Claims (15)
1. Способ диагностики колоректального рака, основанный на одновременном количественном определении онкомаркеров белковой природы, антител к гликанам, иммуноглобулинов классов G, А и М в крови человека на биологическом микрочипе, содержащем гидрогелевые элементы с иммобилизованными антителами к белковым онкомаркерам, гидрогелевые элементы с иммобилизованными гликанами, гидрогелевые элементы с иммобилизованными антителами против иммуноглобулинов человека классов G, А, М, где изменение уровня анализируемых маркеров по сравнению с уровнем маркеров в сыворотке крови здоровых доноров свидетельствует о колоректальном раке.1. A method for the diagnosis of colorectal cancer, based on the simultaneous quantitative determination of tumor markers of protein nature, antibodies to glycans, class G, A and M immunoglobulins in human blood on a biological microchip containing hydrogel elements with immobilized antibodies to protein oncomarkers, hydrogel elements with immobilized glycans, hydrogel elements with immobilized antibodies against human immunoglobulins of classes G, A, M, where the change in the level of the analyzed markers compared to the level The presence of markers in the blood serum of healthy donors indicates colorectal cancer.
2. Способ по п. 1, включающий2. The method according to p. 1, including
а) взаимодействие образца сыворотки крови человека с ячейками биочипа в условиях, обеспечивающих образование специфических иммунных комплексов - соединений, иммобилизованных в гидрогелевых ячейках микрочипа, с соединениями, содержащимися в анализируемом образце;a) the interaction of a sample of human blood serum with biochip cells under conditions providing for the formation of specific immune complexes — compounds immobilized in hydrogel cells of the microchip with compounds contained in the analyzed sample;
б) детекцию образовавшихся иммунных комплексов;b) detection of the formed immune complexes;
в) определение концентраций белковых онкомаркеров, антител к гликанам, иммуноглобулинов G, А и М;c) determination of the concentration of protein tumor markers, antibodies to glycans, immunoglobulins G, A and M;
г) диагностирование колоректального рака путем сравнения уровней белковых онкомаркеров, антител к гликанам и иммуноглобулинов классов G, А, М в анализируемом образце с соответствующими уровнями маркеров в сыворотке крови здоровых доноров.d) the diagnosis of colorectal cancer by comparing the levels of protein tumor markers, antibodies to glycans and immunoglobulins of classes G, A, M in the analyzed sample with the corresponding levels of markers in the blood serum of healthy donors.
3. Способ по п. 2, в котором стадию а) проводят с известными концентрациями белковых онкомаркеров, иммуноглобулинов G, А, М и строят калибровочную зависимость сигналов от ячеек биологического микрочипа от концентрации соединений, которую используют для определения концентрации белковых онкомаркеров, иммуноглобулинов G, А, М, концентрации антител к гликанам в анализируемом образце.3. The method according to p. 2, in which stage a) is carried out with known concentrations of protein tumor markers, immunoglobulins G, A, M, and a calibration dependence of the signals on the cells of the biological microchip is built on the concentration of compounds that is used to determine the concentration of protein tumor markers, immunoglobulins G, A, M, the concentration of antibodies to glycans in the analyzed sample.
4. Способ по п. 2, в котором детекцию образовавшихся иммунных комплексов на стадии (б) проводят флуориметрически.4. The method according to p. 2, in which the detection of the formed immune complexes in stage (b) is carried out fluorimetrically.
5. Биологический микрочип для диагностики колоректального рака, представляющий собой массив трехмерных гидрогелевых элементов, характеризующийся тем, что он включает:5. A biological microchip for the diagnosis of colorectal cancer, which is an array of three-dimensional hydrogel elements, characterized in that it includes:
- элементы, содержащие иммобилизованные антитела к белковым онкомаркерам,- elements containing immobilized antibodies to protein tumor markers,
- элементы, содержащие иммобилизованные гликаны, способные при развитии колоректального рака вызывать у человека иммунные реакции с участием иммуноглобулинов классов G, А и М,- elements containing immobilized glycans capable of inducing immune reactions in humans with the participation of immunoglobulins of classes G, A and M during the development of colorectal cancer
- элементы, содержащие иммобилизованные антитела против иммуноглобулинов человека классов G, А и М.- elements containing immobilized antibodies against human immunoglobulins of classes G, A and M.
6. Биологический микрочип п. 5, в котором каждый элемент массива с иммобилизованными гликанами содержит спейсерированный гликан, и/или неогликоконъюгат, и/или гликан, выделенный из природных источников.6. The biological microchip of claim 5, wherein each element of the array with immobilized glycans contains a spacer glycan, and / or a neoglycoconjugate, and / or glycan isolated from natural sources.
7. Способ по п. 1, в котором в качестве белковых онкомаркеров используются РЭА, СА 19-9, СА 125, SCCA1 (SPB 3), SCCA2 (SPB 4), ПСА общ., ПСА своб., ХГЧ, АФП, СА 242.7. The method according to p. 1, in which CEA, CA 19-9, CA 125, SCCA1 (SPB 3), SCCA2 (SPB 4), PSA total., PSA free, hCG, AFP, CA are used as protein tumor markers 242.
8. Способ по п. 1, в котором в качестве антител к гликанам используются антитела к SiaTn, TF, Tn, LeC, LeY, SiaLeA, Manβ1-4GlcNAc.8. The method according to claim 1, in which antibodies to SiaT n , TF, T n , Le C , Le Y , SiaLe A , Manβ1-4GlcNAc are used as antibodies to glycans.