RU2007143928A - METHOD FOR PRODUCING A PHARMACEUTICAL PRODUCT FROM A CULTURAL ENVIRONMENT OF YEAST AND A PHARMACEUTICAL PRODUCT BASED ON A HUMAN ALPHA-INTERFERON (OPTIONS) - Google Patents

METHOD FOR PRODUCING A PHARMACEUTICAL PRODUCT FROM A CULTURAL ENVIRONMENT OF YEAST AND A PHARMACEUTICAL PRODUCT BASED ON A HUMAN ALPHA-INTERFERON (OPTIONS) Download PDF

Info

Publication number
RU2007143928A
RU2007143928A RU2007143928/13A RU2007143928A RU2007143928A RU 2007143928 A RU2007143928 A RU 2007143928A RU 2007143928/13 A RU2007143928/13 A RU 2007143928/13A RU 2007143928 A RU2007143928 A RU 2007143928A RU 2007143928 A RU2007143928 A RU 2007143928A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
interferon
carried out
ethylenediaminetetraacetic acid
human alpha
pharmaceutical preparation
Prior art date
Application number
RU2007143928/13A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2380405C2 (en
Inventor
Марина Владимировна Падкина (RU)
Марина Владимировна Падкина
Марина Владимировна Доброгорская (RU)
Марина Владимировна Доброгорская
Александр Владимирович Карабельский (RU)
Александр Владимирович Карабельский
Елена Викторовна Самбук (RU)
Елена Викторовна Самбук
Михаил Николаевич Смирнов (RU)
Михаил Николаевич Смирнов
Original Assignee
Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Санкт-Петербургский государственный у
Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Санкт-Петербургский государственный университет
Общество с ограниченной ответственностью "Биотех" (RU)
Общество с ограниченной ответственностью "Биотех"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Санкт-Петербургский государственный у, Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Санкт-Петербургский государственный университет, Общество с ограниченной ответственностью "Биотех" (RU), Общество с ограниченной ответственностью "Биотех" filed Critical Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Санкт-Петербургский государственный у
Priority to RU2007143928/13A priority Critical patent/RU2380405C2/en
Publication of RU2007143928A publication Critical patent/RU2007143928A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2380405C2 publication Critical patent/RU2380405C2/en

Links

Abstract

1. Способ получения фармацевтического препарата из культуральной среды дрожжей, включающий концентрирование культуральной среды, осаждение целевого белка и его хроматографическую очистку с использованием гель-фильтрации и ионообменной хроматографии, отличающийся тем, что культивируют штамм дрожжей Pichia pastoris, который является продуцентом альфа-16-интерферона человека, а хроматографическую очистку проводят последовательно на Сефакриле HR 100 и диэтиламиноэтил-целлюлозе. ! 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что осаждение целевого белка проводят при 60%-ном насыщения сульфата аммония. ! 3. Способ по п.1, отличающийся тем, что гель-фильтрацию на Сефакриле HR 100 проводят с использованием в качестве уравновешивающего и элюирующего раствора 50 мМ аммоний-ацетатного буфера (рН 5,5), содержащего 2 мМ этилендиаминтетрауксусной кислоты и 0,5% Твин-20. ! 4. Способ по п.1, отличающийся тем, что ионообменную хроматографию белков, полученных по п.3, на диэтиламиноэтил-целлюлозе проводят с использованием в качестве уравновешивающего раствора 50 мМ аммоний-ацетатного буфера (рН 7,0), содержащего 2 мМ этилендиаминтетрауксусной кислоты, 0,5% Твин-20, а отмывку примесных белков осуществляют последовательным использованием уравновешивающего буферного раствора и уравновешивающего буферного раствора, содержащего 0,1 М хлористого натрия, элюцию проводят градиентом концентрации хлористого натрия 0,1-1,0 М в 50 мМ аммоний-ацетатном буфере (рН 5,5), содержащем 2 мМ этилендиаминтетрауксусной кислоты, 0,5% Твин-20. ! 5. Фармацевтический препарат на основе альфа-интерферона человека по первому варианту, содержащий этилендиаминтетрауксусную кислоту и солевую буферну1. A method of producing a pharmaceutical preparation from a yeast culture medium, comprising concentrating the culture medium, precipitating the target protein and chromatographic purification using gel filtration and ion exchange chromatography, characterized in that the strain of Pichia pastoris yeast, which is a producer of alpha-16 interferon, is cultivated human, and chromatographic purification is carried out sequentially on Sephacryl HR 100 and diethylaminoethyl cellulose. ! 2. The method according to claim 1, characterized in that the precipitation of the target protein is carried out at 60% saturation of ammonium sulfate. ! 3. The method according to claim 1, characterized in that gel filtration on Sephacryl HR 100 is carried out using 50 mM ammonium acetate buffer (pH 5.5) containing 2 mM ethylenediaminetetraacetic acid and 0.5 mm as a balancing and eluting solution. % Tween-20. ! 4. The method according to claim 1, characterized in that the ion-exchange chromatography of the proteins obtained according to claim 3 on diethylaminoethyl cellulose is carried out using 50 mM ammonium acetate buffer (pH 7.0) containing 2 mM ethylenediaminetetraacetic acid as a balancing solution. acid, 0.5% Tween-20, and the washing of impurity proteins is carried out sequentially using a balancing buffer solution and a balancing buffer solution containing 0.1 M sodium chloride, the elution is carried out by a concentration gradient of sodium chloride 0.1-1.0 M in 50 mM ammonium acetate buffer (pH 5.5) containing 2 mM ethylenediaminetetraacetic acid, 0.5% Tween-20. ! 5. The pharmaceutical preparation based on human alpha-interferon according to the first embodiment, containing ethylenediaminetetraacetic acid and saline buffer

