D376, P257, V308, A287, L306 или H427.47. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-46, containing many mutations in 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 or all residues selected from P244, P245, T250, L251, P247, E380, M428 , A378, D376, P257, V308, A287, L306 or H427.
48. Полипептид по любому из пп. 1-47, содержащий мутацию, которая представляет введение гистидина вдоль поверхности раздела Fc-FcRn.48. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-47, containing a mutation that represents the introduction of histidine along the Fc-FcRn interface.
49. Полипептид по любому из пп. 1-48, содержащий 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более мутаций, или одну или более комбинаций мутаций, приведенных в таблице 1.49. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-48 containing 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 or more mutations, or one or more combinations of mutations shown in Table 1.
50. Полипептид по любому из пп. 1-49, где мутация является отличной от M252Y, S254T, T256E, L309N, T250Q, M428L, N434S, N434A, T307A, E380A, N434A, M252Y, S254T, T256E или их комбинации.50. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-49, where the mutation is other than M252Y, S254T, T256E, L309N, T250Q, M428L, N434S, N434A, T307A, E380A, N434A, M252Y, S254T, T256E, or a combination thereof.
51. Полипептид по любому из пп. 1-50, где мутация находится в остатке, отличном от остатка M252Y, S254T, T256E, L309N, T250, M428, N434, N434, T307, E380, N434, M252, S254, T256 или их комбинации.51. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-50, where the mutation is in a residue other than the residue M252Y, S254T, T256E, L309N, T250, M428, N434, N434, T307, E380, N434, M252, S254, T256, or a combination thereof.
52. Полипептид по любому из пп. 1-51, который не имеет 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или всех из следующей мутации или мутаций:52. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-51, which does not have 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, or all of the following mutation or mutations:
(i) M252Y, S254T, и T256E;(i) M252Y, S254T, and T256E;
(ii) L309N; (iii) T250Q и M428L;(ii) L309N; (iii) T250Q and M428L;
(iv) M428L и N434A;(iv) M428L and N434A;
(v) N434A;(v) N434A;
(vi) T307A, E380A и N434A;(vi) T307A, E380A and N434A;
(vii) M252W;(vii) M252W;
(viii) V308F;(viii) V308F;
(ix) V308F и N434Y; или(ix) V308F and N434Y; or
(х) H435A.(x) H435A.
53. Полипептид по любому из пп. 1-52, содержащий первую мутацию, выбранную из M252Y, S254T, T256E, L309N, T250Q, M428L, N434S, N434A, T307A, E380A, N434A, M252Y, S254T или T256E и вторую мутацию, выбранную из мутации, приведенной в таблице 1, отличной от M252Y, S254T, T256E, L309N, T250Q, M428L, N434S, N434A, T307A, E380A, N434A, M252Y, S254T и T256E.53. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-52, containing the first mutation selected from M252Y, S254T, T256E, L309N, T250Q, M428L, N434S, N434A, T307A, E380A, N434A, M252Y, S254T or T256E and the second mutation selected from the table in the 1 mutation given other than M252Y, S254T, T256E, L309N, T250Q, M428L, N434S, N434A, T307A, E380A, N434A, M252Y, S254T, and T256E.
54. Полипептид по любому из пп. 1-53, дополнительно содержащий мутацию в Fc-области, которая усиливает эффекторную функцию.54. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-53, further comprising a mutation in the Fc region that enhances effector function.
55. Полипептид по п.54, где мутация находится в остатке, выбранном из S239, A330, I332, F243, G236 или их комбинации.55. The polypeptide of claim 54, wherein the mutation is in a residue selected from S239, A330, I332, F243, G236, or a combination thereof.
56. Полипептид по любому из пп. 1-55, дополнительно содержащий мутацию в Fc-области, которая снижает эффекторную функцию.56. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-55, further comprising a mutation in the Fc region that reduces effector function.
57. Полипептид по п.56, где мутация находится в остатке, выбранном из K322, L234, L235, P331, N297 или их комбинации.57. The polypeptide of claim 56, wherein the mutation is in a residue selected from K322, L234, L235, P331, N297, or a combination thereof.
58. Полипептид по любому из пп. 1-57, где Fc-область содержит:58. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-57, where the Fc region contains:
(a) 1, 2, 3, 4, 5 или все комбинации мутаций, выбранных из: T256D/Q311V/A378V, H285N/T307Q/N315D, H285D/T307Q/A378V, T307Q/Q311V/A378V, T256D/N286D/T307R/Q311V/A378V или T256D/T307R/Q311V;(a) 1, 2, 3, 4, 5 or all combinations of mutations selected from: T256D / Q311V / A378V, H285N / T307Q / N315D, H285D / T307Q / A378V, T307Q / Q311V / A378V, T256D / N286D / T307R / Q311V / A378V or T256D / T307R / Q311V;
(b) мутации или комбинации мутаций, способные нарушать эффекторную функцию Fc, или(b) mutations or combinations of mutations capable of impairing Fc effector function, or
(c) обе (а) и (b).(c) both (a) and (b).
