RU2002426C1 - Способ оценки качества корма - Google Patents

Abstract

Использование: 8 микробиологии пищеварени  жвачных животных Сущность изобретени : подсчет протеина в корме ведут путем помещени  обработанного формальдегидом корма в среду, содержащую испытуемый корм, калий фосфорнокислый однозамещенный, калий фосфорнокислый дву- замещенный, натрий хлористый, магний сернокислый , кальций хлористый, натрий серноватистокис- лый, дрожжи, циаеин сол нокислый, натрий двууглекислый , дистилированную воду, в которую иноку- лируют приготовленную культуру Str. bovis, инкубируют в термостате при 39°С в течении 24 ч провод т подсчет количества бактериальных клеток, на основании этого рассчитывают содержание протеина 5 табл.

Description

Изобретение относитс  к микробиологии пищеварени  и может быть использовано в практике кормлени  жвачных животных дл  контрол  эффективности использовани  протеина корма в преджелудках, а также научно-производственной практике.

Известен способ определени  распада- емости протеина корма, основанный на инкубации мешочков в услови х In vitro в камере искусственный рубец. В колбу объемом 150 мл, снабженную дефлегматором, внос т 100 мл содержимого рубца, добавл ют 20 мл подогретого до 39°С фосфатно-аце- татного буфера рН 7,2-7,3 (в 1 л дистиллированной воды содержитс , г; натрий хлористый 0,5; натрий уксуснокислый 1,5; калий фосфорнокислый двузамещен- ный 1,0; калий фосфорнокислый однозаме- щенный 0,3; магний сернокислый 0,1; кальций хлористый 0,1) и помещают по 1 г исследуемого корма в нейлоновых мешочках . Инкубацию провод т в течение 7 ч в вод ной бане при 39°С и посто нном встр хивании (Аитова М.Д. и Романова Н.Г, - Бюл. ВНИИФБ и П с.-х. животных, 1989. вып,2(94).

Наиболее широкое распространение получил метод с использованием нейлоновых мешочков, помещенных в рубец жвачных (Турчинскмй В.В., Курилов Н.В., Фицев A.M. и Воронкова Ф.В, - Определение растворимости и распадаемости протеина кормов - Методические указани , Боровск, 1987).

Однако эти методы требуют наличи  подопытных животных, а следовательно, и затрат на их содержание и уход. При определении количества нерасщепленного белка не учитываетс  примесь микробных белков в пробе. Так, количество, азота бактерий при инкубации мешочков в течение 12 ч может достигать 20% от всего содержащегос  в мешочках азота, а после 18 - 42%. В процессе инкубации могут наблюдатьс  потери за счет вымывани  из мешочков мелких кормовых частиц, содержащих основную часть протеина. При промывании водой извлеченных из рубца мешочков наблюдаютс  также потери протеина. При этом необходимо учитывать пористость используемой дл  изготовлени  мешочков ткани и степень измельчени  корма. С увеличением пористости значительно возрастает приток частиц корма в просвет мешочка, что может привести к занижению истинной величины распада протеина корма. Трудно контролировать и измельчение проб. На достоверность и воспроизводимость результатов, полученных методом нейлоновых мешочков, существенное вли нием оказывает пор док закладывани  мешочков а рубец.

Известен также способ оценки биологической полноценности рациона с использованием в качестве тест-объекта тетрахимена пириформис (Бинев Р.Г, и со- авт. - Оценка биологической полноценности рациона с использованием тест-объекта тетрэхимена пириформис и аппарата Искусственный рубец. Производство и использование растительного белка, 0 Краснодар, 1981). Однако инфузории этого вида  вл ютс  строгими аэробами и не  вл ютс  симбионтами жвачных животных. Поэтому этот способ мало приемлем дл  проведени  оценки эффективности защи- 5 ты протеина корма от разрушени  в рубце жвачных животных, так как рубец - анаэробна  система (Прототип).

Следует также отметить, что ни один из этих методов не позвол ет точно прогнози- 0 ровать интенсивность синтеза бактериальной массы в преджелудках жвачных при скармливании кормов с различной распа- даемостью протеина.

