Claims (37)
1. Биомедицинский клеточный продукт (БМКП), содержащий аутологичные или иммуносовместимые аллогенные мононуклеарные клетки (МНК) мобилизованной периферической крови человека (компонент А), содержащие гемопоэтические стволовые клетки (ГСК) с маркерами CD34+, CD45+ в количестве 1-2% клеток от общего числа МНК и мезенхимальные стромальные стволовые клетки (МССК) с маркерами CD10+, CD13+, CD44+, CD90+ (Thy-1), CD105+, CD34-, CD45- и CD117- в количестве 0,5-2% клеток от общего числа МНК, линию аутологичных или иммуносовместимых аллогенных нейральных стволовых клеток (НСК) с маркером CD133+ (компонент Б), транскриптом-модифицированных путем обработки пертурбагеном, приводящей к формированию секретома НСК, способного к блокированию внутриклеточного сигнального пути интегринов/фокальной адгезии у опухолевых и опухолевых стволовых клеток, и вспомогательное вещество в виде биологически стабильной и стерильной трансфузионной среды при следующих концентрациях клеток на 1 мл вспомогательного вещества:1. Biomedical cell product (BMPC) containing autologous or immunocompatible allogeneic mononuclear cells (MNCs) of mobilized human peripheral blood (component A) containing hematopoietic stem cells (HSCs) with markers CD34 +, CD45 + in the amount of 1-2% of the total number of cells MNCs and mesenchymal stromal stem cells (MSCCs) with markers CD10 +, CD13 +, CD44 +, CD90 + (Thy-1), CD105 +, CD34-, CD45- and CD117- in the amount of 0.5-2% of the total number of MNCs, the line is autologous or immunocompatible allogeneic neural stem cells (NSCs) with the CD133 + marker (component B), transcript-modified by treatment with perturbagen, leading to the formation of an NSC secretory capable of blocking the intracellular signaling pathway of integrins / focal adhesion in tumor and tumor stem cells, and an auxiliary substance in the form of a biologically stable and sterile transfusion medium at the following cell concentrations per 1 ml of auxiliary substance wa:
компонент А (МНК) - 0,8×106-4×106 клеток;component A (MNC) - 0.8 × 10 6 -4 × 10 6 cells;
компонент Б (НСК) - 4×103-3,3×105 клеток.component B (NSC) - 4 × 10 3 -3.3 × 10 5 cells.
2. БМКП по п. 1, отличающийся тем, что для его внутритканевого введения при терапии первичных и метастатических злокачественных новообразований в головном и спинном мозге в качестве вспомогательного вещества использован биодеградируемый полимерный матрикс при следующих концентрациях клеток на 1 мл матрикса:2. BMKP under item 1, characterized in that for its interstitial administration in the treatment of primary and metastatic malignant neoplasms in the brain and spinal cord, a biodegradable polymer matrix is used as an auxiliary substance at the following cell concentrations per 1 ml of matrix:
компонент А (МНК) - 2,5×106-4×106 клеток;component A (MNC) - 2.5 × 10 6 -4 × 10 6 cells;
компонент Б (НСК) - 2,5×105-3,3×105 клеток.component B (NSC) - 2.5 × 10 5 -3.3 × 10 5 cells.
3. БМКП по п. 2, отличающийся тем, что при профилактике рецидива злокачественных новообразований в мозге БМКП дополнительно содержит линию аутологичных или иммуносовместимых аллогенных МССК с маркерами CD10+, CD13+, CD44+, CD90+ (Thy-1), CD105+, CD34-, CD45- и CD117- (компонент В), предварительно транскриптом-модифицированных путем обработки пертурбагеном, приводящей к формированию секретома МССК, способного к блокированию внутриклеточного сигнального пути интегринов/фокальной адгезии у опухолевых и опухолевых стволовых клеток, при концентрации этого компонента 5×105-13×105 клеток/мл матрикса.3. BMKP according to claim 2, characterized in that in the prevention of relapse of malignant neoplasms in the brain, BMKP further comprises a line of autologous or immunocompatible allogeneic MSCCs with markers CD10 +, CD13 +, CD44 +, CD90 + (Thy-1), CD105 +, CD34-, CD45- and CD117- (component B), previously transcript-modified by treatment with perturbagen, leading to the formation of an MCCC secretome capable of blocking the intracellular signaling pathway of integrins / focal adhesion in tumor and tumor stem cells at a concentration of this component 5 × 10 5 -13 × 10 5 cells / ml matrix.
