RU2014114179A - Способ получения биспецифических антител против cd3*cd19 формата флексибоди в клетках млекопитающих - Google Patents
Способ получения биспецифических антител против cd3*cd19 формата флексибоди в клетках млекопитающих Download PDFInfo
- Publication number
- RU2014114179A RU2014114179A RU2014114179/10A RU2014114179A RU2014114179A RU 2014114179 A RU2014114179 A RU 2014114179A RU 2014114179/10 A RU2014114179/10 A RU 2014114179/10A RU 2014114179 A RU2014114179 A RU 2014114179A RU 2014114179 A RU2014114179 A RU 2014114179A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- flexibody
- format
- plasmid dna
- encoding
- polypeptide
- Prior art date
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
1. Способ получения рекомбинантного моноклонального антитела против CD3*CD19 формата флексибоди, включающий конструирование рекомбинантной плазмидной ДНК, кодирующей биспецифическое антитело против CD3*CD19, трансфекцию полученной ДНК штамма клеток СНО М и культивирование полученной линии клеток, характеризующийся тем, что культивирование проводят в перфузионном режиме в присутствии фидерных добавок СВ1 иСВ5.2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что используют комбинацию добавок СВ1 и СВ5 в соотношении 1:1, с объемом добавки, составляющим 25% от объема питательной среды.3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве плазмидной ДНК используют плазмиду pOG776.4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве плазмидной ДНК используют плазмиду pOG854.5. Моноклональное антитело против CD3*CD19 формата флексибоди, полученное способом по любому из пп. 1-4.6. Рекомбинантная плазмидная ДНК pOG776, кодирующая полипептид с последовательностью биспецифического антитела формата флексибоди против CD3*CD19, имеющая размер 10618 п.о., с физической картой, представленной на фиг.6, и состоящая из следующих элементов:- оптимизированной последовательности, кодирующей полипептид биспецифического антитела формата флексибоди против CD3*CD19, SEQ ID №1,- энхансера вируса CMV и промотора транскрипции гена фактора элонгации альфа, CMVe/EFa pro,- сигнала полиаденилирования бычьего гормона роста, BGH рА,- энхансера вируса SV40, sv40 enh,- элемента прикрепления к ядерному матриксу, SGE 1,- кассеты для экспрессии в клетках бактерий гена р-лактамазы, обеспечивающей устойчивость к ампицилину,- кассеты, обеспечивающей устойчивость к пуромицину,- уникальных участков узнавания следующих эндонук�
Claims (7)
1. Способ получения рекомбинантного моноклонального антитела против CD3*CD19 формата флексибоди, включающий конструирование рекомбинантной плазмидной ДНК, кодирующей биспецифическое антитело против CD3*CD19, трансфекцию полученной ДНК штамма клеток СНО М и культивирование полученной линии клеток, характеризующийся тем, что культивирование проводят в перфузионном режиме в присутствии фидерных добавок СВ1 иСВ5.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что используют комбинацию добавок СВ1 и СВ5 в соотношении 1:1, с объемом добавки, составляющим 25% от объема питательной среды.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве плазмидной ДНК используют плазмиду pOG776.
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве плазмидной ДНК используют плазмиду pOG854.
5. Моноклональное антитело против CD3*CD19 формата флексибоди, полученное способом по любому из пп. 1-4.
6. Рекомбинантная плазмидная ДНК pOG776, кодирующая полипептид с последовательностью биспецифического антитела формата флексибоди против CD3*CD19, имеющая размер 10618 п.о., с физической картой, представленной на фиг.6, и состоящая из следующих элементов:
- оптимизированной последовательности, кодирующей полипептид биспецифического антитела формата флексибоди против CD3*CD19, SEQ ID №1,
- энхансера вируса CMV и промотора транскрипции гена фактора элонгации альфа, CMVe/EFa pro,
- сигнала полиаденилирования бычьего гормона роста, BGH рА,
- энхансера вируса SV40, sv40 enh,
- элемента прикрепления к ядерному матриксу, SGE 1,
- кассеты для экспрессии в клетках бактерий гена р-лактамазы, обеспечивающей устойчивость к ампицилину,
- кассеты, обеспечивающей устойчивость к пуромицину,
- уникальных участков узнавания следующих эндонуклеаз рестрикции:
KpnI (7 п.о.), AgeI (460 п.о.), Sad (1206 и.о.), HindIII (1590 п.о.), XbaI (3135 и.о.), SpeI (3932 п.о.), PvuII (4835 п.о.), AccI (5800 п.о.), BsrGI (6612 п.о.), AhdI (8138 п.о.), Sfil (9774 п.о.), BsiWI (9912 п.о.), NotI (10456 п.о.).
