Claims (26)
1. Молекула ДНК, отличающаяся тем, что она содержит последовательность SEQ ID NO:1 с открытой рамкой считывания от пары оснований 211 до пары оснований 1740 или является по меньшей мере на 50% гомологичной указанной выше последовательности или гибридизуется с указанной выше последовательностью при жестких условиях, или содержит последовательность, которая является вырожденной относительно указанной выше последовательности ДНК вследствие вырожденности генетического кода, причем эта последовательность кодирует белок растения, имеющий фукозилтрансферазную активность, или является комплементарной такой последовательности.1. DNA molecule, characterized in that it contains the sequence of SEQ ID NO: 1 with an open reading frame from a pair of bases 211 to a pair of bases 1740 or is at least 50% homologous to the above sequence or hybridizes with the above sequence under stringent conditions , or contains a sequence that is degenerate relative to the above DNA sequence due to the degeneracy of the genetic code, and this sequence encodes a plant protein having fucosylt ansferaznuyu activity or is complementary to such a sequence.
2. Молекула ДНК по п.1, отличающаяся тем, что она кодирует белок, имеющий GlcNAc-α1, 3-фукозилтрансферазную активность, в частности, кор-αl,3-фукозилтрансферазную активность.2. The DNA molecule according to claim 1, characterized in that it encodes a protein having GlcNAc-α1, 3-fucosyltransferase activity, in particular, core-αl, 3-fucosyltransferase activity.
3. Молекула ДНК по п.1 или 2, отличающаяся тем, что она является на по меньшей мере 70-80%, особенно предпочтительно на по меньшей мере 95% гомологичной последовательности SEQ ID NO:1.3. The DNA molecule according to claim 1 or 2, characterized in that it is at least 70-80%, particularly preferably at least 95% of the homologous sequence of SEQ ID NO: 1.
4. Молекула ДНК по одному из пп.1-3, отличающаяся тем, что она содержит 2150-2250, в частности, 2198 п.н.4. The DNA molecule according to one of claims 1 to 3, characterized in that it contains 2150-2250, in particular, 2198 bp
5. Молекула ДНК, отличающаяся тем, что она содержит последовательность SEQ ID NO:3 или содержит последовательность, которая по меньшей мере на 85%, в частности, по меньшей мере на 95% гомологична указанной выше последовательности или гибридизуется с указанной выше последовательностью при жестких условиях или является вырожденной относительно указанной выше последовательности ДНК вследствие вырожденности генетического кода.5. A DNA molecule, characterized in that it contains the sequence of SEQ ID NO: 3 or contains a sequence that is at least 85%, in particular at least 95% homologous to the above sequence or hybridizes with the above sequence when hard conditions or is degenerate relative to the above DNA sequence due to the degeneracy of the genetic code.
6. Молекула ДНК, отличающаяся тем, что она содержит частичную последовательность молекулы ДНК по любому из пп.1-4 и является по меньшей мере на 80% гомологичной SEQ ID NO:l и имеет размер 20-200, предпочтительно 30-50 п.н.6. A DNA molecule, characterized in that it contains a partial sequence of the DNA molecule according to any one of claims 1 to 4 and is at least 80% homologous to SEQ ID NO: l and has a size of 20-200, preferably 30-50 p. n
7. Молекула ДНК по любому из пп.1-6, отличающаяся тем, что она ковалентно связана с детектируемой маркерной последовательностью.7. A DNA molecule according to any one of claims 1 to 6, characterized in that it is covalently linked to a detectable marker sequence.
8. Биологически функциональный вектор, отличающийся тем, что он содержит молекулу ДНК по любому из пп.1-7 или ее части различной длины, имеющие по меньшей мере 20 п.н.8. A biologically functional vector, characterized in that it contains a DNA molecule according to any one of claims 1 to 7, or parts thereof of various lengths, having at least 20 bp
9. Биологически функциональный вектор, отличающийся тем, что он содержит молекулу ДНК по любому из пп.1-7 или ее части различной длины, обращение ориентированные относительно промотора.9. A biologically functional vector, characterized in that it contains a DNA molecule according to any one of claims 1 to 7, or parts thereof of different lengths, the circulation is oriented relative to the promoter.