4. БМКП по п. 1, отличающийся тем, что для его внутривенного и внутриартериального введения при регуляции опухолевых клеток, оставшихся после конвенциональной лучевой и химиотерапии опухолей головного и спинного мозга, БМКП дополнительно содержит линию аутологичных или иммуносовместимых аллогенных МССК с маркерами CD10+, CD13+, CD44+, CD90+ (Thy-1), CD105+, CD34-, CD45- и CD117- (компонент В), предварительно транскриптом-модифицированных путем обработки пертурбагеном, приводящей к формированию секретома МССК, способного к блокированию внутриклеточного сигнального пути интегринов/фокальной адгезии у опухолевых и опухолевых стволовых клеток, а в качестве вспомогательного вещества использован 0,9%-ный физиологический раствор NaCl при следующих концентрациях клеток на 1 мл раствора:4. BMKP according to claim 1, characterized in that for its intravenous and intraarterial administration during the regulation of tumor cells remaining after conventional radiation and chemotherapy of brain and spinal tumors, BMKP additionally contains a line of autologous or immunocompatible allogeneic MCCCs with markers CD10 +, CD13 +, CD44 +, CD90 + (Thy-1), CD105 +, CD34-, CD45- and CD117- (component B), previously transcript-modified by treatment with perturbagen, leading to the formation of MCCC secretome capable of blocking the intracellular signaling pathway of integrins / focal adhesion in tumor and tumor stem cells, and 0.9% physiological NaCl solution was used as an auxiliary substance at the following cell concentrations per 1 ml of solution:
компонент А (МНК) - 0,8×106-1,2×106 клеток;component A (MNC) - 0.8 × 10 6 -1.2 × 10 6 cells;
компонент Б (НСК) - 4×103-6×103 клеток;component B (NSC) - 4 × 10 3 -6 × 10 3 cells;
компонент В (МССК) - 0,5×106-1×106 клеток.component B (MCCC) - 0.5 × 10 6 -1 × 10 6 cells.
5. БМКП по п. 1, отличающийся тем, что для его внутривенного и внутриартериального введения при лечении отдаленных метастазов рака в солидных органах и костных тканях, а также в случае невыявленного очага опухолевого процесса БМКП дополнительно содержит линию аутологичных или иммуносовместимых аллогенных МССК с маркерами CD10+, CD13+, CD44+, CD90+ (Thy-1), CD105+, CD34-, CD45- и CD117- (компонент В), предварительно транскриптом-модифицированных путем обработки пертурбагеном, приводящей к формированию секретома МССК, способного к блокированию внутриклеточного сигнального пути интегринов/фокальной адгезии у опухолевых и опухолевых стволовых клеток, а в качестве вспомогательного вещества использован 0,9%-ный физиологический раствор NaCl при следующих концентрациях клеток на 1 мл раствора:5. BMKP according to claim 1, characterized in that for its intravenous and intraarterial administration in the treatment of distant cancer metastases in solid organs and bone tissues, as well as in the case of an undiagnosed focus of the tumor process, BMKP additionally contains a line of autologous or immunocompatible allogeneic MSCCs with markers CD10 + , CD13 +, CD44 +, CD90 + (Thy-1), CD105 +, CD34-, CD45- and CD117- (component B), pre-transcript-modified by treatment with perturbagen, leading to the formation of MCCC secretion, capable of blocking the intracellular signaling pathway of integrins / focal adhesion in tumor and tumor stem cells, and 0.9% physiological NaCl solution at the following cell concentrations per 1 ml of solution was used as an auxiliary substance:
компонент А (МНК) - 0,8×106-2×106 клеток;component A (MNC) - 0.8 × 10 6 -2 × 10 6 cells;
компонент Б (НСК) - 1,2×104-1,8×104 клеток;component B (NSC) - 1.2 × 10 4 -1.8 × 10 4 cells;
компонент В (МССК) - 1×106-2×106 клеток.component B (MCCC) - 1 × 10 6 -2 × 10 6 cells.