Claims (10)

1. Способ получения фармацевтического препарата из культуральной среды дрожжей, включающий концентрирование культуральной среды, осаждение целевого белка и его хроматографическую очистку с использованием гель-фильтрации и ионообменной хроматографии, отличающийся тем, что культивируют штамм дрожжей Pichia pastoris, который является продуцентом альфа-16-интерферона человека, а хроматографическую очистку проводят последовательно на Сефакриле HR 100 и диэтиламиноэтил-целлюлозе.1. A method of producing a pharmaceutical preparation from a yeast culture medium, comprising concentrating the culture medium, precipitating the target protein and chromatographic purification using gel filtration and ion exchange chromatography, characterized in that the strain of Pichia pastoris yeast, which is a producer of alpha-16 interferon, is cultivated human, and chromatographic purification is carried out sequentially on Sephacryl HR 100 and diethylaminoethyl cellulose. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что осаждение целевого белка проводят при 60%-ном насыщения сульфата аммония.2. The method according to claim 1, characterized in that the precipitation of the target protein is carried out at 60% saturation of ammonium sulfate. 3. Способ по п.1, отличающийся тем, что гель-фильтрацию на Сефакриле HR 100 проводят с использованием в качестве уравновешивающего и элюирующего раствора 50 мМ аммоний-ацетатного буфера (рН 5,5), содержащего 2 мМ этилендиаминтетрауксусной кислоты и 0,5% Твин-20.3. The method according to claim 1, characterized in that gel filtration on Sephacryl HR 100 is carried out using 50 mM ammonium acetate buffer (pH 5.5) containing 2 mM ethylenediaminetetraacetic acid and 0.5 mm as a balancing and eluting solution. % Tween-20. 4. Способ по п.1, отличающийся тем, что ионообменную хроматографию белков, полученных по п.3, на диэтиламиноэтил-целлюлозе проводят с использованием в качестве уравновешивающего раствора 50 мМ аммоний-ацетатного буфера (рН 7,0), содержащего 2 мМ этилендиаминтетрауксусной кислоты, 0,5% Твин-20, а отмывку примесных белков осуществляют последовательным использованием уравновешивающего буферного раствора и уравновешивающего буферного раствора, содержащего 0,1 М хлористого натрия, элюцию проводят градиентом концентрации хлористого натрия 0,1-1,0 М в 50 мМ аммоний-ацетатном буфере (рН 5,5), содержащем 2 мМ этилендиаминтетрауксусной кислоты, 0,5% Твин-20.4. The method according to claim 1, characterized in that the ion-exchange chromatography of the proteins obtained according to claim 3 on diethylaminoethyl cellulose is carried out using 50 mM ammonium acetate buffer (pH 7.0) containing 2 mM ethylenediaminetetraacetic acid as a balancing solution. acid, 0.5% Tween-20, and the washing of impurity proteins is carried out sequentially using a balancing buffer solution and a balancing buffer solution containing 0.1 M sodium chloride, the elution is carried out by a concentration gradient of sodium chloride 0.1-1.0 M in 50 mM ammonium acetate buffer (pH 5.5) containing 2 mM ethylenediaminetetraacetic acid, 0.5% Tween-20. 