RU2019104724A - Слитые белки из фрагментов белков человека для получения композиций кратно мультимеризованных fc иммуноглобулинов с улучшенным связыванием с fc-рецептором - Google Patents

Claims (81)

1. Страдомерное звено, содержащее:

по меньшей мере один гомодимерный домен Fc IgG1, содержащий одну или более точечных мутаций, соответствующих по меньшей мере одному из положений 236, 267, 268, 324 и/или 299 домена Fc; и

по меньшей мере один домен мультимеризации.

2. Страдомерное звено по п. 1, содержащее точечную мутацию в положении 236.

3. Страдомерное звено по п. 2, содержащее точечную мутацию G236R.

4. Страдомерное звено по п. 1, характеризующееся тем, что домен Fc дополнительно содержит точечную мутацию в положении 233.

5. Страдомерное звено по п. 4, характеризующееся тем, что домен Fc содержит точечные мутации E233P, G236E, H268F и S324T.

6. Страдомерное звено по п. 4, характеризующееся тем, что домен Fc содержит точечные мутации E233P, G236D, H268F и S324T.

7. Страдомерное звено по п. 4, характеризующееся тем, что домен Fc содержит точечные мутации E233P, S267Q, H268F и S324T.

8. Страдомерное звено по п. 4, характеризующееся тем, что домен Fc содержит точечные мутации E233P, S267G, H268F и S324T.

9. Страдомерное звено по п. 4, характеризующееся тем, что домен Fc содержит точечные мутации E233P, S267K, H268F и S324T.

10. Страдомерное звено по п. 4, характеризующееся тем, что домен Fc содержит точечные мутации E233P, S267D, H268F и S324T.

11. Страдомерное звено по п. 4, характеризующееся тем, что домен Fc содержит точечные мутации E233P, G236D, S267Q, H268F и S324T.

12. Страдомерное звено по п. 4, характеризующееся тем, что домен Fc содержит точечные мутации E233P, G236Q, S267D, H268F и S324T.

13. Страдомерное звено по п. 4, характеризующееся тем, что домен Fc содержит точечные мутации E233P, G236D, S267D, H268F и S324T.

14. Страдомерное звено по п. 1, характеризующееся тем, что домен Fc содержит точечные мутации в положениях 267, 268, 324 и 299, при этом точечная мутация в положении 299 представляет собой точечную мутацию, отличную от T299S или T299C.

15. Страдомерное звено по п. 1, характеризующееся тем, что домен Fc содержит точечные мутации S267Q, H268F, S324T и T299A.

16. Страдомерное звено по п. 1, характеризующееся тем, что домен Fc содержит точечные мутации S267D, H268F, S324T и T299A.

17. Страдомерное звено по п. 1, характеризующееся тем, что домен Fc содержит точечные мутации S267H, H268F, S324T и T299A.

18. Страдомерное звено по п. 1, характеризующееся тем, что домен Fc содержит точечные мутации S267E, H268F, S324T и T299A.

19. Страдомерное звено по п. 1, характеризующееся тем, что домен Fc дополнительно содержит точечную мутацию в положении 328.

20. Страдомерное звено по п. 19, характеризующееся тем, что домен Fc содержит точечные мутации S267E, H268F, S324T и L328F.

21. Страдомерное звено по п. 1, характеризующееся тем, что домен Fc дополнительно содержит точечные мутации в положениях 234 и 235.

22. Страдомерное звено по п. 21, характеризующееся тем, что домен Fc содержит точечные мутации L234A, L235A, S267E, H268F и S324T.

23. Страдомерное звено по п. 1, характеризующееся тем, что домен Fc дополнительно содержит точечные мутации в положениях 233, 234, 235 и делецию в положении 236.

24. Страдомерное звено по п. 23, характеризующееся тем, что домен Fc содержит точечные мутации E233P, L234V, L235A, S267E, H268F, S324T и делецию в положении 236.

25. Страдомерное звено по п. 1, характеризующееся тем, что домен Fc содержит точечную мутацию в положении 299, при этом точечная мутация в положении 299 представляет собой точечную мутацию, отличную от T229S или T299C.

26. Страдомерное звено по п. 25, характеризующееся тем, что домен Fc содержит точечную мутацию T299A.