6. Биомедицинский клеточный продукт (БМКП), содержащий аутологичные или иммуносовместимые аллогенные мононуклеарные клетки (МНК) мобилизованной периферической крови человека (компонент А), содержащие гемопоэтические стволовые клетки (ГСК) с маркерами CD34+, CD45+ в количестве 1-2% клеток от общего числа МНК и мезенхимальные стромальные стволовые клетки (МССК) с маркерами CD10+, CD13+, CD44+, CD90+ (Thy-1), CD105+, CD34-, CD45- и CD117- в количестве 0,5-2% клеток от общего числа МНК, линию аутологичных или иммуносовместимых аллогенных МССК с маркерами CD10+, CD13+, CD44+, CD90+ (Thy-1), CD105+, CD34-, CD45- и CD117- (компонент В), транскриптом-модифицированных путем обработки пертурбагеном, приводящей к формированию секретома МССК, способного к блокированию внутриклеточного сигнального пути интегринов/фокальной адгезии у опухолевых и опухолевых стволовых клеток, и вспомогательное вещество в виде биологически стабильной и стерильной трансфузионной среды при следующих концентрациях клеток на 1 мл вспомогательного вещества:6. Biomedical cell product (BMPC) containing autologous or immunocompatible allogeneic mononuclear cells (MNCs) of mobilized human peripheral blood (component A) containing hematopoietic stem cells (HSCs) with markers CD34 +, CD45 + in the amount of 1-2% of the total number of cells MNCs and mesenchymal stromal stem cells (MSCCs) with markers CD10 +, CD13 +, CD44 +, CD90 + (Thy-1), CD105 +, CD34-, CD45- and CD117- in the amount of 0.5-2% of the total number of MNCs, the line is autologous or immunocompatible allogeneic MCCCs with markers CD10 +, CD13 +, CD44 +, CD90 + (Thy-1), CD105 +, CD34-, CD45- and CD117- (component B), transcript-modified by treatment with perturbagen, leading to the formation of MCCC secretion capable of blocking the intracellular signaling pathway of integrins / focal adhesion in tumor and tumor stem cells, and an excipient in the form of a biologically stable and sterile transfusion medium at the following cell concentrations per 1 ml of excipient:
компонент А (МНК) - 0,8×106-4×106 клеток;component A (MNC) - 0.8 × 10 6 -4 × 10 6 cells;
компонент В (МССК) - 0,5×106-2×106 клеток.component B (MCCC) - 0.5 × 10 6 -2 × 10 6 cells.
7. БМКП по п. 6, отличающийся тем, что для его внутритканевого введения при метастатических злокачественных новообразованиях в мозге и костных тканях в качестве вспомогательного вещества использован биодеградируемый полимерный матрикс при следующих концентрациях клеток на 1 мл матрикса:7. BMPC according to claim 6, characterized in that for its interstitial administration in case of metastatic malignant neoplasms in the brain and bone tissues, a biodegradable polymer matrix is used as an auxiliary substance at the following cell concentrations per 1 ml of matrix:
компонент А (МНК) - 2,5×106-4×106 клеток;component A (MNC) - 2.5 × 10 6 -4 × 10 6 cells;
компонент В (МССК) - 1,5×106-2×106 клеток.component B (MCCC) - 1.5 × 10 6 -2 × 10 6 cells.