5. Фармацевтический препарат на основе альфа-интерферона человека по первому варианту, содержащий этилендиаминтетрауксусную кислоту и солевую буферную систему, отличающийся тем, что он содержит альфа-16-интерферон человека и Твин-20 при следующем соотношении ингредиентов:5. A pharmaceutical preparation based on human alpha-interferon according to the first embodiment, containing ethylenediaminetetraacetic acid and a salt buffering system, characterized in that it contains human alpha-16-interferon and Tween-20 in the following ratio of ingredients: Рекомбинантный альфа-16-интерферон человекаRecombinant human alpha-16 interferon   с активностью 106-107 МЕ/млwith activity 10 6 -10 7 IU / ml 10-100 мкг/мл10-100 mcg / ml Этилендиаминтетрауксусная кислотаEthylenediaminetetraacetic acid 0,5-1,5 мг/мл0.5-1.5 mg / ml Твин-20Twin 20 0,5-5 мг/мл0.5-5 mg / ml Буферный раствор рН 5,5Buffer pH 5.5 не более 6,0, 10-20 мМno more than 6.0, 10-20 mm
6. Фармацевтический препарат по п.5, отличающийся тем, что он содержит модифицированный рекомбинантный альфа-16-интерферон человека.6. The pharmaceutical preparation according to claim 5, characterized in that it contains a modified recombinant human alpha-16 interferon. 7. Фармацевтический препарат по п.5, отличающийся тем, что он имеет жидкую форму, например, в виде эмульсии, и/или сиропа, и/или капель, и/или липосомной формы.7. The pharmaceutical preparation according to claim 5, characterized in that it has a liquid form, for example, in the form of an emulsion, and / or syrup, and / or drops, and / or liposome form. 8. Фармацевтический препарат на основе альфа-интерферона человека по второму варианту, содержащий этилендиаминтетрауксусную кислоту и солевую буферную систему, отличающийся тем, что он содержит альфа-16-интерферон человека и Твин-20 при следующем соотношении ингредиентов до начала лиофильной сушки:8. A pharmaceutical preparation based on human alpha-interferon according to the second embodiment, containing ethylenediaminetetraacetic acid and a salt buffering system, characterized in that it contains human alpha-16-interferon and Tween-20 in the following ratio of ingredients before freeze drying: Рекомбинантный альфа-16-интерферон человекаRecombinant human alpha-16 interferon   с активностью 106-107 МЕ/млwith activity 10 6 -10 7 IU / ml 10-100 мкг/мл10-100 mcg / ml Этилендиаминтетрауксусная кислотаEthylenediaminetetraacetic acid 0,5-1,5 мг/мл0.5-1.5 mg / ml Твин-20Twin 20 0,5-5 мг/мл0.5-5 mg / ml
Буферообразующие соли, обеспечивающие рН 5,5 - не более 6,0Buffer-forming salts providing pH 5.5 - not more than 6.0 и молярность, равную при растворенииand molarity equal when dissolved 10-20 мМ10-20 mm
9. Фармацевтический препарат по п.8, отличающийся тем, что он содержит модифицированный рекомбинантный альфа-16-интерферон человека.9. The pharmaceutical preparation of claim 8, characterized in that it contains a modified recombinant human alpha-16-interferon. 10. Фармацевтический препарат по п.8, отличающийся тем, что препарат имеет сухую лиофилизованную форму как основу лекарственных форм в виде таблетки, и/или капсулы, и/или порошка, и/или гранул, и/или суппозитория.10. The pharmaceutical preparation of claim 8, characterized in that the preparation has a dry lyophilized form as the basis for dosage forms in the form of tablets, and / or capsules, and / or powder, and / or granules, and / or suppositories.
RU2007143928/13A 2007-11-29 2007-11-29 Method for making recombinant human alpha 16-interferon and pharmaceutical composition for treating viral diseases based on recombinant human alpha 16-interferon RU2380405C2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2007143928/13A RU2380405C2 (en) 2007-11-29 2007-11-29 Method for making recombinant human alpha 16-interferon and pharmaceutical composition for treating viral diseases based on recombinant human alpha 16-interferon