27. Страдомерное звено по п. 1, характеризующееся тем, что домен Fc дополнительно содержит точечную мутацию в положении 430.

28. Страдомерное звено по п. 27, характеризующееся тем, что домен Fc содержит точечные мутации T299A и E430G.

29. Страдомерное звено по п. 1, характеризующееся тем, что домен Fc содержит либо EEM, либо DEL полиморфизм IgG1.

30. Страдомерное звено по п. 1, характеризующееся тем, что домен мультимеризации выбран из группы, состоящей из шарнира IgG2, изолейциновой застежки и домена GPP, и способен мультимеризовать указанные страдомерные звенья.

31. Страдомерное звено по п. 1, характеризующееся тем, что домен мультимеризации создает мультимеры указанных страдомерных звеньев.

32. Страдомерное звено по п. 31, характеризующееся тем, что мультимеры указанных страдомерных звеньев представляют собой мультимеры высокого порядка.

33. Страдомерное звено по п. 1, характеризующееся тем, что указанное страдомерное звено проявляет повышенное связывание с низкоаффинным Fcγ-рецептором.

34. Страдомерное звено по п. 1, характеризующееся тем, что страдомерное звено содержит мутацию в положении 297, 298 или 299 и связывает C1q, ингибирует КЗЦ и сохраняет связывание с FcγRI, FcγRIIa, FcγRIIb и/или FcγRIII.

35. Страдомерное звено по п. 1, характеризующееся тем, что страдомерное звено проявляет повышенное или неизмененное связывание с FcγRI, FcγRII и/или FcγRIII по сравнению со страдомером такой же структуры, который не содержит точечную мутацию в одном или нескольких положениях 236, 267, 268, 324 и/или 299.

36. Страдомерное звено по п. 1, характеризующееся тем, что страдомер содержит, от аминоконца к карбоксильному концу, лидерную последовательность; домен Fc, содержащий шарнир IgG1, CH2 IgG1 и CH3 IgG1; и шарнир IgG2.

37. Страдомерное звено по п. 36, характеризующееся тем, что страдомер включает последовательность аминокислот, выбранную из группы, состоящей из последовательностей SEQ ID NO: 7 – 26 и последовательностей SEQ ID NO: 28 – 29.

38. Страдомерное звено по п. 1, характеризующееся тем, что страдомер содержит, от аминоконца к карбоксильному концу, лидерную последовательность, шарнир IgG2, шарнир IgG1 и домен Fc, содержащий CH2 IgG1 и CH3 IgG1.

39. Страдомерное звено по п. 38, характеризующееся тем, что страдомер включает последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 27.

40. Страдомерное звено, содержащее:

по меньшей мере один гомодимерный домен Fc IgG1, содержащий точечную мутацию в положении 299 домена Fc IgG1 и одну или более дополнительных точечных мутаций в положениях 430, 440 и/или 345; и

шарнирный домен мультимеризации IgG2, расположенный на C-конце по меньшей мере одного гомодимерного домена Fc IgG1,

при этом указанные страдомерные звенья мультимеризуются в гексамерную страдомерную структуру.

41. Страдомерное звено по п. 40, характеризующееся тем, что домен Fc содержит точечные мутации в положениях 299, 345, 430 и 440.

42. Страдомерное звено по п. 40, характеризующееся тем, что домен Fc содержит точечные мутации T299A, E345R, E430G и S440Y.

43. Страдомерное звено по п. 40, характеризующееся тем, что домен Fc содержит точечные мутации в положениях 299, 430 и 440.

44. Страдомерное звено по п. 40, характеризующееся тем, что домен Fc содержит точечные мутации T299A, E430G и S440Y.

45. Страдомерное звено по п. 40, характеризующееся тем, что домен Fc содержит точечные мутации в положениях 299 и 345.

46. Страдомерное звено по п. 40, характеризующееся тем, что домен Fc содержит точечные мутации T299A и E345R.

47. Страдомерное звено по п. 40, характеризующееся тем, что домен Fc содержит точечную мутацию T299A.

48. Страдомерное звено по п. 40, характеризующееся тем, что мультимеры указанных страдомерных звеньев содержат двенадцать гомодимерных страдомерных звеньев.

49. Страдомерное звено по п. 40, характеризующееся тем, что мультимеры указанных страдомерных звеньев содержат восемнадцать гомодимерных страдомерных звеньев.