8. БМКП по п. 6, отличающийся тем, что для его внутривенного и внутриартериального введения при регуляции опухолевых клеток, оставшихся после конвенциональной лучевой и химиотерапии опухолей солидных органов, в качестве вспомогательного вещества использован 0,9%-ный физиологический раствор NaCl при следующих концентрациях клеток на 1 мл раствора:8. BMKP according to claim 6, characterized in that for its intravenous and intra-arterial administration during the regulation of tumor cells remaining after conventional radiation and chemotherapy of solid organ tumors, 0.9% physiological NaCl solution at the following concentrations was used as an auxiliary substance cells per 1 ml of solution:
компонент А (МНК) - 0,8×106-1,2×106 клеток;component A (MNC) - 0.8 × 10 6 -1.2 × 10 6 cells;
компонент В (МССК) - 0,5×106-1×106 клеток.component B (MCCC) - 0.5 × 10 6 -1 × 10 6 cells.
9. БМКП по любому из пп. 1-8, отличающийся тем, что аллогенные МНК, НСК и МССК иммуносовместимы по группе крови, резус-фактору и иммунофенотипу крови.9. BMKP according to any one of paragraphs. 1-8, characterized in that allogeneic MNCs, NSCs and MCCCs are immunocompatible by blood group, Rh factor and blood immunophenotype.
10. БМКП по любому из пп. 1-8, отличающийся тем, что пертурбаген выбран из группы, состоящей из никлозамида, ацетилсалициловой кислоты, трихостатина А и пропидия иодида.10. BMKP according to any one of paragraphs. 1-8, characterized in that perturbagen is selected from the group consisting of niclosamide, acetylsalicylic acid, trichostatin A and propidium iodide.
11. Способ получения ex tempore биомедицинского клеточного продукта по любому из пп. 1, 2 9, 10, включающий в себя:11. The method of obtaining ex tempore biomedical cell product according to any one of paragraphs. 1, 2 9, 10, including:
получение аутологичных или иммуносовместимых аллогенных мононуклеарных клеток (МНК) мобилизованной периферической крови человека (компонент А), содержащих гемопоэтические стволовые клетки (ГСК) с маркерами CD34+, CD45+ в количестве 1-2% клеток от общего числа МНК и мезенхимальные стромальные стволовые клетки (МССК) с маркерами CD10+, CD13+, CD44+, CD90+ (Thy-1), CD105+, CD34-, CD45- и CD117- в количестве 0,5-2% клеток от общего числа МНК, путем их выделения из лейкоконцентрата периферической крови или костного мозга,obtaining autologous or immunocompatible allogeneic mononuclear cells (MNCs) of mobilized human peripheral blood (component A) containing hematopoietic stem cells (HSCs) with markers CD34 +, CD45 + in the amount of 1-2% of the total number of MNCs and mesenchymal stromal stem cells (MCCC) with markers CD10 +, CD13 +, CD44 +, CD90 + (Thy-1), CD105 +, CD34-, CD45- and CD117- in the amount of 0.5-2% of the cells from the total number of MNCs, by isolating them from leukoconcentrate of peripheral blood or bone marrow,
получение линии аутологичных или иммуносовместимых аллогенных нейральных стволовых клеток (НСК) с маркером CD133+ (компонент Б) путем их выделения из эпителия обонятельной выстилки носа и модифицирования их транскриптома путем обработки пертурбагеном, приводящей к формированию секретома НСК, способного к блокированию внутриклеточного сигнального пути интегринов/фокальной адгезии у опухолевых и опухолевых стволовых клеток, иobtaining a line of autologous or immunocompatible allogeneic neural stem cells (NSCs) with the CD133 + marker (component B) by isolating them from the epithelium of the olfactory nasal lining of the nose and modifying their transcriptome by treatment with perturbagen, which leads to the formation of an NSC secretory capable of blocking the integrin / foc signaling pathway adhesion in tumor and tumor stem cells, and
смешивание ex tempore компонентов А, Б и вспомогательного вещества в виде биологически стабильной и стерильной трансфузионной среды.ex tempore mixing of components A, B and excipient in the form of a biologically stable and sterile transfusion medium.
