Claims (26)
1. Способ определения в образце крови уровня гемоглобина, подсчета и дифференцирования лейкоцитов, отличающийся тем, что включает следующие стадии:1. The method of determining the level of hemoglobin in a blood sample, counting and differentiation of leukocytes, characterized in that it includes the following stages:
- помещение образца крови в изотоническую или гипертоническую среду при рН не более 10, не содержащую ионов цианида и содержащую по меньшей мере одну четвертичную соль аммония и один консервант,- placing a blood sample in an isotonic or hypertonic medium at a pH of not more than 10, not containing cyanide ions and containing at least one quaternary ammonium salt and one preservative,
- спектрофотометрическое обнаружение комплекса, образованного гемоглобином с четвертичными аммониевыми группами, и- spectrophotometric detection of a complex formed by hemoglobin with Quaternary ammonium groups, and
- подсчет и дифференцирование лейкоцитов на по меньшей мере три субпопуляции,- counting and differentiation of leukocytes into at least three subpopulations,
при этом указанный способ осуществляют в отсутствие любого другого лиганда.wherein said method is carried out in the absence of any other ligand.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что четвертичная(-ые) соль(-и) аммония выбраны из соединений формулы (I):2. The method according to claim 1, characterized in that the quaternary ammonium salt (s) are selected from compounds of formula (I):
NR1R2R3R4 +X-, гдеNR 1 R 2 R 3 R 4 + X - , where
R1 представляет собой углеводородную цепь, содержащую от 1 до 18 атомов углерода,R 1 represents a hydrocarbon chain containing from 1 to 18 carbon atoms,
R2, R3 и R4 каждый независимо представляет собой алкильную группу, содержащую от 1 до 6 атомов углерода, иR 2 , R 3 and R 4 each independently represents an alkyl group containing from 1 to 6 carbon atoms, and
Х представляет собой галоген или группу, выбранную из ОН, CH3SO4 и PO4.X represents a halogen or a group selected from OH, CH 3 SO 4 and PO 4 .
3. Способ по п.2, отличающийся тем, что R1 представляет собой углеводородную цепь, содержащую от 10 до 18 атомов углерода.3. The method according to claim 2, characterized in that R 1 represents a hydrocarbon chain containing from 10 to 18 carbon atoms.
4. Способ по п.3, отличающийся тем, что соль(-и) аммония выбраны из солей додецилтриметиламмония, миристилтриметиламмония, пальмитилтриметиламмония и стеарилтриметиламмония.4. The method according to claim 3, characterized in that the ammonium salt (s) are selected from salts of dodecyl trimethyl ammonium, myristyl trimethyl ammonium, palmityl trimethyl ammonium and stearyl trimethyl ammonium.
5. Способ по п.2, отличающийся тем, что R1 представляет собой углеводородную цепь, содержащую от 1 до 6 атомов углерода.5. The method according to claim 2, characterized in that R 1 represents a hydrocarbon chain containing from 1 to 6 carbon atoms.
6. Способ по п.5, отличающийся тем, что соль(-и) аммония выбраны из солей тетраэтиламмония.6. The method according to claim 5, characterized in that the ammonium salt (s) are selected from tetraethylammonium salts.
7. Способ по п.4 или 6, отличающийся тем, что соль(-и) аммония выбраны из бромида миристилтриметиламмония, хлорида додецилтриметиламмония и гидроксида тетраэтиламмония.7. The method according to claim 4 or 6, characterized in that the ammonium salt (s) are selected from myristyltrimethylammonium bromide, dodecyltrimethylammonium chloride and tetraethylammonium hydroxide.
8. Способ по п.1, отличающийся тем, что содержание четвертичной(-ых) соли(-ей) аммония составляет от 2 до 4 мас.% по отношению к массе среды.8. The method according to claim 1, characterized in that the content of the Quaternary ammonium salt (s) is from 2 to 4 wt.% In relation to the mass of the medium.
9. Способ по п.1, отличающийся тем, что консервант является бактериостатиком, предпочтительно диметилмочевиной.9. The method according to claim 1, characterized in that the preservative is a bacteriostatic, preferably dimethylurea.
10. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанная среда содержит также стабилизатор.10. The method according to claim 1, characterized in that the medium also contains a stabilizer.
11. Способ по п.10, отличающийся тем, что стабилизатором является этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТА).11. The method according to claim 10, characterized in that the stabilizer is ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA).
12. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанная среда содержит также по меньшей мере одно неионное поверхностно-активное вещество.12. The method according to claim 1, characterized in that the medium also contains at least one non-ionic surfactant.
13. Способ по п.12, отличающийся тем, что неионным поверхностно-активным веществом является Triton®.13. The method according to p. 12, characterized in that the non-ionic surfactant is Triton®.
14. Способ по п.1, отличающийся тем, что подсчет лейкоцитов осуществляют по полному сопротивлению и их дифференцируют на следующие три субпопуляции: лимфоциты, моноциты, отличные от лимфоцитов, и гранулоциты.14. The method according to claim 1, characterized in that the leukocyte count is carried out by total resistance and they are differentiated into the following three subpopulations: lymphocytes, monocytes other than lymphocytes, and granulocytes.
