RU2013136339A

RU2013136339A - Способ индукции апоптоза клеток злокачественной опухоли колоректального рака и средство для его осуществления

Info

Publication number: RU2013136339A
Application number: RU2013136339/10A
Authority: RU
Inventors: Александр Васильевич Карпухин; Андрей Сергеевич Бавыкин; Александра Алексеевна Коротаева; Станислав Владимирович Поярков
Priority date: 2013-08-02
Filing date: 2013-08-02
Publication date: 2015-02-10
Also published as: RU2551238C9; RU2551238C2

Abstract

1. Способ индукции апоптоза клеток злокачественной опухоли колоректального рака, предусматривающий ингибирование функции генов клеток злокачественной опухоли с помощью препаратов малых интерферирующих РНК в присутствии химиотерапевтического платинового препарата, при котором производят ингибирование функции генов из группы: c-IAP2, Livin и МСМ4, для чего используют препараты малых интерферирующих миРНК-олигонуклеотидов из группы: UGUGGACAAAGUCUCUUCCdTdT; CCUGUGGGUAAGAAGAUGAGdTdT; UUCUCUCUCCUCUUCCCUUAdTdT.2. Способ по п.1, отличающийся тем, что производят одновременное ингибирование функций двух генов из группы: c-IAP2, Livin и МСМ4, в одной из комбинаций генов: Livin и МСМ4; c-IAP2 и МСМ4; c-IAP2 и Livin, для чего используют препараты малых интерферирующих миРНК-олигонуклеотидов из группы: UGUGGACAAAGUCUCUUCCdTdT; CCUGUGGGUAAGAAGAUGAGdTdT; UUCUCUCUCCUCUUCCCUUAdTdT.3. Способ по любому из пп.1 и 2 отличающийся тем, что производят одновременное ингибирование функций двух генов из группы: c-IAP2, Livin и МСМ4, в одной из комбинаций генов: Livin и МСМ4; c-IAP2 и МСМ4; c-IAP2 и Livin, для чего используют препараты малых интерферирующих миРНК-олигонуклеотидов в виде дуплексов прямой и обратной комплементарных цепей нуклеотидов следующей структуры:4. Способ по п.3, отличающийся тем, что используют миРНК дуплексы (duplex) синтезированные в прямом направлении (sense, (s)) и в обратном направлении (antisense, (as) на основе первичной структурыРНК генов, выбранных из условия наибольшего подавления экспрессии гена при наименьшей концентрации миРНК.5. Способ по любому из пп.1, 2, 4, отличающийся тем, что ингибирование функции двух генов клеток злокачественной опухоли осуществляют в присутствии химиотерапевтического препарата оксалиплатина.6. Средство д�

Claims

1. Способ индукции апоптоза клеток злокачественной опухоли колоректального рака, предусматривающий ингибирование функции генов клеток злокачественной опухоли с помощью препаратов малых интерферирующих РНК в присутствии химиотерапевтического платинового препарата, при котором производят ингибирование функции генов из группы: c-IAP2, Livin и МСМ4, для чего используют препараты малых интерферирующих миРНК-олигонуклеотидов из группы: UGUGGACAAAGUCUCUUCCdTdT; CCUGUGGGUAAGAAGAUGAGdTdT; UUCUCUCUCCUCUUCCCUUAdTdT.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что производят одновременное ингибирование функций двух генов из группы: c-IAP2, Livin и МСМ4, в одной из комбинаций генов: Livin и МСМ4; c-IAP2 и МСМ4; c-IAP2 и Livin, для чего используют препараты малых интерферирующих миРНК-олигонуклеотидов из группы: UGUGGACAAAGUCUCUUCCdTdT; CCUGUGGGUAAGAAGAUGAGdTdT; UUCUCUCUCCUCUUCCCUUAdTdT.