10. Молекула ДНК, кодирующая рибозим, отличающаяся тем, что она имеет две части последовательности, каждая из которых имеет длину из по меньшей мере 10-15 пар оснований и которые комплементарны частям последовательности молекулы ДНК данного изобретения по любому из пп.1-7, так что рибозим образует комплекс и расщепляет мРНК, транскрибируемую природной молекулой ДНК GlcNAc-α1, 3-фукозилтрансферазы.10. A DNA molecule encoding a ribozyme, characterized in that it has two parts of the sequence, each of which has a length of at least 10-15 base pairs and which are complementary to parts of the sequence of the DNA molecule of the present invention according to any one of claims 1 to 7, so that the ribozyme forms a complex and cleaves the mRNA transcribed by the natural DNA molecule GlcNAc-α1, 3-fucosyl transferase.
11. Биологически функциональный вектор, отличающийся тем, что он содержит молекулу ДНК по п.10.11. Biologically functional vector, characterized in that it contains a DNA molecule according to claim 10.
12. Способ получения кДНК, содержащей молекулу ДНК по любому из пп.1-5, отличающийся тем, что РНК выделяют из клеток насекомых или растений, в частности, из клеток гипоктилей, и с указанной РНК выполняют обратную транскрипцию после добавления обратной транскриптазы и праймеров.12. A method of producing a cDNA containing a DNA molecule according to any one of claims 1 to 5, characterized in that RNA is isolated from insect or plant cells, in particular from hypoktile cells, and reverse transcription is performed with said RNA after addition of reverse transcriptase and primers .
13. Способ клонирования GlcNAc-α1, 3-фукозилтрансферазы, отличающийся тем, что молекулу ДНК по любому из пп.1-5 клонируют в вектор, трансфицируемый затем в клетку хозяина или в хозяина, причем получают клеточные линии посредством отбора и амплификации трансфицированных клеток-хозяев, причем клеточные линии экспрессируют активную GlcNAc-α1, 3-фукозилтрансферазу.13. The method of cloning GlcNAc-α1, 3-fucosyltransferase, characterized in that the DNA molecule according to any one of claims 1 to 5 is cloned into a vector, then transfected into a host cell or into a host, and cell lines are obtained by selection and amplification of transfected cells hosts, and cell lines express active GlcNAc-α1, 3-fucosyltransferase.
14. Способ получения рекомбинантных клеток-хозяев, в частности, клеток растений или насекомых, или растений или насекомых, соответственно, в которых продуцирование GlcNAc-α1, 3-фукозилтрансферазы супрессировано или полностью остановлено, отличающийся тем, что по меньшей мере один из векторов по пп.8, 9 или 11 и вектор, содержащий молекулу ДНК по любому из пп.1-7, соответственно где указанная последовательность ДНК содержит делеционную мутацию, мутацию вставки и/или мутацию замены, соответственно, встраивают в указанную клетку-хозяина или в растение или насекомое, соответственно.14. A method of producing recombinant host cells, in particular plant or insect cells, or plants or insects, respectively, in which the production of GlcNAc-α1, 3-fucosyltransferase is suppressed or completely stopped, characterized in that at least one of the vectors claims 8, 9 or 11 and a vector containing a DNA molecule according to any one of claims 1 to 7, respectively, wherein said DNA sequence contains a deletion mutation, an insert mutation and / or a replacement mutation, respectively, inserted into said host cell or plant or insect, respectively.
15. Способ получения рекомбинантных клеток-хозяев, в частности, клеток растений или насекомых, или растений или насекомых, соответственно, отличающийся тем, что молекулу ДНК по любому из пп.1-7, где указанная последовательность ДНК содержит делеционную мутацию, мутацию вставки и/или мутацию замены, встраивают в геном указанной клетки-хозяина или в растение или насекомое, соответственно, в положении немутированной гомологичной последовательности.15. A method for producing recombinant host cells, in particular plant or insect cells, or plants or insects, respectively, characterized in that the DNA molecule according to any one of claims 1 to 7, wherein said DNA sequence contains a deletion mutation, an insertion mutation, and / or a substitution mutation, is inserted into the genome of said host cell or into a plant or insect, respectively, at the position of an unmuted homologous sequence.
16. Рекомбинантные растения или клетки растений, отличающиеся тем, что они получены согласно способу по пп.14 или 15, и тем, что их продуцирование GlcNAc-α1, 3-фукозилтрансферазы супрессировано или полностью остановлено.16. Recombinant plants or plant cells, characterized in that they are obtained according to the method according to claims 14 or 15, and in that their production of GlcNAc-α1, 3-fucosyl transferase is suppressed or completely stopped.
17. Рекомбинантные насекомые или клетки насекомых, отличающиеся тем, что они получены согласно способу по пп.14 или 15 и тем, что их продуцирование GlcNAc-α1, 3-фукозилтрансферазы супрессировано или полностью остановлено.17. Recombinant insects or insect cells, characterized in that they are obtained according to the method according to claims 14 or 15 and in that their production of GlcNAc-α1, 3-fucosyltransferase is suppressed or completely stopped.