50. Страдомерное звено по п. 40, характеризующееся тем, что страдомерное звено проявляет повышенное связывание с белками комплемента по сравнению с гомодимерным страдомерным звеном такой же структуры, которое не содержит точечную мутацию в одном или нескольких положениях 299, 245, 430 и/или 440.

51. Страдомерное звено по п. 50, характеризующееся тем, что белок комплемента представляет собой C1q.

52. Страдомерное звено по п. 51, характеризующееся тем, что гомодимерное страдомерное звено ингибирует комплементзависимую цитотоксичность.

53. Страдомерное звено по п. 40, характеризующееся тем, что страдомерное звено проявляет не измененное или повышенное связывание с FcγRI, FcγRII и/или FcγRIII по сравнению с гомодимерным страдомерным звеном такой же структуры, которое не содержит точечную мутацию в одном или нескольких положениях 299, 345, 430 и/или 440.

54. Страдомерное звено по п. 53, характеризующееся тем, что страдомерное звено проявляет не измененное или повышенное связывание с низкоаффинным Fc-рецептором.

55. Страдомерное звено по п. 40, характеризующееся тем, что страдомер содержит, от аминоконца к карбоксильному концу, лидерную последовательность, домен Fc, содержащий шарнир IgG1, CH2 IgG1 и CH3 IgG1; и шарнир IgG2.

56. Страдомерное звено по п. 55, характеризующееся тем, что страдомер включает последовательность аминокислот, выбранную из группы, состоящей из последовательностей SEQ ID NO: 30 – 32.

57. Страдомерное звено по п. 40, характеризующееся тем, что домен Fc IgG1 содержит либо полиморфизм DEL, либо полиморфизм EEM.

58. Кластерный страдомер, содержащий два или более страдомерных звеньев согласно любому из пп. 1 - 57.

59. Композиция, содержащая кластерный страдомер по п. 58.

60. Обогащенная гетерогенная композиция, содержащая мультимеры высокомолекулярного типа, включая мультимеризованные гомодимеры, указанные в любом из пп. 40 – 57.

61. Композиция по п. 60, характеризующаеся тем, что высокомолекулярные мультимеры включают мультимеры с электрофоретической полосой на уровне гексамера и выше.

62. Композиция по п. 60, характеризующаеся тем, что высокомолекулярные мультимеры включают мультимеры с электрофоретической полосой на уровне 12-мера и выше.

63. Композиция по п. 60, характеризующаеся тем, что высокомолекулярные мультимеры включают мультимеры с электрофоретической полосой на уровне 18-мера и выше.

64. Способ лечения или предотвращения комплемент-опосредованного заболевания, опосредованного антителом заболевания, аутоиммунного заболевания, воспалительного заболевания, аллергии или заболевания крови, включающий введение страдомера по любому из пп. 1 – 58 или композиции по любому из пп. 59 – 63 нуждающемуся в этом субъекту.

65. Способ по п. 64, характеризующийся тем, что опосредованное антителами заболевание выбрано из группы, состоящей из болезни Гудпасчера; отторжения трансплантата солидного органа; опосредованного антителами отторжения аллотрансплантатов; дистрофии желтого пятна; болезни холодовых агглютининов; гемолитической анемии; нейромиелита зрительного нерва; нейромиотонии; лимбического энцефалита; синдрома Морвана; тяжелой миастении; миастенического синдрома Ламберта-Итона; автономной нейропатии; болезни Альцгеймера; атеросклероза; болезни Паркинсона; синдрома скованного человека или гиперэкплексии; привычного выкидыша; синдрома Хьюза; системной красной волчанки; аутоиммунной мозжечковой атаксии; болезней соединительной ткани, включая склеродермию, синдром Шегрена; полимиозита; ревматоидного артрита; узелкового полиартериита; CREST-синдрома; эндокардита; тиреоидита Хашимото; смешанного заболевания соединительной ткани; каналопатий; детских аутоиммунных нервно-психических расстройств, ассоциированных со стрептококковой инфекцией (PANDAS); клинических состояний, связанных с антителами против рецепторов N-метил-D-аспартата, особенно NR1, связанного с контактином белка 2, AMPAR, GluR1/GluR2, декарбоксилазы глутаминовой кислоты, GlyR-альфа 1a, рецептора ацетилхолина, VGCC P/Q-типа, VGKC, MuSK, GABA(B)R; аквапорина-4; и пузырчатки.