3. Способ по любому из пп.1 и 2 отличающийся тем, что производят одновременное ингибирование функций двух генов из группы: c-IAP2, Livin и МСМ4, в одной из комбинаций генов: Livin и МСМ4; c-IAP2 и МСМ4; c-IAP2 и Livin, для чего используют препараты малых интерферирующих миРНК-олигонуклеотидов в виде дуплексов прямой и обратной комплементарных цепей нуклеотидов следующей структуры:

для LIVIN GGAAGAGACUUUGUCCACAdTdT (BIRC7) IIIIIIIIIIIIIIIIIIII dTdTCCUUCUCUGAAACAGGUGU для МСМ4 CUCAUCUCUUACCCACAGGdTdT IIIIIIIIIIIIIIIIIIII dTdTGAGUAGAGAAUGGGUGUCC для c-IAP2 UAAGGGAAGAGGAGAGAGAAdTdT (BIRC3) IIIIIIIIIIIIIIIIIIIII dTdTAUUCCCUUCUCCUCUCUCUU.

4. Способ по п.3, отличающийся тем, что используют миРНК дуплексы (duplex) синтезированные в прямом направлении (sense, (s)) и в обратном направлении (antisense, (as) на основе первичной структуры мРНК генов, выбранных из условия наибольшего подавления экспрессии гена при наименьшей концентрации миРНК.

5. Способ по любому из пп.1, 2, 4, отличающийся тем, что ингибирование функции двух генов клеток злокачественной опухоли осуществляют в присутствии химиотерапевтического препарата оксалиплатина.

6. Средство для осуществления способа по пп.1, 2, 4 для индукции апоптоза клеток злокачественной опухоли колоректального рака, содержащее оксалиплатин и комбинацию комплементарных к мРНК в клетках злокачественной опухоли миРНК-олигонуклеотидов в виде коротких петлевых миРНК (shRNA), по меньшей мере, одной из следующих структур:

(Sense oligo)-CAAGAGA-(Antisense oligo), или:

(Sense oligo-dtdt)-(Sense oligo)-CAAGAGA-(Antisense oligo-dtdt)-(Antisense oligo), где: Sense oligo и Antisense oligo - пары олигонуклеотидов для каждого гена, (Sense oligo-dtdt) и (Antisense oligo-dtdt)- аналогичные последовательности РНК в парах олигонуклеотидов без dtdt или:

(Antisense oligo-dtdt)-(Antisense oligo)-CAAGAGA-(Sense deoxyoligo-dtdt)-(Sense deoxyoligo), или:

CG-(Antisense deoxyoligo-dtdt)-(Antisense deoxyoligo)-CAAGAGA-(Sense deoxyoligo -dtdt)- (Sense deoxyoligo)-TTTTTTGGAAA, где: Antisense deoxyoligo и Sense deoxyoligo представляют собой последовательности нуклеотидов с заменой рибонуклеотидов на дезоксирибонуклеотиды, (Antisense deoxyoligo-dtdt) и (Sense deoxyoligo-dtdt)- аналогичные последовательности ДНК в парах олигонуклеотидов без dtdt,

при этом (Sense oligo) и (Antisense oligo) выбираются в соответствии с ингибируемым геном из приведенных ниже:

Ген мишень миРНК
Sense-олигонуклеотид, 5'→3' миРНК
Antisense-олигонуклеотид, 5'→3' c-IAP2 UAAGGGAAGAGGAGAGAGAAdTdT UUCUCUCUCCUCUUCCCUUAdTdT Livin GGAAGAGACUUUGUCCACAdTdT UGLJGGACAAAGUCUCUUCCdTdT МСМ4 CUCAUCUCUUACCCACAGGdTdT CCUGUGGGUAAGAAGAUGAGdTdT

7. Средство по п.6, отличающееся тем, что оно выполнено в фармацевтической форме, пригодной для парентерального применения с целью индукции апоптоза клеток злокачественной опухоли колоректального рака.