59. Полипептид по любому из пп. 1-58, который содержит мутации в остатках, выбранных из:59. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-58, which contains mutations in residues selected from:
(i) T256, Q311 и A378;(i) T256, Q311 and A378;
(ii) H285, T307 и N315;(ii) H285, T307 and N315;
(iii) H285, T307 и A378;(iii) H285, T307 and A378;
(iv) T307, Q311 и A378;(iv) T307, Q311 and A378;
(v) T256, N286, T307, Q311 и A378; или(v) T256, N286, T307, Q311 and A378; or
(vi) T256, H285, T307, Q311 и A378.(vi) T256, H285, T307, Q311 and A378.
60. Полипептид по любому из пп. 1-59, который содержит мутации, выбранные из:60. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-59, which contains mutations selected from:
(i) T256D, Q311V и A378V;(i) T256D, Q311V and A378V;
(ii) H285N, T307Q и N315D;(ii) H285N, T307Q and N315D;
(iii) H285D, T307Q и A378V;(iii) H285D, T307Q and A378V;
(iv) T307Q, Q311V и A378V;(iv) T307Q, Q311V and A378V;
(v) T256D, N286D, T307R, Q311V и A378V; или(v) T256D, N286D, T307R, Q311V and A378V; or
(vi) T256D, H285D, T307R, Q311V и A378V.(vi) T256D, H285D, T307R, Q311V and A378V.
61. Полипептид по любому из пп. 1-60, дополнительно содержащий мутацию в области, отличной от Fc-области.61. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-60, further comprising a mutation in a region other than the Fc region.
62. Полипептид по любому из пп. 1-61, содержащий множество мутаций, где, по меньшей мере, одна мутация является компенсаторной или полезной мутацией.62. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-61, containing a plurality of mutations, where at least one mutation is a compensatory or beneficial mutation.
63. Полипептид по любому из пп. 1-62, который представляет выделенный полипептид.63. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-62, which represents an isolated polypeptide.
64. Полипептид по любому из пп. 1-62, который представляет синтетический полипептид.64. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-62, which is a synthetic polypeptide.
65. Композиция, содержащая полипептид по любому из пп. 1-64.65. A composition containing a polypeptide according to any one of claims. 1-64.
66. Композиция по п.65, дополнительно включающая фармацевтически приемлемый носитель.66. The composition of claim 65, further comprising a pharmaceutically acceptable carrier.
67. Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид по любому из пп. 1-64.67. A nucleic acid molecule encoding a polypeptide according to any one of claims. 1-64.
68. Вектор, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты по п.67.68. A vector containing a nucleic acid molecule according to claim 67.
69. Клетка, содержащая молекулу нуклеиновой кислоты по п.67 или вектор по п.68.69. A cell containing a nucleic acid molecule according to claim 67 or a vector according to claim 68.
70. Набор, содержащий полипептид по любому из пп. 1-64 и инструкции по применению полипептида.70. A kit containing a polypeptide according to any one of paragraphs. 1-64 and instructions for use of the polypeptide.
71. Контейнер, содержащий полипептид по любому из пп. 1-64.71. A container containing a polypeptide according to any one of claims. 1-64.
72. Способ получения полипептида, включающий культивирование клетки по п.69 в условиях, позволяющих продуцировать молекулу антитела, тем самым обеспечивая продукцию полипептид.72. A method for producing a polypeptide, comprising culturing a cell according to claim 69 under conditions that allow production of an antibody molecule, thereby allowing production of the polypeptide.
73. Способ по п.72, дополнительно включающий выделение или очистку полипептида.73. The method of claim 72, further comprising isolating or purifying the polypeptide.
74. Способ лечения расстройства, где способ включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества полипептида по любому из пп. 1-64 или композиции по пп.65 или 66, тем самым обеспечивая лечение расстройства.74. A method of treating a disorder, wherein the method comprises administering to a subject in need thereof an effective amount of a polypeptide according to any one of claims. 1-64 or the composition of claim 65 or 66, thereby providing treatment for the disorder.
75. Полипептид по любому из пп. 1-64 или композиция по пп.65 или 66 для применения в лечении расстройства у субъекта.75. The polypeptide according to any one of paragraphs. 1-64, or a composition according to claims 65 or 66 for use in treating a disorder in a subject.
76. Применение полипептида по любому из пп. 1-64 или композиции по пп.65 или 66 в производстве лекарственного средства для лечения расстройства у субъекта.76. The use of a polypeptide according to any one of claims. 1-64, or a composition according to claim 65 or 66 in the manufacture of a medicament for treating a disorder in a subject.
77. Способ детектирования молекулы, включающий контактирование клетки или образца от субъекта с полипептидом по любому из пп. 1-64, тем самым обеспечивая детектирование молекулы.77. A method for detecting a molecule, comprising contacting a cell or sample from a subject with a polypeptide according to any one of claims. 1-64, thereby allowing detection of the molecule.