66. Способ по п. 64, характеризующийся тем, что аутоиммунное заболевание представляет собой ревматоидный артрит.

67. Способ по п. 64, характеризующийся тем, что аутоиммунное заболевание представляет собой связанную с аутоиммунитетом потерю зрения или потерю слуха.

68. Способ по п. 64, характеризующийся тем, что опосредованное комплементом заболевание выбрано из группы, состоящей из тяжелой миастении, гемолитико-уремического синдрома (ГУС), атипичного гемолитико-уремического синдрома (аГУС), пароксизмальной ночной гемоглобинурии (ПНГ), мембранозной нефропатии, нейромиелита зрительного нерва, опосредованного антителами отторжения аллотрансплантатов, волчаночного нефрита и мембранозного пролиферативного гломерулонефрита (МПГН).

69. Способ по п. 64, характеризующийся тем, что заболевание крови представляет собой серповидно-клеточную болезнь.

70. Способ по п. 64, характеризующийся тем, что страдомер вводят внутривенно, подкожно, перорально, интраперитонеально, сублингвально, буккально, трансдермально, с помощью подкожного имплантата или внутримышечно.

71. Способ лечения или предотвращения боли, связанной или вызванной опосредованным комплементом заболеванием, опосредованным антителами заболеванием, аутоиммунным заболеванием, воспалительным заболеванием, аллергией или заболеванием крови, указанный способ включает введение гексамерного страдомера по любому из пп. 40 – 57 или композиции по любому из пп. 60 – 63 нуждающемуся в этом субъекту.

72. Способ по п. 71, характеризующийся тем, что опосредованное антителами заболевание выбрано из группы, состоящей из болезни Гудпасчера; отторжения трансплантата солидного органа; опосредованного антителами отторжения аллотрансплантатов; дистрофии желтого пятна; болезни холодовых агглютининов; гемолитической анемии; нейромиелита зрительного нерва; нейромиотонии; лимбического энцефалита; синдрома Морвана; тяжелой миастении; миастенического синдрома Ламберта-Итона; автономной нейропатии; болезни Альцгеймера; атеросклероза; болезни Паркинсона; синдрома скованного человека или гиперэкплексии; привычного выкидыша; синдрома Хьюза; системной красной волчанки; аутоиммунной мозжечковой атаксии; болезней соединительной ткани, включая склеродермию, синдром Шегрена; полимиозита; ревматоидного артрита; узелкового полиартериита; CREST-синдрома; эндокардита; тиреоидита Хашимото; смешанного заболевания соединительной ткани; каналопатий; детских аутоиммунных нервно-психических расстройств, ассоциированных со стрептококковой инфекцией (PANDAS); клинических состояний, связанных с антителами против рецепторов N-метил-D-аспартата, особенно NR1, связанного с контактином белка 2, AMPAR, GluR1/GluR2, декарбоксилазы глутаминовой кислоты, GlyR-альфа 1a, рецептора ацетилхолина, VGCC P/Q-типа, VGKC, MuSK, GABA(B)R; аквапорина-4; и пузырчатки.

73. Способ по п. 71, характеризующийся тем, что аутоиммунное заболевание представляет собой ревматоидный артрит или связанную с аутоиммунитетом потерю зрения или потерю слуха.

74. Способ по п. 71, характеризующийся тем, что опосредованное комплементом заболевание выбрано из группы, состоящей из тяжелой миастении, гемолитико-уремического синдрома (ГУС), атипичного гемолитико-уремического синдрома (аГУС), пароксизмальной ночной гемоглобинурии (ПНГ), мембранозной нефропатии, нейромиелита зрительного нерва, опосредованного антителами отторжения аллотрансплантатов, волчаночного нефрита и мембранозного пролиферативного гломерулонефрита (МПГН).

75. Способ по п. 71, характеризующийся тем, что заболевание крови представляет собой серповидно-клеточную болезнь.

76. Способ по п. 71, характеризующийся тем, что страдомер вводят внутривенно, подкожно, перорально, интраперитонеально, сублингвально, буккально, трансдермально, с помощью подкожного имплантата или внутримышечно.