Цель изобретени  - повышение точно- 5 сти у чувствительности способа оценки качества протеина корма, позвол ющего учитывать интенсивность синтеза бактериальной массы и использовать в качестве индикаторной культуры Sir. bovls, 0 выделенный из преджелудков жвачных животных .

Цель достигаетс  тем, что в качестве единственного источника азота в среде использовали испытуемый корм, а в качестве 5 индикаторной стандартной культуры стрептококки, относ щиес  к виду Str.bovls. Характерной особенностью Str.bovis  вл етс  способность использовать как органические, так и неорганиче- 0 ские источники азота.

Пример1.В колбочки емкостью 100 мл в качестве единственного источника азота вносили 1,0 г испытуемого корма - подсолнечного шрота, обработанного 5 формальдегидом из расчета от 0,2 до 1,0% от массы протеина корма и добавл ли среду следующего состава, мас.%: Калий фосфорнокислый однозамещенный0.02

0 Калий фосфорнокислый

двухзамещенный0.05

Натрий хлористый0.1

Магний сернокислый 0.01 Кальций хлористый 0,01 5 Натрий

серноватист окислый 0,03 Дрожжи0,05

Цистеин сол нокислый 0,01 Натрий двууглекислый 0,4 Дистиллированна  вода Ос мльное

Перед засевом среду в течение 1 мин насыщали углекислым газом и колбочки закрывали резиновыми пробками с дефлегматорами . В качестве посевного материала использовали суточную культуру стрептококков , которую вносили в среду и инкубировали при 39°С в течение 24 ч. Затем готовили р д разведений и учитывали численность бактерий под микроскопом. Кроме того, подсчет количества бактерий проводили также после выращивани  их на крах мально-лептонно-дрожжевом агаре с последующим пересчетом на вес сухой биомассы , которую определ ли по калибровочной кривой.

Установлено, что содержание протеина в биомассе Str.bovls  вл етс  величиной посто нной и составл ет 49,6%.

Интенсивность синтеза биомассы Str.bovls на средах с подсолнечным шротом , обработанным различными дозами формальдегида и содержание протеина в биомассе представлены в табл.1.

Из таблицы следует, что с увеличением дозы формальдегида интенсивность роста стрептококков уменьшаетс , т.е. между этими показател ми наблюдалась обратна  зависимость . Уже при дозе формальдегида 0.2% биосинтез бактериальной массы достоверно снижалс . С увеличением дозы формальдегида до 0,5% интенсивность синтеза биомассы Str.bovls снижалась на 60.6%, практически полное прекращение развити  бактерий наблюдалось при повышении концентрации формальдегида до 0.9-1.0% от массы протеина.

Расчеты по определению эффективности защиты протеина корма вели следующим образом: так, если накопление биомассы Str.bovis при выращивании на среде с нативным подсолнечным шротом прин ть за 100%, то при выращивании на среде с обработанным формальдегидом шротом в дозе 0,2; 0,3: 0.4; 0,5; О.б; 0,7; 0.8; 0.9 и 1,0 г/100 г протеина накопление биомассы будет составл ть соответственно 68.2; 65,2; 59,1; 39.4; 31,8; 24.3: 18.2; 9.1 и 4,5%, а эффективность защиты протеина составит 31,8; 34.8; 40.9; 60.6; 68.2; 75,7; 81,8; 90,9 и 95,5% соответственно. Следовательно , наивысша  эффективность защиты протеина корма имеет место при обработке подсолнечного шрота формальдегидом в дозе 0,9-1,0 г/100 г.

П р и м е р 2. Культивирование проводили как э примере 1, но вместо обработанного формальдегидом подсолнечного шрота использовали в качестве субстрата натив- ные и обработанные формальдегидом концентраты . Согласно имеющимс 

литературным данным известно, что обработка шрота формальдегидом в концентрации 0,5% от массы сырого протеина корма  вл етс  оптимальной дл  микробной и 5 ферментативной фаз переваривани  (Phillips., J.Anim.Scl. 1981, 53,6, 1616-1622). В св зи с этим были испытаны четыре комбикорма . Комбикорма № 1 и 2 были идентичными по составу, но вход щий в комбикорм

0 № 2 подсолнечный шрот был обработан формальдегидом из расчета 0,5% от массы протеина. Комбикорма № 3 и 4 состо ли из одних и тех же ингредиентов, но последний был подвергнут формальдегид но и обрзбот5 ке в дозе 0,5% от массы протеина.