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2007143928/13A RU2380405C2 (en) 2007-11-29 2007-11-29 Method for making recombinant human alpha 16-interferon and pharmaceutical composition for treating viral diseases based on recombinant human alpha 16-interferon

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2007143928A true RU2007143928A (en) 2009-06-10
RU2380405C2 RU2380405C2 (en) 2010-01-27

Family

ID=41024084

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2007143928/13A RU2380405C2 (en) 2007-11-29 2007-11-29 Method for making recombinant human alpha 16-interferon and pharmaceutical composition for treating viral diseases based on recombinant human alpha 16-interferon

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2380405C2 (en)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2557534C2 (en) * 2013-12-06 2015-07-20 Федеральное бюджетное учреждение науки научно-исследовательский институт Эпидемиологии Роспотребнадзора Method for predicting antiviral treatment response in chronic hepatitis c

Also Published As

Publication number Publication date
RU2380405C2 (en) 2010-01-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6593721B2 (en) A chromatographic method to isolate and purify high-purity recombinant human serum albumin
US10414795B2 (en) Techniques of preparing collagen active peptides
JP5948343B2 (en) Method for purifying human serum albumin from seeds of transgenic rice
CN104710511B (en) Iron chelating peptide derived from hairtail fish protein and preparation method and application thereof
CN109761833B (en) A kind of isolation and purification method of L-Leu
JP2011525492A (en) Purification of modified cytokines
CN105648008A (en) Feeding silk antibacterial peptide preparation and preparation method thereof
CN101104635B (en) Method for purifying recombination human alpha-whey albumin from transgene cow milk
EP0446582B1 (en) Method for producing of recombinant human cysteineless gamma-interferon free of methionine at n-terminal
RU2007143928A (en) METHOD FOR PRODUCING A PHARMACEUTICAL PRODUCT FROM A CULTURAL ENVIRONMENT OF YEAST AND A PHARMACEUTICAL PRODUCT BASED ON A HUMAN ALPHA-INTERFERON (OPTIONS)
CN105273076A (en) Preparation method and pharmaceutical composition of PEGylated recombinant human granulocyte colony-stimulating factor
ES2370019T3 (en) BETA INTERFERON PURIFICATION PROCEDURE.
FI74978B (en) FRAMEWORK FOR FRAME STARTING OF MAENNIS-GAMMA-INTERFERON.
CN107058269A (en) Medicinal kininogenase and its preparation method and application
ES2267201T3 (en) RIBONUCLEOPOLIPTIDOS CONTAINING METAL.
ES2369911T3 (en) BETA INTERFERON PURIFICATION PROCEDURE.
Khodwe et al. Purification of arginine by ion-exchange chromatographic from cottonseed de-oiled cake
EP0248057B1 (en) Glucose tolerance factor and method of making same
CN103923178B (en) A kind of purposes of small peptide, its synthetic method and its enhancing domestic animal immunity
CN107011413A (en) Tripeptides CGP with function of blood sugar reduction and application thereof
JPS6226226A (en) Antitumor polypeptide
RU2722731C2 (en) Method for producing biologically active components from yeast cells saccharomyces cerevisiae and a therapeutic agent based thereon
JPH01165393A (en) Method for purifying recombinant human erytheropoietin
Denucé Studies on experimental nephrosis in rats: I. Starch gel electrophoresis of serum and muscle proteins, including esterases
CN107236036A (en) A kind of method of the factor of Prepare restructuring people blood coagulation eight

Legal Events

Date Code Title Description
PD4A Correction of name of patent owner
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20171130