7. Рекомбинантная плазмидная ДНК pOG854, кодирующая полипептид с последовательностью биспецифического антитела против CD3*CD19, имеющая размер 10618 п.о., с физической картой, представленной на фиг.6, и состоящая из следующих элементов:
- оптимизированной последовательности, кодирующей полипептид биспецифического антитела формата флексибоди против CD3*CD19, SEQ ID №2,
- энхансера вируса CMV и промотора транскрипции гена фактора элонгации альфа, CMVe/EFa pro,
- сигнала полиаденилирования бычьего гормона роста, BGH рА,
- энхансера вируса SV40, sv40 enh,
- элемента прикрепления к ядерному матриксу, SGE 1,
- кассеты для экспрессии в клетках бактерий гена β-лактамазы, обеспечивающей устойчивость к ампицилину,
- кассеты, обеспечивающей устойчивость к пуромицину,
- уникальных участков узнавания следующих эндонуклеаз рестрикции:
KpnI (7 п.о.), AgeI (460 п.о.), SacI (1206 п.о.), HindIII (1590 п.о.), XbaI (3135 п.о.), SpeI (3932 п.о.), PvuII (4835 п.о.), AccI (5800 п.о.), BsrGI (6612 п.о.), AhdI (8138 п.о.), SfiI (9774 п.о.), BsiWI (9912 п.о.), NotI (10456 п.о.).
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014114179/10A RU2577226C2 (ru) | 2014-04-10 | 2014-04-10 | Способ получения биспецифических антител против cd3*cd19 формата флексибоди в клетках млекопитающих |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014114179/10A RU2577226C2 (ru) | 2014-04-10 | 2014-04-10 | Способ получения биспецифических антител против cd3*cd19 формата флексибоди в клетках млекопитающих |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2014114179A true RU2014114179A (ru) | 2015-10-20 |
| RU2577226C2 RU2577226C2 (ru) | 2016-03-10 |
Family
ID=54326854
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2014114179/10A RU2577226C2 (ru) | 2014-04-10 | 2014-04-10 | Способ получения биспецифических антител против cd3*cd19 формата флексибоди в клетках млекопитающих |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2577226C2 (ru) |
Cited By (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US11225528B2 (en) | 2014-11-26 | 2022-01-18 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens |
| US11352442B2 (en) | 2014-11-26 | 2022-06-07 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies that bind CD3 and CD38 |
| US11472890B2 (en) | 2019-03-01 | 2022-10-18 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies that bind ENPP3 and CD3 |
| US11492407B2 (en) | 2016-06-14 | 2022-11-08 | Xencor, Inc. | Bispecific checkpoint inhibitor antibodies |
| US11591401B2 (en) | 2020-08-19 | 2023-02-28 | Xencor, Inc. | Anti-CD28 compositions |
| US11623957B2 (en) | 2015-12-07 | 2023-04-11 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies that bind CD3 and PSMA |
| US11634506B2 (en) | 2013-01-14 | 2023-04-25 | Xencor, Inc. | Heterodimeric proteins |
| US11673972B2 (en) | 2014-11-26 | 2023-06-13 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens |
| US11718667B2 (en) | 2013-01-14 | 2023-08-08 | Xencor, Inc. | Optimized antibody variable regions |
| US11739144B2 (en) | 2021-03-09 | 2023-08-29 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies that bind CD3 and CLDN6 |
| US11814423B2 (en) | 2013-03-15 | 2023-11-14 | Xencor, Inc. | Heterodimeric proteins |
| US11859012B2 (en) | 2021-03-10 | 2024-01-02 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies that bind CD3 and GPC3 |
| US11919956B2 (en) | 2020-05-14 | 2024-03-05 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies that bind prostate specific membrane antigen (PSMA) and CD3 |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP7344206B2 (ja) * | 2017-12-11 | 2023-09-13 | アムジェン インコーポレイテッド | 二重特異性抗体製品のための連続製造プロセス |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| BRPI9909860B8 (pt) * | 1998-04-21 | 2021-05-25 | Amgen Res Munich Gmbh | polipeptídeo multifuncional de cadeia simples, polinucleotídeo, vetor, célula procariótica, de levedura ou unicelular, composição, usos de polipeptídeo e polinucleotídeo e métodos para preparo do referido polipeptídeo e para identificação de ativadores ou inibidores de ativação ou estimulação das células t |
| DE60124912T2 (de) * | 2001-09-14 | 2007-06-14 | Affimed Therapeutics Ag | Multimerische, einzelkettige, Tandem-Fv-Antikörper |
| ES2559763T3 (es) * | 2002-09-10 | 2016-02-15 | Affimed Gmbh | Anticuerpo humano específico de CD3 con propiedades inmunosupresoras |
| AU2010343057B2 (en) * | 2009-12-29 | 2017-02-23 | Aptevo Research And Development Llc | Heterodimer binding proteins and uses thereof |
-
2014
- 2014-04-10 RU RU2014114179/10A patent/RU2577226C2/ru active