15. Способ по п.2, отличающийся тем, что среда содержит по меньшей мере одну четвертичную соль аммония формулы (I), где R1 представляет собой углеводородную цепь, содержащую 12 атомов углерода, и другую четвертичную соль аммония формулы (I), где R1 представляет собой углеводородную цепь, содержащую 14 атомов углерода.15. The method according to claim 2, characterized in that the medium contains at least one quaternary ammonium salt of the formula (I), where R 1 is a hydrocarbon chain containing 12 carbon atoms, and another quaternary ammonium salt of the formula (I), where R 1 represents a hydrocarbon chain containing 14 carbon atoms.
16. Способ по п.15, отличающийся тем, что подсчет лейкоцитов осуществляют бипараметрическим способом по полному сопротивлению и широкоугольному лазерному измерению, и дифференцируют следующие четыре субпопуляции: лимфоциты, моноциты, эозинофилы и нейтрофилы.16. The method according to p. 15, characterized in that the leukocyte count is carried out in a biparametric way by impedance and wide-angle laser measurement, and the following four subpopulations are differentiated: lymphocytes, monocytes, eosinophils and neutrophils.
17. Способ по п.1, отличающийся тем, что среда содержит три четвертичные соли аммония.17. The method according to claim 1, characterized in that the medium contains three quaternary ammonium salts.
18. Среда для определения уровня гемоглобина, подсчета и дифференцирования лейкоцитов, не содержащая ионов цианида и содержащая по меньшей мере одну четвертичную соль аммония, выбранную из соединений формулы (I): NR1R2R3R4 +X-, где R1 представляет собой углеводородную цепь, содержащую от 1 до 18 атомов углерода,18. The environment for determining the level of hemoglobin, counting and differentiation of leukocytes, not containing cyanide ions and containing at least one quaternary ammonium salt selected from compounds of formula (I): NR 1 R 2 R 3 R 4 + X - , where R 1 represents a hydrocarbon chain containing from 1 to 18 carbon atoms,
R2, R3 и R4 каждый независимо представляет собой алкильную группу, содержащую от 1 до 6 атомов углерода, иR 2 , R 3 and R 4 each independently represents an alkyl group containing from 1 to 6 carbon atoms, and
Х представляет собой галоген или группу, выбранную из ОН, CH3SO4 и PO4,X represents a halogen or a group selected from OH, CH 3 SO 4 and PO 4 ,
и консервант,and preservative
причем указанный консервант не содержит никакого другого лиганда.moreover, the specified preservative does not contain any other ligand.
19. Среда по п.18, отличающаяся тем, что соль(-и) аммония выбраны из бромида миристилтриметиламмония, хлорида додецилтриметиламмония и гидроксида тетраэтиламмония.19. The environment of claim 18, wherein the ammonium salt (s) are selected from myristyltrimethylammonium bromide, dodecyltrimethylammonium chloride and tetraethylammonium hydroxide.
20. Среда по п.19, отличающаяся тем, что концентрация бромида миристилтриметиламмония составляет от 20 до 40 г/л, концентрация хлорида додецилтриметиламмония составляет от 1 до 10 г/л, а концентрация гидроксида тетраэтиламмония составляет от 1 до 5 г/л.20. The medium according to claim 19, characterized in that the concentration of myristyltrimethylammonium bromide is from 20 to 40 g / l, the concentration of dodecyltrimethylammonium chloride is from 1 to 10 g / l, and the concentration of tetraethylammonium hydroxide is from 1 to 5 g / l.
21. Среда по любому из пп.18-20, отличающаяся тем, что консервантом является бактериостатик, предпочтительно выбранный из диметилмочевины и 2-пиридинтиол-1-оксида натрия.21. The medium according to any one of claims 18 to 20, characterized in that the preservative is a bacteriostatic, preferably selected from dimethylurea and 2-pyridinethiol-1-sodium oxide.
22. Среда по п.21, отличающаяся тем, что концентрация диметилмочевины составляет от 1 до 10 г/л, а концентрация 2-пиридинтиол-1-оксида натрия составляет от 1 до 10 г/л.22. The medium according to item 21, wherein the concentration of dimethylurea is from 1 to 10 g / l, and the concentration of 2-pyridinethiol-1-sodium oxide is from 1 to 10 g / l.
23. Среда по п.18, отличающаяся тем, что дополнительно содержит стабилизатор.23. The medium according to p. 18, characterized in that it further comprises a stabilizer.
24. Среда по п.23, отличающаяся тем, что стабилизатором является этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТА).24. The medium according to item 23, wherein the stabilizer is ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA).
25. Среда по п.24, отличающаяся тем, что концентрация этилендиаминтетрауксусной кислоты составляет от 1 до 10 г/л.25. The environment according to paragraph 24, wherein the concentration of ethylenediaminetetraacetic acid is from 1 to 10 g / L.
26. Среда по п.18, отличающаяся тем, что содержит четвертичную соль аммония формулы (I), где R1 представляет собой углеводородную цепь, содержащую 12 атомов углерода, и другую четвертичную соль аммония формулы (I), где R1 представляет собой углеводородную цепь, содержащую 14 атомов углерода.
26. The medium according to p. 18, characterized in that it contains a Quaternary ammonium salt of the formula (I), where R 1 represents a hydrocarbon chain containing 12 carbon atoms, and another Quaternary ammonium salt of the formula (I), where R 1 represents a hydrocarbon chain containing 14 carbon atoms.