Результаты исследований по изучению интенсивности роста Str.bovls на средах с различными комбикормами представлены в табл.2.

0 Исследовани ми установлено, что наиболее интенсивный рост Str.bovls обеспечиваетс  на средах с обычными комбикормами №№ 1 и 3, тогда как формаль- дегидна  обработка подсолнечного шрота

5 комбикорма № 2 и всего комбикорма № 4 уменьшила интенсивность роста стрептококков на 34 и 54% соответственно.

Подобна  закономерность получена и с суммарной микрофлорой рубца при ее инку0 бации с испытуемыми, кормами (табл.3). Как и в опытных с чистыми культурами Str.bovls, обработанные формальдегидом комбикорма № 2 и 4 а сравнении с контрольными не обеспечивали адекватного роста амилоли5 тических, молочнокислых, протеолитиче- ских, пектолитических и усваивающих азот мочевины бактерий, т.е. формальдегидна  обработка комбикорма снижала доступность протеина корма дл  микрофлоры руб0 ца. Скармливание вышеуказанных комбикормов коровам в составе рациона более полно удовлетвор ло потребности микрофлоры в питательных веществах за счет грубых и сочных кормов рациона.

5 П р и м е р 3. Культивирование проводили как ъ примере 1, но вместо обработанного формальдегидом подсолнечного шрота в качестве субстрата в среду вносили натив- ный и обработанный теплом (автоклавиро0 ванный при 110°С и экструдированный) подсолнечный шрот.

Интенсивность синтеза биомассы Str.bovls на средах с нативным и обработанным теплом подсолнечном шроте в качестве

5 единственного источника азота представлены в табл.4. Из таблицы следует, что наиболее интенсивный рост стрептококков был на средах с необработанным подсолнечным шротом. При включении в среду обработанного автоклавированием в течение 1 ч при

110°С подсолнечного шрота биосинтез бактериальной массы уменьшалс  на 34%. Аналогична  картина наблюдалась и при использовании экструдированного подсолнечного шрота.

П р и м е р 4. Культивирование проводили как в примере 1, но вместо обработанного формальдегидом подсолнечного шрота в качестве единственного источника азота в среде использовали традиционные корма с различной естественной деградируемостью протеина (табл.5). При составлении рационов дл  жвачных животных полученные результаты позвол т прогнозировать интенсивность синтеза бактериальной массы и регулировать течение микробиологических процессов в преджелудках.

Предложенный способ позвол ет сравнительно быстро и надежно проводить оценку качества протеина корма, а также прогнозировать интенсивность синтеза

бактериальной массы и регулировать течение микробиологических процессов в пред- желудках жвачных животных.

Способ сравнительно прост в исполнении , не требует дорогосто щей аппаратуры,

исключаетс  использование животных, а следовательно, затраты на их содержание.

(56) Бинев Р. Г. Оценка биологической полноценности рациона с использованием в ка- честве тест-объекта тетрахимену пириформис и аппарата Искусственный рубец . Производство и использование расти- тельного белка. Краснодар, 1981.

Таблица 1

Таблица 2

Таблица 3

Формуле изобретени 

СПОСОБ ОЦЕНКИ КАЧЕСТВА КОРМА, предусматривающий обработку испытуемого корма формальдегидом с последующим подсчетом содержани  протеина в корме, отличающийс  тем, что перед подсчетом содержани  протеина в корме помещают обработанный формальдегидом корм в среду следующего состава, мас.%:

Фосфорнокислый однозамещенный калий0.02

Фосфорнокислый двузамещенный калий0,05

Таблица 4

Таблица 5

Хлористый натрий0,1

Сернокислый магний0,01

Хлористый кальций0,01

Серноватистокислый натрий0,03

Дрожжио.05

Сол нокислый цистеин0,01

Двууглекислый натрий0,4

Дистиллированна  водаОстальное

ввод т в испытуемый корм культуру j Str.bovls, выдерживают в течение суток, а о содержании протеина суд т по количеству бактериальных клеток, подсчитанных по стандартному методу.