12. Способ по п. 11, отличающийся тем, что дополнительно получают линию аутологичных или иммуносовместимых аллогенных МССК с маркерами CD10+, CD13+, CD44+, CD90+ (Thy-1), CD105+, CD34-, CD45- и CD117- (компонент В) путем их выделения из костного мозга или жировой ткани и модифицирования их транскриптома путем обработки пертурбагеном, приводящей к формированию секретома МССК, способного к блокированию внутриклеточного сигнального пути интегринов/фокальной адгезии у опухолевых и опухолевых стволовых клеток, и смешивание ex tempore компонента В вместе с компонентами А, Б и вспомогательным веществом.12. The method according to p. 11, characterized in that it further obtains a line of autologous or immunocompatible allogeneic MCCCs with markers CD10 +, CD13 +, CD44 +, CD90 + (Thy-1), CD105 +, CD34-, CD45- and CD117- (component B) by their isolation from bone marrow or adipose tissue and modification of their transcriptome by treatment with perturbagen, leading to the formation of an MCCC secretome capable of blocking the intracellular signaling pathway of integrins / focal adhesion in tumor and tumor stem cells, and ex tempore mixing of component B together with components A, B and excipient.
13. Способ получения ex tempore биомедицинского клеточного продукта по любому из пп. 6-10, включающий в себя:13. The method of obtaining ex tempore biomedical cell product according to any one of paragraphs. 6-10, including:
получение аутологичных или иммуносовместимых аллогенных мононуклеарных клеток (МНК) мобилизованной периферической крови человека (компонент А), содержащих гемопоэтические стволовые клетки (ГСК) с маркерами CD34+, CD45+ в количестве 1-2% клеток от общего числа МНК и мезенхимальные стромальные стволовые клетки (МССК) с маркерами CD10+, CD13+, CD44+, CD90+ (Thy-1), CD105+, CD34-, CD45- и CD117- в количестве 0,5-2% клеток от общего числа МНК, путем их выделения из лейкоконцентрата периферической крови или костного мозга;obtaining autologous or immunocompatible allogeneic mononuclear cells (MNCs) of mobilized human peripheral blood (component A) containing hematopoietic stem cells (HSCs) with markers CD34 +, CD45 + in the amount of 1-2% of the total number of MNCs and mesenchymal stromal stem cells (MCCC) with markers CD10 +, CD13 +, CD44 +, CD90 + (Thy-1), CD105 +, CD34-, CD45- and CD117- in the amount of 0.5-2% of the cells from the total number of MNCs, by isolating them from leukoconcentrate of peripheral blood or bone marrow;
получение линии аутологичных или иммуносовместимых аллогенных МССК с маркерами CD10+, CD13+, CD44+, CD90+ (Thy-1), CD105+, CD34-, CD45- и CD117- (компонент В) путем их выделения из костного мозга или жировой ткани и модифицирования их транскриптома путем обработки пертурбагеном, приводящей к формированию секретома МССК, способного к блокированию внутриклеточного сигнального пути интегринов/фокальной адгезии у опухолевых и опухолевых стволовых клеток, иobtaining a line of autologous or immunocompatible allogeneic MSCCs with markers CD10 +, CD13 +, CD44 +, CD90 + (Thy-1), CD105 +, CD34-, CD45- and CD117- (component B) by isolating them from bone marrow or adipose tissue and modifying their transcriptome by treatment with perturbagen leading to the formation of MCCC secretome capable of blocking the intracellular signaling pathway of integrins / focal adhesion in tumor and tumor stem cells, and
смешивание ex tempore компонентов А, В и вспомогательного вещества в виде биологически стабильной и стерильной трансфузионной среды.ex tempore mixing of components A, B and excipient in the form of a biologically stable and sterile transfusion medium.
14. Способ по пп. 11, 12 или 13, отличающийся тем, что полученные компоненты А, Б, В криоконсервируют, а перед их смешиванием ex tempore со вспомогательным веществом размораживают.14. The method according to PP. 11, 12 or 13, characterized in that the obtained components A, B, C are cryopreserved, and before they are mixed ex tempore with an auxiliary substance, they are thawed.
15. Применение биомедицинского клеточного продукта по любому из пп. 1-10 для лечения и профилактики рака и других злокачественных новообразований.15. The use of a biomedical cell product according to any one of paragraphs. 1-10 for the treatment and prevention of cancer and other malignant neoplasms.