18. Молекула ПНК (пептиднуклеиновой кислоты), отличающаяся тем, что она содержит последовательность оснований, комплементарную последовательности молекулы ДНК по любому из пп.1-6 и ее частичным последовательностям.18. A PNA (peptide nucleic acid) molecule, characterized in that it contains a base sequence complementary to the sequence of the DNA molecule according to any one of claims 1 to 6 and its partial sequences.
19. Молекула ПНК, отличающаяся тем, что она содержит последовательность оснований, соответствующую последовательности молекулы ДНК по любому из пп.1-6 и ее частичным последовательностям.19. PNA molecule, characterized in that it contains a base sequence corresponding to the sequence of the DNA molecule according to any one of claims 1 to 6 and its partial sequences.
20. Способ получения растений или насекомых, или клеток, соответственно, в частности, клеток растений и насекомых, имеющих блокированную экспрессию GlcNAc-α1, 3-фукозилтрансферазы на уровне транскрипции и трансляции, отличающийся тем, что молекулы ПНК по п.18 или 19 вводятся в эти клетки.20. A method of producing plants or insects, or cells, respectively, in particular plant cells and insects, having a blocked expression of GlcNAc-α1, 3-fucosyl transferase at the level of transcription and translation, characterized in that the PNA molecules according to claim 18 or 19 are introduced into these cells.
21. Способ получения рекомбинантных гликопротеидов, отличающийся тем, что систему по п.16 или 17 или растения или насекомые, или клетки, соответственно, которые получены согласно способу по п.20, трансфицируют геном, который экспрессирует гликопротеид, таким образом, что экспрессируются рекомбинантные гликопротеиды.21. A method for producing recombinant glycoproteins, characterized in that the system of claim 16 or 17, or plants or insects, or cells, respectively, which are obtained according to the method of claim 20, are transfected with a gene that expresses the glycoprotein, so that recombinant glycoproteins.
22. Способ получения рекомбинантных гликопротеидов человека, отличающийся тем, что систему по п.16 или 17 или растения или насекомые, или клетки, соответственно, которые получены согласно способу по п.20, трансфицируют геном, который экспрессирует гликопротеид, таким образом, что экспрессируются рекомбинантные гликопротеиды.22. A method of producing recombinant human glycoproteins, characterized in that the system according to clause 16 or 17, or plants or insects, or cells, respectively, which are obtained according to the method according to claim 20, are transfected with a gene that expresses the glycoprotein, so that are expressed recombinant glycoproteins.
23. Способ получения рекомбинантных гликопротеидов человека для применения в медицине, отличающийся тем, что систему по п.16 или 17 или растения или насекомые, или клетки, соответственно, которые получены согласно способу по п.20, трансфицируют геном, который экспрессирует гликопротеид, таким образом, что экспрессируются рекомбинантные гликопротеиды.23. A method of producing recombinant human glycoproteins for use in medicine, characterized in that the system of claim 16 or 17, or plants or insects, or cells, respectively, which are obtained according to the method of claim 20, are transfected with a gene that expresses the glycoprotein, such in a way that recombinant glycoproteins are expressed.
24. Способ отбора молекул ДНК, кодирующих GlcNAc-α1, 3-фукозилтрансферазу, в пробе, отличающийся тем, что молекулы ДНК по п.7 добавляют в указанную пробу, причем эти молекулы связываются с молекулами ДНК, кодирующими GlcNAc-α1, 3-фукозилтрансферазу.24. A method for selecting DNA molecules encoding GlcNAc-α1, 3-fucosyltransferase in a sample, characterized in that the DNA molecules according to claim 7 are added to the specified sample, and these molecules bind to DNA molecules encoding GlcNAc-α1, 3-fucosyltransferase .
25. Способ по п.24, отличающийся тем, что указанная проба содержит геномную ДНК организма растения или насекомого.25. The method according to paragraph 24, wherein the specified sample contains the genomic DNA of the organism of a plant or insect.
26. Молекулы ДНК, кодирующие GlcNAc-α1, 3-фукозилтрансферазу, отличающиеся тем, что они отобраны согласно способу по п.24 или 25 и затем выделены из пробы.26. DNA molecules encoding GlcNAc-α1, 3-fucosyltransferase, characterized in that they are selected according to the method according to paragraph 24 or 25 and then isolated from the sample.