RU2008146193A

RU2008146193A - METHOD FOR PRODUCING GRAMICIDIDINE WITH DEPTH GROWING OF CULTURE - PRODUCER OF BACILLUS BREVIS

Info

Publication number: RU2008146193A
Application number: RU2008146193/13A
Authority: RU
Inventors: Виктор Викторович Дербышев (RU); Виктор Викторович Дербышев; Сергей Петрович Клыков (RU); Сергей Петрович Клыков
Original assignee: Виктор Викторович Дербышев (RU); Виктор Викторович Дербышев; Сергей Петрович Клыков (RU); Сергей Петрович Клыков
Priority date: 2008-11-24
Filing date: 2008-11-24
Publication date: 2010-05-27
Also published as: RU2447143C2

Abstract

Способ получения грамицидина С при глубинном выращивании культуры - продуцента Bacillus brevis штамм 101, включающий культивирование на синтетической питательной среде, содержащей автолизат дрожжей и гидролизат казеина в концентрациях 10 мг % и 20 мг % по аминному азоту соответственно, отличающийся тем, что выращивание производят на среде, в которой концентрации глицерина, пищевой 40-% молочной кислоты, хлористого и двузамещенного фосфорно-кислого аммония, фосфорно-кислого однозамещенного калия, сернокислого 7-водного магния и лимоннокислого натрия составляют 20 мл/л; 2-4 мл/л; 0-3,4 г/л; 0,85-4,5 г/л; 0-1,0 г/л; 0,9 г/л и 1,0 г/л соответственно, и при содержании восстановленного азота в исходной среде 1,3-1,6 г/л с подпиткой концентрированным питательным раствором, в состав которого входят глицерин, молочная кислота, хлористый и двузамещенный фосфорно-кислый аммоний и сернокислый магний при соотношении концентраций глицерина, молочной кислоты, азота, фосфора и магния 1:(0,008-0,032):(0,027-0,036):(0-0,008):(0,002-0,008), подаваемым в реакционный объем при значениях восстановленного азота в культуре ниже 1,4 г/л до достижения концентрации не более 1,75 г/л, при ограничении роста недостатком кислорода в условиях повышения интенсивности перемешивания по показателям скорости массопередачи кислорода с 0,25 до 1,0 ММО2/л·мин, достигаемого повышением скорости перемешивания с 200 до 500 об/мин, при поддержании значений рН в диапазоне 6,5-6,8 введением стерильных растворов едкого калия или натрия и при остановке процесса выращивания через 2-6 ч после начала стационарной фазы. A method of producing gramicidin C during the deep cultivation of a culture-producer of Bacillus brevis strain 101, which includes cultivation on a synthetic nutrient medium containing yeast autolysate and casein hydrolyzate in concentrations of 10 mg% and 20 mg% in amine nitrogen, respectively, characterized in that the cultivation is performed on medium , in which the concentration of glycerol, food 40-% lactic acid, chloride and disubstituted phosphoric acid ammonium, phosphoric acid monosubstituted potassium, 7-hydrous magnesium sulfate and sodium citrate make up 20 ml / l; 2-4 ml / l; 0-3.4 g / l; 0.85-4.5 g / l; 0-1.0 g / l; 0.9 g / l and 1.0 g / l, respectively, and when the content of reduced nitrogen in the initial medium is 1.3-1.6 g / l with a concentrated nutrient solution, which includes glycerin, lactic acid, chloride and disubstituted phosphoric acid ammonium and magnesium sulfate with a concentration ratio of glycerol, lactic acid, nitrogen, phosphorus and magnesium 1: (0.008-0.032) :( 0.027-0.036) :( 0-0.008) :( 0.002-0.008) fed to the reaction volume with reduced nitrogen in the culture below 1.4 g / l until a concentration of not more than 1.75 g / l is reached, while limiting growth sufficient oxygen in conditions of increasing intensity of mixing according to the indicators of mass transfer of oxygen from 0.25 to 1.0 MMO2 / l · min, achieved by increasing the mixing speed from 200 to 500 rpm, while maintaining pH values in the range of 6.5-6, 8 by the introduction of sterile solutions of caustic potassium or sodium and when the growing process is stopped 2-6 hours after the onset of the stationary phase.

Claims

A method of producing gramicidin C during the deep cultivation of a culture of producer Bacillus brevis strain 101, comprising culturing on a synthetic nutrient medium containing yeast autolysate and casein hydrolyzate in concentrations of 10 mg% and 20 mg% in amine nitrogen, respectively, characterized in that the cultivation is performed on medium in which the concentration of glycerol, food 40-% of lactic acid, chloride and disubstituted phosphoric acid ammonium, phosphoric acid monosubstituted potassium, 7-hydrous magnesium sulfate and sodium citrate make up 20 ml / l; 2-4 ml / l; 0-3.4 g / l; 0.85-4.5 g / l; 0-1.0 g / l; 0.9 g / l and 1.0 g / l, respectively, and when the content of reduced nitrogen in the starting medium is 1.3-1.6 g / l with replenishment with a concentrated nutrient solution, which includes glycerin, lactic acid, chloride and disubstituted phosphoric acid ammonium and magnesium sulfate with a concentration ratio of glycerol, lactic acid, nitrogen, phosphorus and magnesium 1: (0.008-0.032) :( 0.027-0.036) :( 0-0.008) :( 0.002-0.008) fed to the reaction volume with reduced nitrogen in the culture below 1.4 g / l until a concentration of not more than 1.75 g / l is reached, while limiting growth oxygen abundance under conditions of increasing the intensity of mixing according to the indicators of mass transfer of oxygen from 0.25 to 1.0 MMO ₂ / l · min, achieved by increasing the mixing speed from 200 to 500 rpm, while maintaining pH values in the range of 6.5-6 , 8 by the introduction of sterile solutions of caustic potassium or sodium and when the growing process is stopped 2-6 hours after the onset of the stationary phase.