Cited By (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US11634506B2 (en) | 2013-01-14 | 2023-04-25 | Xencor, Inc. | Heterodimeric proteins |
| US11718667B2 (en) | 2013-01-14 | 2023-08-08 | Xencor, Inc. | Optimized antibody variable regions |
| US11814423B2 (en) | 2013-03-15 | 2023-11-14 | Xencor, Inc. | Heterodimeric proteins |
| US11352442B2 (en) | 2014-11-26 | 2022-06-07 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies that bind CD3 and CD38 |
| US11945880B2 (en) | 2014-11-26 | 2024-04-02 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens |
| US11225528B2 (en) | 2014-11-26 | 2022-01-18 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens |
| US11859011B2 (en) | 2014-11-26 | 2024-01-02 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens |
| US11673972B2 (en) | 2014-11-26 | 2023-06-13 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens |
| US11623957B2 (en) | 2015-12-07 | 2023-04-11 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies that bind CD3 and PSMA |
| US11492407B2 (en) | 2016-06-14 | 2022-11-08 | Xencor, Inc. | Bispecific checkpoint inhibitor antibodies |
| US11472890B2 (en) | 2019-03-01 | 2022-10-18 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies that bind ENPP3 and CD3 |
| US11919956B2 (en) | 2020-05-14 | 2024-03-05 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies that bind prostate specific membrane antigen (PSMA) and CD3 |
| US11591401B2 (en) | 2020-08-19 | 2023-02-28 | Xencor, Inc. | Anti-CD28 compositions |
| US11739144B2 (en) | 2021-03-09 | 2023-08-29 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies that bind CD3 and CLDN6 |
| US11859012B2 (en) | 2021-03-10 | 2024-01-02 | Xencor, Inc. | Heterodimeric antibodies that bind CD3 and GPC3 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2577226C2 (ru) | 2016-03-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2014114179A (ru) | Способ получения биспецифических антител против cd3*cd19 формата флексибоди в клетках млекопитающих | |
| Kawabe et al. | Repeated integration of antibody genes into a pre-selected chromosomal locus of CHO cells using an accumulative site-specific gene integration system | |
| Sawa et al. | RORγt+ innate lymphoid cells regulate intestinal homeostasis by integrating negative signals from the symbiotic microbiota | |
| IL299249B2 (en) | Genetically modified immune cells that include adapted shrna-microRNA (shrnamir) | |
| DK2517556T3 (en) | Method for point-specific recombination, rodents and rodent cells capable of expressing chimeric antibodies or chains | |
| Benabdellah et al. | Development of an all-in-one lentiviral vector system based on the original TetR for the easy generation of Tet-ON cell lines | |
| AU2021200228A1 (en) | Histidine engineered light chain antibodies and genetically modified non-human animals for generating the same | |
| FI3536797T3 (fi) | Siirtogeenin tehostettu ilmentäminen ja prosessointi | |
| Ryder et al. | Rapid conversion of EUCOMM/KOMP-CSD alleles in mouse embryos using a cell-permeable Cre recombinase | |
| Fan et al. | Transient, inducible, placenta-specific gene expression in mice | |
| CN105331635A (zh) | 一种诱导型慢病毒表达体系及其构建方法和应用 | |
| JP2010000087A (ja) | 高レベルの組み換え蛋白を生成する安定な哺乳動物細胞系の迅速形成 | |
| Takiguchi et al. | Variability of inducible expression across the hematopoietic system of tetracycline transactivator transgenic mice | |
| CN107523588A (zh) | 一种四环素慢病毒诱导表达载体及其建立方法和应用 | |
| HRP20200744T1 (hr) | Organizacija ekspresijskog vektora, novi postupci generiranja proizvodnje stanica i njihova uporaba za rekombinantnu proizvodnju polipeptida | |
| Hill et al. | Production of transgenic cattle by pronuclear injection | |
| CN101265483B (zh) | 乳腺特异性表达载体及其构建方法 | |
| US11680267B2 (en) | Co-regulatory sequences based on tetracycline and Cumate | |
| CN102669057A (zh) | 一种调控动物内源基因表达的遗传修饰方法 | |
| CN107012168A (zh) | 人工染色体载体 | |
| RU2013123638A (ru) | Рекомбинантная плазмидная днк, кодирующая химерное антитело против фактора некроза опухоли-альфа человека, линия эукариотических клеток - продуцент химерного антитела и способ получения химерного антитела | |
| EP3733850A1 (en) | Chimeric promoter with high transcriptional activity in t-cells | |
| CN103333917B (zh) | 哺乳动物细胞表达系统 | |
| CN1150331C (zh) | 一组生产用哺乳类细胞人源抗体高效表达载体 | |
| CN101864419B (zh) | 小鼠Miwi启动子,其载体及应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD4A | Correction of name of patent owner | ||
| PC43 | Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions |
Effective date: 20220228 |